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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验七 植物激素作用的空间和浓度效应比较,1. 实验目的,了解,Auxin,和,ABA,的生理效应,了解不同器官对植物激素敏感性的差异,Auxin,生理效应的特异性,Auxin,及人工合成的类似物质如萘乙酸,(NAA),等对植物生长具有调节作用。,1),Auxin,的剂量效应,:,不同浓度的,Auxin,对植物生长的效应不同。一般来说,,低浓度的,Auxin,促进生长,高浓度时则抑制生长。,2),Auxin,的器官效应,:,不同植物器官对,Auxin,的反应不同,通常,根比芽、茎对,Auxin,更,敏感。,ABA,抑制生长和种子萌发。,2. 实验原理,不同浓度的生长素对根部的影响,10,-11,10,-9,10,-7,10,-5,10,-3,10,-1,Auxin浓度(mol/L),不同营养器官对不同浓度IAA的反应,10,-4,根,茎,芽,10,-10,10,-8,ABA对种子萌发的抑制作用,ABA对气孔的影响,生长素实验:,材料:,小麦种子,仪器:,温箱、培养皿、移液管、直尺、滤纸、镊子、铅笔,药品:,10 mg/L NAA,0.1%升汞,ABA实验:,材料:,油菜种子,仪器:,培养皿、滤纸、镊子、移液管、铅笔、烧杯,药品:,ABA 母液( 0.1 mM ABA )、 0.1%升汞,3. 材料、仪器设备与试剂,4. 实验步骤,NAA实验,1),配置浓度梯度:,取洁净大皿5套,编号。在1号皿中加入10 mg/L萘乙酸(NAA) 1ml,加9 ml蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。然后从其中吸取1 ml放入2号皿中,加9 ml蒸馏水混匀后即成为0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀释到4号皿(最后,从第4号培养皿中取出1ml弃去,),第5号皿则加入9ml蒸馏水作对照。,2),排种子:,在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取已萌动的小麦种子10粒,用镊子将其整齐地排在皿直径上(腹沟朝下),盖上皿盖后,放在25的温箱中暗培养2d。,3),测量:,小麦幼芽长度,幼根数目及最长根长。,ABA实验,1),配置浓度梯度:,取洁净小皿5套,编号。在1号培养皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 ml,然后从其中吸取0.2 ml放入2号培养皿中,加1.8 ml蒸馏水混匀后即成为0.01 mM 。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号皿中取0.2 ml弃去),第5号皿中则加入1.8 ml蒸馏水作对照。,2),排种子:,在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取油菜籽20粒,放入皿中后用镊子将种子分布均匀,盖上皿盖后,放在25的温箱中暗培养2d。,3),统计:,发芽率。,NAA实验:,1),配置浓度梯度:,取洁净大皿5套,编号。在1号皿中加入10 mg/L萘乙酸(NAA) 1ml,加9 ml蒸馏水混匀后即成为1 mg/L 萘乙酸溶液。然后从其中吸取1 ml放入2号皿中,加9 ml蒸馏水混匀后即成为0.1 mg/L 萘乙酸溶液。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号培养皿中取出1ml弃去),第5号皿则加入9ml蒸馏水作对照。,2),排种子:,在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取已萌动的小麦种子10粒,用镊子将其整齐地排在皿直径上(腹沟朝下),盖上皿盖后,放在22的温箱中暗培养2d。,3),测量:,小麦幼芽长度,幼根数目及最长根长。,ABA实验:,1),配置浓度梯度:,取洁净小皿5套,编号。在1号培养皿中加入ABA母液(0.1 mM)2 ml,然后从其中吸取0.2 ml放入2号培养皿中,加1.8 ml蒸馏水混匀后即成为0.01 mM 。如此依次稀释到4号皿(最后从第4号皿中取0.2 ml弃去),第5号皿中则加入1.8 ml蒸馏水作对照。,2),排种子:,在各皿中放入一张与皿底大小一致的滤纸,选取油菜籽20粒,放入皿中后用镊子种子分布均匀,盖上皿盖后,放在22的温箱中暗培养2d。,3),统计:发芽率,。,实验步骤,分析: 1)NAA的浓度效应,2)不同器官对NAA的敏感性,培养2d后,NAA浓度( mg/L ),调查,1,0.1,0.01,0.001,0(CK),平均根数 (cm),平均最长根长 (cm),平均芽长 (cm),幼根增或减%,100%,幼芽增或减%,100%,5. 结果与分析,NAA实验(2d后),1)统计发芽率:,种子见绿或见白,胚芽(根)种子半径。,2)作图:,以ABA浓度,负对数,为横座标,以相对发芽率(设对照发芽率为100%)为纵座标,绘出标准曲线,分析不同浓度的脱落酸对种子发芽率的影响。,ABA实验(2d后),洁净的培养皿,选用活力一致的种子,制作浓度梯度时,摇匀后再取,由高到低稀 释,注意润洗移液管,平铺吸水纸,实际试验时务必设置重复,携带调查用直尺,纸笔,调查后洗净培养皿,反置,6. 注意事项,如何准备ABA母液?,7. 思考题,
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