影响尿生成的因素实验

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,尿生成的影响因素,及药物对尿生成的影响,实验目的,1.,掌握输尿管插管技术，学习尿量的记录和测量方法；,2.,观察神经体液因素及药物对尿生成的影响，并分析其作用机制。,实验原理,尿生成的过程包括：肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收和分泌。凡是影响尿生成过程的因素均可引起尿量的改变。,尿生成的调节包括肾内自身调节、神经调节、体液调节。本实验分别对实验动物施加不同因素，观察尿量及其成分的变化。,尿生成的生理基础,肾小管,肾小体,肾小囊,肾小球,远端小管,近端小管,髓袢细段,近端小管直段,近曲小管,髓袢升支细段,髓袢降支细段,远曲小管,髓袢升支粗段,肾单位,原 理：,终尿生成滤过液（原尿）重吸收量分泌（比较少，可不考虑）,有效滤过压毛细血管压胶体渗透压囊内压,凡能影响上述过程的因素都可影响尿的生成，从而引起尿量的改变,有效滤过压毛细血管压胶体渗透压囊内压,本实验用两道同步记录,1,道记录血压,2,道记录尿量,实验对象：,家兔,实验器材和药品,RM-6240,多道生理记录仪、压力换能器、兔手术器械,1,套、刺激电极、膀胱插管、尿液记滴器、生理盐水、,20%,葡萄糖、,1,：,10000,肾上腺素、抗利尿激素、呋塞米、,0.5%,肝素、,25%,乌拉坦、尿糖试纸,步骤,（一）麻醉、固定,（2,5,乌拉坦,4ml/kg）,（二）颈部手术,1做颈部切口，,逐层分离,皮肤、皮下组织、肌肉,（,钝性分离,），,暴露气管。,2气管插管。,3分离右侧迷走神经，穿线备用。,4分离左侧颈总动脉并行动脉插管，描记动脉血压。,（三）尿液收集方法：,输尿管插管,在,耻骨联合上缘,作46,cm,正中切口，用湿生理盐水的纱布衬垫后，将膀胱翻至体外（,勿使肠断外露，以免血压下降,）。在膀胱底部找出两侧输尿管，细心分离（,莫损伤伴行血管,），各穿两条线备用，分别将输尿管近膀胱端结扎，在结扎线的远离膀胱端剪开一个斜口（可先用玻璃分针探一下），把,预先充满生理盐水,的细塑料管向肾脏方向插入输尿管（1,cm,左右），用线结扎固定。,手术完毕后用温生理盐水纱布将切口盖住。,尿液收集方法：,膀胱插管,腹部剪毛，,耻骨联合上方,正中剪口,3-5cm,，沿腹白线剪开腹壁，将膀胱向尾侧移至体外，辨认膀胱和输尿管的解剖部位，用针筒抽取尿液,6ml,，装入两只试管。在膀胱顶部剪一丛行小口，插入膀胱插管，穿线结扎固定，（注意：结扎线,不要堵住插管的两个入口,，插管最好正对着输尿管在膀胱的入口处，,不要紧贴膀胱后壁,，以免堵塞输尿管。）用浸有,38,生理盐水的纱布覆盖创面。,（四）连接换能器和记滴器,动脉插管已连在血压力换能器，,1,道记录血压变化,膀胱插管与记滴器相连，使膀胱内引流出的尿液 滴在记滴器的两个电极之间，构成一个完整的电通路，,2,道记录通道会记录下来一次尿滴。,观察项目,手术和实验装置安装完毕后，记录正常血压和尿量曲线，然后依次进行下列实验，观察血压和尿量的变化。,1.记录正常血压、尿量。,2.,取尿液做尿糖定性实验。从记滴器下方接一滴尿于尿糖试纸上，放置,2030,秒，对比试纸颜色和标准颜色。,3.,按,10ml/Kg,静脉快速输入,生理盐水,，观察血压和尿量变化。,4.,静脉注射,抗利尿激素,2U,，观察血压和尿量变化。,5.,静脉注射,20%,葡萄糖,（,4ml/Kg,），,5min,内注完，观察血压和尿量变化。在尿量明显增多时，取尿做尿糖定性实验。,6.,静脉注射,1,：,10000,肾上腺素,0.20.3ml,，观察血压和尿量变化。,7.,静脉注射,呋塞米,5mg/Kg,，,观察血压和尿量变化。,8.,切断右侧,迷走神经,，用阈上刺激连续刺激其外周断，使血压降至,50mmHg,左右，观察血压和尿量变化。,实验结果,观察项目,血压,尿量,10ml/Kg,生理盐水,抗利尿激素,2U,20%,葡萄糖（,4ml/Kg,）,1,：,10000,肾上腺素,0.20.3ml,呋塞米,5mg/Kg,刺激右侧迷走神经,结果分析,一次快速注射,10ml/Kg,生理盐水，,使血容量增加，会引起下列情况：,（,1,）,血液被稀释,，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，肾小球有效滤过率增加，尿量增加。,（,2,）,血容量增加,，肾小球血浆流量增加，使尿液滤过增多，也促使尿液增加。,（,3,）血容量增加，刺激左心房及胸腔大静脉容量感受器，冲动沿迷走神经上传到下丘脑的视上核和室旁核，使,抗利尿激素（,ADH,）的分泌与释放减少,，远曲小管，集合管对水的重吸收减少，尿液增多。,结果分析,抗利尿激素,antidiuretic hormone,，,ADH,来源：,下丘脑视上核和室旁核神经元分泌，神经垂体,贮存、释放,作用：,提高远曲小管和集合管对水的通透性；,增加髓质组织间液的溶质浓度,机制：,ADH,V2 GS AC cAMP PKA,使,AQP-2,镶嵌在管腔膜上形成水通道，增加水的重吸收,结果分析,20%,葡萄糖,4ml/Kg,注入后，,可见尿量立即大量增加,因为加入后肾中滤过的葡萄糖超过了肾的,肾糖阈,，经肾小球滤出的大量葡萄糖不能被肾小管上皮细胞全部重吸收，致使小管液中出现较多的葡萄糖，使肾小管液中的渗透压增加，防碍水的重吸收，于是水随葡萄糖一起排出，尿量增加。此称为,渗透性利尿,。,此时尿液作生化实验，可检测出,尿糖,。,结果分析,静注大剂量肾上腺素后，,血压上升（使与外周小动脉平滑肌中的,受体相结合，使之收缩）尿量减少,机制：,肾小球毛细血管血压高低既受全身动脉血压的影响，又受肾小球入球小动脉和出球小动脉的口径比例（也就是血管平滑肌舒缩程度）的影响，而后一种因素比前一种因素更为重要。可使肾小球入球小动脉收缩，使肾小球毛细血管中血流量降低，滤过率减少，尿量减少。,因此在临床上抢救休克病人，使用大剂量的肾上腺素时一定要注意患者尿量的变化。,髓袢升支粗段,:,对水不通透,小管液,上皮细胞,血液,2Na+,3K,+,钠泵,K,+,K,+,、,Na,+,2Cl,-,Mg,2+,Ca,2+,呋塞米,（一）,K+,Cl-,Cl-,结果分析,皮质,髓质,原尿,髓质高渗,尿液稀释,尿液浓缩,结果分析,刺激迷走神经,心输出量减少,尿量减少,迷走兴奋,思考题：,试分析尿生成的主要环节，讨论各因素影响尿生成的机制。,一次性口服大量清水和静脉大量生理盐水时，尿量变化有何异同？其作用机制如何？,