微生物复习小抄.doc

微生物：是指一些个体微小、构造简单的低等生物，即一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞三大类。原核类：细菌（真细菌和古细菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体和衣原体。真核类：酵母菌、霉菌和蕈菌。非细胞类：病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和朊病毒）。微生物学史：史前期，初创期，奠基期，发展期，成熟期。微生物的五大共性：1.体积小，面积大； 2.吸收多，转化快；3.生长旺，繁殖快； 4.适应强，易变异；5.分布广，种类多。细菌大小：直径约0.5微米。 细菌形状分类：球菌，杆菌，螺旋菌。细胞构造：细胞壁、细胞膜、细胞质和核区；特殊构造：鞭毛、菌毛、性菌毛、糖被和芽孢。细胞壁：肽聚糖和（90%）和磷壁酸（10%）。肽聚糖包括 N-乙酰葡糖胺、N-乙酰包壁酸、四肽尾和肽桥。溶菌酶溶解-1，4-糖苷键。 青霉素阻止肽桥的形成。间体：是一种由细胞膜内褶形成的其中充满着层状或管状的泡囊。多见于革兰氏阳性细菌。每个细胞含一至少数几个。着生部位可在表层或深层，前者与某些酶如青霉素酶的分泌有关，后者与DNA的复制、分配以及与细胞分裂有关。荚膜：由有固定层次的较厚透明胶状物组成，它含有DPA-Ca,能稳定芽孢中的生物大分子，从而增强了芽孢的耐热性。鞭毛：生长在某些细菌表面的长丝状，波曲的蛋白质附属物。功能：辅助运动。鞭毛具有长，粗等特征；菌毛具有短，细，直等特征。菌落：指在固体培养基内以母细胞为中心的一堆肉眼可见的，有一定形态、构造等特征的子细胞集团。1.细菌的菌落特征： 菌落表面湿润或干燥，边缘整齐或锯齿状，菌落较小，有些细菌产生色素。有鞭毛的细菌菌落表面是粗糙的，有荚膜的细菌形成的菌落表面光滑。菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致。2.放线菌菌落特征：表面粗糙、干燥，不透明，当孢子成熟时，表面绒毛状、粒状或粉末状。菌落与培养基结合紧密，不易挑起。有些放线菌产生色素，使菌落正面和反面的颜色不同。3.酵母菌菌落特征：在固体培养基表面，酵母菌菌落和细菌菌落相似，一般都湿润，较光滑，有一定透明度，且容易挑起，菌落质地均匀，正反面、边缘和中央部位颜色很均一。4.霉菌的菌落特征：形态较大，质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蜘蛛网状、绒毛状或棉絮状，菌落与培养基连接紧密，不易挑取，菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色很不一致。放线菌：一类呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物。基内菌丝：吸收营养和排泄废物； 气生菌丝：成熟为繁殖菌丝，产生分生孢子。细菌核糖体为70S，链霉素具有对其抑制作用而对真核生物的核糖体80S不具有。蓝细菌：含叶绿素a，能进行产氧光合作用。支原体：无细胞壁，细胞膜含甾醇，从而比其它原核生物的膜更坚韧。酵母菌：细胞壁含甘露聚糖（外层）、葡聚糖（内层）、蛋白质（中间）。基因组有17条染色体。霉菌：无性孢子包括（游动孢子，包囊孢子，分生孢子，节孢子，厚垣孢子，芽孢子，掷孢子）有性孢子包括（卵孢子，接合孢子，子囊孢子，担孢子）毛霉有性繁殖过程：霉菌的有性繁殖过程十分复杂，一般分为三个阶段，即质配、核配和减数分裂。（1）质配：两个性细胞结合，细胞质融合，成为双核细胞，每个核均含单倍染色体（n+n）（2）核配：两个核融合，成为二倍体接合子核，此时核的染色体数是二倍（2n）。（3）减数分裂：具有双倍体的细胞核经过减数分裂，核中的染色体数目又恢复到单倍体状态。非细胞生物：1.真病毒：至少含有核酸（DNA或RNA）和蛋白质俩种组分。2.亚病毒：2.1类病毒：只含具有独立侵染性的RNA组分；2.2拟病毒：只含不具独立侵染性的RNA组分；2.3阮病毒：只含单一蛋白质组分。病毒：是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”，其本质是一种只含DNA或RNA的遗传因子，它们能以感染态和非感染态俩种状态存在。双层培养法：1.分别配置含2%和1%琼脂的底层培养基。2.先用底层培养基在培养皿上浇一层平板，待凝固。3.把预先融化并冷却到45度以下，加有较浓敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养基，摇匀，倒入底层培养基上平铺。4.在37度下保温，培养10余小时后，计数。营养要素：6大类，即碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水。碳源：种类 有牛肉膏、蛋白胨、氨基酸、明胶、葡萄糖、蔗糖、糖蜜、天然气、石油、有机酸、烃类、CO2 、NaHCO3 、CaCO3等。作用 为微生物生长繁殖提供所需碳元素。实验室用 牛肉膏、蛋白胨等培养微生物。工业用 工业生产上应考虑原料的价格及来源,通常使用各种淀粉及它们的水解物如糊精、葡萄糖等氮源： 种类 有牛肉膏、蛋白胨、氨基酸、尿素、酵母膏、铵盐、(NH4)SO4 、KNO3 、N2 和空气等。作用 除提供氮源外，有些有机氮源还提供大量的无机盐及生长因子。诱导某些酶的产生。实验室用 牛肉膏、蛋白胨和酵母膏等培养微生物，工业用 氨基酸、尿素、硝酸盐、铵盐等。理化条件：PH 细菌为7.08.0放线菌为7.58.5；酵母菌为3.86.0；霉菌为4.05.8；藻类为6.07.0；原生动物为6.08.0。培养基按成分分为：1.天然培养基2.组合培养基3.半组合培养基按物理状态分为：1.液体培养基 2.固体培养基 3.半固体培养基 4.脱水培养基 按功能分为：1.选择培养基 2.鉴别培养基生物氧化类型分为：呼吸 无氧呼吸 发酵生物氧化过程分为：脱氢（或电子） 递氢（或电子） 受氢（或电子）底物脱氢途径：4条，EMP途径，HMP途径，ED途径，TCA循环。纯培养：微生物学中把从一个或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代。方法：1.液体稀释法；2.平板划线法；3.倾注平板法；4.平板涂布法；5.选择性培养分离法；6.单细胞分离法。测生长量（一） 直接法 有粗放的测体积法和精确的称干重法。微生物的干重一般为其湿重的10%-20%。（二） 间接法1.比浊法 可用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定，一般选用450-650nm波段。2.生理指标法 测含氮量法。计繁殖数（一）直接法 指用计数板在光学显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法。（二）间接法 是一种活菌计数法。最常用的是利用固体培养基上形成菌落的菌落计数法。1.平板菌落计数法 可用浇注平板活或涂布平板等方法进行。适用于各种好氧菌和厌氧菌。2.厌氧菌的菌落计数法 一般用亨盖特滚管培养法。营养物浓度： 影响微生物的生长速率和生长总量。只在营养物浓度很低（0.1-0.2mg/mL）时，才会影响微生物的生长速率繁殖着营养物浓度的浓度提高（2.0-8.0 mg/mL），生长速率不受影响，而影响到最终菌体产量。在进一步提高营养物浓度，则俩者都不受影响。生长限速因子：凡处于较低浓度范围内可以影响生长速率和菌体产量的某营养物按控制方式把连续培养器分为：1.恒浊器：这是一种根据培养其内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。在这个系统中，当培养基流速低于微生物生长速度时，菌体密度增高，这时通过光电控制系统的调节，可促进培养液流速加快，反之亦然，并以此达到恒密度的目的。在恒浊器中的微生物始终能以最高生长速率进行生长，并在允许范围内调控不同的菌体密度。2.恒化器：是一种设法使培养液的流速保持不变，并使微生物始终在低于其最 高生长速率的条件下进行生长繁殖的连续培养装置。菌体密度和限制因子浓度的相互作用，使微生物的生长速率正好与恒速流入的新鲜培养基流速相平衡。以获得一定生长速率的均一菌体，又可获得低于最高菌体产量却保持稳定菌体密度的菌体，常用于实验室。按照微生物与氧的关系分类：1.专性好氧菌 必须在较高浓度分子氧的条件下才能生长，它们有完整 的呼吸链，以分子氧作为最终受体。2.兼性厌氧菌 既能在有氧时生长也能在没氧时生长，有氧时靠呼吸产能，无氧时借发酵或无氧呼吸产能。3.微好氧菌 只能在较低氧分压才能正常生长的微生物。通过呼吸链并以氧为最终受体产能。4.耐氧菌 可在分子氧存在下进行发酵的厌氧微生物。5.厌氧菌 也叫专性厌氧菌，氧分子对其有毒害作用。好氧菌的液体培养：实验室常用的好氧菌培养法1.试管液体培养 装液可多可少。此法通气效果不够理想，适合培养兼性厌氧菌。2.三角瓶浅层液体培养 在静止状态，通气量与装液量和通气塞状态有关。适合兼性厌氧菌培养。3.摇瓶培养 将三角瓶瓶口用8层纱布包扎，利于通气和防杂菌污染，并减少装液量，置于摇床上震荡，达到提高溶氧量的目的。高温灭菌的种类：（一）干热灭菌法（150度170度，12小时）包括火焰灼烧法和烘箱内热空气灭菌法。（二）湿热灭菌法（用100度以上的加压蒸汽灭菌）包括1.常压法 巴氏消毒法、煮沸消毒法（100度下煮沸数分钟）和间歇灭菌法（80100度煮15分钟，过夜，同样的方法再次灭菌，重复3次）。2.加压法 常规加压灭菌法（121度，15-20分钟）和连续加压灭菌法（适用于大型发酵厂）效价：表示抗生素的活力。计量一般用“单位（unit）”表示。1牛津单位青霉素G钠盐相当于0.6微克重量，所以1毫克纯品含1667个单位。诱变剂：（一）碱基置换1.直接引起置换的诱变剂，如亚硝酸、羟胺等。能引起颠换的很少。2.间接引起置换的诱变剂，是一些碱基类似物，如5-溴尿嘧啶。5-氨基尿嘧啶等，它们通过活细胞的代谢活动渗入DNA分子中引起突变。（二）移码突变 吖啶类染料，包括黄素、吖啶橙等。它们和嘌呤、 嘧啶对十分相似，能嵌入俩个相邻的DNA碱基对之间，复制时使链上多或少一个碱基，引发突变。（三）染色体畸变 电离辐射和烷化剂、亚硝酸等。原核基因重组包括 转化、转导、接合。菌株接合过程如下1.Hfr与F-细胞配对；2.通过性菌毛使俩个细胞直接接触，形成接合管，Hfr的染色体在起始字开始复制，到F因子进入部位结束，供体DNA的一条单链通过性菌毛进入受体菌；3.接合中断，F-成为一个部分双倍体，单链DNA合成双链的；4.外源DNA片段与受体菌的染色体发生双交换，从而产生了稳定的结合子。七级分类单元：界、门、纲、目、科、属、种。双名法：属名（必须大写）+种名加词（须小写，包括人名或地名等专有名词）。微生物的分类鉴定：1.经典方法：工作3步聚：获得该微生物的纯培养、测定一系列的鉴定指标、查找权威性的菌种手册。方法有：“API”系统、“Enterotube”系统、”Biologe”全自动和手动系统。2.现代方法：（一）通过核酸分析鉴定微生物遗传型1.DNA碱基比例的测定（是指（G+C）mol%值）。 2.核酸分子杂交法（DNA-DNA、DNA-rRNA和rRNA-rRNA分子间）。3.rRNA寡核苷酸编目分析（分析rRNA寡核苷酸序列同源性程度）。4.微生物全基因组序列测定。（二）细胞化学成分作鉴定的指标1.细胞壁的化学成分。2.全细胞水解液的糖型。3.磷酸类脂成分分析。4.枝菌酸分析。5.醌类分析 6.气相色谱仪分析鉴定。（三）数值分类法（统计分类法）。