广州血液中心输血研究所

1广州血液中心输血研究所 田兆嵩 2 n输 血 前 要 做 三 项 检 查 ：血 型 鉴 定 ； 抗 体 筛 选 ；交 叉 配 血 试 验 。目 的 有 二 ：使 输 入 的 血 液 成 分 有 效 存 活 ；不 会 引 起 受 血 者 的 红 细 胞 发 生 破 坏 。 3 n在 检 验 医 学 中 ， 没 有 几 项 检 验 像 输 血 前 检 验 一 样 ，临 床 医 生 几 乎 完 全 依 赖 其 结 果 的 正 确 性 。输 血 前 检 验 的 每 一 个 环 节 均 可 能 发 生 差 错 ， 标 本搞 错 最 为 常 见 。给 患 者 输 入 不 相 容 的 血 液 成 分 导 致 严 重 不 良 后 果 ：急 性 溶 血 反 应 ： 多 由 ABO 血 型 不 相 容 输 血 引 起 ，人 为 差 错 是 其 主 要 原 因 ；迟 发 性 溶 血 反 应 ： 多 由 ABO 以 外 血 型 不 相 容 输血 所 致 ， 输 血 前 检 验 不 规 范 是 其 主 要 原 因 。 4 安 全 输 血 从 源 头 上 抓 起 就 应 重 视 如 何 获 取正 确 的 血 液 标 本 ；一 旦 受 血 者 的 血 标 本 张 冠 李 戴 ， 安 全 输 血的 所 有 防 范 措 施 都 将 化 为 泡 影 。减 少 这 种 错 误 的 有 效 方 法 是 给 每 一 位 住 院患 者 手 腕 上 系 上 一 个 腕 带 （ 腕 环 ） ；各 种 各 样 的 塑 料 腕 带 在 国 外 已 广 泛 使 用 ，国 内 已 有 不 少 医 院 开 始 使 用 。 5 应 制 定 严 格 的 “ 血 标 本 的 采 集 与 送 检 管 理制 度 ” ， 并 做 到 医 、 护 、 技 人 人 皆 知 ：患 者 在 采 集 血 标 本 后 又 转 科 或 转 床 ， 需 要输 血 时 应 重 新 采 集 血 标 本 （ 有 腕 带 可 例 外 ） ；未 配 戴 腕 带 而 又 不 知 血 型 的 患 者 ， 应 遵 循两 次 采 集 血 标 本 的 规 定 ； 6 检 验 科 做 血 常 规 时 做 正 定 型 ， 输 血 时 由 血库 复 查 正 定 型 ， 加 做 反 定 型 ； 或 者 备 血 时 由 血 库 做 血 型 鉴 定 ， 输 血 时 重新 采 集 血 标 本 做 血 型 鉴 定 及 交 叉 配 血 试 验 。 如 果 两 次 血 标 本 血 型 不 一 致 ， 或 血 标 本 血型 与 申 请 单 上 的 血 型 不 一 致 ， 则 应 重 新 采 集血 标 本 。 7 采 集 血 标 时 必 须 认 真 核 对 受 血 者 身 份 ， 只有 申 请 单 上 的 资 料 与 患 者 腕 带 的 资 料 完 全 一致 才 能 采 集 血 标 本 。使 用 条 形 码 的 医 院 ， 应 在 采 血 后 将 标 有 患者 信 息 的 条 形 码 标 签 贴 在 试 管 上 并 与 腕 带 资料 核 对 。 8 采 集 血 标 本 时 应 要 求 患 者 回 答 自 己 的 姓 名 ， 意 识不 清 应 通 过 亲 属 确 认 患 者 身 份 。不 得 使 用 来 源 不 明 或 无 人 对 其 来 源 负 责 的 血 标 本 。血 标 本 采 集 后 必 须 在 离 开 床 边 之 前 在 标 本 上 标 明患 者 姓 名 、 住 院 号 及 标 本 采 集 日 期 （ 国 外 要 求 标明 出 生 日 期 ） 。专 用 试 管 上 有 两 个 相 同 的 号 码 条 ， 在 采 集 标 本 后立 即 将 另 一 个 号 码 条 贴 在 输 血 申 请 单 上 。 9 一 位 医 护 人 员 不 得 同 时 采 集 两 位 或 两 位 以上 患 者 的 血 标 本 ， 以 避 免 将 血 样 注 入 到 错 误的 试 管 中 。最 好 由 采 血 者 和 患 者 在 申 请 单 上 签 名 ， 共同 确 认 血 标 本 的 正 确 性 。 10 贴 有 标 签 的 血 标 本 连 同 输 血 申 请 单 经 核 对后 由 医 护 人 员 送 输 血 科 （ 血 库 ） ， 双 方 核 对后 签 名 确 认 。 不 得 由 非 医 护 人 员 送 标 本 （ 护工 送 标 本 必 须 经 过 培 训 、 考 核 并 授 权 ） 。输 血 科 （ 血 库 ） 工 作 人 员 在 检 验 前 必 须 确认 试 管 上 的 标 签 与 申 请 单 上 的 资 料 一 致 ， 如有 疑 问 ， 应 重 新 采 集 血 标 本 。 不 得 电 话 询 问后 就 擅 自 修 改 错 误 的 标 签 及 申 请 单 。 11 血 标 本 要 做 到 八 不 收 ：血 标 本 无 标 签 或 填 写 不 清 不 收 ；血 标 本 与 申 请 单 所 填 项 目 不 符 不 收 ；血 标 本 量 少 于 3ml不 收 ；血 标 本 被 稀 释 不 收 （ 如 从 输 液 管 获 取 血 标 本 ，应 以 生 理 盐 水 冲 注 ， 并 将 首 先 抽 取 的 5ml血 液弃 去 ） ； 12 血 标 本 溶 血 不 收 （ 溶 血 性 疾 病 例 外 ， 为 防 止对 溶 血 结 果 误 判 为 阴 性 ， 建 议 反 定 型 及 交 叉 配血 的 细 胞 中 加 入 EDTA， 以 阻 断 补 体 激 活 途径 ） ；用 肝 素 治 疗 者 的 血 标 本 未 用 鱼 精 蛋 白 对 抗 使之 凝 结 不 收 ； 13 非 医 护 人 员 送 标 本 不 收 ；用 右 旋 糖 酐 等 大 分 子 物 质 治 疗 后 采 集 的 血 标本 未 作 标 记 说 明 不 收 （ 如 已 标 记 说 明 应 将 红 细胞 洗 涤 ） 。 14 献 血 者 的 血 标 本 必 须 从 与 血 袋 相 连 的 塑 料管 中 获 得 。血 清 和 血 浆 原 则 上 均 可 用 于 输 血 前 检 验 ，但 血 清 更 好 。 原 因 是 血 浆 中 有 时 可 出 现 细 小纤 维 蛋 白 包 裹 红 细 胞 的 凝 块 ， 与 凝 集 反 应 不易 区 分 。 15 国 外 认 为 必 须 使 用 不 抗 凝 或 者 EDTA抗 凝的 血 标 本 。 如 果 用 血 浆 标 本 ， 必 须 通 过 检 测弱 抗 体 来 评 估 其 有 效 性 ， 确 保 临 床 有 意 义 的抗 体 不 被 漏 检 。配 血 用 的 血 标 本 必 须 是 输 血 前 3天 之 内 的（ 我 国 规 定 ） ， 或 血 标 本 能 代 表 患 者 当 前 免疫 学 状 态 的 。 16 国 外 对 有 输 血 史 患 者 的 标 本 采 集 要 求 （ 见表 1） 表 1 标 本 采 集 要 求前 次 输 血 时 间314天1528天29天 3个 月 采 集 血 标 本 时 间输 血 前 24h内输 血 前 72h内输 血 前 1周 内 17 当 患 者 反 复 输 血 ， 不 需 要 每 天 采 集 血 标 本 ，但 要 每 隔 3天 进 行 一 次 抗 体 筛 选 试 验 ， 随 时了 解 是 否 有 新 的 不 规 则 抗 体 产 生 。不 用 溶 血 的 血 标 本 ， 因 为 血 清 中 的 游 离 血红 蛋 白 可 蒙 蔽 抗 体 引 发 的 溶 血 现 象 。 18 标 本 保 存 不 当 会 溶 血 、 细 菌 污 染 、 补 体 失活 以 及 不 规 则 抗 体 效 价 降 低 。 保 存 要 求 见 表 2表 2 标 本 保 存 要 求EDTA抗 凝 全 血血 清 或 血 浆 182548h不 允 许 47d7d -30不 允 许6个 月 19 常 规 ABO 血 型 鉴 定 应 包 括 正 反 定 型 ， 二 者起 到 互 相 验 证 和 质 控 的 作 用 。 我 国 已 规 定 常规 血 型 鉴 定 还 应 包 括 Rh（ D） 定 型 。 反 定 型要 用 试 管 法 ， 不 用 玻 片 法 。ABO 正 定 型 采 用 单 克 隆 抗 -A、 抗 -B血 型 试剂 ， 抗 -B试 剂 不 应 该 与 获 得 性 B抗 原 反 应 。二 、 坚 持 正 反 定 型 20 采 用 A和 B试 剂 细 胞 进 行 反 定 型 检 测 。 新 生儿 和 以 前 做 过 反 定 型 可 省 略 。 依 据 记 录 而 省略 反 定 型 存 在 一 定 风 险 ， 因 为 第 一 次 标 本 有可 能 采 错 。只 有 正 反 定 型 结 果 相 符 才 能 正 确 判 定 ABO血 型 。 单 纯 正 定 型 O 型 不 可 靠 ， 单 纯 反 定 型AB型 也 不 可 靠 。二 、 坚 持 正 反 定 型 21 正 反 定 型 不 一 致 ， 需 进 一 步 鉴 定 ：在 正 定 型 试 剂 中 增 加 抗 -A1、 抗 -AB及 抗 -H ： 抗 -AB用 来 确 认 弱 A和 弱 B抗 原 （ 这 种 抗 -A和 抗 -B的 混 合 物 与 弱 A和 弱 B亲 和 力 强 ， 发生 强 烈 反 应 ） ；二 、 坚 持 正 反 定 型 22 抗 -A1用 来 鉴 定 A亚 型 （ A型 中 A1和 A2这 两种 亚 型 占 99.99%， A1约 占 80%， A2约 占20%， 抗 -A1与 A2不 反 应 ） ； 抗 -H 用 于 鉴 定 亚 型 及 孟 买 型 （ 亚 型 细 胞 上有 较 多 的 H 抗 原 ， 与 抗 -H 反 应 较 强 ， 而 孟 买型 红 细 胞 上 无 H 抗 原 ） 。二 、 坚 持 正 反 定 型 23 在 血 型 鉴 定 中 有 若 干 因 素 可 导 致 错 误 结 果 ：人 为 因 素 有 ： 试 剂 不 标 准 、 失 效 或 污 染 ； 操 作 中 加 错 样 本 或 试 剂 ； 离 心 速 度 不 足 或 过 度 ； 细 胞 与 血 清 比 例 不 当 ， 结 果 判 断 错 误 等 ； 人 工 判 读 结 果 有 可 能 发 生 书 写 错 误 。二 、 坚 持 正 反 定 型 24 客 观 因 素 有 ： 因 某 种 疾 病 （ 如 白 血 病 ） 导 致 抗 原 减 弱 ； 红 细 胞 发 生 多 凝 集 现 象 或 产 生 类 B物 质 （ 如细 菌 感 染 ） ； 抗 体 效 价 低 （ 如 婴 幼 儿 、 老 年 人 、 低 免 疫 球蛋 白 血 症 等 ） ； 血 清 中 有 意 外 抗 体 ， 某 些 药 物 干 扰 等 。二 、 坚 持 正 反 定 型 25 n反 定 型 对 ABO 亚 型 的 发 现 特 别 有 帮 助 。 原 因 是 亚 型患 者 红 细 胞 上 A或 B抗 原 很 弱 ， 通 过 正 反 定 型 易 于 发现 二 者 结 果 不 一 致 ， 从 而 引 起 警 惕 。n出 现 异 常 结 果 的 处 理 办 法 ：正 反 定 型 不 一 致 应 重 新 检 测 ；重 新 检 测 时 应 使 用 洗 涤 红 细 胞 。 为 预 防 差 错 事 故 发生 ， 建 议 使 用 原 始 标 本 重 新 配 制 红 细 胞 悬 液 而 不 用以 前 配 好 的 红 细 胞 ， 同 时 应 做 自 身 对 照 。二 、 坚 持 正 反 定 型 26 如 果 重 新 检 测 结 果 仍 然 异 常 ， 请 资 深 工 作 人员 协 助 。当 检 测 结 果 与 以 往 记 录 不 一 致 时 ， 应 重 新 采集 血 标 本 再 一 次 检 测 。如 果 一 时 无 法 找 到 正 反 定 型 结 果 不 一 致 的 原因 ， 患 者 又 需 紧 急 输 血 ， 此 时 可 输 注 Rh（ D）同 型 的 O 型 红 细 胞 （ 正 反 定 型 相 符 ） 。二 、 坚 持 正 反 定 型 27 nRh（ D） 血 型 鉴 定 原 则 ：对 受 血 者 常 规 只 测 Rh（ D） 抗 原 ；对 献 血 者 不 仅 要 检 测 Rh（ D） 抗 原 ， 在 初 筛为 阴 性 时 必 须 进 一 步 确 定 是 否 为 弱 D；弱 D针 对 受 血 者 而 言 为 Rh（ D） 阴 性 ， 而 对献 血 者 而 言 则 为 Rh（ D） 阳 性 ；二 、 坚 持 正 反 定 型 28 当 Rh（ D） 定 型 结 果 有 疑 问 时 ， 在 确 认 之 前应 当 作 阴 性 对 待 ；目 前 各 种 单 克 隆 抗 -D检 测 部 分 D或 弱 D时 差异 较 大 ， 建 议 使 用 两 种 以 上 不 同 厂 家 的 试 剂 有助 于 弱 D的 定 型 。二 、 坚 持 正 反 定 型 29 n紧 急 情 况 下 血 型 鉴 定 时 ， 必 须 做 正 定 型 及 阴阳 性 对 照 （ 见 表 3） ， 或 者 正 反 定 型 。表 3 阴 性 /阳 性 对 照 表二 、 坚 持 正 反 定 型试 剂抗 -A抗 -B抗 -D 阳 性 对 照 细 胞ABD阳 性 阴 性 对 照 细 胞BAD阴 性 30 n当 患 者 体 内 含 有 高 效 价 的 冷 自 身 抗 体 或 冷 凝集 素 时 。 采 用 温 的 盐 水 洗 涤 细 胞 有 助 于 血 型 鉴定 。n日 常 工 作 中 需 要 定 期 做 阳 性 /阴 性 对 照 ， 使 用自 动 化 检 测 设 备 时 ， 应 在 常 规 检 测 中 加 入 对 照标 本 ； 采 用 手 工 操 作 时 应 每 一 批 次 做 阳 性 /阴性 对 照 。 二 、 坚 持 正 反 定 型 31 n在 可 能 的 情 况 下 ， 最 好 每 天 在 使 用 定 型 试 剂前 作 阳 性 /阴 性 对 照 ， 以 检 测 其 活 性 。n在 观 察 定 型 结 果 时 ， 既 要 观 察 有 无 凝 集 ， 也要 观 察 凝 集 强 度 ， 这 有 助 于 A、 B亚 型 、 类 B等 的 发 现 。二 、 坚 持 正 反 定 型 32 n对 受 血 者 作 抗 体 筛 选 的 目 的 是 检 出 有 临 床 意义 的 抗 体 ， 并 可 在 配 血 前 有 足 够 的 时 间 来 选 择缺 乏 相 应 抗 原 的 相 配 合 的 血 液 ， 避 免 盲 目 配 血 。n方 法 是 用 受 检 者 血 清 与 试 剂 红 细 胞 起 反 应 ，以 发 现 在 37 有 临 床 意 义 的 抗 体 。三 、 做 好 抗 体 筛 选 33 n抗 体 筛 选 试 验 用 的 筛 选 细 胞 通 常 以 2 3个 单人 份 的 O型 红 细 胞 组 成 一 套 筛 选 细 胞 试 剂 。n抗 体 筛 选 用 试 剂 红 细 胞 必 须 含 有 18种 抗 原 ，所 表 达 的 抗 原 以 纯 合 子 基 因 所 表 达 的 抗 原 为 佳 ，随 机 获 得 的 O型 红 细 胞 易 造 成 抗 体 漏 检 。三 、 做 好 抗 体 筛 选 34 n抗 体 筛 选 试 验 的 方 法 很 多 ， 国 外 以 间 接 抗 球蛋 白 法 为 金 标 准 ， 国 内 中 小 医 院 多 采 用 凝 聚 胺法 ， 大 医 院 多 采 用 微 柱 凝 胶 技 术 。n微 柱 凝 胶 法 是 简 单 、 有 效 检 测 不 规 则 抗 体 的方 法 ， 但 无 法 排 除 无 临 床 意 义 抗 体 的 干 扰 。n抗 体 筛 选 用 的 红 细 胞 一 定 要 保 存 在 4 环 境中 ， 以 防 红 细 胞 上 抗 原 丢 失 。三 、 做 好 抗 体 筛 选 35 n抗 体 筛 选 试 验 并 非 能 检 出 所 有 有 临 床 意 义 的抗 体 。 原 因 有 二 ：一 是 低 频 抗 原 的 抗 体 可 能 被 忽 略 ；二 是 以 往 所 产 生 的 抗 体 已 降 至 难 以 检 出 的 水平 。n以 往 的 抗 体 鉴 定 记 录 有 重 要 参 考 价 值 。三 、 做 好 抗 体 筛 选 36 n国 外 对 所 有 受 血 者 常 规 作 抗 体 筛 选 试 验 ， 并认 为 抗 体 筛 选 是 检 测 不 规 则 抗 体 最 可 靠 、 最 敏感 的 方 法 。n我 国 规 定 凡 遇 下 列 情 况 之 一 必 须 做 抗 体 筛 选试 验 ：交 叉 配 血 不 合 时 ；对 有 输 血 史 、 妊 娠 史 或 短 期 内 需 要 接 受 多 次输 血 者 。 三 、 做 好 抗 体 筛 选 37 n如 抗 体 筛 选 试 验 阳 性 ， 缺 乏 谱 细 胞 鉴 定 其 特 异性 时 ， 可 送 有 条 件 的 单 位 鉴 定 。n抗 体 鉴 定 试 验 包 括 ：自 身 细 胞 检 查 ： 确 定 患 者 血 清 内 是 否 有 自 身抗 体 或 自 身 抗 体 与 同 种 抗 体 并 存 ；三 、 做 好 抗 体 筛 选 38 使 用 试 剂 谱 细 胞 ： 谱 细 胞 一 般 是 由 8 16单 人份 的 已 知 血 型 表 型 的 O型 红 细 胞 配 套 组 成 ， 具 有各 种 不 同 的 抗 原 成 分 ；根 据 谱 细 胞 的 反 应 格 局 一 般 可 以 鉴 定 常 见 的抗 体 。n国 外 认 为 采 用 一 组 谱 细 胞 进 行 抗 体 鉴 定 有 一 定的 局 限 性 ， 有 可 能 漏 检 常 见 的 组 合 抗 体 。 采 用两 组 谱 细 胞 可 以 提 高 检 出 组 合 抗 体 的 能 力 。三 、 做 好 抗 体 筛 选 39 n输 血 前 必 须 严 格 交 叉 配 血 ， 这 是 防 止 输 血 前检 验 程 序 中 发 生 差 错 的 最 后 一 道 “ 安 全 岗 ” 。n所 谓 “ 严 格 ” 是 指 所 采 用 的 方 法 必 须 能 检 出ABO不 相 容 及 ABO系 统 之 外 的 有 临 床 意 义 的 抗体 （ IgG抗 体 ） 。四 、 严 格 交 叉 配 血 40 n交 叉 配 血 的 方 法 有 ：主 侧 交 叉 ： 由 患 者 血 清 和 供 者 红 细 胞 组 成 ；次 侧 交 叉 ： 由 患 者 红 细 胞 和 供 者 血 清 （ 浆 ）组 成 （ 由 于 我 国 尚 未 对 供 者 进 行 抗 体 筛 选 ， 故次 侧 交 叉 是 有 必 要 的 ， 尤 其 是 输 全 血 时 ） ；自 身 对 照 ： 由 患 者 自 身 血 清 和 患 者 自 身 红 细胞 组 成 （ 自 身 对 照 有 助 于 分 析 解 释 交 叉 配 血 试验 中 出 现 的 阳 性 结 果 ） 。四 、 严 格 交 叉 配 血 41 n交 叉 配 血 的 方 法 有 盐 水 法 、 酶 法 、 抗 球 蛋 白法 、 凝 聚 胺 法 等 ， 各 有 优 缺 点 ：盐 水 法 ： 简 便 、 快 捷 、 价 廉 ， 但 有 局 限 性 ： 盐 水 法 只 能 检 出 ABO、 P、 Lewis、 MN等 系 统的 抗 体 ， 此 类 抗 体 属 天 然 抗 体 ， 属 IgM球 蛋 白 。IgM是 五 聚 体 ， 分 子 量 大 ， 分 子 长 度 长 ， 能 在盐 水 中 出 现 可 见 的 凝 集 反 应 ；四 、 严 格 交 叉 配 血 42 盐 水 法 不 能 检 出 Rh、 Kell、 Kidd、 Duffy等系 统 的 抗 体 ， 此 类 抗 体 由 免 疫 产 生 ， 属 IgG球蛋 白 。 IgG是 单 聚 体 ， 分 子 量 小 ， 分 子 长 度 短 ，不 能 在 盐 水 中 起 凝 集 反 应 。四 、 严 格 交 叉 配 血 43 交 叉 配 血 不 能 只 用 盐 水 法 ， 还 要 选 用 能 有 效检 出 IgG抗 体 的 方 法 ， 这 些 方 法 有 ： 酶 法 ： 对 Rh系 统 较 为 敏 感 ， 但 会 改 变 某 些 血型 系 统 的 抗 原 构 型 ， 加 之 不 易 保 存 ， 应 用 受 限 ； 抗 球 蛋 白 法 是 检 测 IgG抗 体 最 可 靠 的 方 法 ，但 操 作 繁 琐 。四 、 严 格 交 叉 配 血 44 凝 聚 胺 法 对 Kell系 统 之 外 的 大 多 数 血 型 系 统敏 感 度 高 ， 且 操 作 简 便 ， 快 速 。 微 柱 凝 胶 试 验 （ 卡 式 配 血 ） 灵 敏 度 高 ， 特 异性 强 ， 结 果 直 观 ， 能 自 动 化 操 作 ， 还 能 保 存 ，缺 点 是 价 格 昂 贵 、 耗 时 长 、 可 出 现 假 阳 性 ， 有条 件 的 医 院 可 采 用 。四 、 严 格 交 叉 配 血 45 欧 美 国 家 常 用 抗 体 球 蛋 白 法 或 微 柱 凝 胶 法 ，因 为 白 种 人 中 约 有 9%是 Kell（ K） 阳 性 ， 而 凝聚 胺 对 Kell系 统 不 敏 感 。我 国 中 小 医 院 适 合 用 凝 聚 胺 法 ， 因 为 凝 聚 胺对 Rh系 统 特 别 敏 感 ， 在 我 国 以 Rh系 统 引 起 的迟 发 性 溶 血 性 输 血 反 应 最 为 常 见 ， 而 汉 族 人 几乎 100%为 K抗 原 阴 性 ， 通 常 不 考 虑 抗 -K。四 、 严 格 交 叉 配 血 46 n凝 聚 胺 试 验 原 理凝 聚 胺 （ Polybrene） 是 一 种 阳 离 子 聚 合 物 ，溶 解 后 能 产 生 很 多 正 电 荷 ， 可 中 和 红 细 胞 表 面负 电 荷 ， 引 起 红 细 胞 非 特 异 性 凝 聚 ， 这 种 凝 聚是 可 逆 的 ；如 果 是 抗 体 致 敏 的 红 细 胞 在 凝 聚 胺 作 用 下 发生 凝 集 ， 这 种 凝 集 是 不 可 逆 的 ；四 、 严 格 交 叉 配 血 47 在 凝 聚 胺 试 验 中 ， 首 先 让 红 细 胞 和 血 清 在 低 离 子 介质 中 孵 育 ， 促 进 抗 体 与 红 细 胞 抗 原 结 合 ， 然 后 加 入凝 聚 胺 使 红 细 胞 凝 聚 ， 再 加 入 枸 橼 酸 钠 重 悬 液 （ 枸橼 酸 根 带 负 电 荷 ） 中 和 凝 聚 胺 正 电 荷 ， 恢 复 红 细 胞表 面 的 负 电 荷 ；重 悬 后 如 果 是 非 特 异 性 凝 聚 ， 则 由 于 红 细 胞 表 面 负电 荷 的 排 斥 作 用 ， 红 细 胞 散 开 ， 结 果 为 阴 性 ； 若 是由 于 抗 原 抗 体 引 起 的 特 异 性 凝 集 则 不 会 散 开 ， 结 果为 阳 性 。 四 、 严 格 交 叉 配 血 48 n凝 聚 胺 试 验 的 注 意 事 项加 入 重 悬 液 后 ， 应 尽 快 观 察 结 果 ， 最 好 在 1min内 ，最 长 不 要 超 过 3min， 以 免 弱 反 应 消 失 ；凝 聚 胺 溶 液 若 放 玻 璃 瓶 中 太 久 作 用 会 变 弱 ， 所 以 必须 保 存 在 黑 色 塑 料 瓶 中 ；凝 聚 胺 是 一 种 抗 肝 素 药 物 ， 所 以 使 用 含 肝 素 的 血 标本 要 稍 稍 多 加 一 些 凝 聚 胺 来 中 和 肝 素 。四 、 严 格 交 叉 配 血 49 n主 侧 交 叉 配 血 不 相 合 的 原 因 ：患 者 或 供 者 ABO血 型 定 型 不 正 确 ；患 者 血 清 中 存 在 同 种 抗 体 与 供 者 红 细 胞 上 的相 应 抗 原 起 反 应 ；四 、 严 格 交 叉 配 血 50 患 者 血 清 中 存 在 自 身 抗 体 ， 与 供 者 红 细 胞 上的 相 应 抗 原 起 反 应 ；患 者 血 清 中 白 蛋 白 与 球 蛋 白 比 例 不 正 常 引 起的 缗 钱 状 假 凝 集 ；血 浆 扩 容 剂 的 影 响 或 试 剂 被 污 染 等 。四 、 严 格 交 叉 配 血 51 n主 侧 （ +） 、 自 身 （ -） 、 抗 体 筛 选 （ -） ， 可 能 原因 是 ：患 者 或 供 者 ABO血 型 错 误 ；（ 重 新 定 型 ， 检 查 患 者 亚 型 、 输 血 史 及 移 植 史 ）患 者 血 清 中 有 抗 体 ， 但 筛 选 细 胞 上 无 相 应 抗 原 ；（ 对 患 者 进 行 抗 体 鉴 定 ）供 者 红 细 胞 已 被 致 敏 。（ 对 供 者 做 直 接 抗 球 蛋 白 试 验 ）四 、 严 格 交 叉 配 血 52 n主 侧 （ +） 、 自 身 （ -） 、 抗 体 筛 选 （ +） ，可 能 原 因 是 ：患 者 血 清 中 的 同 种 抗 体 与 供 者 红 细 胞 上 相 应抗 原 起 反 应 。（ 对 患 者 进 行 抗 体 鉴 定 ， 选 择 无 对 应 抗 原 的 血液 输 注 。 ）四 、 严 格 交 叉 配 血 53 n主 侧 （ +） 、 自 身 （ +） 、 抗 体 筛 选 （ +） ， 可 能 原 因 是 ：患 者 血 清 中 可 能 同 时 存 在 自 身 抗 体 和 同 种 抗 体 ；（ 对 患 者 血 清 自 身 吸 收 及 抗 体 鉴 定 ， 用 吸 收 后 血 清 配 血 ）白 蛋 白 /球 蛋 白 比 值 不 正 常（ 盐 水 添 加 试 验 解 决 缗 钱 状 假 凝 集 ）血 浆 扩 容 剂 （ 如 右 旋 糖 酐 ） 的 影 响 ；（ 洗 涤 细 胞 ， 或 等 待 扩 容 剂 消 失 后 重 新 抽 取 标 本 ）污 染（ 使 用 洁 净 的 器 具 和 符 合 要 求 的 试 剂 ）四 、 严 格 交 叉 配 血 54 n交 叉 配 血 实 验 中 ， 离 心 力 、 离 心 时 间 不 当 ，可 造 成 假 阴 性 或 假 阳 性 结 果 。n恒 温 水 浴 箱 温 度 不 正 确 也 会 造 成 错 误 结 果 。n对 于 高 效 价 O型 血 清 出 现 前 带 现 象 时 ， 应 当用 EDTA盐 水 适 当 稀 释 ， 以 阻 止 补 体 C1引 起 的 凝集 。n出 现 溶 血 或 部 分 溶 血 应 判 为 阳 性 结 果 （ 标 本本 身 溶 血 例 外 ） 。四 、 严 格 交 叉 配 血 55 n含 有 冷 凝 集 素 的 患 者 交 叉 配 血 时 可 采 用 37生 理 盐 水 洗 涤 3次 ， 如 还 显 弱 凝 集 ， 再 用 42或 45 盐 水 洗 1次 再 配 血 。n温 抗 体 型 的 自 身 免 疫 性 溶 血 性 贫 血 患 者 血 清中 的 游 离 抗 体 有 时 很 难 吸 收 完 全 ， 导 致 配 血 困难 。 在 排 除 同 种 抗 体 的 情 况 下 可 选 择 凝 集 反 应弱 的 同 型 血 液 输 注 ， 亦 可 输 注 O型 洗 涤 红 细 胞 。四 、 严 格 交 叉 配 血 56 n某 些 紧 急 情 况 下 需 要 快 速 配 血 ， 建 议 血 清（ 血 浆 ） 与 细 胞 比 例 为 2:1， 细 胞 悬 液 浓 度 为2% 3%。 同 时 离 心 前 孵 育 2 5min， 有 利 于 检测 弱 的 ABO抗 体 。n婴 儿 输 注 O型 血 或 ABO同 型 血 ， 应 当 采 用 母 亲的 血 清 （ 血 浆 ） 进 行 交 叉 配 血 。四 、 严 格 交 叉 配 血 57 n在 任 何 情 况 下 ， 一 定 要 选 择 ABO和 Rh（ D） 同型 的 血 液 。 如 果 同 型 血 不 够 用 ， 可 以 输 注 O型相 合 的 添 加 剂 红 细 胞 （ 红 细 胞 悬 液 、 悬 浮 红 细胞 ） ， 这 种 红 细 胞 所 含 血 浆 量 很 少 。nAB型 血 液 不 能 满 足 供 应 ， 可 选 择 A型 或 B型 红细 胞 ， 尽 量 不 用 O型 ， O型 红 细 胞 以 备 它 用 。四 、 严 格 交 叉 配 血 58 nRh（ D） 阴 性 血 不 够 用 ， 可 以 选 择 Rh（ D） 阳性 血 ， 但 有 生 育 能 力 的 妇 女 不 能 用 。n在 大 量 输 血 时 如 果 输 的 是 同 型 相 合 的 添 加 剂红 细 胞 （ 未 输 全 血 ） ， 供 者 之 间 可 以 不 做 交 叉配 血 试 验 。 若 是 输 了 ABO不 同 型 的 相 合 红 细 胞 ，以 后 要 尽 快 输 注 与 患 者 同 型 的 红 细 胞 ， 不 要 坚持 一 直 应 用 ABO不 同 型 的 相 合 红 细 胞 。四 、 严 格 交 叉 配 血 59 病 例 讨 论例 1： 王 某 ， 女 ， 44岁 ， 因 乳 腺 癌 1年 前 作 根 治 术 。手 术 期 间 患 者 输 A型 全 血 400ml， 无 不 良 反 应 。 术后 曾 化 疗 8次 。 此 次 入 院 进 行 第 9次 化 疗 。 血 常 规 ：红 细 胞 4.12 1012/L， 血 红 蛋 白 125g/L， 白 细 胞 3.3 10 9/L， 血 小 板 60 109/L。 60 血 型 “ A”。 因 白 细 胞 和 血 小 板 偏 低 ， 为 了 能 顺利 进 行 第 9次 化 疗 ， 给 患 者 输 当 天 新 鲜 全 血400ml ， 输 血 过 程 无 任 何 反 应 。 化 疗 顺 利 。 输血 后 第 7天 血 红 蛋 白 降 为 90 g/L。 再 输 新 鲜 全 血400ml， 输 后 约 20分 钟 ， 患 者 觉 腰 痛 ， 继 而 出 现畏 寒 、 头 痛 、 恶 心 、 体 温 39 ， 尿 呈 酱 油 样 。经 及 时 抢 救 ， 患 者 转 危 为 安 。 61 例 1复 查 血 型 及 交 叉 配 血 试 验一 、 患 者 血 型 ： “ A”（ CCDee) ； 供 者 血 型 ： “ A”(CCDEe) 二 、 交 叉 配 血 试 验 ： 盐 水 介 质 不 发 生 凝 集 反 应 ； 抗 球 蛋 白 和 酶 介 质 中 ， 主 侧 发 生 强 凝 集 反 应 ， 次 侧 无 凝 集 反 应 。三 、 抗 体 鉴 定 ： 患 者 血 清 中 存 在 抗 E抗 体 ， 效 价 ： 512。四 、 问 题 ： 1、 该 患 者 是 什 么 输 血 反 应 ？ 2、 诊 疗 过 程 中 有 哪 些 失 误 ？ 62 患 者 女 ， 李 芝 ， 39岁 ， 农 民 ， 因 子 宫肌 瘤 行 子 宫 次 全 切 除 术 。 术 前 定 血 型 为 A型 ，Hb110g/L。 术 中 失 血 约 400mL， 手 术 结 束 时输 A型 新 鲜 全 血 400mL。 输 完 血 后 ， 回 病 房 约10分 钟 ， 患 者 寒 战 、 腰 痛 、 发 热 39 ， 1.5小时 后 排 出 酱 油 色 尿 ， 手 术 切 口 渗 血 不 止 ， 即 按急 性 溶 血 反 应 治 疗 ， 再 次 核 定 血 型 为 B型 。 2天 后 出 现 急 性 肾 功 能 衰 竭 。 3天 后 ， 死 于 转 院途 中 。 63 采 集 标 本 的 医 护 人 员 误 将 39岁 看 成 39床 ， 错 用39床 的 血 标 本 测 定 血 型 并 作 配 血 试 验 。 39床 血型 为 A型 ， 女 ， 李 兰 。实 际 上 ， 患 者 为 28床 ， 血 型 为 B型 。 64 IgM在 盐 水 介 质 中 产 生 凝 集 65 IgG 在 盐 水 介 质 中 一 般 不 产 生 凝 集 66 酶 处 理 、 凝 聚 胺 67 抗 球 蛋 白 试 验 抗 球 蛋 白 68 69 #r%v(y+B3E6I9LcOgRjUmYp!t&w)z1C4F7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JaMePhTkWnZr$u*x+A2E5H8KcNfQiUlXp#s%v)y0B3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUlXp#s&v)y0C3F6IaLdPgSjVnYq!t*w-A1D4G8JbMeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v)z0C3F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQhTlWo#r%u(y+B2E6H9LcOfRjUmXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t*x-A2D5G8KbNeQiTlXo#r%v(y+B3E6I9LcOgRjUmYp!s&w)z1C4F7JaMdPhSkWnZq$u*x-A2D5H8KbNfQiTlXo#s%v(y0B3E6I9LdOgRjVmYp!t&w-z1C4G7JaMePhTkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMePhTkWoZr$u(x+A2E5H9KcNfRiUlXp#s&v)y0C3F6IaLdPgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZr%u(x+B2E5H9KcOfRiUmXp#s&v)z0C3F7IaLdPgSkVnYq$t*w-A1D5G8JbNeQhTlWo#r%u(y+B2E6H9KcOfRjUmXp!s&v)z0C4F7IaMdPgSkVnZq$t*x-A1D5G8KbNeQiTlWo#r%v(y+B3E6H9LcOgRjUmYp!s&w)z1C4F7JaMdPhSkWnZq$u*x-A2D5G8KbNfQiTlXo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbNeQhTlWoZr%u(y+B2E6H9KcOfRjUmXp!s&v)z0C4F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B3E6H9LcOfRjUmYp!s&w)z0C4F7JaMdPhSkVnZq$u*x-A2D5G8KbNfQiTlXo#r%v(y+B3E6I9LcOgRjUmYp!t&w)5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B3E6H9LcOfRjUmYp!s&w)z0C4F7JaMdPhSkVnZq$u*x-A2D5G8KbNeQiTlXo#r%v(y+B3E6I9LcOgRjUmYp!t&w)z1C4F7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYp!t&w-z1C4G7JaMePhTkWnZr$u*x+A2E5H8KcNfQiUlXp#s%v)y0B3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+A2E5H9KcNfRiUlXp#s&v)y0C3F6IaLdPgSjVnYq!t*w-A1D4G8JbMeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v)z0C3F7IaMdPgSkVnYq$t*w-A1D5G8JbNeQhTlWo#r%u(y+B2E6H9LcOfRjUmXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t*x-A2D5G8KbNeQiTlXo#r%v(y+B3E6H9LcOgRjUmYp!s&w)z1C4F7JaMdPhSkWnZq$u*x-A2D5H8KbNfQiTlXo#s%v(y0B3E6I9LdOgRjVmYp!t&w-z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMiTlXo#s%v(y0B3E6I9LdOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMePhTkWoZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZr%u(x+B2E5H9KcOfRiUmXp#s&v)z0C3F7IaLdPgSkVnYq$t*w-A1D4G8JbNeQhTlWoZr%u(y+B2E6H9KcOfRjUmXp!s&v)z0C4F7IaMdPgSkVnZq$t*x-A1D5G8KbNeQiTlWo#r%v(y+B3E6H9LcOfRjUmYp!s&w)z0C4F7JaMdPhSkVnZq$u*x-A2D5G8KbNfQiTlXo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(yF7JaMdPhSkVnZq$u*x-A2D5G8KbNfQiTlXo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4F7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfQiUlXp#s%v)y0B3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbMeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v)z0C3F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B3E6H9LcOfRjUmXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v)z0C3F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B2E6H9LcOfRjUmXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t*x-A2D5G8KbNeQiTlXo#r%v(y+B3E6I9LcOgRjUmYp!t&w)z1C4F7JaMdPhSkWnZq$u*x-A2D5H8KbNfQiTlXo#s%v(y0B3E6I9LdOgRjVmYp!t&w-z1C4G7JaMePhTkWnZr$u*x+A2E5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMePhTkWoZr$u(x+A2E5H9KcNfRiUlXp#s&v)y0C3F6IaLdPgSjVnYq!t+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMePhTkWoZr$u(x+A2E5H9KcNfRiUlXp#s&v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZr%u(x+B2E5H9KcOfRiUmXp#s&v)z0C3F7IaLdPgSkVnYq$t*w-A1D5G8JbNeQhTlWo#r%u(y+B2E6H9KcOfRjUmXp!s&v)z0C4F7IaMdPgSkVnZq$t*x-A1D5G8KbNemXp#s&v)z0C3F7IaLdPgSkVnYq$t*w-A1D4G8JbNeQhTlWoZr%u(y+B2E6H9KcOfRjUmXp!s&v)z0C4F7IaMdPgSkVnZq$t*x-A1D5G8KbNeQiTlWo#r%v(y+B3E6H9LcOgRjUmYp!s&w)z0C4F7JaMdPhSkVnZq$u*x-A2D5G8KbNfQiTlXo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhXo#r%v(y0B3E6I9LcOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZq$u*x+A2D5H8KbNfQiUlXo#s%v(y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0B3F6IaLdOgSjVmYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbMeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v)z0C3F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B3E6H9LcOfRjUmYp!s&w)z0C4FMeQhTlWoZr%u(x+B2E6H9KcOfRiUmXp!s&v)z0C3F7IaMdPgSkVnYq$t*x-A1D5G8JbNeQiTlWo#r%u(y+B2E6H9LcOfRjUmXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t*x-A2D5G8KbNeQiTlXo#r%v(y+B3E6I9LcOgRjUq$t*x-A1D5G8JbNeQhTlWo#r%u(y+B2E6H9LcOfRjUmXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t*x-A2D5G8KbNeQiTlXo#r%v(y+B3E6I9LcOgRjUmYp!s&w)z1C4F7JaMdPhSkWnZq$u*x-A2D5H8KbNfQXp!s&w)z0C4F7IaMdPhSkVnZq$t*x-A2D5G8KbNeQiTlXo#r%v(y+B3E6H9LcOgRjUmYp!s&w)z1C4F7JaMdPhSkWnZq$u*x-A2D5H8KbNfQiTlXo#s%v(y0B3E6I9LdOgRjVmYp!t&w-z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMeTlXo#s%v(y0B3E6I9LdOgRjVmYp!t&w)z1C4G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1D4G7JbMePhTkWoZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0G7JaMePhSkWnZr$u*x+A2D5H8KcNfQiUlXo#s%v)y0B3F6I9LdOgSjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZ)y0B3F6I9LdOgRjVmYq!t&w-z1C4G7JbMePhTkWnZr$u(x+A2E5H8KcNfRiUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G8JbMeQhTkWoZr$u(x+B2E5H9KcNfRiUmXp#s&v)y0C3F7IaLdPgSjVnYq$t*w-A1D4G8JbNeUlXp#s%v)y0C3F6IaLdOgSjVnYq!t*w-z1D4G7JbMeQhTkWoZr