第九章紫外吸收光谱法课件

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第九章紫外吸收光第九章紫外吸收光谱法法一、分子内部的运一、分子内部的运动动及分子能及分子能级级 分子光谱比原子光谱要复杂得多,在分子中,除了有电子相对于原子核的运动外,还有组成分子的各原子在其平衡位置附近的振动,以及分子本身绕其重心的转动,分子总的能量可以认为是这三种运动能量之和 即:E Ee+Ev+Er 式中Ee为电子能量,Ev为振动能量,Er转动能量。分子中除了电子能级外,还有振动能级和转动能级这三种能级都是量子化的、不连续的。对于简单的双原子分子,Ee Ev Er二、能二、能级跃级跃迁与分子吸收光迁与分子吸收光谱谱的的类类型型 通常情况下,分子处于较低的能量状态,即基态。分子吸收能量具有量子化特征,即分子只能吸收等于二个能级之差的能量。如果外界给分子提供能量(如光能),分子就可能吸收能量引起能级跃迁,而由基态跃迁到激发态能级。E=E1-E2=h=hc/由于三种能级跃迁所需要的能量不同,所以需要不同的波长范围的电磁辐射使其跃迁,即在不同的光学区域产生吸收光谱。1.转动转动能能级跃级跃迁与迁与远红远红外光外光谱谱 转动能级间的能量差Er约为:0.0250.003eV。可计算出 转动能级跃迁产生吸收光谱位于远红外区(50 300mm),称远红外光谱或分子转动光谱。2.振振动动能能级级 振动能级间的能量差Ev 约为:0.025eV。可计算出振动能级跃迁产生的吸收光谱位于红外区(0.7850m),称红外光谱或分子振动光谱。振动能级跃迁时不可避免地会产生转动能级间的跃迁。即振动光谱中总包含有转动能级间跃迁,因而产生光谱也叫振动-转动光谱。3.电电子能子能级级 电子能级的能量差 Ee:201eV。可计算出电子跃迁产生的吸收光谱在紫外可见光区(200780nm),称紫外可见光谱或分子的电子光谱。电子能级迁时不可避免地会产生振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振动能级和转动能级间跃迁,因而产生的谱线呈现宽谱带。紫外可见光谱实际上是电子-振动-转动光谱。应该指出,紫外光可分为近紫外光(200 400 nm)和真空紫外光(60 200 nm)。由于氧、氮、二氧化碳、水等在真空紫外区(60 200 nm)均有吸收,因此在测定这一范围的光谱时,必须将光学系统抽成真空,然后充以一些惰性气体,如氦、氖、氩等。鉴于真空紫外吸收光谱的研究需要昂贵的真空紫外分光光度计,故在实际应用中受到一定的限制。我们通常所说的紫外可见分光光度法,实际上是指近紫外、可见分光光度法。三、有机化合物的紫外吸收光三、有机化合物的紫外吸收光谱谱 有机化合物此外吸收光谱(电子光谱)是由分子外层电子或价电子跃迁所产生的。按分子轨道理论,有机化合物分子中有:成键轨道,反键*轨道;成键轨道,反键轨道(不饱和烃);另外还有非键轨道(杂原子存在)。各种轨道的能级不同,如图所示。有机化合物的紫外有机化合物的紫外可可见见吸收光吸收光谱谱,是其分子中外,是其分子中外层层价价电电子子跃跃迁的迁的结结果(三种):果(三种):电电子、子、电电子、子、n电电子子。分子分子轨轨道理道理论论:一个成一个成键轨键轨道必定有一道必定有一个相个相应应的反的反键轨键轨道。通常外道。通常外层电层电子均子均处处于分于分子子轨轨道的基道的基态态,即成,即成键轨键轨道或非道或非键轨键轨道上。道上。外外层电层电子吸收紫外或可子吸收紫外或可见辐见辐射后,就从基射后,就从基态态向激向激发态发态(反反键轨键轨道道)跃跃迁。主要有四种迁。主要有四种跃跃迁所需能迁所需能量量大小大小顺顺序序为为:n n n n 电电电电子子子子跃跃跃跃迁迁迁迁类类类类型:型:型:型:1.*跃跃迁:迁:饱饱和和烃烃(甲(甲烷烷,乙,乙烷烷)E很高,很高,n *n*生色生色团团与助色与助色团团生色生色团团:最有用的紫外最有用的紫外可可见见光光谱谱是由是由和和n跃跃迁迁产产生的。生的。这这两种两种跃跃迁均要求有机物分子中含迁均要求有机物分子中含有不有不饱饱和基和基团团。这类这类含有含有键键的不的不饱饱和基和基团团称称为为生色生色团团。简单简单的生色的生色团团由双由双键键或或叁键叁键体系体系组组成,如成,如乙乙烯烯基、基、羰羰基、基、亚亚硝基、偶氮基硝基、偶氮基NN、乙炔基、乙炔基、腈腈基基CN等。等。助色助色团团:有一些含有有一些含有n n电电子的基子的基团团(如如OH、OR、NH、NHR、X等等),它它们们本身没有生色功本身没有生色功能能(不能吸收不能吸收200nm200nm的光的光),但当它,但当它们们与生色与生色团团相相连时连时,就会,就会发发生生n n共共轭轭作用,增作用,增强强生色生色团团的的生色能力生色能力(吸收波吸收波长长向向长长波方向移波方向移动动,且吸收,且吸收强强度增加度增加),这样这样的基的基团团称称为为助色助色团团。跃跃迁迁 所需能量最大,所需能量最大,电电子只有吸收子只有吸收远远紫外光的能量才能紫外光的能量才能发发生生跃跃迁。迁。饱饱和和烷烃烷烃的分子吸收光的分子吸收光谱谱出出现现在在远远紫外区紫外区(吸收波吸收波长长200nm。这类跃这类跃迁在迁在跃跃迁迁选选律上属于禁阻律上属于禁阻跃跃迁,摩迁,摩尔尔吸光系数一般吸光系数一般为为10100 Lmol-1 cm-1,吸收,吸收谱带谱带强强度度较较弱。分子中孤弱。分子中孤对电对电子和子和键键同同时时存在存在时发时发生生n 跃跃迁。丙迁。丙酮酮n 跃跃迁的迁的为为275nm max为为22 Lmol-1 cm-1(溶(溶剂环剂环己己烷烷)。vn*跃跃迁迁发发生在含有生在含有杂杂原子的不原子的不饱饱和化合物中,其最大摩和化合物中,其最大摩尔尔吸光系数吸光系数max(表示物(表示物质对质对光吸光吸收能力大小的参量)比收能力大小的参量)比较较小,吸收峰随溶小,吸收峰随溶剂剂极性增加而向短波方向移极性增加而向短波方向移动动,即,即产产生生蓝蓝移,下表列移,下表列出了一些常出了一些常见见生色生色团团n*跃跃迁的吸收特性。迁的吸收特性。生色生色团团化合物化合物溶溶剂剂羰羰基基正己正己烷烷28016羧羧基基乙醇乙醇20441硝基硝基CH3NO2异辛异辛烷烷28022亚亚硝基硝基C4H9NO乙乙醚醚66520*跃跃迁可以迁可以发发生在任何具有不生在任何具有不饱饱和和键键的有机化合物分子中,其最大摩的有机化合物分子中,其最大摩尔尔吸光率很大,吸收峰随吸光率很大,吸收峰随溶溶剂剂极性增加向极性增加向长长波方向移波方向移动动,即,即产产生生红红移。下表列出了一些常移。下表列出了一些常见见生色生色团团*跃跃迁的吸收特性。迁的吸收特性。生色生色团团化合物化合物溶溶剂剂羰羰基基正己正己烷烷188900烯烯正庚正庚烷烷17713000炔炔正庚正庚烷烷17810000当一个分子中含有两个或两个以上的生色当一个分子中含有两个或两个以上的生色团时团时,按相互,按相互间间的位置可以分的位置可以分为为共共轭轭和非共和非共轭轭两种情况:非共两种情况:非共轭时轭时,各个生色,各个生色团团各自独立吸收,吸收各自独立吸收,吸收带带由各生色由各生色团团的吸收的吸收带带叠加而成;共叠加而成;共轭时轭时,生色,生色团团原有的吸收峰原有的吸收峰会会发发生改生改变变,可,可产产生新的吸收峰。下表列出了一些有关共生新的吸收峰。下表列出了一些有关共轭结轭结构的化合物的吸收特性。构的化合物的吸收特性。化合物化合物共共轭轭双双键键数数11955000220010000221721000325425000325835000另有一些基另有一些基团团,本身并不,本身并不产产生吸收峰,但与生色生吸收峰,但与生色团团共存于同一分子共存于同一分子时时,可引起吸收峰的位移和吸收,可引起吸收峰的位移和吸收强强度度的改的改变变,这这些基些基团团称称为为助色助色团团。如苯。如苯环环的一个的一个氢氢原子被一些基原子被一些基团团取代后,苯取代后,苯环环在在254nm处处的吸收的吸收带带的最的最大吸收位置和大吸收位置和强强度就会改度就会改变变。化合物化合物取代基取代基苯苯254300氯氯苯苯264320溴苯溴苯262325苯酚苯酚2731780苯甲苯甲醚醚2722240 有有机机化化合合物物的的吸吸收收谱谱带带常常常常因因引引入入取取代代基基或或改改变变溶溶剂剂使最大吸收波使最大吸收波长长maxmax和吸收和吸收强强度度发发生生变变化化:maxmax向向长长波波方方向向移移动动称称为为红红移移,向向短短波波方方向向移移动动称称为为蓝蓝移移 (或或紫紫移移)。吸吸收收强强度度即即摩摩尔尔吸吸光光系系数数增增大大或或减减小小的的现现象分象分别别称称为为增色效增色效应应或减色效或减色效应应,如,如图图所示。所示。红红移和移和蓝蓝移移5红移和蓝移:由于化合物结构变化(共轭、引入助色团取代基)或采用不同溶剂后 吸收峰位置向长波方向的移动,叫红移(长移)吸收峰位置向短波方向移动,叫蓝移(紫移,短移)6增色效应和减色效应 增色效应:吸收强度增强的效应 减色效应:吸收强度减小的效应7强带和弱带:max105 强带 min103 弱带紫外紫外可可见见吸收光吸收光谱谱中有机物中有机物发发色体系信息分析的一般色体系信息分析的一般规规律律 若在200750nm波长范围内无吸收峰,则可能是直链烷烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双键的烯烃等。若在270350nm波长范围内有低强度吸收峰(10100Lmol-1cm-1),(n跃迁),则可能含有一个简单非共轭且含有n电子的生色团,如羰基。若在20300nm波长范围内有中等强度的吸收峰则可能含苯环。若在210250nm波长范围内有强吸收峰,则可能含有2个共轭双键;若在260300nm波长范围内有强吸收峰,则说明该有机物含有3个或3个以上共轭双键。若该有机物的吸收峰延伸至可见光区,则该有机物可能是长链共轭或稠环化合物。无机化合物的紫外无机化合物的紫外无机化合物的紫外无机化合物的紫外-可可可可见见见见吸收光吸收光吸收光吸收光谱谱谱谱 镧系和锕系元素的离子对紫外和可见光的吸收是基于内层f电子的跃迁而产生的。其紫外可见光谱为一些狭长的特征吸收峰,这些峰几乎不受金属离子的配位环境的影响。1.电电子子跃跃迁吸收光迁吸收光谱谱 过渡金属的电子跃迁类型为d电子在不同d轨道间的跃迁,吸收紫外或可见光谱。这些峰强烈受配位环境的影响。例如 cu2+以水为配位体,吸收峰在794nm处,而以氨为配位体,吸收峰在663nm处。此类光谱吸收强度弱,较少用于定量分析。2.电电子子跃跃迁吸收光迁吸收光谱谱3.3.电电荷荷转转移吸收光移吸收光谱谱1 当吸收紫外可当吸收紫外可见辐见辐射后,分子中原定域在金属射后,分子中原定域在金属M轨轨道上道上电电荷的荷的转转移到配位体移到配位体L的的轨轨道,或按相道,或按相反方向反方向转转移,移,这这种种跃跃迁称迁称为电为电荷荷转转移移跃跃迁,所迁,所产产生的吸收光生的吸收光谱谱称称为为荷移光荷移光谱谱。1 电电荷荷转转移移跃跃迁本迁本质质上属于分子内氧化上属于分子内氧化还还原反原反应应,因此呈,因此呈现现荷移光荷移光谱谱的必要条件是构成分子的的必要条件是构成分子的二二组组分,一个分,一个为电为电子子给给予体,另一个予体,另一个应为电应为电子接受体。子接受体。1 电电荷荷转转移移跃跃迁在迁在跃跃迁迁选选律上属于允律上属于允许跃许跃迁,其摩迁,其摩尔尔吸光系数一般都吸光系数一般都较较大大(10 4左右左右),适宜于微,适宜于微量金属的量金属的检检出和出和测测定。定。1 电电荷荷转转移移跃跃迁在紫外区或可迁在紫外区或可见见光呈光呈现现荷移光荷移光谱谱,荷移光,荷移光谱谱的最大吸收波的最大吸收波长长及吸收及吸收强强度与度与电电荷荷转转移的移的难难易程度有关。易程度有关。例:例:Fe3与与SCN形成血形成血红红色配合物,在色配合物,在490nm处处有有强强吸收峰。其吸收峰。其实质实质是是发发生了如下反生了如下反应应:Fe3 SCN h=Fe SCN 2 有有机化合物的吸收机化合物的吸收带带吸收吸收带带(absorption band):在紫外光在紫外光谱谱中,吸收峰在光中,吸收峰在光谱谱中的波中的波带带位置。根据位置。根据电电子及分子子及分子轨轨道的种道的种类类,可将吸收,可将吸收带带分分为为四种四种类类型。型。1.(1)R吸收带2.(2)K吸收带3.(3)B吸收带4.(4)E吸收带吸收吸收吸收吸收带类带类带类带类型和影响因素型和影响因素型和影响因素型和影响因素1R带带:由含:由含杂杂原子的不原子的不饱饱和基和基团团的的n*跃跃迁迁产产生生CO;CN;NN E小,小,max250400nm,max200nm,max104共共轭轭体系增体系增长长,max红红移,移,max溶溶剂剂极性极性,对对于于(CHCH)n max不不变变 对对于于CHCCO max红红移移3B带:由*跃迁产生芳香族化合物的主要特征吸收带 max=254nm,宽带,具有精细结构;max=200极性溶剂中,或苯环连有取代基,其精细结构消失4E带:由苯环环形共轭系统的*跃迁产生芳香族化合物的特征吸收带 E1 180nm max104(常观察不到)E2 200nm max=7000 强吸收苯环有发色团取代且与苯环共轭时,E2带与K带合并 一起红移(长移)影响紫外影响紫外-可可见见吸收光吸收光谱谱的因素的因素 物物质质的吸收光的吸收光谱谱与与测测定条件有密切的关系。定条件有密切的关系。测测定条件(温度、溶定条件(温度、溶剂剂极性、极性、pH等)不同,吸收等)不同,吸收光光谱谱的形状、吸收峰的位置、吸收的形状、吸收峰的位置、吸收强强度等都可能度等都可能发发生生变变化。化。1.温度温度 在室温范在室温范围围内,温度内,温度对对吸收光吸收光谱谱的影响不大。的影响不大。2.溶溶剂剂 注意如下几点:注意如下几点:(1)同一种物)同一种物质质由于使用的溶由于使用的溶剂剂不同,得到的紫外不同,得到的紫外可可见见吸收光吸收光谱谱的峰形和最大吸收位置可的峰形和最大吸收位置可能不一能不一样样,所以在,所以在测测定物定物质质的吸收光的吸收光谱时谱时,一定要注明所使用的溶,一定要注明所使用的溶剂剂(2)尽量)尽量选选用低极性溶用低极性溶剂剂;(3)能很好地溶解被)能很好地溶解被测测物,并且形成的溶液具有良好的化学和光化学物,并且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳稳定性;定性;(4)溶)溶剂剂在在样样品的吸收光品的吸收光谱谱区无明区无明显显吸收。吸收。影响吸收影响吸收带带位置的因素:位置的因素:1溶剂效应:对max影响:n-*跃迁:溶剂极性,max蓝移 -*跃迁:溶剂极性,max红移对吸收光谱精细结构影响 溶剂极性,苯环精细结构消失溶剂的选择极性;纯度高;截止波长 max2pH值的影响:影响物质存在型体,影响吸收波长 可可见见分光光度分光光度计计 紫外紫外-可可见见分光光度分光光度计计1.1.光源光源 在整个紫外光区或可在整个紫外光区或可见见光光谱谱区可以区可以发发射射连续连续光光谱谱,具有足,具有足够够的的辐辐射射强强度、度、较较好的好的稳稳定性、定性、较长较长的使用寿命。的使用寿命。可可见见光光区区:钨钨灯灯作作为为光光源源,其其辐辐射波射波长长范范围围在在3203202500 nm2500 nm。紫紫外外区区:氢氢、氘氘灯灯。发发射射185185400 nm400 nm的的连续连续光光谱谱。仪器结构 2.2.单单色器色器 将光源将光源发发射的复合光分解成射的复合光分解成单单色光并可从中色光并可从中选选出一任波出一任波长单长单色光的光学系色光的光学系统统。入射狭入射狭缝缝:光源的光由此:光源的光由此进进入入单单色器;色器;准光装置:透准光装置:透镜镜或返射或返射镜镜使入射光成使入射光成为为平行光束;平行光束;色散元件:将复合光分解成色散元件:将复合光分解成单单色光;棱色光;棱镜镜或光或光栅栅;聚焦装置:透聚焦装置:透镜镜或凹面反射或凹面反射镜镜,将分光后所得将分光后所得单单色光聚焦至出射狭色光聚焦至出射狭缝缝;出射狭出射狭缝缝。3.3.样样品室品室 样样品室放置各种品室放置各种类类型的吸收池(比色皿)和相型的吸收池(比色皿)和相应应的池的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须须采用石英池,可采用石英池,可见见区一般用玻璃池。区一般用玻璃池。4.4.检测检测器器 利用光利用光电电效效应应将透将透过过吸收池的光信号吸收池的光信号变变成可成可测测的的电电信信号,常用的有光号,常用的有光电电池、光池、光电电管或光管或光电电倍增管。倍增管。5.5.结结果果显显示示记录记录系系统统 检检流流计计、数字、数字显显示、微机示、微机进进行行仪仪器自器自动动控制和控制和结结果果处处理理1.1.单单光束光束 简单简单,价廉,适于在,价廉,适于在给给定波定波长处测长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫谱扫描,要描,要求光源和求光源和检测检测器具有很高的器具有很高的稳稳定性。定性。2.2.双光束双光束 自自动记录动记录,快速全波段,快速全波段扫扫描。可消除描。可消除光源不光源不稳稳定、定、检测检测器灵敏度器灵敏度变变化等因素的化等因素的影响,特影响,特别别适合于适合于结结构分析。构分析。仪仪器复器复杂杂,价格价格较较高。高。分光光度分光光度计类计类型型3.3.双波双波长长 将不同波将不同波长长的两束的两束单单色光色光(1 1、2 2)快束交替通快束交替通过过同一吸收池而后到达同一吸收池而后到达检测检测器。器。产产生交流生交流信号。无需参比池。信号。无需参比池。=1 12nm2nm。两波两波长长同同时扫时扫描即可描即可获获得得导导数光数光谱谱。1.1.单组单组分的分的测测定定 通常采用通常采用 A-C 标标准曲准曲线线法定量法定量测测定。定。2.2.多多组组分的同分的同时测时测定定 若各若各组组分的吸收曲分的吸收曲线线互不重叠,互不重叠,则则可在各自最大吸收波可在各自最大吸收波长处长处分分别进别进行行测测定。定。这这本本质质上与上与单组单组分分测测定没有区定没有区别别。若各若各组组分的吸收曲分的吸收曲线线互有重叠,互有重叠,则则可根据吸光度的加合性求解可根据吸光度的加合性求解联联立方程立方程组组得出各得出各组组分的含量。分的含量。A1=a1bca b1bcb A2=a2bca b2bcb 普通分光光度分析方法普通分光光度分析方法 普通分光光度法一般只适于普通分光光度法一般只适于测测定微量定微量组组分,当待分,当待测组测组分含量分含量较较高高时时,将,将产产生生较较大的大的误误差。需差。需采用示差法。即提高入射光采用示差法。即提高入射光强强度,并采用度,并采用浓浓度稍低于待度稍低于待测测溶液溶液浓浓度的度的标标准溶液作参比溶液。准溶液作参比溶液。设设:待:待测测溶液溶液浓浓度度为为c cx x,标标准溶液准溶液浓浓度度为为c cs s(c cs s c cx x)。则则:Ax=b cx As=b cs x s=b(cx cs)=bc 测测得的吸光度相当于普通法中待得的吸光度相当于普通法中待测测溶液与溶液与标标准溶液的吸光度之差准溶液的吸光度之差。示差分光光度法示差分光光度法示差法示差法测测得的吸光度与得的吸光度与c呈直呈直线线关系。由关系。由标标准曲准曲线线上上查查得相得相应应的的c值值,则则待待测测溶液溶液浓浓度度cx:cx=cs+c 普通法:普通法:cs的的T=10%;cx的的T=5%示差法:示差法:cs 做参比,做参比,调调T=100%则则:cx的的T=50%;标标尺尺扩扩展展10倍倍示差法示差法标标尺尺扩扩展原理展原理 不需空白溶液作参比;但需要两个单色器获得两束单色光(1和2);以参比波长1处的吸光度A1作为参比,来消除干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。A A A22 A A11 (22 11)b cb c 两波两波长处测长处测得的吸光度差得的吸光度差值值A与待与待测组测组分分浓浓度成正比。度成正比。11和和22分分别别表示待表示待测组测组分在分在1 1和和2 2处处的摩的摩尔尔吸光系数。吸光系数。双波双波长长法法关关键问题键问题:测测量波量波长长2 2和参比波和参比波长长1 1的的选择选择与与组组合合 以两以两组组分分x x和和y y的双波的双波长长法法测测定定为为例:例:设设:x x为为待待测组测组分,分,y y为为干干扰组扰组分,二者的吸光度差分分,二者的吸光度差分别为别为:Ax和和Ay,则该则该体系的体系的总总吸光度差吸光度差Ax+y为为:Ax+y=A x+A y 如何如何选择选择波波长长1、2有一定的要求。有一定的要求。选择选择波波长组长组合合1 1 、2 2的基本要求是:的基本要求是:选定的波长1和2处干扰组分应具有相同吸光度,即:,即:Ay=y=A y y22 A y y11=0=0故:故:Ax+y=x+y=A x=(x=(x x22x x11)bcbcx x此此时时:测测得的吸光度差得的吸光度差A只与待只与待测组测组分分x x的的浓浓度呈度呈线线性关系,而与干性关系,而与干扰组扰组分分y y无关。若无关。若x x为为干干扰组扰组分,分,则则也可用同也可用同样样的方法的方法测测定定y y组组分。分。可采用作可采用作图图法法选择选择符合上述两个条件的波符合上述两个条件的波长组长组合合。在在选选定的两个波定的两个波长长1 1和和2 2处处待待测组测组分的分的吸光度吸光度应应具有足具有足够够大的差大的差值值。导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面,显示了很大的优越性。利用吸光度(或透光度)对波长的导数曲线来进行分析:0 e-bc假定入射光强度0 在整个波长范围内保持恒定:dI 0/d0则:dI/d0 bc e-bc d/d 0 bc d/d 导导数分光光度法数分光光度法 d dI I/d/d 0 0 bcbc d d/d/d 一一阶导阶导数信号与数信号与试样浓试样浓度呈度呈线线性关系;性关系;测测定灵敏度依定灵敏度依赖赖于摩于摩尔尔吸光系数吸光系数对对波波长长的的变变化率化率d d/d/d。吸收曲。吸收曲线线的拐点的拐点处处d d/d/d最大,故其灵敏最大,故其灵敏度最高度最高(见图见图)。)。同理可以同理可以导导出其二出其二阶阶和三和三阶导阶导数光数光谱谱(略)(略)紫外紫外-可可见见吸收光吸收光谱谱的的应应用用 紫外-可见吸收光谱除主要可用于物质的定量分析外,还可以用于物质的定性分析、纯度鉴定、结构分析。1.定性分析 每一种化合物都有自己的特征光谱。测出未知物的吸收光谱,原则上可以对该未知物作出定性鉴定,但对复杂化合物的定性分析有一定的困难。2.纯度的鉴定 用紫外吸收光谱确定试样的纯度是比较方便的。如蛋白质与核酸的纯度分析中,可用A280/A260的比值,鉴定其纯度。3.结构分析 紫外-可见吸收光谱一般不用于化合物的结构分析,但利用紫外吸收光谱鉴定化合物中的共轭结构和芳环结构还是有一定价值。例如,某化合物在近紫外区内无吸收,说明该物质无共轭结构和芳香结构。谢谢!
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