肥料中2,4-D的测定　高效液相色谱法（定稿）

ICS65.080G 20DB37山东省地方标准DB 37/T XXXXXXXXX肥料中2,4-D的测定高效液相色谱法Determination of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid in fertilizers by high performance liquid chromatographyXXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施山东省市场监督管理局发布DB37/ XXXXXXXXX目次前言II1 范围12 规范性引用文件13 方法提要14 试剂和材料15 仪器16 分析步骤26.1 样品制备26.2 提取26.3 测定26.4 空白试验26.5 结果表述26.6 允许差3附录A （资料性附录） 2，4-D基本信息4附录B （资料性附录） 标准物质液相色谱图5前言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由山东省市场监督管理局提出并监督实施。本标准由山东化工标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、菏泽金正大生态工程有限公司、山东农业大学。本标准主要起草人：刘爽、张娟、刘倩倩、朱海荣、田静、于燕萍、尹畅、程彬、商姗姗、郑树林、王景超、邹惠玲、苏本玉、李成亮。5肥料中2,4-D的测定高效液相色谱法警告：本标准有可能涉及到有害物质、危险操作和设备的安全。本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的要求。1 范围本标准规定了肥料中2,4-D的液相色谱检测方法。本标准适用于水溶肥料、复混肥料、掺混肥料、配方肥料中2,4-D的检测。称样量为1.0 g时，方法中2,4-D的检出限为3 mg/kg。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和实验方法3 方法提要试样中2,4-D用甲醇进行超声提取，在选定的工作条件下，用高效液相色谱仪（配有二极管阵列检测器）进行测定，外标法定量。4 试剂和材料本标准中试验用水应符合GB/T 6682中一级用水的规格。4.1 乙酸铵：色谱纯。4.2 甲醇：色谱纯。4.3 乙腈：色谱纯。4.4 10 mM乙酸铵水溶液：称取0.771 g乙酸铵加水稀释至1 000 mL。4.5 2,4-D标准品：已知质量分数，w98.0 %。4.6 2,4-D标准溶液：称取0.01 g（精确至0.000 1 g）2,4-D标准品，定容至10 mL，用甲醇（4.2）配制成浓度为1 000 mg/L的标准溶液，现用现配。5 仪器5.1 高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器（PDA），色谱数据处理机或色谱工作站。5.2 涡旋混合器。5.3 高速离心机：最高转速不低于6 000 r/min。5.4 超声波清洗器。5.5 金属试验筛：0.5 mm。5.6 分析天平：精度0.1 mg。5.7 有机相微孔滤膜：0.45 m。6 分析步骤6.1 样品制备固体样品：将样品粉碎，过0.5 mm试验筛，待用。液体样品混匀后直接称取。6.2 提取称取0.1 g1.0 g（精确至0.000 1 g）样品至离心管中，加入8 mL甲醇（4.2），涡旋1 min，超声30 min，以6 000 r/min高速离心10 min，放至室温后，定容至10 mL，取1 mL上清液过0.45 m有机相滤膜，待测。6.3 测定6.3.1 液相色谱操作条件推荐的液相色谱条件如下：a) 色谱柱：250 mm 4.6 mm（i.d.）不锈钢柱，内装RP18 5.0 m填充物（或具有相同柱效的其他反相色谱柱）；b) 检测波长：283 nm；c) 柱箱温度：35 ；d) 流动相：（乙腈：乙酸铵水溶液）=60：40；e) 流速：0.8 mL/min；f) 进样量：10 L。上述液相色谱操作条件，系典型操作参数。可根据不同仪器特点，对给定的操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。典型的2，4-D标准物质液相色谱图见图B.1。6.3.2 标准曲线绘制分别移取2,4-D标准溶液（4.6）0.01 mL、0.05 mL、0.25 mL、0.50 mL和1.00 mL至10 mL容量瓶中，甲醇（4.2）定容，配制成浓度分别为1 mg/L、5 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 mg/L的标准工作溶液，按色谱条件（6.3.1）进行测定，以色谱峰峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。6.3.3 试样测定取适量待测液（6.2），按照色谱条件（6.3.1）进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，外标法定量，同时进行平行试验。2,4-D含量高的试样可取适量试样溶液用甲醇稀释后进行测定。6.4 空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。6.5 结果表述试样中2，4-D含量以质量分数X（%）表示，按公式（1）计算：(1)式中：c 由标准曲线查得试样溶液中2,4-D的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；c0 由标准曲线查得空白溶液中2,4-D的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；V 样品的定容体积，单位为升（L）；D 样品稀释倍数；m 样品质量，单位为克（g）。计算结果保留两位有效数字，取平行测定结果的算术平均值作为测定结果。6.6 允许差在重复性条件下获得的两次平行测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10 %。AA附录A （资料性附录）2，4-D基本信息2，4-D基本信息见表A.1。表A.1 2，4-D的化学名称、别名、英文名称、分子式、CAS号、结构式、分子量中文名称2，4-D分子式C8H6Cl2O3化学名称2，4-二氯苯氧乙酸结构式别名2，4-D酸；2，4-D；2，4-二氯苯氧基乙酸；2，4-滴酸CAS号94-75-7英文名称2，4-Dichlorophenoxyacetic acid分子量221.04BB附录B （资料性附录）标准物质液相色谱图标准物质液相色谱图见图B.1。注： 1-未知；2-2，4-D。图B.1 2,4-D标准物质液相色谱图_