第五章-天然和重组蛋白质结构测定课件

蛋白质蛋白质组学组学功能基因功能基因组学组学结构结构基因组学基因组学二二十十一一世世纪纪二二十十一一世世纪纪结结构构生生物物学学结结构构生生物物学学人类和其它有机体人类和其它有机体人类和其它有机体人类和其它有机体基因组基因组基因组基因组世世纪纪之之交交世世纪纪之之交交后后 基基 因因 组组 时时 代代 的的 系系 统统 生生 物物 学学基因组基因组基因组基因组结构基因组学结构基因组学结构基因组学结构基因组学(Structural(Structural Genomics)Genomics)：基因组编码蛋白基因组编码蛋白基因组编码蛋白基因组编码蛋白质组质组质组质组/群的群的群的群的结构与功能结构与功能蛋白质世界蛋白质世界蛋白质世界蛋白质世界表达谱表达谱结构结构功能功能?功能功能功能功能蛋白质组学（蛋白质组学（蛋白质组学（蛋白质组学（Proteomics)Proteomics)：生生生生物体、细胞、组织中全部蛋白质物体、细胞、组织中全部蛋白质物体、细胞、组织中全部蛋白质物体、细胞、组织中全部蛋白质的表达谱、相互作用、结构与功的表达谱、相互作用、结构与功的表达谱、相互作用、结构与功的表达谱、相互作用、结构与功能能能能测序法测序法X射线晶体衍射射线晶体衍射核磁共振核磁共振质谱技术质谱技术天然和重组蛋白质结构测定天然和重组蛋白质结构测定蛋白质末端分析蛋白质末端分析蛋白质二硫键分析蛋白质二硫键分析二硫硝基苯甲酸二硫硝基苯甲酸 (DTNB(DTNB)EllmanEllman反应反应在在pH8.0pH8.0时，时，412nm412nm波长有强烈吸收波长有强烈吸收硫硝基苯甲酸硫硝基苯甲酸可用于比色法定量测定半胱氨酸的含量可用于比色法定量测定半胱氨酸的含量质谱质谱 质谱方法质谱方法(Mass(Mass Spectroscope,MSSpectroscope,MS):):可以正确测定蛋白质分子的质可以正确测定蛋白质分子的质量而进行蛋白质分子鉴定、蛋白质分子的修饰和蛋白质分子相互作用的量而进行蛋白质分子鉴定、蛋白质分子的修饰和蛋白质分子相互作用的研究研究.质谱方法仅限于小分子和中等分子的研究，因为要将质谱应用于生质谱方法仅限于小分子和中等分子的研究，因为要将质谱应用于生物大分子需要将之制备成气相带电分子，然后在真空中物理分解成离子。物大分子需要将之制备成气相带电分子，然后在真空中物理分解成离子。2020世纪世纪7070年代，解吸技术的出现成功地将蛋白分子转化成气相离子。年代，解吸技术的出现成功地将蛋白分子转化成气相离子。8080年代电喷雾电离年代电喷雾电离(ESI)(ESI)技术的发展则使得质谱方法应用于高分子量蛋白技术的发展则使得质谱方法应用于高分子量蛋白分子的研究分子的研究 生物质谱技术生物质谱技术测测定定生生物物大大分分子子三三维维结结构构的的方方法法分分为为两两大大类类：（1）应应用用X射射线线晶晶体体衍衍射射图图谱谱法法（X-ray crystallography）和和中中子子衍衍射射法法测测定定晶晶体体中中的的蛋蛋白白质质分分子子构构象象；（2）应应用用核核磁磁共共振振法法（nuclear magnetic resonance，NMR）、园园二二色色性性光光谱谱法法、激激光光拉拉曼曼光光谱谱法法、荧荧光光光光谱谱法法、紫紫外外差差光光谱谱法法和和氢氢同同位位素素交交换换法法等等测测定定溶溶液中液中的蛋白质构象。的蛋白质构象。生物大分子三维结构的测定方法生物大分子三维结构的测定方法美美国国蛋蛋白白质质数数据据库库(PDB)(PDB)存存入入的的三三维维结结构构数数据据,至至19931993年年6 6月月为为止止总总共共存存入入11101110套套(其其中中,982,982套套蛋蛋白白质质、酶酶与与病病毒毒,107,107套套DNADNA、2 2套套RNARNA、9 9套套tRNAtRNA和和1010套套糖糖类类),),而而截截止止目目前前,已已经经存存入入国国际际蛋蛋白白质质三三维维结结构构数数据据库库的的蛋蛋白白质质、核核酸酸和和糖类的三维结构已超过糖类的三维结构已超过2000020000套套。X X射射线线晶晶体体衍衍射射分分析析迄迄今今仍仍然然是是蛋蛋白白质质和和核核酸酸空空间间结结构构测测定定的的主主要要方方法法。以以X X射射线线晶晶体体衍衍射射分分析析为为主主要要手手段段，加加以以NMRNMR方方法法的的不不断断突突破破，生生物物大大分分子子三三维维结结构构测测定定在在高高速速发发展展，1997199719981998年年间间平平均均每每日日2 2个个结结构构，而而当当前前已已达达平平均均每日每日9 9个结构个结构。研究概况研究概况X-X-射线衍射法射线衍射法概述概述X-X-射线衍射法是测定射线衍射法是测定蛋白质晶体蛋白质晶体结构的极其重要结构的极其重要方法。生物大分子方法。生物大分子X X射线晶体学是揭示分子结构与射线晶体学是揭示分子结构与功能的科学。目前还没有一种工具能够用它直接功能的科学。目前还没有一种工具能够用它直接观察到蛋白质内部的原子和基团的排列。虽然电观察到蛋白质内部的原子和基团的排列。虽然电子显微镜接近于看到大分子的轮廓。但是仍然仅子显微镜接近于看到大分子的轮廓。但是仍然仅限于揭露分子的大小、形状、对称性和聚集状态限于揭露分子的大小、形状、对称性和聚集状态等。通过等。通过X-X-射线衍射法（射线衍射法（X-ray diffraction X-ray diffraction methodmethod）可）可间接地间接地研究蛋白质晶体的空间结构。研究蛋白质晶体的空间结构。对晶体结构的研究将帮助人们从对晶体结构的研究将帮助人们从原子原子的水平上了的水平上了解物质。解物质。发展历史发展历史 18951895年，年，伦琴伦琴(Rontgen)(Rontgen)发现了发现了X-rayX-ray;1914 1914年布拉格父子用年布拉格父子用X X射线衍射法对氯化钠、氯化钾晶体进行了测射线衍射法对氯化钠、氯化钾晶体进行了测定，指出定，指出晶体衍射图可以确定晶体内部的原子（或分子）间的距离晶体衍射图可以确定晶体内部的原子（或分子）间的距离和排列和排列。因此获诺贝尔奖。因此获诺贝尔奖。19511951年年，加加利利福福尼尼亚亚理理工工学学院院的的保保利利和和科科里里提提出出，-构构型型的的多多肽肽链链呈螺旋形，通过呈螺旋形，通过X射线确定，组成蛋白质的都是射线确定，组成蛋白质的都是L-L-型氨基酸型氨基酸。19531953年克里克、沃森在年克里克、沃森在X X射线衍射资料的基础上，提出了射线衍射资料的基础上，提出了DNADNA三维结三维结构构的模型。获的模型。获19621962年生理或医学诺贝尔奖。年生理或医学诺贝尔奖。19591959年佩鲁茨和肯德鲁对年佩鲁茨和肯德鲁对血红蛋白和肌血蛋白血红蛋白和肌血蛋白进行结构分析，解决进行结构分析，解决了三维空间结构了三维空间结构,获获19621962年诺贝尔化学奖年诺贝尔化学奖.19591959年有机化学家豪普特曼和卡尔勒建立了测定晶体结构的纯数学年有机化学家豪普特曼和卡尔勒建立了测定晶体结构的纯数学理论，特别在研究生物大分子如理论，特别在研究生物大分子如激素、抗生素、蛋白质及新型药物激素、抗生素、蛋白质及新型药物分子结构分子结构方面起到了重要作用。因此获方面起到了重要作用。因此获19851985年化学奖。年化学奖。X X射线衍射技术在蛋白质结构研究方面起到了推动作用射线衍射技术在蛋白质结构研究方面起到了推动作用与与X X射线及晶体衍射有关的部分诺贝尔奖获得者名单射线及晶体衍射有关的部分诺贝尔奖获得者名单 溶溶 菌菌 酶酶 （lysozyme)溶菌酶存在于鸡蛋清和动物的眼泪中，其溶菌酶存在于鸡蛋清和动物的眼泪中，其生物学功能是催化某些细菌细胞壁的多糖水生物学功能是催化某些细菌细胞壁的多糖水解，从而溶解细菌的细胞壁。解，从而溶解细菌的细胞壁。溶菌酶是溶菌酶是第一个用第一个用X X-射线法阐明其全部结射线法阐明其全部结构和功能的酶构和功能的酶。是。是19221922年伦敦细菌学家弗莱年伦敦细菌学家弗莱明明(Fleming)首次发现的。首次发现的。鸡蛋蛋清溶菌酶的氨基酸序列鸡蛋蛋清溶菌酶的氨基酸序列/nm/nm/cm/cm-1-1能量升高能量升高电磁波谱与有机光谱的对应关系电磁波谱与有机光谱的对应关系X X射线晶体结构分析射线晶体结构分析1)X1)X射线射线 （X-rayX-ray）18951895年伦琴发现用高速电子冲击固体时，年伦琴发现用高速电子冲击固体时，有一种新射线从固体上发出来有一种新射线从固体上发出来阴极阴极阳极阳极+-2)X2)X射线晶体衍射学射线晶体衍射学19121912年劳埃等人实验证实了年劳埃等人实验证实了X X射线与晶体射线与晶体相遇时能发生衍射现象，证明了相遇时能发生衍射现象，证明了X X射线具有射线具有电磁波的性质，成为电磁波的性质，成为X X射线衍射学的第一个射线衍射学的第一个里程碑。里程碑。当一束单色当一束单色X X射线入射到晶体时，由于晶体是由原子规射线入射到晶体时，由于晶体是由原子规则排列成的晶胞组成，这些规则排列的则排列成的晶胞组成，这些规则排列的原子间距离原子间距离与入射与入射X X射线波长有相同数量级射线波长有相同数量级，故由不同原子故由不同原子散射的散射的X X射线相互干涉，在某些特殊方向上产生强射线相互干涉，在某些特殊方向上产生强X X射射线衍射线衍射X射线源入射线晶体衍射线 X X射线衍射原理射线衍射原理这种衍射现象貌似晶体中每个原子作为一个新的这种衍射现象貌似晶体中每个原子作为一个新的散射波源，它们各自向空间辐射与入射波同频率散射波源，它们各自向空间辐射与入射波同频率的电磁波。的电磁波。因此，因此，X射线在晶体中的衍射现象，可以看成是晶射线在晶体中的衍射现象，可以看成是晶体原子的散射波互相干涉的结果。体原子的散射波互相干涉的结果。晶体的衍射图晶体的衍射图 依据：在晶体结构分析中应用的依据：在晶体结构分析中应用的X射线是波长在射线是波长在o1nm左右的电磁波，这一波长与晶体内左右的电磁波，这一波长与晶体内原子间的距离原子间的距离具有同具有同一数量级，由于晶体结构内分子排列的规则性，当一数量级，由于晶体结构内分子排列的规则性，当X射线射线入射到晶体上时晶体中的每一个原子可发射出入射到晶体上时晶体中的每一个原子可发射出次生次生的的x射线，并射线，并相互干涉相互干涉，形成一个，形成一个衍射花样衍射花样。对于对于x射线来说，由于不能将散射光聚焦射线来说，由于不能将散射光聚焦而形成物像，来直接看到晶体内部的结构。而形成物像，来直接看到晶体内部的结构。但是，通过但是，通过晶体的衍射花样反映处晶体内晶体的衍射花样反映处晶体内部的结构。部的结构。如何在如何在衍射图衍射图与与晶体结构晶体结构之间建之间建立起定性和定量的关系？立起定性和定量的关系？晶体结构基本常识晶体结构基本常识日常所见的许多晶体，如：氯化钠（离子日常所见的许多晶体，如：氯化钠（离子晶体）、金刚石（原子晶体）等，外形都晶体）、金刚石（原子晶体）等，外形都是非常有规则的。无论是那一类晶体，组是非常有规则的。无论是那一类晶体，组成晶体的微粒在空间的三个方向上，都是成晶体的微粒在空间的三个方向上，都是周期性排列周期性排列的。的。晶体的空间结构是由一组为数无限的、相晶体的空间结构是由一组为数无限的、相互平行的、情况相同的平面点阵所组成。互平行的、情况相同的平面点阵所组成。每一个点阵所构成的单元叫每一个点阵所构成的单元叫晶胞晶胞。知道了。知道了晶体的晶胞就等于知道了整个晶体的空间晶体的晶胞就等于知道了整个晶体的空间结构。结构。衍射线空间方位与晶体结构的关系衍射线空间方位与晶体结构的关系可用可用布拉格方程布拉格方程布拉格方程布拉格方程表示：表示：衍射线方向：衍射线方向：确定晶胞的大小和形状；确定晶胞的大小和形状；衍射线强度：衍射线强度：确定晶胞中的原子排列。确定晶胞中的原子排列。(n=1,2,3,)Protein Structure By X-RayCrystallographyObtain Crystals;Expose Crystals to X-rays;Measure intensity of Diffraction;Compute Electron density at every position in the crystal(x,y,z);Place poly-peptide chain into electron density.Protein Crystallization and X-ray diffraction X射线晶体结构测定步骤射线晶体结构测定步骤蛋白质晶体的培养和挑选蛋白质晶体的培养和挑选X射线照射晶体，得到衍射数据射线照射晶体，得到衍射数据根据晶体性质，分析衍射数据，获得晶体根据晶体性质，分析衍射数据，获得晶体晶胞空间群。晶胞空间群。解晶体结构要进一步知道晶胞中原子的分解晶体结构要进一步知道晶胞中原子的分布也就是原子坐标。这就需要结合其他方布也就是原子坐标。这就需要结合其他方法，获得衍射点的振幅、相角、电子密度法，获得衍射点的振幅、相角、电子密度等信息，最终得到晶体结构。等信息，最终得到晶体结构。晶体内部结构的特点：晶体内部结构的特点：由于球状蛋白分子量较大，由于球状蛋白分子量较大，而且表面基团的构象较不稳定，欲获得而且表面基团的构象较不稳定，欲获得排列有序排列有序的晶体是比较难的。实际上，所形成的晶体不可的晶体是比较难的。实际上，所形成的晶体不可能是完美的堆砌，能是完美的堆砌，在分子之间形成许多大的孔或在分子之间形成许多大的孔或通道。通道。这些通道常常由占晶体体积一半以上（这些通道常常由占晶体体积一半以上（2070）的溶剂分子所占有，晶体的蛋白质分的溶剂分子所占有，晶体的蛋白质分子之间通常是通过一个或几个无序的溶剂分子层子之间通常是通过一个或几个无序的溶剂分子层发生接触，这些接触区域的相互作用也是较弱的。发生接触，这些接触区域的相互作用也是较弱的。获得好的晶体是获得好的晶体是结构分析中最关键的一步结构分析中最关键的一步生物大分子的晶体要求生物大分子的晶体要求 要进行要进行x射线晶体结构分析，首先要得到适合射线晶体结构分析，首先要得到适合于结构分析的晶体。于结构分析的晶体。首先要得到具有有序性的首先要得到具有有序性的单晶单晶，不是孪晶，否，不是孪晶，否则无法得到具有结构本身特点的衍射花样；则无法得到具有结构本身特点的衍射花样；其次晶体要其次晶体要有一定的大小和形状有一定的大小和形状。因为晶体衍。因为晶体衍射线的强度大体上正比于晶体的体积，而反比射线的强度大体上正比于晶体的体积，而反比于分子量的大小。于分子量的大小。蛋白质结晶过程像其他小分子物质一样，是一蛋白质结晶过程像其他小分子物质一样，是一个有序化过程，即在溶液中处于随机状态的分个有序化过程，即在溶液中处于随机状态的分子转变成子转变成有规则排列状态的固体有规则排列状态的固体。一般认为要使这种有序化过程开始必须要形成一般认为要使这种有序化过程开始必须要形成一定大小的一定大小的晶核晶核，并使分子不断地结合到晶核，并使分子不断地结合到晶核上，晶体逐渐长大。上，晶体逐渐长大。过饱和溶液蛋白质结晶过程是一个有序化过程蛋白质结晶过程是一个有序化过程蛋白质结晶过程蛋白质结晶过程晶体生长的理化条件晶体生长的理化条件 蛋白质晶体生长的生化条件：蛋白质晶体生长的生化条件：pHpH值、离子强度、沉淀剂和添加剂值、离子强度、沉淀剂和添加剂 在摸索晶体生长的过程中，首先是缓冲液的选取，其在摸索晶体生长的过程中，首先是缓冲液的选取，其次是沉淀剂，最后是蛋白质的浓度次是沉淀剂，最后是蛋白质的浓度蛋白质晶体生长的物理条件：蛋白质晶体生长的物理条件：温度、震动、溶剂的清洁度、试剂的纯度、重力等因素温度、震动、溶剂的清洁度、试剂的纯度、重力等因素 物理条件控制了晶核形成的速度和晶体生长的速度物理条件控制了晶核形成的速度和晶体生长的速度在蛋白质结晶时必须保持在水合状态，或者在在蛋白质结晶时必须保持在水合状态，或者在生理生理pH和温度条件下。和温度条件下。要使生物大分子结晶和生长出大的晶体最关键要使生物大分子结晶和生长出大的晶体最关键的是控制过饱和度的量和结晶速度的是控制过饱和度的量和结晶速度过饱和度要过饱和度要低，而速度要尽可能地慢。低，而速度要尽可能地慢。蛋白质结晶要点蛋白质结晶要点单晶衍射分析单晶衍射分析应用应用 能提供晶体内部三维空间的电子云密度分布，晶体中分能提供晶体内部三维空间的电子云密度分布，晶体中分子的立体构型、构像、化学键类型，键长、键角、分子间距子的立体构型、构像、化学键类型，键长、键角、分子间距离，配合物配位等离，配合物配位等a ribbon representation of Klebsiella pneumoniae nitrogenase component 1 臭鼻肺炎杆菌臭鼻肺炎杆菌臭鼻肺炎杆菌臭鼻肺炎杆菌 Crystallization RoboticsSetup:small quantity,accurate,time saving,repeatable.Monitor:continuous,accurate,time saving,dynamic.PROTEUM系统适用于生物大分子结构测定系统适用于生物大分子结构测定核磁共振（核磁共振（NMR）核磁共振是核磁共振是19461946年由美国哈佛大年由美国哈佛大学普舍尔学普舍尔(E.M.PurcellE.M.Purcell)小组和斯坦小组和斯坦大学的布洛赫（大学的布洛赫（F.BlochF.Bloch）小组同时）小组同时独立发现的，它的研究对象是独立发现的，它的研究对象是原子原子核的磁矩在磁场中对电磁波的吸收核的磁矩在磁场中对电磁波的吸收和发射和发射根据核磁共振峰的根据核磁共振峰的化学位化学位移移和和自旋自旋-自旋分裂自旋分裂可以测定分子的可以测定分子的静态结构、静态结构、研究化学交换等研究化学交换等常见有机波谱常见有机波谱 原子核由质子和中子组成质子、中子与电子一样具有原子核由质子和中子组成质子、中子与电子一样具有自旋运动，因而核也产生磁矩自旋运动，因而核也产生磁矩 并非所有原子核自旋都具有磁矩，并非所有原子核自旋都具有磁矩，实验证明只有那些实验证明只有那些原子原子序数或质量数为奇数的原子自旋才具有磁矩序数或质量数为奇数的原子自旋才具有磁矩例如：例如：H H，C C，N N，O O等等 让处于外磁场的自旋核接受一定频率的电磁波辐射（让处于外磁场的自旋核接受一定频率的电磁波辐射（h h ），），而辐射的能量又恰好等于高低两种不同取向的能量差时，质子而辐射的能量又恰好等于高低两种不同取向的能量差时，质子就吸收电磁辐射，从低能态跃迁到高能态而产生共振现象，称就吸收电磁辐射，从低能态跃迁到高能态而产生共振现象，称为为核磁共振（核磁共振（NMRNMR）以吸收的能量的强度为纵坐标，以吸收的频率为横坐标，用以吸收的能量的强度为纵坐标，以吸收的频率为横坐标，用记录仪描绘下来，分子中各个核在核磁共振谱上即出现吸收峰，记录仪描绘下来，分子中各个核在核磁共振谱上即出现吸收峰，成为成为核磁共振谱图核磁共振谱图 常规1D谱：1H-NMR，13C-NMR，DEPT(90o或135o)，31P-NMR，19F-NMR 按照核磁共振所研究的样品体系，我们可以将核磁共按照核磁共振所研究的样品体系，我们可以将核磁共振技术分为：振技术分为：溶液高分辨核磁共振溶液高分辨核磁共振:以溶液样品为研究对象，主要用以溶液样品为研究对象，主要用于研究生物分子、药物分子和化学分子体系中的相关问于研究生物分子、药物分子和化学分子体系中的相关问题。题。固体核磁共振固体核磁共振:以固体样品为研究对象，在材料研究以以固体样品为研究对象，在材料研究以及高分子聚合物的分析中是不可缺少的研究手段。及高分子聚合物的分析中是不可缺少的研究手段。核磁共振成像技术核磁共振成像技术:可用以获得人和动物体中各种器官可用以获得人和动物体中各种器官以及骨骼的断面图像，现今已发展成为医学上重要的诊以及骨骼的断面图像，现今已发展成为医学上重要的诊断工具。断工具。三类核磁共振基于同一物理原理，但是实验技术各不三类核磁共振基于同一物理原理，但是实验技术各不相同，对实验样品制备也有各不相同的要求。相同，对实验样品制备也有各不相同的要求。核磁共振的分类核磁共振的分类 核磁共振波谱仪核磁共振波谱仪工作过程包含射频发生、工作过程包含射频发生、功率放大、脉冲形成及控功率放大、脉冲形成及控制、信号检测等制、信号检测等核磁共振的发展核磁共振的发展 19711971年比利时的年比利时的J.JeenerJ.Jeener首次提出首次提出二维核磁共振二维核磁共振的概念。的概念。2020世纪世纪8080年代末期遗传工程技术迅速发展，已成功制备了年代末期遗传工程技术迅速发展，已成功制备了许多许多15N15N和和13C13C等稳定同位素标记的蛋白质样品，使二维异等稳定同位素标记的蛋白质样品，使二维异核核磁共振方法得以实施核核磁共振方法得以实施2020世纪世纪9090年代初期年代初期A.BaxA.Bax等人提出了异核三维和四维核磁等人提出了异核三维和四维核磁共振方法。已可用于确定分子量为共振方法。已可用于确定分子量为15-25kDa15-25kDa蛋白质分子的蛋白质分子的溶液三维空间结构。溶液三维空间结构。NMRNMR技术技术最大的优点在于它能对在溶最大的优点在于它能对在溶液中和非晶态的蛋白质进行测量液中和非晶态的蛋白质进行测量多维核磁共振波谱技术多维核磁共振波谱技术成为确定蛋白质和核酸等生物分子成为确定蛋白质和核酸等生物分子溶液三维空间结构的唯一有效手段。近几年来异核核磁共溶液三维空间结构的唯一有效手段。近几年来异核核磁共振方法迅速发展，已可用于确定分子量为振方法迅速发展，已可用于确定分子量为151525KDa25KDa蛋白蛋白质分子溶液的三维空间结构质分子溶液的三维空间结构（600MHz）NMR实验步骤实验步骤生物大分子的NMR三维结构金黄色葡萄球菌酶(SNase)蛇毒蛋白蛇毒蛋白CobrotoxinII结构叠加图结构叠加图X晶体衍射技术与核磁共振技术的比较晶体衍射技术与核磁共振技术的比较1.X光衍射光衍射 （80%）（1）要结晶要结晶 （2）有动态运动研究的前景）有动态运动研究的前景 （3）可以分析很大的分子）可以分析很大的分子 （4）数据收集时间短（同步辐射）数据收集时间短（同步辐射）（5）数据分析相对简单）数据分析相对简单 2.NMR （15%）（1）无须结晶，在）无须结晶，在溶液状态溶液状态下分析下分析 （2）蛋白的动态运动学研究）蛋白的动态运动学研究 （3）30 kD 以下的分子（以下的分子（600MHz，大分，大分子的局部研究）子的局部研究）（4）需要做同位素标志，数据收集时间长）需要做同位素标志，数据收集时间长 （5）数据分析相对复杂）数据分析相对复杂生物大分子在晶体状态下的结构是否反映了在有生物大分子在晶体状态下的结构是否反映了在有机体内的真实结构机体内的真实结构?回答基本上是肯定的。目前来讲，实验结果表回答基本上是肯定的。目前来讲，实验结果表明，大部分生物大分子的明，大部分生物大分子的晶体结构晶体结构(crystal structure)接近于其用核磁共振技术测得的接近于其用核磁共振技术测得的溶液溶液结构结构(solution structure)。试从晶体的内部结构进行解释？试从晶体的内部结构进行解释？思考题：思考题：