多肽溶解指南

多肽溶解指南尊敬的客户：您好！感谢使用我公司的多肽合成服务，以下为多肽溶解建议，请参考没有绝对理想的一种溶剂可以做到既能溶解所有多肽，又能保持它们的完整性并且与生物学检测相一致。多肽的溶解取决于其物理特性。氨基酸分为酸性、碱性、极性、非极性及疏水性等。因此，溶解方法还需要结合溶剂及多肽特性等因素进行选择，实验前先进行小量试验，方法可行后再大量溶解。a)从冰箱中取出多肽样品并放置20min,回到室温后离心使其沉到管底，再打开进行溶解b)加入相应的溶解试剂后，震荡混匀。c)溶解成功后，可以加入水或PH57的缓冲液至终浓度(12mg/ml)。d)溶解之后的多肽储存于-20C,长期保存建议储存于-80C。多肽酸碱性预测氨基酸赋值酸性AspD,GluE,C端的竣基-COOH-1碱性ArgR,LysK,HisH,N端的氨基-NH2+1中性除上述两种的具它氨基酸0i. 计算结果为负值，则多肽呈酸性，可以先用水溶解；如果不溶，尝试使用13%(v/v)氨水溶解，然后将多肽稀释至需要的浓度。对于含有半胱氨酸的多肽，要避免使用氨水，因为PH碱性条件下会促使二硫键的形成。ii. 计算结果为正值，则多肽呈碱性，可以先用水溶解；如过不溶，尝试使用10%30%的乙酸溶解；如果一点都不溶，建议用DMSO并以超声波助溶。iii. 计算结果为0,则多肽呈中性，可以用乙月青、甲醇、异丙醇等有机溶剂进行溶解。对于疏水性非常强的多肽，先用少量的DMSO溶解，并用水稀释到需要的浓度；如果多肽序列中含有半胱氨酸Cys，使用二甲基甲酰胺(DMF)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)进行溶解。对于容易聚集的多肽，先加6M的月瓜盐酸(guanidine?HCl)或8M的尿素(Urea)来溶解，然后稀释到需要的浓度。iv. 如多肽序列中含有甲硫氨酸Met(M),半胱氨酸Cys(C)或酪氨酸Tyr(Y),建议保存于无氧环境防止氧化。注：以上为稀释建议，均以参考为主，小量试验可行后再进行后续实验。