常用缓冲溶液配制方法

常用缓冲溶液的配制方法 1 甘氨酸 盐酸缓冲液 0 05mol L X 毫升 0 2 mol L 甘氨酸 Y 毫升 0 2 mol L HCI 再加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 2 0 2 4 2 6 2 8 50 50 50 50 44 0 32 4 24 2 16 8 3 0 3 2 3 4 3 6 50 50 50 50 11 4 8 2 6 4 5 0 甘氨酸分子量 75 07 0 2 mol L 甘氨酸溶液含 15 01 克 升 2 邻苯二甲酸 盐酸缓冲液 0 05 mol L X 毫升 0 2 mol L 邻苯二甲酸氢钾 0 2 mol L HCl 再加水稀释到 20 毫升 pH 20 X Y pH 20 X Y 2 2 2 4 2 6 2 8 3 0 5 5 5 5 5 4 070 3 960 3 295 2 642 2 022 3 2 3 4 3 6 3 8 5 5 5 5 1 470 0 990 0 597 0 263 邻苯二甲酸氢钾分子量 204 23 0 2 mol L 邻苯二甲酸氢溶液含 40 85 克 升 3 磷酸氢二钠 柠檬酸缓冲液 pH 0 2mol L Na2HPO4 毫升 0 1mol L 柠檬酸 毫升 pH 0 2mol L Na2HPO4 毫升 0 1mol L 柠檬酸 毫升 2 2 2 4 2 6 2 8 3 0 3 2 3 4 3 6 3 8 4 0 4 2 4 4 4 6 4 8 5 0 0 40 1 24 2 18 3 17 4 11 4 94 5 70 6 44 7 10 7 71 8 28 8 82 9 35 9 86 10 30 10 60 18 76 17 82 16 83 15 89 15 06 14 30 13 56 12 90 12 29 11 72 11 18 10 65 10 14 9 70 5 2 5 4 5 6 5 8 6 0 6 2 6 4 6 6 6 8 7 0 7 2 7 4 7 6 7 8 8 0 10 72 11 15 11 60 12 09 12 63 13 22 13 85 14 55 15 45 16 47 17 39 18 17 18 73 19 15 19 45 9 28 8 85 8 40 7 91 7 37 6 78 6 15 5 45 4 55 3 53 2 61 1 83 1 27 0 85 0 55 Na2HPO4 分子量 14 98 0 2 mol L 溶液为 28 40 克 升 Na2HPO4 2H2O 分子量 178 05 0 2 mol L 溶液含 35 01 克 升 C4H2O7 H2O 分子量 210 14 0 1 mol L 溶液为 21 01 克 升 4 柠檬酸 氢氧化钠 盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 mol L 柠檬酸 克 C6H8O7 H2O 氢氧化钠 克 NaOH 97 盐酸 毫升 HCl 浓 最终体积 升 2 2 3 1 3 3 4 3 5 3 5 8 6 5 0 20 0 20 0 20 0 20 0 35 0 45 0 38 210 210 210 210 245 285 266 84 83 83 83 144 186 156 160 116 106 45 68 105 126 10 10 10 10 10 10 10 使用时可以每升中加入 1 克克酚 若最后 pH 值有变化 再用少量 50 氢氧化钠 溶液或浓盐酸调节 冰箱保存 5 柠檬酸 柠檬酸钠缓冲液 0 1 mol L pH 0 1 mol L 柠檬酸 毫升 0 1 mol L 柠檬酸钠 毫升 pH 0 1 mol L 柠檬酸 毫升 0 1 mol L 柠檬酸钠 毫升 3 0 3 2 3 4 3 6 3 8 4 0 4 2 4 4 4 6 4 8 18 6 17 2 16 0 14 9 14 0 13 1 12 3 11 4 10 3 9 2 1 4 2 8 4 0 5 1 6 0 6 9 7 7 8 6 9 7 10 8 5 0 5 2 5 4 5 6 5 8 6 0 6 2 6 4 6 6 8 2 7 3 6 4 5 5 4 7 3 8 2 8 2 0 1 4 11 8 12 7 13 6 14 5 15 3 16 2 17 2 18 0 18 6 柠檬酸 C6H8O7 H2O 分子量 210 14 0 1 mol L 溶液为 21 01 克 升 柠檬酸钠 Na3 C6H5O7 2H2O 分子量 294 12 0 1 mol L 溶液为 29 41 克 毫升 6 乙酸 乙酸钠缓冲液 0 2 mol L pH 18 0 2 mol L NaAc 毫升 0 3 mol L HAc 毫升 pH 18 0 2 mol L NaAc 毫升 0 3 mol L HAc 毫升 2 6 3 8 4 0 4 2 4 4 4 6 0 75 1 20 1 80 2 65 3 70 4 90 9 25 8 80 8 20 7 35 6 30 5 10 4 8 5 0 5 2 5 4 5 6 5 8 5 90 7 00 7 90 8 60 9 10 9 40 4 10 3 00 2 10 1 40 0 90 0 60 Na2Ac 3H2O 分子量 136 09 0 2 mol L 溶液为 27 22 克 升 7 磷酸盐缓冲液 1 磷酸氢二钠 磷酸二氢钠缓冲液 0 2 pH 0 2 mol L Na2HPO4 毫升 0 2 mol L NaH2PO4 毫升 pH 0 2 mol L Na2HPO4 毫升 0 2 mol L NaH2PO4 毫升 5 8 5 9 6 0 6 1 6 2 6 3 6 4 6 5 6 6 6 7 6 8 6 9 8 0 10 0 12 3 15 0 18 5 22 5 26 5 31 5 37 5 43 5 49 5 55 0 92 0 90 0 87 7 85 0 81 5 77 5 73 5 68 5 62 5 56 5 51 0 45 0 7 0 7 1 7 2 7 3 7 4 7 5 7 6 7 7 7 8 7 9 8 0 61 0 67 0 72 0 77 0 81 0 84 0 87 0 89 5 91 5 93 0 94 7 39 0 33 0 28 0 23 0 19 0 16 0 13 0 10 5 8 5 7 0 5 3 Na2HPO4 2H2O 分子量 178 05 0 2 mol L 溶液为 85 61 克 升 Na2HPO4 12H2O 分子量 358 14 0 2 mol L 溶液为 71 628 克 升 NaH2PO4 2H2O 分子量 156 01 0 2 mol L 溶液为 31 202 克 升 磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂 由于它们是二级解离 有二个 pKa 值 所以用它们配制的缓冲液 pH 范围最宽 NaH 2PO4 pKa1 2 12 pKa2 7 21 Na2HPO4 pKa1 7 21 pKa2 12 32 配酸性缓冲液 用 NaH2PO4 pH 1 4 配中性缓冲液 用混合的两种磷酸盐 pH 6 8 配碱性缓冲液 用 Na2HPO4 pH 10 12 用钾盐比钠盐好 因为低温时钠盐难溶 钾盐易溶 但若配制 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电 泳的缓冲液时 只能用磷酸钠而不能用磷酸钾 因为 SDS 十二烷基硫酸钠 会与钾盐生成 难溶的十二烷基硫酸钾 磷酸盐缓冲液的优点为 容易配制成各种浓度的缓冲液 适用的 pH 范围宽 pH 受温度的影响小 缓冲液稀释后 pH 变化小 如稀释 10 倍后 pH 的变化小于 0 1 其缺点为 易与常见的钙 Ca2 离子 镁 Mg2 离子以及重金属离子缔合生成沉淀 会抑制某些生物化学过程 如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用 2 磷酸氢二钠 磷酸二氢钾缓冲液 1 15 mol L pH mol L 15Na2HPO4 毫升 mol L 15KH2PO4 毫升 pH mol L 15Na2HPO4 毫升 mol L 15KH2PO4 毫升 4 92 0 10 9 90 7 17 7 00 3 00 5 29 5 91 6 24 6 47 6 64 6 81 6 98 0 50 1 00 2 00 3 00 4 00 5 00 6 00 9 50 9 00 8 00 7 00 6 00 5 00 4 00 7 38 7 73 8 04 8 34 8 67 8 18 8 00 9 00 9 50 9 75 9 90 10 00 2 00 1 00 0 50 0 25 0 10 0 Na2HPO4 2H2O 分子量 178 05 1 15M 溶液为 11 876 克 升 KH2PO4 分子量 136 09 1 15M 溶液为 9 078 克 升 8 磷酸二氢钾 氢氧化钠缓冲液 0 05M X 毫升 0 2M K2PO4 Y 毫升 0 2N NaOH 加水稀释至 29 毫升 pH 20 X 毫升 Y 毫升 pH 20 X 毫升 Y 毫升 5 8 6 0 6 2 6 4 6 6 6 8 5 5 5 5 5 5 0 372 0 570 0 860 1 260 1 780 2 365 7 0 7 2 7 4 7 6 7 8 8 0 5 5 5 5 5 5 2 963 3 500 3 950 4 280 4 520 4 680 9 巴比妥钠 盐酸缓冲液 18 pH 0 04M 巴比妥 钠溶液 0 2V 盐酸 pH 0 04M 巴比 妥钠溶液 毫 升 0 2N 盐酸 毫 升 6 8 7 0 7 2 7 4 7 6 7 8 8 0 8 2 100 100 100 100 100 100 100 100 18 4 17 8 16 7 15 3 13 4 11 47 9 39 7 21 8 4 8 6 8 8 9 0 9 2 9 4 9 6 100 100 100 100 100 100 100 100 5 21 3 82 2 52 1 65 1 13 0 70 0 35 巴比妥钠盐分子量 206 18 0 04M 溶液为 8 25 克 升 10 Tris 盐酸缓冲液 0 05M 25 50 毫升 0 1M 三羟甲基氨基甲烷 Tris 溶液与 X 毫升 0 1N 盐酸混匀后 加水稀释至 100 毫升 pH X 毫升 pH X 毫升 7 10 7 20 7 30 7 40 7 50 7 60 45 7 44 7 43 4 42 0 40 3 38 5 8 10 8 20 8 30 8 40 8 50 8 60 26 2 22 9 19 9 17 2 14 7 12 4 7 70 7 80 7 90 8 00 36 6 34 5 32 0 29 2 8 70 8 80 8 90 10 3 8 5 7 0 三羟甲基氨基甲烷 Tris HOCH2 CH2OH C HOCH2 NH2 分子量 121 14 0 1M 溶液为 12 114 克 升 Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳 使用时注意将瓶盖严 11 硼酸 硼砂缓冲液 0 2M 硼酸根 pH 0 05M 硼砂 毫升 0 2M 硼酸 毫升 pH 0 05M 硼砂 毫升 0 2M 硼酸 毫升 7 4 7 6 7 8 8 0 1 0 1 5 2 0 3 0 9 0 8 5 8 0 7 0 8 2 8 4 8 7 9 0 3 5 4 5 6 0 8 0 6 5 5 5 4 0 2 0 硼砂 Na2B4O7 10H2O 分子量 381 37 0 05M 溶液 0 2M 硼酸根 含 19 07 克 升 硼酸 H3BO3 分子量 61 83 0 2M 溶液为 12 37 克 升 硼砂易失去结晶水 必须在带塞的瓶中保存 12 甘氨酸 氢氧化钠缓冲液 0 05M X 毫升 0 2M 甘氨酸 Y 毫升 0 2NnaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 8 6 8 8 9 0 9 2 9 4 50 50 50 50 50 4 0 6 0 8 8 12 0 16 8 9 6 9 8 10 0 10 4 10 6 50 50 50 50 50 22 4 27 2 32 0 38 6 45 5 甘氨酸分子量 75 07 0 2M 溶液含 15 01 克 升 13 硼砂 氢氧化钠缓冲液 0 05M 硼酸根 X 毫升 0 05M 硼砂 Y 毫升 0 2NNaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 9 3 9 4 9 6 50 50 50 6 0 11 0 23 0 9 8 10 0 10 1 50 50 50 34 0 43 0 46 0 硼砂 Na2B4O7 10H2O 分子量 381 43 0 05M 溶液为 19 07 克 升 14 碳酸钠 碳酸氢钠缓冲液 0 1M Ca2 Mg 2 存在时不得使用 pH 20 37 0 1MNa2CO3 毫升 0 1MN2HCO3 毫升 9 16 9 40 8 77 9 12 1 2 9 8 9 51 9 78 9 90 10 14 10 28 10 53 10 83 9 40 9 50 9 72 9 90 10 08 10 28 10 57 3 4 5 6 7 8 9 7 6 5 4 3 2 1 Na2CO2 10H2O 分子量 286 2 0 1M 溶液为 28 62 克 升 N2HCO3 分子量 84 0 0 1M 溶液为 8 40 克 升 15 PBS 缓冲液 pH 7 6 7 4 7 2 7 0 H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 1000 8 5 2 2 0 1 1000 8 5 2 2 0 2 1000 8 5 2 2 0 3 100ml 8 5g 2 2g 0 4g pH 标准缓冲溶液 Standard pH Buffer Solutions 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 名称 Name 配 制 Compounding way 0 5 10 15 20 25 30 35 40 1 67 1 67 1 67 1 67 1 68 1 68 1 69 1 69 1 69 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 45 50 55 60 70 80 90 95 草酸盐 标准缓 冲溶液 c KH3 C2O4 2 2H2 O 为 0 05mol L 称取 12 71g 四草酸 钾 KH 3 C2O4 2 2H2O 溶于无二 氧化碳的水中 稀 释至 1000ml 1 70 1 71 1 72 1 72 1 74 1 77 1 79 1 81 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 0 5 10 15 20 25 30 35 40 3 56 3 55 3 55 3 55 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 45 50 55 60 70 80 90 95 酒石酸 盐标准 缓冲溶 液 在 25 时 用无二 氧化碳的水溶解外 消旋的酒石酸氢钾 KHC4H4O6 并剧烈 振摇至成饱和溶液 3 55 3 55 3 55 3 56 3 58 3 61 3 65 3 67 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 0 5 10 15 20 25 30 35 40 4 00 4 00 4 00 4 00 4 00 4 01 4 01 4 02 4 04 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 45 50 55 60 70 80 90 95 苯二甲 酸氢盐 标准缓 冲溶液 c C6H4CO2HCO2K 为 0 05mol L 称取于 115 0 5 0 干 燥 2 3h 的邻苯二 甲酸氢钾 KHC 8H4O4 10 21g 溶于无 CO2的蒸馏水 并稀 释至 1000ml 注 可用于酸度 计校准 4 05 4 06 4 08 4 09 4 13 4 16 4 21 4 23 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 0 5 10 15 20 25 30 35 40 6 98 6 95 6 92 6 90 6 88 6 86 6 85 6 84 6 84 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 磷酸盐 标准缓 冲溶液 分别称取在 115 0 5 0 干 燥 2 3h 的磷酸氢 二钠 Na 2HPO4 3 53 0 01 g 和磷酸二氢钾 KH 2PO4 3 39 0 01 g 溶于预先煮沸过 45 50 55 60 70 80 90 95 15 30min 并迅速 冷却的蒸馏水中 并稀释至 1000ml 注 可用 于酸度计校准 6 83 6 83 6 83 6 84 6 85 6 86 6 88 6 89 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 0 5 10 15 20 25 30 35 40 9 46 9 40 9 33 9 27 9 22 9 18 9 14 9 10 9 06 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 45 50 55 60 70 80 90 95 硼酸盐 标准缓 冲溶液 c Na2B4O7 10H2O 称取硼砂 Na 2B4O7 10H2O 3 80 0 01 g 注意 不能烘 溶于预先煮沸 过 15 30min 并迅 速冷却的蒸馏水中 并稀释至 1000ml 置聚乙烯塑料瓶中 密闭保存 存放时 要防止空气中的 CO2的进入 注 可 用于酸度计校准 9 04 9 01 8 99 8 96 8 92 8 89 8 85 8 83 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 0 5 10 15 20 25 30 35 40 13 42 13 21 13 00 12 81 12 63 12 45 12 30 12 14 11 98 不同温度时的 pH 值 pH in different temperatures 45 50 55 60 70 80 90 95 氢氧化 钙标准 缓冲溶 液 在 25 用无二氧 化碳的蒸馏水制备 氢氧化钙的饱和溶 液 氢氧化钙溶液 的浓度 c 1 2Ca OH 2 应在 0 0400 0 0412 mol L 氢氧化钙 溶液的浓度可以酚 红为指示剂 用盐 酸标准溶液 c HCl 0 1mol L 滴定测 出 存放时要防止 空气中的二氧化碳 的进入 出现混浊 应弃去重新配制 11 84 11 71 11 57 11 45 注 为保证 pH 值的准确度 上述标准缓冲溶液必须使用 pH 基准试剂配制 常用 pH 缓冲溶液的配制和 pH 值 Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions 序号 No 溶液名称 Solution name 配制方法 Preparation pH 值 pH value 1 氯化钾 盐酸 13 0 ml 0 2 mol L HCl 与 25 0 ml 0 2 mol L KCl 混合均匀后 加水稀释至 100 ml 1 7 2 氨基乙酸 盐酸 在 500 ml 水中溶解氨基乙酸 150 g 加 480 ml 浓盐酸 再加水稀释至 1L 2 3 3 一氯乙酸 氢氧化钠 在 200 ml 水中溶解 2 g 一氯乙酸后 加 40 g NaOH 溶解完全后再加水稀释至 1 L 2 8 4 邻苯二甲酸氢钾 盐 酸 把 25 0 ml 0 2 mol L 的邻苯二甲酸氢钾溶 液与 6 0 ml 0 1 mol L HCl 混合均匀 加水稀 释至 100 ml 3 6 5 邻苯二甲酸氢钾 氢 氧化钠 把 25 0 ml 0 2 mol L 的邻苯二甲酸氢钾溶 液与 17 5 ml 0 1 mol L NaOH 混合均匀 加 水稀释至 100 ml 4 8 6 六亚甲基四胺 盐酸 在 200 ml 水中溶解六亚甲基四胺 40 g 加 浓 HCl 10 ml 再加水稀释至 1 L 5 4 7 磷酸二氢钾 氢氧化 钠 把 25 0 ml 0 2 mol L 的磷酸二氢钾与 23 6 ml 0 1 mol L NaOH 混合均匀 加水稀释至 100 ml 6 8 8 硼酸 氯化钾 氢氧 化钠 把 25 0 ml 0 2 mol L 的硼酸 氯化钾与 4 0 ml 0 1 mol L NaOH 混合均匀 加水稀释至 100 ml 8 0 9 氯化铵 氨水 把 0 1 mol L 氯化铵与 0 1 mol L 氨水以 2 1 比例混合均匀 9 1 10 硼酸 氯化钾 氢氧 化钠 把 25 0 ml 0 2 mol L 的硼酸 氯化钾与 43 9 ml 0 1 mol L NaOH 混合均匀 加水稀 释至 100 ml 10 0 11 氨基乙酸 氯化钠 氢氧化钠 把 49 0 ml 0 1 mol L 氨基乙酸 氯化钠与 51 0 ml 0 1 mol L NaOH 混合均匀 11 6 12 磷酸氢二钠 氢氧化 钠 把 50 0 ml 0 05 mol L Na 2HPO4与 26 9 ml 0 1 mol L NaOH 混合均匀 加水稀释至 100 ml 12 0 13 氯化钾 氢氧化钠 把 25 0 ml 0 2 mol L KCl 与 66 0 ml 0 2 mol L NaOH 混合均匀 加水稀释至 100 ml 13 0