结核病实验室生物安全课件

结核病实验室生物安全结核病实验室生物安全自治区疾控中心自治区疾控中心结核病核病实验室室结核病实验室生物安全自治区疾控中心结核病实验室结核病实验室生物安全课件什么是生物安全什么是生物安全生物安全是指生物安全是指对由由现代生物技代生物技术的开的开发和和应用用过程中程中可能可能产生的生的负面影响面影响，所采取的有，所采取的有效效预防和控制措施防和控制措施.什么是生物安全生物安全是指对由现代生物技术的开发和应用过程中l保保护人人（实验人人员、同事、同事、实验室室辅助人助人员）l物品物品(标本和器材等本和器材等)l环境境(空气、土壤、水空气、土壤、水)生物安全的目的生物安全的目的保护人（实验人员、同事、实验室辅助人员）生物安全的目的国家发展与改革委员会国家发展与改革委员会科技部科技部建设部建设部国家环保部国家环保部国家质检总局（中国合格评定国家认可中心）国家质检总局（中国合格评定国家认可中心）国家卫生计生委国家卫生计生委农业部农业部民航局民航局其它有关部门其它有关部门实验室管理部门实验室管理部门实验室管理部门国家对病原微生物实行国家对病原微生物实行分类管理分类管理，对实验室实，对实验室实行行分级管理分级管理。国家实行国家实行统一统一的实验室生物安全的实验室生物安全标准标准。实验室。实验室应当符合国家标准和要求。应当符合国家标准和要求。基本规定基本规定国家对病原微生物实行分类管理，对实验室实行分级管理。基本规病原微生物的分类和管理病原微生物的分类和管理 国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为度，将病原微生物分为四类四类：第一类病原微生物第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物，是指能够引起人类或者动物非常严重非常严重疾疾病的微生物，以及我国尚病的微生物，以及我国尚未发现未发现或者或者已经宣布消灭已经宣布消灭的微生物。的微生物。第二类病原微生物第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物，是指能够引起人类或者动物严重疾病严重疾病，比较容易直比较容易直接或者间接在人与人接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播、动物与人、动物与动物间传播的微生物。的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物高致病性病原微生物。病原微生物的分类和管理 国家根据病原微生物的传染性、感染后对第三类病原微生物第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物，是指能够引起人类或者动物疾病疾病，但一般，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。施的微生物。第四类病原微生物第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。疾病的微生物。第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下结核分枝杆菌危害等级结核分枝杆菌危害等级n根据卫生部病原微生物危害等级分类，结核分枝杆菌属于第二类，即指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。结核分枝杆菌危害等级根据卫生部病原微生物危害等级分类，结核分实验室的设立与管理实验室的设立与管理国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室分为一级、二级、三级、四级。实验室的设立与管理国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水BSL-1BSL-1BSL-2BSL-2BSL-3BSL-3 原则：定向气流原则：定向气流原则：定向气流设施设备设施设备标准操作程序标准操作程序个人防护装备个人防护装备管理管理实验室生物安全控制要素实验室生物安全控制要素设施设备标准操作程序个人防护装备管理实验室生物安全控制要素结核菌是通核菌是通过气溶胶气溶胶传播播结核菌是通过气溶胶传播l涂片l培养液的倾倒和转移；l高速混合含菌液体；l滴加、接种培养物；l取样器和振荡器的使用；l容器内外压力不同时打开容器可能产生气溶胶的操作可能产生气溶胶的操作涂片可能产生气溶胶的操作实验室仪器设备操作及其危险性实验室仪器设备操作及其危险性 在在实验室中使用离心机、室中使用离心机、搅拌机、匀拌机、匀浆机、机、振振荡器、超声波粉碎器、超声波粉碎仪和混合和混合仪处理含有感理含有感染性染性结核菌的材料核菌的材料时，以及打开培养容器；，以及打开培养容器；冻干和干和过滤也可以也可以产生感染性气溶胶生感染性气溶胶 实验室仪器设备操作及其危险性 在实验室中使用离心机、搅拌机、保证实验室通风保证实验室通风 保保证实验室的窗室的窗户可以通可以通风将含有气溶将含有气溶胶的空气与室外空气胶的空气与室外空气进行交行交换，以排出或稀，以排出或稀释气溶胶气溶胶浓度。度。保证实验室通风 保证实验室的窗户可以通风将含有气溶胶的 如果如果实验室室进行了正确的行了正确的试验操作，操作，那么与患者的一次不加防那么与患者的一次不加防护的咳嗽相比，的咳嗽相比，在操作中在操作中产生的气溶胶是很少的。生的气溶胶是很少的。实验室危室危险 如果实验室进行了正确的试验操作，那么 给予口罩或面巾予口罩或面巾 教会如何教会如何较卫生的方式咳嗽生的方式咳嗽 分开的区域侯分开的区域侯诊 尽快接受相关尽快接受相关检查(在排在排队前前)转诊到到专门的的结核病核病诊断和治断和治疗场所所(机构机构)对结核病可疑症状者或核病可疑症状者或结核病患者核病患者应该采取：采取：给予口罩或面巾对结核病可疑症状者或结核病患者应该采取：根根据据我我国国发布布的的人人间传染染的的病病原原微微生生物物名名录的的要要求求，对于于结核核分分枝枝杆杆菌菌大大量量活活菌菌操操作作须在在符符合合生生物物安安全全三三级（BSL-3）的的环境境中中进行；行；样本本检测，包包括括样本本的的病病原原菌菌分分离离纯化化、药物物敏敏感感性性实验、生生化化鉴定定、免免疫疫学学实验、PCR核核酸酸提提取取、涂涂片片、显微微观察察等等初初步步检测活活动，可可以以在在符符合合生生物物安安全全二二级（BSL-2）的的环境中境中进行。行。结核分枝杆菌核分枝杆菌实验操作要求操作要求 根据我国发布的人间传染的病原微生物名录的用于保用于保护操作人操作人员、处理理样品安全与品安全与环境安境安全的通全的通风安全柜，柜内保持安全柜，柜内保持负压状状态，适用，适用于生物危于生物危险度等度等级为1 1、2 2、3 3的媒的媒质的操作。的操作。级生物安全柜生物安全柜为临床生物防床生物防护中中应用最普用最普遍的一遍的一类生物安全柜。生物安全柜。级生物安全柜级生物安全柜用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜，柜内保结核病实验室生物安全课件安全柜的最佳放置位置安全柜的最佳放置位置安全柜安全柜应该放在什么地方？放在什么地方？尽量隔离安全柜尽量隔离安全柜降低人流降低人流尽量离开尽量离开风管出口管出口尽量离开尽量离开门和窗口和窗口安全柜的最佳放置位置安全柜应该放在什么地方？注注 意意ABCDA，B:不可不可 D，C:建议建议Installation注 意ABCDA，B:不可 生物安全柜的使用生物安全柜的使用准准备：l在开始工作前在开始工作前应应考考虑实验虑实验中的操作步中的操作步骤骤和所需和所需设备设备，充分做好准，充分做好准备备工作。工作。l准准备备好消毒好消毒剂剂和和处处理理遗遗撒事件的物品。撒事件的物品。l尽量减少房尽量减少房间间内的走内的走动动，保，保证证正常气流。正常气流。l前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和风风机。机。l让让生物安全柜工作区排气几分生物安全柜工作区排气几分钟钟之后再开始工之后再开始工作作生物安全柜的使用准备：生物安全柜的使用生物安全柜的使用操作：操作：l消毒桌面（消毒桌面（75%75%酒精，使用紫外酒精，使用紫外线作作为表面消毒表面消毒的效果不一定能完全无菌）的效果不一定能完全无菌）l安全柜内只放本次安全柜内只放本次实验实验所需的物品。所有物品所需的物品。所有物品离前窗至少离前窗至少15cm15cm，即在隔即在隔栅之后，所有之后，所有污染性染性的操作尽量的操作尽量远离工作区域的后部。离工作区域的后部。l大物体之大物体之间间要保持一定距离。要保持一定距离。生物安全柜的使用操作：生物安全柜的使用生物安全柜的使用操作：操作：干干净净和被和被污污染的物品分开放置；被染的物品分开放置；被污污染的物品染的物品尽量不要尽量不要进进入干入干净净区域，区域，应应放置在工作区域的放置在工作区域的后部。后部。操作操作时时物品和手臂不要物品和手臂不要频繁穿繁穿过前窗。前窗。操作完操作完毕后，将物品表面用适当的消毒液擦拭后，将物品表面用适当的消毒液擦拭后移出，用消毒液擦拭安全柜内面。后移出，用消毒液擦拭安全柜内面。生物安全柜的使用操作：污染区工作区清洁区污染区工作区清洁区不要覆盖前、后、侧边的隔栅不要覆盖前、后、侧边的隔栅不要覆盖前、后、侧边的隔栅操作完毕后用消毒操作完毕后用消毒液擦拭安全柜内面液擦拭安全柜内面操作完毕后用消毒液擦拭安全柜内面生物安全柜内发生意外应急处理生物安全柜内发生意外应急处理用蘸取消毒液的用蘸取消毒液的纱布或布或纸巾覆盖巾覆盖溅出物，静置使消毒出物，静置使消毒液和液和溅出物接触至少出物接触至少1515分分钟用适当的消毒液擦拭用适当的消毒液擦拭溅出物周出物周围表面或其他容器表面表面或其他容器表面换新手套，新手套，净化安全柜几分化安全柜几分钟将将污染物高染物高压灭菌菌生物安全柜内发生意外应急处理用蘸取消毒液的纱布或纸巾覆盖溅出生物安全柜外发生意外应急处理生物安全柜外发生意外应急处理发生重大生重大溅洒事故洒事故时，所有人，所有人应立即离开立即离开实验室，待气溶胶沉降完全后再室，待气溶胶沉降完全后再处理。理。生物安全柜外发生意外应急处理可以在可以在 BSCBSC内用火焰内用火焰?在在生生物物安安全全柜柜内内所所形形成成的的几几乎乎没没有有微微生生物物的的环境境中中，应避避免免使使用用明明火火。使使用用明明火火会会对气气流流产生影响。生影响。在在对接接种种环进行行灭菌菌时，可可以以使使用用微微型型燃燃烧器或器或电炉，而不炉，而不应使用明火使用明火。可以在 BSC内用火焰?在生物安全柜内所形成的几乎没有微生高压灭菌器使用高压灭菌器使用u负责高高压灭菌的人菌的人员应接受接受过良好的培良好的培训并持并持证上上岗。u灭菌前：菌前：l检查灭菌容器的菌容器的盖盖子，子，将盖将盖子旋子旋松后松后再放再放入入消毒物品。消毒物品。l容器內容器內各种液体各种液体约装装八分八分满，切勿，切勿装装满。l具有具有挥发性的物性的物质，不可，不可高高压灭菌。菌。l灭菌菌前前务必确定必确定水位在水位在正常要求水位正常要求水位以上。以上。高压灭菌器使用负责高压灭菌的人员应接受过良好的培训并持证上岗高压灭菌器使用高压灭菌器使用灭菌菌过程中：程中：随随时查看所查看所设定定温度（温度（121121度）、度）、压力力是否是否正确正确。（。（121121度，度，3030分分钟）灭菌后：菌后：l开开门前前务必确定必确定內內锅压力表已力表已经归零零。l灭菌菌器中各器中各项物品及物品及灭菌器本身均高菌器本身均高温温，取出物品取出物品时应戴戴手套手套。l随随时保持保持锅內內清清洁，以延，以延长使用年限使用年限。高压灭菌器使用灭菌过程中：个人防护装备个人防护装备 (PPE)(PPE)在生物安全在生物安全实验室中，室中，这些器材和用品主要是保些器材和用品主要是保护实验人人员免于暴露于生物危害物免于暴露于生物危害物质（气溶胶、（气溶胶、喷濺物以及意外接种等）危濺物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。的一种物理屏障。防护部位防护部位 防护装备防护装备眼睛眼睛眼镜（安全镜、护目镜）眼镜（安全镜、护目镜）头面部、呼吸道头面部、呼吸道口罩（口罩（N95N95）、面罩、帽子）、面罩、帽子 躯体躯体防护服防护服(实验服、隔离衣实验服、隔离衣)手、足手、足手套、鞋套手套、鞋套个人防护装备(PPE)在生物安全实验室中，这些器材N95N95是感染防是感染防护的最低的最低标准，准，N95N95口罩非常重口罩非常重要，要，“NIOSHNIOSH”认证。N95是感染防护的最低标准，N95口罩非常重要，“NIOSH不合格不合格不合格个人防护装置选择原则个人防护装置选择原则要求工作人要求工作人员应掌握的要点掌握的要点l必必须十分了解和掌握自己工作性十分了解和掌握自己工作性质和特点和特点l所所涉涉及及的的实验工工作作需需要要使使用用个个人人防防护装装备的的类型型l正确的使用方法正确的使用方法l使使用用前前应仔仔细检查，不不使使用用标志志不不清清、破破损或泄漏的防或泄漏的防护用品用品个人防护装置选择原则要求工作人员应掌握的要点个人防护个人防护出出实验室前，一定要洗手！室前，一定要洗手！个人防护出实验室前，一定要洗手！废弃物处理废弃物处理l传染性染性废弃物弃物对实验员和和环境危境危险性极大性极大.l在在废弃弃物物离离开开实验室室前前必必须高高压灭菌菌或或去去污染染处理理.废弃物处理传染性废弃物对实验员和环境危险性极大.结核菌污染物品灭菌结核菌污染物品灭菌结核分枝杆菌核分枝杆菌对湿湿热敏感敏感100100煮沸煮沸5 5minmin可可杀死痰中死痰中结核杆菌。核杆菌。121121压力蒸汽力蒸汽3030minmin，可可杀灭动物物脏器、痰器、痰或培养基中的或培养基中的结核分枝杆菌。核分枝杆菌。结核菌污染物品灭菌结核分枝杆菌对湿热敏感生物安全意生物安全意识至关重要！至关重要！谢谢 ！生物安全意识至关重要！