苯乙胺类似肾上腺素药物分析课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,上一内容,下一内容,回主目录,返回,第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析,药物分析,课件,第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析药物分,1,基本要求,掌握：,结构和性质，典型药物的鉴别、检查和含量测定的原理与特点。,熟悉,:,药物杂质的结构、危害、检查方法与含量测定。,了解：,影响药物稳定性的因素、体内样品与临床监测方法。,基本要求掌握：结构和性质，典型药物的鉴别、检查和含量测定的原,基本内容,一、结构与性质,二、鉴别试验,三、特殊杂质与检查,四、含量测定,五、体内药物分析,基本内容一、结构与性质,（一）基本结构：苯乙胺或儿茶酚胺类,*,第一节 结构与性质,（一）基本结构：苯乙胺或儿茶酚胺类*第一节 结构与性质,盐酸克仑特罗,代表药物,（二）化学性质,（1）弱碱性：具有,脂烃胺侧链,，其氮为仲胺氮。,（2）酚羟基特性：具有,邻苯二酚,或,苯酚,结构，酚易氧化，多元酚更易氧化显色。,（3）光学活性：本类药物大多具,手性碳原子,，具有旋光性。,（4）,芳伯氨基,特性,盐酸克仑特罗代表药物（二）化学性质（1）弱碱性：具有脂烃胺侧,第二节鉴别试验,一、与三氯化铁反应,具有酚羟基的本类药物,高铁离子价有多高？,第二节鉴别试验一、与三氯化铁反应具有酚羟基的本类药物高铁离,第二节鉴别试验,二、与甲醛,-,硫酸反应,具有酚羟基的本类药物,请看具体例子,第二节鉴别试验二、与甲醛-硫酸反应具有酚羟基的本类药物请看,第二节鉴别试验,一、与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应,药物,三氯化铁,甲醛硫酸,肾上腺素,0.1mol/L,盐酸液中显翠绿色，加氨试液显,紫色,，紫红色,红色,重酒石酸去甲肾上腺素,翠绿色，加碳酸氢钠试液显,蓝色,，,红色,淡红色,盐酸去氧肾上腺素,紫色,玫瑰红,，,橙红,，,深棕红,盐酸异丙肾上腺素,深绿色,，滴加新制,5%,碳酸氢钠液，显蓝紫色，红色,棕色,，,暗紫色,盐酸多巴胺,墨绿色,，滴加,1%,氨溶液，显紫红色,第二节鉴别试验一、与三氯化铁反应、与甲醛硫酸反应药物三氯,第二节鉴别试验,三、氧化反应,酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化钾氧化呈现不同颜色,肾上腺素,碘或过氧化氢,中性或酸性,肾上腺素红,放置,棕红色多聚体,盐酸异丙肾上腺素,偏酸性条件,碘,异丙肾上腺素红,硫代硫酸钠,淡红色溶液,重酒石酸,去甲肾上腺素,酒石酸氢钾饱和液,pH 3.56,碘试液,放置,5min,硫代硫酸钠,溶液为无色,或仅显微红色或,淡紫色,肾上腺素,或盐酸异丙肾上腺素,明显的,红棕色,或紫色,书上说的是还原性反应,第二节鉴别试验三、氧化反应酚羟基，易被碘、过氧化氢、铁氰化,四、双缩脲反应,是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于,盐酸麻黄碱，盐酸伪麻黄碱鉴别：,D CuSO,4,+ NaOH,显,蓝紫色,乙醚，醚层,(,紫红色,),水层,(,蓝色,),盐酸麻黄碱,第二节鉴别试验,四、双缩脲反应是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于D C,五、与亚硝基铁氰化钠的反应,重酒石酸间羟胺,红紫色,亚硝基铁氰化钠试液,丙酮,（无甲醛）,、碳酸氢钠,脂肪族伯胺的专属反应（,Rimini,反应）,五、与亚硝基铁氰化钠的反应重酒石酸间羟胺,第二节鉴别试验,六、,UV,和,IR,药物,溶剂,浓度,(mg/ml),nm,(nm),吸收度,(A),重酒石酸间羟胺,水,0.10,272,盐酸异丙肾上腺素,水,0.05,280,0.50,盐酸多巴胺,0.5%,硫酸,0.03,280,盐酸芬氟拉明,0.1mol/L,盐酸,0.25,263, 270,盐酸苯乙双胍,水,0.01,234,0.60,盐酸克伦特罗,0.1mol/L,盐酸,0.03,243, 296,硫酸沙丁胺醇,水,0.08,274,盐酸伪麻黄碱,水,0.50,251, 257, 263,第二节鉴别试验六、UV和IR药物溶剂浓度(mg/ml)n,一、,酮体,检查,第三节特殊杂质与检查,杂质来源 原料残存,检查方法 含量测定法（,UV,法）,一、酮体检查第三节特殊杂质与检查 杂质来源,一、酮体检查,生产工艺：,酮体,氢化还原,制得，若氢化不完全则引入酮体杂质。,降解产物,肾上腺素红,多聚体,一、酮体检查生产工艺：酮体氢化还原制得，若氢化不完全则引入酮,三、,Detection of specific impurities,通过,UV,光谱检测,三、Detection of specific impuri,检查原理：,利用,酮体,在,310nm,波长处有最大吸收，而,药物本身,在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在,310nm,波长处的吸收度限制酮体的量。,例如：肾上腺素本项检查 配2.0,mg/ml =310nm A0.05,盐酸去氧肾上腺素 配2.0,mg/ml =310nm A0.02,盐酸异丙肾上腺素 配2.0,mg/ml =310nm A0.15,检查原理：利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物,药物,杂质,溶剂,C(mg/ml),(nm),A,肾上腺素,肾上腺酮,HCl(92000),2.0,310,0.05,盐酸去氧肾上腺素,酮体,水,2.0,310,0.20,重酒石酸去甲肾上腺素,去甲肾上腺酮,水,2.0,310,0.05,盐酸异丙肾上腺素,酮体,水,2.0,310,0.15,盐酸甲氧明,酮胺,水,1.5,347,0.06,紫外分光光度法检查酮体的条件及要求,药物杂质 溶剂C(mg/ml)(nm),例,中国药典（,2010,年版）规定肾上腺素中检查酮体的方法为：取本品，加盐酸溶液（,92000,）制成每,1ml,中含,2.0mg,的溶液，于,310nm,波长处测定，吸光度不得过,0.05,，已知酮体在,310nm,波长处的百分吸收系数为,453,，肾上腺素在该波长处无吸收。计算肾上腺素中酮体的限量。,例 中国药典（2010年版）规定肾上腺素中检查酮体的方法为：,光学纯度检查,光学纯度检查：,药物,溶剂,C(mg/ml),比旋度,肾上腺素,HCl(92000),20,-50.0-53.5,盐酸去氧肾上腺素,水,20,-42-47,重酒石酸去甲肾上腺素,水,50,-10.0-12.0,盐酸麻黄碱,水,50,-33-35.5,盐酸伪麻黄碱,水,50,+61.0+62.5,手性碳原子,光学纯度检查光学纯度检查： 药物 溶剂C(mg/ml),高低浓度对比法,:,1mg/ml,2,g/ml,单个杂质峰面积不得大,于对照溶液主峰面积,（,0.2%),；各杂质峰面,积的和不得大于对照溶,液主峰面积的,2.5,倍（,0.5%).,1.,肾上腺素采用,HPLC,法。,有关物质检查,高低浓度对比法:单个杂质峰面积不得大1.肾上腺素采用HPLC,2.,盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查,PC,法,样品制备：本品甲醇溶解即得,展开：,7.550 cm,，,EtOAc-ethanol-water,(6:3:1),显色：,10,铁氰化钾,10,亚硝基铁氰化钠,10,NaOH,检测：剪下显色斑点后甲醇萃取用,UV,法测定,2.盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查PC法,一、非水溶液滴定法,利用本类药物分子中的芳伯氨基和侧链脂烃胺的,碱性,，在冰醋酸溶液中，用高氯酸液的滴定，以结晶紫为指示剂，也可用电位法指示终点。,第四节含量测定,一、非水溶液滴定法第四节含量测定,非水溶液滴定法,(,弱碱性,),为什么要应用非水滴定法？,这是因为本类药物多为,弱碱性,，在水溶液中用酸碱滴定液直接滴定,没有明显的突跃,，终点难以观测，常不能获得满意的测定结果。而在非水酸性溶剂中，只要在水溶液中的,p,Kb 10,，均可以被冰醋酸,均化,到溶剂醋酸根水平，,相对碱度显著增强,。因而可使弱碱性的药物都能顺利进行滴定。,非水溶液滴定法(弱碱性)为什么要应用非水滴定法？,(一) 基本原理,当,HA,酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低,HA,的酸性，使反应顺利地完成。,BH,+,A,-,+,HClO,4,BH,+,ClO,4,+,HA,游离碱类盐,被置换出的弱酸,因此，要根据不同情况采用相应测定条件。,(一) 基本原理当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去,(二) 一般方法,供试品,+,冰醋酸,10,ml30ml,若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液,3,ml5ml,高氯酸滴定液滴定,以空白试验校正,以消耗标准液8,ml,计算,结,果,指示剂：结晶紫,(二) 一般方法供试品+冰醋酸10ml30ml若供试品为氢,(,三）讨论,K,b,为10,-8,10,-10,选,冰醋酸,作溶剂,K,b,为10,-10,10,-12,选,冰醋酸和醋酐,作溶剂,K,b,10,-12,选,醋酐,作溶剂, 适用范围,K,b,10,-8,的有机碱盐。,(三）讨论Kb为10-810-10 选冰醋酸作溶剂,HA,不同，对滴定反应的影响也不同。, 盐的滴定,置换滴定，即用强酸（,HClO,4,）,置换出与生物碱结合的较弱的酸（,HA）。,HClO,4,、HBr、HCl、H,2,SO,4,、HNO,3,在,HAc,中酸强度不相同。,HClO,4,HBrH,2,SO,4,HClHNO,3,其它弱酸,在水中酸强度相等, HA不同，对滴定反应的影响也不同。 盐的滴定置换滴定,a.,氢卤酸盐的测定,排除方法：,加入过量的,HgAc,2,/HAc,溶液,氢卤酸,HAc,中酸性较强，对滴定有影响。,a.氢卤酸盐的测定排除方法：加入过量的HgAc2/HAc溶,b.,硫酸盐的测定，如硫酸特布他林。,直接滴定法,注意硫酸盐的结构，正确判断反应的摩尔比。,b. 硫酸盐的测定，如硫酸特布他林。,c.,硝酸盐的测定,HNO,3,在冰,HAc,中为弱酸，不影响滴定突跃。,HNO,3,具有氧化性，应采用电位法指示终点或将,HNO,3,破坏分解后再进行测定。,d.,磷酸盐及有机酸盐的测定,磷酸、有机酸为弱酸，不干扰滴定。,c.硝酸盐的测定 HNO3在冰HAc中为弱酸，不影响,最常用的指示剂是,结晶紫,Crystal Violet（CV）,紫,蓝,蓝绿,黄绿,黄,（碱性区）（酸性区）,终点的颜色应用电位法校准。, 终点指示方法,最常用的指示剂是紫蓝蓝绿黄绿黄 终点指示, 注意事项,a.,水分的影响及排除,(CH,3,CO),2,O + H,2,O 2CH,3,COOH,b.,标准溶液的稳定性, 注意事项a. 水分的影响及排除(CH3CO)2O,二、溴量法,重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素原料药,基本原理：,二、溴量法重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素原料药基本原理：,基本操作：供试品,精密称定,加水溶解后精密加,溴滴定液,盐酸放置并振摇加碘化钾振摇用,Na,2,S,2,O,3,滴定,至近终点,加淀粉指示液继续滴定至蓝色消失。,基本操作：供试品精密称定加水溶解后精密加溴滴定液盐酸,游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失,不能加入太过量的溴液，以防酚羟基氧化或溴化。一般以过量,2,为宜。,平行条件作空白，校正操作中溴及碘挥发。,游离溴及碘极易挥散，操作过程中防逸失,三、亚硝酸钠法,盐酸克伦特罗，芳伯氨基，重氮化，,永停滴定法,指示终点,三、亚硝酸钠法盐酸克伦特罗，芳伯氨基，重氮化，永停滴定法指示,四、紫外分光光度法：,苯乙胺类药物分子具有苯环结构具有特征的紫外吸收，,Chp2015,采用这种方法测定多种紫类药物。如盐酸甲氧明注射液，重酒石酸间羟胺注射液。,比色法：,分子中具有芳伯胺基的药物采用重氮化,-,偶合反应显色，分子中含有酚羟基可与亚铁离子显色，然后进行比色测定。,Chp2015,采用比色法测定盐酸克伦罗特栓和盐酸异丙肾上腺素。,四、紫外分光光度法：,四、,Assay,四、,UV,和比色法,五、,HPLC,瘦肉精,四、Assay四、UV和比色法五、 HPLC瘦肉精,六、 体内药物分析,(GC-MS),动物组织中的,盐酸克伦罗特,残留的测定,盐酸克伦特罗是肾上腺类神经兴奋剂。,克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它,-,兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。,又称“瘦肉精”,应用,GC-MS,法进行测定。（衍生化）,六、 体内药物分析(GC-MS)动物组织中的盐酸克伦罗特残留,练习与思考,A,型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,水杨酸,D.,对氨基苯甲酸,E.,氨基酚,2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,对氨基酚,D.,苯甲酸,E.,苯酚,3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,对氨基酚,D.,酮体,E.,苯甲酸,练习与思考A型题1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是,4,、下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（,A,）,A.,乙酰水杨酸,B.,对氨基水杨酸钠,C.,对乙酰氨基酚,D.,普鲁卡因,E.,苯佐卡因,4、下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（A）,5,、亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（,BCDE,）,A.,自身指示剂法,B.,内指示剂法,C.,永停法,D.,外指示剂法,E.,电位法,5、亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（BCDE）,6,、亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（,C,）,A.,自身指示终点法,B.,电位法指示终点,C.,永停滴定法,D.,氧化还原指示剂法,E.,酸碱指示剂法,6、亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的,7,、盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（,ABCDE,）,A.,强酸,B.,加入适量溴化钾,C.,室温（,10,30,）下滴定,D.,滴定管尖端深入液面,E.,永停法指示终点,7、盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（A,8.,在亚硝酸钠滴定法中，加入溴化钾的目的是（）。,A.,增加,K,的浓度，以加快反应速率,B.,形成,NaBr,以防止重氮盐分解,C.,使滴定终点的指示更明显,D.,利用生成的,Br2,的颜色指示终点,E.,能生成大量的,NO,，从而加快反应速率,8.在亚硝酸钠滴定法中，加入溴化钾的目的是（）。,9.,中国药典规定亚硝酸钠滴定法进行滴定的温度是（）。,A.0,5,B.5,10,C.0,10,D.10,20,E.10,30,9.中国药典规定亚硝酸钠滴定法进行滴定的温度是（）。,10.,盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（,E,）,A.,有关物质,B.,二苯酮,C.,盐酸,D.,醛,E.,酮体,10. 盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（E）,B,型题,A。,硫酸铜反应,B.,氧化反应,C.,还原反应,D.,水解后重氮化-偶合反应,E.,重氮化-偶合反应,1. 盐酸利多卡因,2. 肾上腺素,3. 盐酸普鲁卡因,4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,B型题A。硫酸铜反应 B.氧化反应,A。,溴量法,B.,紫外分光光度法,C.,亚硝酸钠滴定法,D. RP-HPLC,法,E.,非水滴定法 5. 盐酸去氧肾上腺素 6. 肾上腺素注射液 7. 盐酸普鲁卡因 8对乙酰氨基酚,A,D,C,B,A。溴量法 B. 紫外分光光度法,A.,对氨基酚,B.,对氨基苯甲酸,C.,酮体,D.,间氨基酚,E.,肾上腺酮,1,中国药典规定对乙酰氨基酚中需检查的特殊杂质是（ ）。,2,中国药典规定盐酸普鲁卡因注射液中需检查的特殊杂质是（）。,3,中国药典规定盐酸去氧肾上腺素需检查的特殊杂质是（）。,4,中国药典规定盐酸异丙肾上腺素需检查的特殊杂质是（）。,A.对氨基酚B.对氨基苯甲酸C.酮体D.间氨基酚,