资源描述
7/16/20241一、常用仪器及其使用一、常用仪器及其使用显微镜显微镜冰箱冰箱超净工作台、杀菌锅超净工作台、杀菌锅离心机离心机水浴锅、培养箱水浴锅、培养箱烘箱或干燥箱烘箱或干燥箱匀质器匀质器各种玻璃器材各种玻璃器材7/16/20242（一）显微镜（一）显微镜7/16/20243普通显微镜的保养普通显微镜的保养1、观察完后，移去观察的载玻片标本。、观察完后，移去观察的载玻片标本。2、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上、用过油浸镜的，应先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭的油擦去，再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭23次，最后再用擦镜纸将擦镜液二甲苯擦去。次，最后再用擦镜纸将擦镜液二甲苯擦去。3、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。、转动物镜转换器，放在低倍镜的位置。4、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上、将镜身下降到最低位置，调节好镜台上标本移动器的位置，罩上防尘套。标本移动器的位置，罩上防尘套。7/16/20244数字显微镜7/16/202457/16/202461.智能隔水恒温培养箱智能隔水恒温培养箱2.隔水培养箱隔水培养箱3.电热培养箱电热培养箱4.生化培养箱生化培养箱（二）、培养箱（二）、培养箱1.智能隔水恒温培养箱智能隔水恒温培养箱2.隔水培养箱隔水培养箱3.电热培养箱电热培养箱4.生化培养箱生化培养箱7/16/20247卧式恒温振荡培养箱电热恒温培养箱1、普通恒温培养箱、普通恒温培养箱7/16/20248智能培养箱微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。工作温度任意调节并具有偏差报警功能，镜面不锈钢内胆，外门内层用一层门，观察箱内情况时不影响箱内温度。9000系列隔水式加热方式，具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。7/16/20249隔水式培养箱隔水式培养箱隔水式培养箱数字控温，不锈钢内胆，俗称水夹套培养箱。温度均匀，断电后仍能保持较长时间恒温。7/16/202410电热恒温培养箱7/16/202411幻灯片放映2、生化培养箱、生化培养箱7/16/2024123、二氧化碳培养箱、二氧化碳培养箱7/16/202413培养箱的配置和使用培养箱的配置和使用配置：配置：22（）、30（）、37（）培养箱各一个）培养箱各一个使用注意事项：使用注意事项：(1)箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速箱内不能放入过热或过冷的物品，取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。进行并做到随手关闭箱门。(2)内放一杯水，以保持湿度。内放一杯水，以保持湿度。(3)培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。培养物不能放在最底层，也不得放置过于拥挤。(4)每月消毒一次，先用每月消毒一次，先用3%的来苏尔液涂布消毒，再用清的来苏尔液涂布消毒，再用清水擦净。水擦净。(5)不得当烘箱使用。不得当烘箱使用。7/16/2024147/16/2024154、水浴锅、水浴锅（1）37和和42水浴锅水浴锅24小时工作；小时工作；（2）其余水浴锅用后关掉电源；）其余水浴锅用后关掉电源；（3）水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水，）水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水，使用时请注意水位。使用时请注意水位。配置：配置：37、42、56各一个各一个7/16/2024167/16/202417匀浆机（三）匀质器（三）匀质器7/16/202418高速匀浆机无菌均质器无菌均质器无菌均质器该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点，样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，预防交叉污染。7/16/202419（四）、超净工作台（四）、超净工作台三大类三大类型：型：侧流式、直流式和外流式侧流式、直流式和外流式7/16/202420垂直流超净工作台7/16/202421水平单向流洁净工作台7/16/202422超净台的使用和注意事项超净台的使用和注意事项1 1、使用前先打开紫外灯照射，紫外、使用前先打开紫外灯照射，紫外线照射照射时间40604060分分钟；2 2、使用中，有机玻璃罩受到、使用中，有机玻璃罩受到污染，染，严禁用酒精棉球擦拭，禁用酒精棉球擦拭，请用含水棉布檫拭；请用含水棉布檫拭；3 3、请保持超保持超净台整台整洁，不要堆，不要堆积杂物；物；4 4、使用完、使用完毕，勿忘关，勿忘关闭煤气开关或酒精灯；煤气开关或酒精灯；5 5、请做好使用做好使用记录。6 6、如遇故障，除、如遇故障，除记录在册外，在册外，还应及及时与有关人与有关人员联系，系，尽早排除故障。尽早排除故障。7 7、学期开始做无菌、学期开始做无菌试验一次，以保一次，以保证净化台正常使用。平化台正常使用。平时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符时可根据情况，定期做无菌试验，以测定净化台是否符合无菌要求。合无菌要求。7/16/202423（五）、离心机（五）、离心机离心机的类型：离心机的类型：普通离心机普通离心机 高速离心机高速离心机 超速离心机超速离心机7/16/202424类型普通离心机高速离心机超速离心机最 大 转 速(r/min)600025000可达75000以上最大RCF（g）600089000可达510000以上分离形式固液沉淀固液沉淀分离密度梯度区带分离或差速沉降分离转子角式和外摆式转子角式、外摆式转子等 角式、外摆式、区带转子等仪器结构性能和特点速率不能严格控制，多数室温下操作有消除空气和转子间摩擦热的制冷装置，速率和温度控制较准确、严格。备有消除转子与空气摩擦热的真空和冷却系统，有更为精确的温度和速度控制、监测系统、有保证转子正常运转的传动和制动装置等。应用收集易沉降的大 颗 粒（如RBC、酵 母 细胞等）收集微生物、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等。但不能有效沉淀病毒、小细胞器（如核糖体）、蛋白质等大分子。主要分离细胞器、病毒、核酸、蛋白质、多糖等甚至能分开分子大小相近的同位素标记物15N-DNA和未标记的DNA。7/16/202425台式高速冷冻离心机7/16/2024267/16/2024277/16/202428差速沉降（沉淀）法：差速沉降（沉淀）法：密度梯度离心法：密度梯度离心法：7/16/202429转子转子许多离心机可以配用不同大小的离心管，只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/适配器相配的转子。1水水平平转转子子：盛样品的离心管放在吊桶内，以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机，其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时，减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。2角角式式转转子子：许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短，沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。3垂垂直直管管转转子子：用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。转子：（a）水平转子；（b）固定转角转子；（c）垂直离心管转子7/16/202430（六）、灭菌器（六）、灭菌器干热灭菌器干热灭菌器湿热灭菌器湿热灭菌器7/16/2024311、电烘箱、电烘箱（干燥箱）用途：用途：用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。玻璃器皿等物的灭菌，温度玻璃器皿等物的灭菌，温度160165，灭，灭菌菌2小时。小时。7/16/2024327/16/202433玻璃器材的干热灭菌方法玻璃器材的干热灭菌方法(1)将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后，用报纸包好，或装入特制的铁筒中。包好，或装入特制的铁筒中。(2)将包装好的玻璃将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以仪器摆入电热烘箱中，彼此间留有一定的空隙以便流通空气。便流通空气。(3)关紧箱门，打开排气孔接上电源。关紧箱门，打开排气孔接上电源。(4)待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，待箱内空气排出到一定程度时，关闭上排气孔，继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定继续加热至一定温度后，调节温度控制旋钮固定温度，在温度，在160165保持保持2小时即可。小时即可。(5)待待自然降温冷却后自然降温冷却后(60以下以下)才能开门取出玻璃才能开门取出玻璃器皿。7/16/2024342、高压灭菌锅、高压灭菌锅用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样用途：培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。器、纱布、衣物的灭菌。种类：手提式、立式、卧式杀菌锅种类：手提式、立式、卧式杀菌锅7/16/202435不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器（电热）全自动高压灭菌器7/16/2024367/16/202437大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法1.放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位；放干消毒锅内的剩余水，加入纯净水至最高水位；2.放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开放入物品，关上消毒锅门；冷凝阀开1圈；消毒钮顺时圈；消毒钮顺时针拨至针拨至“关关”；3.选择所需的杀菌压力选择所需的杀菌压力0.07、0.11或或0.14Mpa后；开启后；开启电源；电源；4.当温度达到当温度达到100左右时就可将消毒钮顺时针拨至左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消消毒毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止；及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止；5.当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关当消毒室温度达到所需温度时开始计时，到时间后关闸。闸。7/16/202438使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项A：为避免烫伤，只有当温度降低到：为避免烫伤，只有当温度降低到70以下时放以下时放可小心的打开消毒锅门。可小心的打开消毒锅门。B：为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不：为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不开消毒锅门，所以当消毒室温度低于开消毒锅门，所以当消毒室温度低于70时就可时就可慢慢把门打开。慢慢把门打开。C：根据消毒物品选择排气方式：根据消毒物品选择排气方式：（1）.如有液体（营养液等）请选择慢排。如有液体（营养液等）请选择慢排。（2）.如只有废品等可选择快排。如只有废品等可选择快排。7/16/202439手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法（1）、关好排水阀门放入清水至标度为止）、关好排水阀门放入清水至标度为止。（2）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌）、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。锅中，关上器盖。（3）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内）、通电加温，同时打开排气活门，排尽锅内的空气，再关闭活门。的空气，再关闭活门。（4）、当达到所需温度时开始计时，并在此温度当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。下保持所需的时间。7/16/202440（5）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气）、稍微打开一点排气活门，使锅内蒸气缓慢排除缓慢排除。（6）、当压力表指针降到零、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物锅内蒸气完全排尽时，立即打开锅盖取出物品。品。（7）、最后将高压灭菌器内的剩余水）、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。排出。7/16/202441思考题干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何?电热烘箱和高压锅如何操作?各有哪些使用注意事项?7/16/2024423、滤菌器7/16/202443MF75快速抽滤器方便过滤1000ml容量的培养液、缓冲液等，可直接保存和分装。可高温灭菌。Nalgene可反复用抽滤装置7/16/202444（七）、普通冰箱冰柜（七）、普通冰箱冰柜1、取用冰箱冰柜内物品尽可能快，取完取用冰箱冰柜内物品尽可能快，取完后及时将有用物品放回原处；后及时将有用物品放回原处；2、关关冰柜门时应轻轻合上，同时将门轻轻往冰柜门时应轻轻合上，同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好外拉一下检查是否关好;3、冰柜内的不要样品应及时清理。、冰柜内的不要样品应及时清理。7/16/2024457/16/202446菌落计数器菌落计数器自动细菌菌落测定分析仪自动细菌菌落测定分析仪菌落计数器菌落计数器自动细菌菌落测定分析仪自动细菌菌落测定分析仪7/16/2024471、可直接测读菌体本身在、可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化，培养液中造成的导电度变化，或利用菌体在代谢过程中的或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化，产物所造成的导电度变化，快速测定样品中细菌含量数快速测定样品中细菌含量数目。目。2、适用于各种食品，制药，、适用于各种食品，制药，石化工厂的微生物品质管理，石化工厂的微生物品质管理，取代传统方法将侦测时间由取代传统方法将侦测时间由3-5天减到几个小时。亦可天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。用于做样品的抗菌性试验。快速自动菌数导电测定仪快速自动菌数导电测定仪7/16/202448细胞的总数、细胞的直径、平细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。仪器全均直径、细胞浓度等。仪器全自动操作，避免人工操作的误自动操作，避免人工操作的误差，数据精确，省时省力。是差，数据精确，省时省力。是您作细胞研究的好助手，是研您作细胞研究的好助手，是研究细胞的更高层次的选择究细胞的更高层次的选择细胞/颗粒分析计数仪空气微生物检测仪 7/16/202449适合适合CGMP药厂药厂,食品加工食品加工厂厂,医院手术防医院手术防,无尘无菌无尘无菌室室室室Class100100000之等之等级级微粒子落塵计数器微粒子落塵计数器 7/16/202450二、常用玻璃仪器及用具二、常用玻璃仪器及用具7/16/2024511、移液管、移液管1ml，2ml，5ml，10ml，25ml（一）量器类（一）量器类7/16/2024522、容量瓶、容量瓶50ml，100ml，250ml，500ml，1000ml7/16/2024533、量筒、量筒容量（容量（ml）10、25、50、100、25054、500、1000、20007/16/202454固定体积移液器数字型可调移液器P型4、微量取样器、微量取样器7/16/202455（二）、其他常用玻璃器皿（二）、其他常用玻璃器皿7/16/2024563.5cm,7cm，9cm，15cm1、培养皿、培养皿7/16/2024572、试管、试管7/16/2024587/16/202459各种试管的使用各种试管的使用13mmX100mm：生化反应及凝集反应15mmX150mm：斜面培养18mmX180mm：检样稀释7/16/202460型号150ml，200ml，250ml，500ml，1L，2L，3L3、三角瓶、三角瓶7/16/202461烧杯烧杯容量（容量（ml）：）：30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、30007/16/202462三、玻璃器皿的清洗和灭菌三、玻璃器皿的清洗和灭菌(一一)、新、新购的玻璃器皿的玻璃器皿 1 1、先用、先用热肥皂水刷洗，流水冲肥皂水刷洗，流水冲净。2 2、再浸泡于的、再浸泡于的盐酸中数小酸中数小时，最后用流水冲净。最后用流水冲净。7/16/202463(二二)、用、用过的玻璃器皿的玻璃器皿7/16/2024641、含油脂器材的清洗、含油脂器材的清洗（1）、单独高压灭菌；）、单独高压灭菌；（2）、趁热倒去污物；）、趁热倒去污物；（3）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置）、倒放在铺有吸水纸的篮子上，置100烘箱中烤烘箱中烤0.5h;（4）、再用）、再用5%的碳酸氢钠水煮两次，的碳酸氢钠水煮两次，再用肥皂水刷洗干净。再用肥皂水刷洗干净。7/16/2024652、含菌试管的清洗、含菌试管的清洗高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干高压灭菌后，肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。或晾干备用。7/16/2024663、含菌平皿的灭菌、含菌平皿的灭菌（1）、底盖分开放，放入桶中，高压灭）、底盖分开放，放入桶中，高压灭菌；菌；（2）、趁热倒去污物；）、趁热倒去污物；（3）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备）、肥皂水刷洗干净，烘干或晾干备用。用。7/16/2024674、含菌吸管的清洗、含菌吸管的清洗（1）、把含菌吸管投入）、把含菌吸管投入3%的来苏尔液的来苏尔液内浸泡内浸泡30min以上杀菌；以上杀菌；（2）、用肥皂水洗涤一次；）、用肥皂水洗涤一次；（3）、最后用清水冲洗干净即可。）、最后用清水冲洗干净即可。7/16/2024685、载玻片及盖玻片的清洗、载玻片及盖玻片的清洗（1）将载玻片及盖玻片分别浸入将载玻片及盖玻片分别浸入5%的来的来苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；苏尔液内浸泡过夜，取出水洗干净；（2）盖片用软布擦干即可；盖片用软布擦干即可；（3）染色用的载玻片要放入肥皂水中煮染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸沸10min，再用肥皂水刷洗干净，最后，再用肥皂水刷洗干净，最后用用95%的酒精浸泡片刻，晾干备用。的酒精浸泡片刻，晾干备用。7/16/202469（三）、玻璃器材的灭菌（三）、玻璃器材的灭菌（1）清洗后烘干；）清洗后烘干；（2）加塞包扎；）加塞包扎；（3）灭菌）灭菌:干热灭菌干热灭菌:160165烘箱中烤烘箱中烤2h湿热灭菌湿热灭菌:12120min7/16/202470思考题1、在微生物实验室中如何配置培养箱、在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注使用中要注意哪些问题意哪些问题?2、在微生物实验室中如何配置水浴锅、在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注使用中要注意哪些问题意哪些问题?3、如何正确使用超净台、如何正确使用超净台?4、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌、如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌?5、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法、简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法？6、如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?7/16/202471
展开阅读全文