农药环境安全性评价.ppt

农药环境安全性评价,2020/8/14,农药环境安全性评价,2,农药使用的利与弊,农药的重要地位 防治病、虫、草、鼠害，调节农作物生长 全世界由于病、虫、草、鼠害而损失的农作物收获量相当于潜在收获量的三分之一，如果一旦停止用药或严重的用药不当，一年后将减少收成2540（与正常用药相比），两年后将减少4060以至绝产。 我国平均每年挽回粮食2500万吨、棉花40万吨、蔬菜800万吨、果品330万吨，减少经济损失约300亿元。,2020/8/14,农药环境安全性评价,3,背 景,农业部农药检定所 农药登记前、登记、登记后的管理、监督、检测 11个处室 药政处、生测室、分析室、残留室、监督处、信息处、咨询中心、生物中心 120人，在编86人,2020/8/14,农药环境安全性评价,4,背 景,生物中心 2800m2实验室，200m2全自动控制温室 室内生测试验：杀虫剂、杀菌剂、除草剂、卫生杀虫剂 环境试验：农药对非靶标生物毒性、环境行为特征 试材培养：虫、菌、草、蚊、蜚蠊、蜂、鸟、鱼、蚕 20人，在编6人 实习博士、硕士研究生、本科生5-10人,2020/8/14,农药环境安全性评价,5,农药使用的利与弊,农药对环境的污染问题农药残留 农药残留的急性毒性问题 农药残留的慢性、亚慢性毒性问题 农药残留对农药产品贸易的影响 农药残留对农产品贸易的影响,2020/8/14,农药环境安全性评价,6,农药使用的利与弊,农药对环境的污染问题环境中的归宿 归宿：水、土壤、空气 影响因子：温度、湿度、光照、降雨、微生物、pH,2020/8/14,农药环境安全性评价,7,农药使用的利与弊,农药对环境的污染问题环境生物毒害 对有益生物的影响 蜜蜂、鱼类、鸟类、家蚕 天敌，赤眼蜂、青蛙 蚯蚓、土壤微生物 对生物链的影响,2020/8/14,农药环境安全性评价,8,农药使用的利与弊,农药对环境的污染问题环境激素 在已经列为环境激素的名单中，有40多种是农药，其中的六六六、DDT等目前已被禁用，但仍有多种仍在广泛应用环境激素对人和动物最明显的危害是使生殖机能下降。科学研究表明，由于环境激素的危害，人类男性的精子数和精液正迅速减少，生殖健康受到影响。 环境激素还会使人和动物体内内分泌紊乱，导致神经系统受损。此外环境激素还会降低机体的免疫力而诱发肿瘤。已有许多研究表明睾丸癌、前列腺癌、乳腺癌的发生都与环境激素有关。,2020/8/14,农药环境安全性评价,9,农药登记管理农药安全性,1982年开始恢复对农药登记管理 重点的转变 药效 产品质量 农产品残留 环境,2020/8/14,农药环境安全性评价,10,农药环境安全性评价的主要内容,环境行为 非靶标生物,2020/8/14,农药环境安全性评价,11,农药环境安全性评价的主要内容,环境行为 农药环境行为是指农药进入环境后，在环境中迁移转化过程中的表现与特征。 包括物理行为、化学行为与生物效应等三个方面。 直观地反映了农药对生态环境污染影响的状态。,2020/8/14,农药环境安全性评价,12,农药环境安全性评价的主要内容,环境行为 挥发作用 土壤吸附作用 淋溶作用 土壤降解作用 水解作用 光解作用 生物富集作用,2020/8/14,农药环境安全性评价,13,农药环境安全性评价的主要内容,农药对非靶生物毒性试验 在靶生物与非靶生物并存的环境中，使用农药难免对非靶生物会造成一定的危害。不同的农药品种，由于其施药对象、施药方式、毒性及其危及生物种类的不同，其影响程度也随之而异。环境生物种类很多，在评价时只能选择有代表性的，并具有一定经济价值的生物品种，其中包括陆生生物、水生生物和土壤生物作为评价指标。,2020/8/14,农药环境安全性评价,14,农药环境安全性评价的主要内容,非靶标生物毒性试验 鸟类毒性 蜜蜂毒性 天敌毒性（赤眼蜂、蛙类） 鱼类毒性 水生生物毒性（水蚤、藻类） 家蚕毒性（根据农药性质和用途而定） 蚯蚓毒性和土壤微生物影响（土壤处理） 主要后茬作物敏感性（高活性除草剂：如 磺酰脲类等）,2020/8/14,农药环境安全性评价,15,农药环境安全性评价的主要内容,土壤降解,2020/8/14,农药环境安全性评价,16,土壤降解的概念,成土因子与田间耕作条件的共同作用下，土壤中的残留农药逐步由大分子分解成小分子直至失去毒性和生物活性的全过程。 土壤是农药在环境中的贮藏库，也是农药在环境中的集散地。 土壤中农药残留量的大小、持留时间的长短、农药在土壤中的降解性能，是评价农药对整个环境危害影响十分重要的指标。 农药在土壤中的持留愈长，对环境的污染以及对各种环境生物，以至对人类的潜在威胁也愈大。 表示：降解半衰期：t0.5,2020/8/14,农药环境安全性评价,17,土壤降解的试验方法,试验材料 土壤 农田耕层土壤 新鲜，有代表性，34种 风干，过筛（2mm）,冷藏贮存 理化性质测定：pH、有机质、代换量、土壤质地 农药纯品/原药 配制水溶液，有机溶剂助溶（少量，无干扰：丙酮、乙醇） 培养箱：050 残留分析仪器设备、材料 前处理：旋转蒸发器、震荡器 化学试剂 分析仪器：气相色谱、液相色谱、色谱-质谱联用仪,2020/8/14,农药环境安全性评价,18,土壤降解的试验方法,试验方法 称量：20g，三角瓶， 混入农药：农药的用量最好用田间的实际用量来换算，或将土壤中农药的起始浓度调至 10ppm （新要求：田间用量的倍量） 调节含水量：田间持水量的60%。 培养：在25 1恒温条件下培养 定期采样测定：直至土壤中农药的降解量达到两个半衰期以上，即降解量75%，或者90%以上时可终止试验 （用于水田的农药，则同时要做在渍水条件下的降解试验）,2020/8/14,农药环境安全性评价,19,土壤降解的试验方法,计算公式 Ct=C0e-kt t0.5=Ln2/k C0 ：初始浓度 Ct ：t时间时的浓度 k ：降解速率常数 t ：培养时间 t0.5：半衰期,2020/8/14,农药环境安全性评价,20,土壤降解的试验方法,质量要求 残留分析方法： 准确度：添加回收率70110% 灵敏度：小于初始浓度10%*1/3 初始浓度按照加入量，在土壤中的平均含量 采样点：至少7个点，其中5个点浓度为初始浓度的20%70%,2020/8/14,农药环境安全性评价,21,土壤残留评价特性等级的划分,2020/8/14,农药环境安全性评价,22,农药环境安全性评价的主要内容,水解,2020/8/14,农药环境安全性评价,23,水解的概念,农药在水环境中的降解是农药在水环境中引起的化学降解的现象。 非生物降解的主要形式之一。 它是评价农药在水体中残留特性的指标。 一般的农药，在高温、偏碱性的水体中容易降解。 表示：降解半衰期：t0.5,2020/8/14,农药环境安全性评价,24,水解的试验方法,试验材料 缓冲溶液 pH5.0 pH7.0 pH9.0 农药纯品/原药 配制水溶液，有机溶剂助溶（少量，1%，无干扰：丙酮、乙醇） 培养箱：050 pH剂、灭菌锅 残留分析仪器设备、材料 前处理：旋转蒸发器 化学试剂、玻璃器皿 分析仪器：气相色谱、液相色谱、色谱-质谱联用仪,2020/8/14,农药环境安全性评价,25,水解的试验方法,试验方法 配制药液：缓冲溶液，0.01mol/L或饱和浓度的一半 培养： 5 0，5天 水解10%，稳定，停止试验 水解10%，进一步做，25 、50 培养，从0时起，采样7次以上，直至90% 如有高毒降解产物，需同时测定 灭菌：高温高压，缓冲溶液与容器，校正pH,2020/8/14,农药环境安全性评价,26,水解的试验方法,计算公式 Ct=C0e-kt t0.5=Ln2/k C0 ：初始浓度 Ct ：t时间时的浓度 k ：降解速率常数 t ：培养时间 t0.5：半衰期,2020/8/14,农药环境安全性评价,27,水解的试验方法,质量要求 残留分析方法： 准确度：添加回收率70110% 灵敏度：小于初始浓度10%*1/3 温度要求：0.5 平行样误差： 2.5% 采样点：至少7个点，其中5个点浓度为初始浓度的20%70%,2020/8/14,农药环境安全性评价,28,农药水解特性等级划分,2020/8/14,农药环境安全性评价,29,农药环境安全性评价的主要内容,光解,2020/8/14,农药环境安全性评价,30,光解的概念,残留在大气、作物、水体和土壤表面的农药在阳光的作用下遭受光降解的能力。 重要的非生物降解途径。 对农药残留、药效、毒性均有重大影响。 表示：降解半衰期：t0.5,2020/8/14,农药环境安全性评价,31,光解试验,试验材料 蒸馏水 农药纯品/原药 配制水溶液，有机溶剂助溶（乙腈，无光敏性） 光化学反应仪：光源（汞灯或氙灯）、光反应管、马达、温控装置 紫外强度计、照度计 残留分析仪器设备、材料 前处理设备 化学试剂、玻璃器皿 分析仪器：气相色谱、液相色谱、色谱-质谱联用仪,2020/8/14,农药环境安全性评价,32,光解试验,试验方法 配制药液：蒸馏水培养： 5 0，5天 反应：于光化学反应装置中 光源：汞灯或氙灯，距光反应管13.5cm 温度：252 ，压缩机或风机控温 采样：7次以上 检测,2020/8/14,农药环境安全性评价,33,光解试验,计算公式 Ct=C0e-kt t0.5=Ln2/k C0 ：初始浓度 Ct ：t时间时的浓度 k ：降解速率常数 t ：培养时间 t0.5：半衰期,2020/8/14,农药环境安全性评价,34,光解试验,质量要求 残留分析方法： 准确度：添加回收率70110% 灵敏度：小于初始浓度10%*1/3 蒸馏水：pH6.07.5 光源：推荐氙灯，光谱特性与太阳光相似 采样点：至少7个点，其中5个点浓度为初始浓度的20%70%,2020/8/14,农药环境安全性评价,35,农药光解特性等级划分,2020/8/14,农药环境安全性评价,36,农药环境安全性评价的主要内容,土壤吸附作用,2020/8/14,农药环境安全性评价,37,土壤吸附作用的概念,农药吸附作用是指农药被吸持在土壤中的能力。 农药在固液两相之间分配达到平衡的比值。 表示：吸附常数Kd 农药吸附能力的强弱决定于农药的水溶性，分配系数与离解特性等。水溶性小，分配系数大，离解作用强的农药，容易被土壤吸附；土壤性质对农药吸附作用的影响也很大。有机质含量高，代换量大，质地粘重的土壤，就容易吸附农药。 农药吸附性能的强弱对农药的生物活性、残留性与移动性都有很大影响。 评价移动性、持留性、生物活性、环境毒性的重要指标。,2020/8/14,农药环境安全性评价,38,土壤吸附作用试验方法,试验材料 土壤 3种以上 性质差异较大：以pH、有机质、粘粒含量衡量 风干，过筛 农药纯品/原药 溶于0.01mol/LCaCl2溶液，有机溶剂助溶（少量，无干扰：丙酮、乙腈） 恒温振荡器、离心机 残留分析仪器设备、材料 前处理设备 化学试剂、玻璃器皿 分析仪器：气相色谱、液相色谱、色谱-质谱联用仪,2020/8/14,农药环境安全性评价,39,土壤吸附作用试验方法,预试验 称量土壤，加入药液(25%，进行解析试验和高级吸附试验,2020/8/14,农药环境安全性评价,40,土壤吸附作用试验方法,解析试验 分出上清液，土壤固相中加入0.01mol/LCaCl2溶液 24小时振荡，离心分离 测定上清液农药含量 重复操作一次 合计两次农药含量 计算解析率 若吸附率75%，进行质量平衡试验,2020/8/14,农药环境安全性评价,41,土壤吸附作用试验方法,高级吸附试验 配置药液：0.04,0.2,1.0,5.0mg/L 操作同预试验 求出吸附系数,2020/8/14,农药环境安全性评价,42,土壤吸附作用试验方法,质量平衡试验 选择适当的提取剂，提取、检测土壤中的农药含量 验证吸附试验过程中的农药质量平衡,2020/8/14,农药环境安全性评价,43,土壤吸附作用试验方法数据处理,吸附率 M-CeV0 x A= 100= 100 M M M：平衡时未加土壤的溶液中农药含量 Ce：土壤吸附平衡时，水相中浓度 V0：水溶液体积 x：吸附于土壤中的农药量,2020/8/14,农药环境安全性评价,44,土壤吸附作用试验方法数据处理,解析率 (C1-C2)V-(V0-V)Ce D= 100 X C1：第一次解析浓度 C2：第二次解析浓度 V0：吸附试验前水相的体积 V：吸附试验后水相的体积,2020/8/14,农药环境安全性评价,45,土壤吸附作用试验方法数据处理,吸附常数 Cs=Kd Ce1/n Cs=x/M Cs：土壤对农药的吸附浓度 Kd ：土壤吸附系数 1/n：Cs与Ce关系曲线斜率 求得： LnKd=LnCs-1/nLnCe,2020/8/14,农药环境安全性评价,46,土壤吸附作用试验质量要求,水、土壤残留分析方法： 准确度：添加回收率70110% 灵敏度：水中小于最小平衡浓度1/3 助溶剂：75%,2020/8/14,农药环境安全性评价,47,农药土壤吸附性等级划分,2020/8/14,农药环境安全性评价,48,农药环境安全性评价的主要内容,土壤淋溶作用,2020/8/14,农药环境安全性评价,49,土壤淋溶作用试验,农药淋溶作用是指农药在土壤中随水垂直向下移动的能力。 影响农药淋溶作用的因子与影响农药吸附作用的因子基本相同，恰好成反相关关系。一般来说，农药吸附作用愈强，其淋溶作用愈弱。 另外与施用地区的气候、土壤条件也关系密切。在多雨，土壤砂性的地区，农药容易被淋溶。 农药淋溶作用的强弱，是评价农药是否对地下水有污染危险的重要指标。,2020/8/14,农药环境安全性评价,50,土壤淋溶作用试验,试验材料 3-4种代表性土壤 砂土、砂壤土、粉砂壤土、粘壤土 风干，过筛,2020/8/14,农药环境安全性评价,51,土壤淋溶作用试验,薄层层系法 柱淋洗法,2020/8/14,农药环境安全性评价,52,土壤淋溶作用试验,薄层层系法 制泥浆，涂于层析板（0.5-1mm），晾干 点药，以水为展开剂展开 放射性标记农药：显影法求出Rf值 普通农药：薄板平均分成6段，检测各段含量,2020/8/14,农药环境安全性评价,53,土壤淋溶作用试验,柱淋洗法 2cm内径塑料或玻璃柱，装成30cm高土柱 上端加药，定量、定速淋洗，收集测定淋出液 淋洗后，土柱切成6段，测定各段农药含量,2020/8/14,农药环境安全性评价,54,土壤淋溶作用试验,数据处理 Rf=lmax/Lmax lmax：原点至色谱斑点中心距离 Lmax ：原点至展开剂前沿的距离,2020/8/14,农药环境安全性评价,55,土壤淋溶作用评价,2020/8/14,农药环境安全性评价,56,农药环境安全性评价的主要内容,挥发性 农药挥发作用是指在自然条件下农药从植物表面、水面与土壤表面通过挥发逸入大气中的现象。农药挥发作用的大小除与农药蒸气压有关外，还与施药地区的土壤和气候条件有关。农药残留在高温、湿润、沙质的土壤中比残留在寒冷、干燥、粘质的土壤中容易发挥。农药挥发性的大小，也会影响农药在土壤中的持留性及其在环境中在分配的情况。挥发性大的农药一般持留较短，而在环境中的影响范围较大。,2020/8/14,农药环境安全性评价,57,农药环境安全性评价的主要内容,生物富集作用 生物富集作用是指农药从环境中进入生物体内蓄积，进而在食物链中互相传递与富集的能力。农药生物富集作用大小与农药的水溶性、分配系数以及与生物的种类，生物体内的脂肪含量，生物对农药代谢能力等因子有关。农药的生物富集能力愈强，对生物的污染与慢性危害愈大。,2020/8/14,农药环境安全性评价,58,生物富集作用,测定生物富集系数的方法有静态法与动态法两种。对一般农药，通常先采用静态法试验。 用静态法测定BCF时，国外常用的鱼种有迥鱼、鲤鱼、虹鳟、鲢鱼等，在我国建议用鲤鱼作试验。 试验用两种浓度，各重复一次，并设加药不养鱼与养鱼不加农药的两种空白对照。前者通过测定来校正试验鱼缸中因挥发与降解所造成的农药浓度的变化，后者用作在试验结束时检查试验组鱼体重量有无异常变化与测定鱼体内的脂肪含量。 试验农药用纯品，难溶于水的可用少量低毒、不易降解的有机溶剂（如叔丁醇或二甲亚砜）助溶，加量0.1ml/L。,2020/8/14,农药环境安全性评价,59,生物富集作用,于0、6、24、48、96、144、192小时时分别从各处理中取水样测定农药含量的变化，并喂给适量饲料（20mg/g鱼） 至第8天时取出全部鱼样，称体重后每组分成两份测鱼体内农药含量。试验结果计算：用对照组水体中农药的含量，来校正养鱼组水体中的农药含量，求出被鱼体摄入农药的真实值。 在试验结束时水体中农药含量变化已达到平衡，则此时鱼体对农药的富集系数为： BCF=Cfs/Cws Cfs：已达到平衡时鱼体内农药含量（ppm) Cws ：已达到平衡时水体中农药含量 (ppm) 如果在试验结束时，水体中农药浓度尚未达到平衡，则用上述公式求出的富集系数值应注明是8天的结果，即用BCF8天表示。,2020/8/14,农药环境安全性评价,60,农药的理化性质对生态环境安全性影响,蒸气压 农药进入环境后在气、水、土各介质间迁移、扩散与再分配特性受农药蒸气压影响很大，蒸气压愈大，农药就愈容易从土壤或水域环境转向大气空间，这样就容易进一步引起农药的光降解作用；农药在土壤中的移动性能，受农药蒸气压影响也很大。,2020/8/14,农药环境安全性评价,61,农药的理化性质对生态环境安全性影响,水溶性 水溶性的大小对农药在环境中的移动性、吸附性、生物富集性以及农药的毒性都有很大影响。水溶性大的农药容易从农田流向水体，或通过渗漏进入地下水之中，也容易被生物吸收，导致对生物的急性危害；水溶性弱脂溶性强的农药，容易在生物体内积累，引起对生物的慢性危害。,2020/8/14,农药环境安全性评价,62,农药的理化性质对生态环境安全性影响,分配系数 分配系数是指农药在互不相溶的两种极性与非极性溶剂中的分配能力，分配系数大的农药容易在非生物物质与生物体内富集，分配系数小的农药，容易在环境中扩散，从而也扩大了农药的污染范围。,2020/8/14,农药环境安全性评价,63,农药的理化性质对生态环境安全性影响,化学稳定性 农药的稳定性是指农药进入环境后遭受物理、化学因子影响时分解难易程度的指标，这是评价农药在环境中稳定性基础资料。,2020/8/14,农药环境安全性评价,64,农药的理化性质对生态环境安全性影响,杂质 一般优质农药其杂质成份对农药影响不大，但有些农药的杂质成份则成了影响环境安全的主要对象，如666中的几点种异构体，氟乐灵中的亚硝烟弥漫胺，甲胺磷中的不纯物等，因此农药的纯度和不纯物的成份必须在基础资料中提供。,2020/8/14,农药环境安全性评价,65,农药对非靶标生物的毒性作用,鸟类,2020/8/14,农药环境安全性评价,66,鸟类毒性试验,试验材料 鹌鹑： 孵化后饲养30天 大小均匀、体重基本一致，健康、活泼 雌雄各半 实验条件 252 ，自然光照 器材：鸟笼,2020/8/14,农药环境安全性评价,67,鸟类毒性试验,试验方法1：经口一次性染毒法 一次性给药 预试验： 较大间距设置45个浓度组，得到最低全致死浓度和最高全存活浓度 正式试验： 设置57个浓度组，每组10只，设空白对照，23个平行 252 ，自然光照，正常饲养 观察7天，记录死亡数 统计，求出LD50和置信限,2020/8/14,农药环境安全性评价,68,鸟类毒性试验,试验方法：喂饲法 将药剂定量拌入饲料或转入胶囊 按体重算出每只鹌鹑的食药量，一次性喂饲 预试验： 较大间距设置45个浓度组，得到最低全致死浓度和最高全存活浓度 正式试验： 设置57个浓度组，每组10只，设空白对照，23个平行 252 ，自然光照，正常饲养 观察7天，记录死亡数 统计，求出LD50和置信限,2020/8/14,农药环境安全性评价,69,鸟类毒性试验,2020/8/14,农药环境安全性评价,70,鸟类毒性试验,数据处理 寇氏法 直线内插法 概率单位图解法 计算机软件,2020/8/14,农药环境安全性评价,71,鸟类毒性试验,质量控制 投喂药品或饲料期间，农药含量不能低于规定含量的 试验结束时，对照组死亡率不得超过。 鸟类应适应环境条件和食物，减少外部因素的影响。 观察不正常行为、中毒症状。,2020/8/14,农药环境安全性评价,72,鸟类毒性评价标准,2020/8/14,农药环境安全性评价,73,农药对非靶标生物的毒性作用,蜜蜂 摄入毒性 触杀毒性,2020/8/14,农药环境安全性评价,74,蜜蜂毒性试验,试验材料 意大利成年工蜂 要求健康、蜂龄一致 供试药剂：原药或制剂 以蒸馏水配制，难溶于水的，以少量有机溶剂助溶 器材：蜂笼（上下纱网） 生化培养箱 点滴器、烧杯,2020/8/14,农药环境安全性评价,75,蜜蜂毒性试验,摄入毒性 将蜂引入蜂笼，每笼20只 配制药蜜：药液：蜂蜜=2：1 装入小烧杯，加脱脂棉，倒置于蜂笼上部 试验宜在252微光条件下进行 预试验：间距较大的45个浓度，得到最低全致死浓度和最高全存活浓度 正式试验： 设5个浓度，每组30只，23个平行，设空白对照， 记录24小时死亡数 统计数据，计算LC50及95%置信限,2020/8/14,农药环境安全性评价,76,蜜蜂毒性试验,触杀毒性 试验宜在252微光条件下进行 供试农药用丙酮溶解 用麻醉法先将蜜蜂麻醉（麻醉时的死亡率不得大于10%） 于蜜蜂的前胸背板处，用微量注射器点滴1.7ul药液。 预试验：间距较大的45个浓度，得到最低全致死浓度和最高全存活浓度 正式试验： 设57个浓度，每组30只，23个平行，设空白对照， 记录24小时死亡数 统计数据，计算LD50及95%置信限,2020/8/14,农药环境安全性评价,77,蜜蜂毒性试验,2020/8/14,农药环境安全性评价,78,蜜蜂毒性试验,质量控制 试验期间，农药含量不能低于规定含量的 试验结束时，对照组死亡率不得超过。 观察不正常行为、中毒症状。,2020/8/14,农药环境安全性评价,79,蜜蜂毒性评价,2020/8/14,农药环境安全性评价,80,农药对非靶标生物的毒性作用,家蚕,2020/8/14,农药环境安全性评价,81,家蚕毒性试验,试验材料 家蚕：常用品种 二龄 供试药剂：原药或制剂 以蒸馏水配制，难溶于水的，以少量有机溶剂助溶 恒温培养箱、熏蒸箱（60*40*70cm，带燃烧室）、培养皿（9cm） 等,2020/8/14,农药环境安全性评价,82,家蚕毒性试验,食下毒叶法 熏蒸法,2020/8/14,农药环境安全性评价,83,家蚕毒性试验,食下毒叶法 在培养皿内饲养，每组20头 浸泡桑叶：不同浓度的药液定量5mL/10g桑叶 投喂24小时 预试验：间距较大的45个浓度，得到最低全致死浓度和最高全存活浓度 正式试验： 设57个浓度，23个平行，设空白对照， 记录24、48、96小时、三龄死亡数 统计数据，计算LC50及95%置信限,2020/8/14,农药环境安全性评价,84,家蚕毒性试验,熏蒸法 培养皿内，放新鲜桑叶，20头家蚕 放入熏蒸箱，接通通风装置 将药物放于电热蚊香加热器上加热 记录家蚕反应症状 8小时后取出 正常饲养，观察至48小时或至三龄起 统计8、24、48小时死亡率 设置9个重复，同时设空白对照 统计数据，计算LC50及95%置信限,2020/8/14,农药环境安全性评价,85,家蚕毒性试验,质量控制 空白对照死亡率不超过10% 保证家蚕正常的饲养条件控制 记录： 摄食：减少和拒食 不适：逃避、昂头、晃头、甩头、扭曲挣扎、吐水 体症：大小、体色、肿胀、侧倒、静卧 死亡率,2020/8/14,农药环境安全性评价,86,家蚕毒性试验,2020/8/14,农药环境安全性评价,87,家蚕毒性评价,2020/8/14,农药环境安全性评价,88,农药对非靶标生物的毒性作用,鱼类,2020/8/14,农药环境安全性评价,89,鱼类毒性试验,静态法：整个过程不更换药液 不易挥发、难降解的农药 流动法：恒定浓度的药液流动经过有鱼的 试验容器，适用语易水解、易挥发、耗氧量大的农药 半静态法：最常用 间隔12或24小时更换药液，保持药液不低于初始农药浓度的80%,2020/8/14,农药环境安全性评价,90,鱼类毒性试验,2020/8/14,农药环境安全性评价,91,鱼类毒性试验,试验材料 鲤鱼的幼鱼（3-4cm)、斑马鱼（3cm)等 健壮无病，大小一致 驯养7-14天，喂食（1-2次/天），曝气充氧 光照12-16h 试验前24h停止喂食 驯养期间死亡不超过5% 水：自来水，曝气24以上，硬度50-250mg/L pH6-8.5 溶氧量：5.8mg/L以上 药液：蒸馏水溶解，可加有机溶剂/乳化剂助溶，1-2天配制一次，低温保存,2020/8/14,农药环境安全性评价,92,鱼类毒性试验,试验条件：20，自然采光 预备试验 较大间距浓度梯度，每缸5尾 24h，确定最低全致死浓度和最高全存活浓度，确定正式试验浓度范围 正式试验 5-7个浓度组，每缸10尾，96小时，设空白对照 3-6小时内特别注意观察，之后每24h观察一次，记录 平衡、游动、呼吸、体色变化 温度、pH、溶氧量 数据处理：96h-LC50,寇氏法、直线内插法、计算机软件,2020/8/14,农药环境安全性评价,93,鱼类毒性试验,质量控制 空白对照死亡率不超过10% 以重铬酸钾为参考物质，斑马鱼试验，24-LC50必须处于200-4mg/L之间 溶氧量不低于5.8mg/L 保证其他条件正常,2020/8/14,农药环境安全性评价,94,鱼毒性评价,2020/8/14,农药环境安全性评价,95,蛙类毒性试验,农药对蛙类的毒性测定，选用泽蛙的蝌蚪为试验材料。 供试农药用制剂或原药，对难于溶于水的农药，可用少量内酮与吐温-80助溶，用量不得0.1ml/L。 试验材料取自田间自然繁殖的蝌蚪，采回后先预养一天，再选健壮、个体均一的蝌蚪供试验用； 试验容器为直径18cm、高9cm的玻璃缸，加入1000ml试液，每个处理投放10头蝌蚪，重复三次。 正式试验前先用预试。然后在最高安全浓度与最低全致死浓度范围之间按等比级差设5-7个处理，并设空白对照，试验在自然气温条件下进行。 试验开始后24小时、48小时观察记录蝌蚪的死亡率， 用概率统计法求出LC50值与95%的可信限值。 农药对蛙类的毒性分级标准，可参照鱼类的毒性分级标准。,2020/8/14,农药环境安全性评价,96,蚯蚓毒性试验,为了使试验结果具有可比性，采用人工配制的标准土壤作为试验材料，将农药按一定的级差，配成5-7个等级，分别均匀地加入1公斤土壤中，调节到一定的湿度后，装于2升的培养缸中。 每个处理养入个体大小相近的健壮蚯蚓10条，在202和有适量光照条件下进行试验。 供试农药用制剂或纯品，对难溶于水的农药，可用丙酮助溶。拌入土壤后先将丙酮挥发掉后再做试验。 蚯蚓的毒性试验需连续进行14天，于第7与14天时测定蚯蚓的死亡率，用概率法求半致死浓度LC50与95%的可信限值。 上述方法得到的试验结果，建议按照LC50值的大小将农药对蚯蚓的毒性划分为三个等级：10ppm的为低毒农药。,2020/8/14,农药环境安全性评价,97,土壤微生物毒性试验,本试验用测定土壤微生物呼吸强度的方法，评价施用农药后对土壤微生物总活性影响的指标。 供试土壤要用两种有代表性的新鲜土壤，并要提供pH 值、有机质、代换量、土壤质地等数据。 供试农药最好用制剂，也可用原药或纯品。每种土壤设 1ppm、10ppm、100ppm 三组不同浓度处理，并设空白对照，每组重复三次。难溶于水的农药，可用丙酮助溶。,2020/8/14,农药环境安全性评价,98,土壤微生物毒性试验,将药液先与少量土混匀，待丙酮发净后，再均匀拌入到处理的土壤中。每个处理用土50克，将土壤含水量调节成田间持水量的60%，装于100ml 小烧杯中，与另一个装有标准碱液的小烧杯一起置于2 升容积的密闭瓶中，于251的恒温箱中培养。 试验开始后的第5、10、15天时更换出密闭瓶中的碱液测定吸收的CO2 含量。当打开密闭瓶更换碱液时，同时更换了密闭瓶中的空气，以保证密闭瓶中的氧压维持在一定水平。 用土壤中CO2 释放量的变化，反映土壤微生物受农药抑制的程度，并以此为依据，建议将农药对土壤微生物的毒性划分成以下三个等级：用1ppm处理土壤，在15天内抑制值50%的为高毒农药；用10ppm处理的土壤，抑制值50%的为中毒的农药；抑制值50%的为低毒农药,2020/8/14,农药环境安全性评价,99,水蚤毒性试验,试验用的蚤种选用常用的大型蚤（Daphnia magna），蚤龄6-24 小时，试验水用脱氯后的自来水，标明水质指标，以绿藻（小球藻、栅列藻）为饲料，用静态方法培养。 试验用的农药用纯品，也可用制剂。难溶于水的农药，可用少量低毒的丙酮与吐温 -80助溶，加入量不得0.1ml/L，试验液的浓度按级差设5-7 个组。另设一对照组，每组用水蚤20只，分4槽，每槽5 只。 槽中药液用量不得2ml/ 只蚤。试验期不投食，对照组中水蚤的死亡率应控制在10% ，试验在222的条件下观察48 小时。 判断水蚤死亡的标准，在显微镜下观察，心脏停止跳动为依据，记录 24小时与48小时的死亡数，用概率统计法求出LC50与95% 的可信限值。 农药对水蚤的毒性等级划分标准，可参照鱼类的等级标准。,2020/8/14,农药环境安全性评价,100,藻类毒性试验,国际上供农药毒性试验用的藻种有月牙藻、栅列藻、小球藻等，这些藻种在我国都有广泛分布。建议统一用栅列藻作为试验材料。 试验用的玻璃容器均需高温灭菌，选择合适的培养液作为试验用水（如水生 6 号培养液）。 供试的农药用纯品，必要时也可用制剂。难溶于水的农药可用丙酮与吐湿 -80助溶，用量不得0.1ml/L。 试验用的农药溶液按级差设5-7 个组，另设一个空白对照。开始时试验液中的藻量控制在105 个细胞/ml左右，pH 7.50.2，水温222，连续光照（光强4000勒克斯），采用振摇或间歇振摇下培养96小时，于24、48、72、96小时时取出少量培养液，测定藻数变化，用概率统计法求出相应时间内的半抑制浓度EC50与95%的可信限值。,2020/8/14,农药环境安全性评价,101,我国农药登记管理对农药环境安全性的要求,按照登记阶段 临时登记 正式登记 登记后,2020/8/14,农药环境安全性评价,102,临时登记阶段,制剂 根据农药特性和用途，至少应提供由我国登记主管部门认证或认可试验单位出具的制剂对鱼、鸟、蜜蜂、家蚕的毒性实验资料。 原药 根据农药的特性和使用特点，原药要求提供有关的环境行为特征资料。,2020/8/14,农药环境安全性评价,103,正式登记阶段,原药完整的环境化学、环境行为特征资料（七项）： 1）挥发作用 2）土壤吸附作用 3）淋溶作用 4）土壤降解作用 5）水解作用 6）光解作用 7）生物富集作用,2020/8/14,农药环境安全性评价,104,正式登记阶段,制剂环境生态的资料（八项） 1）鸟类毒性 2）蜜蜂毒性 3）天敌毒性（赤眼蜂、蛙类） 4）鱼类毒性 5）水生生物毒性（水蚤、藻类） 6）家蚕毒性（根据农药性质和用途而定） 7）蚯蚓毒性和土壤微生物影响（土壤处理） 8）主要后茬作物敏感性（高活性除草剂：如 磺酰脲类等） 对环境有明显影响的农药，提供其对环境影响的补充资料 （如：虾、蟹，地下水影响等）,2020/8/14,农药环境安全性评价,105,特殊产品,生杀虫剂： 原药提供光解、水解和吸附作用资料，室内用制剂提供家蚕毒性试验资料，室外用制剂提供对主要水生生物的毒性及水中滞留性试验资料 杀鼠剂：临时登记，提供鸟、禽、畜的毒性资料；正式登记，全面喷洒的提供全部的环境生态试验资料（环境行为特征和环境生态）。 生物化学农药（信息素、激素、酶） 临时登记时提供环境生态毒性资料；正式登记时提供环境行为特征试验资料。,2020/8/14,农药环境安全性评价,106,登记后管理,发现问题，继续试验，决定产品管理政策 菊酯类农药 涕灭威对地下水污染 克百威对地下水污染、对鸟类毒性,2020/8/14,农药环境安全性评价,107,？,2020/8/14,农药环境安全性评价,108,谢谢,