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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,酶 工 程,Enzyme Engineering,课 程 复 习,酶工程,课程复习,考试时间,2011,年,7,月,1,日(星期五),8:30,10:30,地点,考试形式:,闭卷,考试,答疑安排,6,月,30,日上午,9:30,11:30,,化工楼,B613,酶工程,课程复习,考试题型,单项选择题:,20,(,102,),名词解释题:,24,(,83,),每个名词用几句话解释,不能太简单,简答题:,36,(,66,),虽然是,“,简答,”,,但要求适当扩展,复习时参考每章后面的思考题,综合题:,20,反应方程式,分析题:根据所给出的现象,利用相关理论进行解释,酶工程,课程复习,以下章节不列入考试范围,第四章酶的提取与分离纯化,第八章酶定向进化,ppt,第八课人工酶,其他:,ppt,中的补充内容,补充的反应方程式,补充的反应动力学,其他,参见各章节复习提纲,酶工程,课程复习,重点章节,第二章微生物发酵产酶,第五章酶分子修饰,第六章酶、细胞、原生质体固定化,第七章酶非水相催化,第九章酶反应器,第十章酶的应用,难点,非水相酶催化的相关理论,以及对实验现象的解释,酶工程,课程复习,复习提纲,第一章,1),酶催化反应的特点,专一性(绝对,/,相对)、催化效率、反应条件,2),影响催化的因素,底物浓度:米氏方程,抑制剂:不可逆抑制、三种可逆抑制(图),3),六大类,P,酶(,注意避免混淆,),EC,类,.,亚类,.,小类,.,序号,每一类酶的催化特点和区别,4)R,酶,核酸,记几种常见的,R,酶(自我剪切酶、自我剪接酶、,RNA,剪切酶等),酶工程,课程复习,复习提纲,第一章,5),酶活力测定,基本方法和过程,酶活力单位:定义和表示方法,6),酶学和酶工程简史(记几件重大事件),1894,年,高峰让吉:淀粉酶用作消化剂,1913,年,,Michaelis-Menten,方程,1926,年,,J.Sumner,:脲酶的结晶体(首次),1969,年,固定化酶的工业应用:氨基酰化酶拆分,DL-,氨基酸,1982,年,,Cech,:,R,酶的发现,1984,年,,Klibanov,:有机介质中酶催化反应成功(,Science,),酶工程,课程复习,复习提纲,第二章(,重点,),1),酶生物合成的过程与调节(不作考试要求),2),酶生物合成的四大模式(,),同步、延续、中期、滞后,每一种合成模式的特点(对照示意图,要会认图),3),产酶微生物的特点(掌握总的特点即可),4),发酵工艺条件及其控制(,),培养基(主要成分),pH,、温度、溶氧调节,提高酶产量的措施(诱导物、阻遏物、表面活性剂、促进剂),在理解的基础上进行复习,不要死记硬背,酶工程,课程复习,复习提纲,第二章(,重点,),5),酶发酵动力学(,,,难点,),细胞生长动力学(基本方程、带稀释速率的方程),四大合成模式的产酶动力学方程,基质消耗动力学方程,结合,生物反应工程,相关内容复习,6),固定化微生物细胞,/,原生质体发酵产酶,优缺点,工艺条件和控制,可结合第六章一起复习,酶工程,课程复习,复习提纲,第三章,1),真核细胞中酶生物合成的调节(不作考试要求),2),植物细胞培养,植物细胞的特点(与微生物比较),植物细胞培养基的主要成分,工艺过程和控制(结合具体例子复习,如,SOD,的生产),3),动物细胞培养,动物细胞的特点(与微生物比较),动物细胞培养基的主要成分,工艺过程和控制(结合具体例子复习,如,tPA,的生产),本章掌握基本要点即可,酶工程,课程复习,复习提纲,第五章(,重点,),各种修饰方法的定义(,),常见的修饰反应方程式(,),1),金属离子置换修饰(,),认识几种常见的金属酶(,-,淀粉酶、,SOD,、过氧化氢酶等,),修饰过程,2),大分子结合修饰,采用,PEG,(,MPEG,)的修饰:三氯均三嗪反应(,),其他大分子结合修饰(简单了解),大分子结合修饰的作用(,),酶工程,课程复习,复习提纲,第五章(,重点,),3),侧链基团修饰(反应式参见,ppt,)(,,,难点,),氨基修饰(,),记住,:三硝基苯磺酸(,TNBS,)、二硝基氟苯、丹磺酰氯反应式,羧基修饰(,),记住,:碳二亚胺法反应式,巯基修饰(,),记住,:碘乙酸、,N,-,乙基马来酰亚胺(,ppt,)反应式,其他基团修饰(简单了解),胍基:二羰基化合物,分子内交联:同型,/,异型双功能基团化合物,酶工程,课程复习,复习提纲,第五章(,重点,),4),肽链有限水解修饰(,),定义、目的,5),核苷酸链剪切修饰(定义),6),氨基酸置换修饰,定义、方法(化学法、定点突变法),7),核苷酸置换修饰(定义),8),物理修饰,定义、特点,9),酶分子修饰的应用(,),酶学研究、医药、工业生产等,酶工程,课程复习,复习提纲,第六章(,重点,),酶、细胞、原生质体固定化的定义(,),各种固定化方法的,特点,与,比较,(,),1),酶固定化方法(,),吸附法、包埋法(凝胶、半透膜)、离子结合法,共价结合法(反应式不要求掌握),交联法:戊二醛的交联反应式,热处理法(简单了解),2),固定化酶的特点(,),稳定性变化、最适温度、最适,pH,、底物特异性,载体性质对固定化酶最适,pH,的影响(,难点,),酶工程,课程复习,复习提纲,第六章(,重点,),3),固定化酶的应用,工业生产应用(完成反应式),酶传感器,定义、基本结构和原理,葡萄糖氧化酶电极、青霉素酶电极,4),细胞固定化(,),注意比较与酶固定化不同的固定化方法,(,),不同类型细胞的固定化及其特点(了解),微生物、植物、,动物,5),原生质体固定化(,),方法(,注意与酶、细胞的固定化方法比较,),特点(,注意与固定化酶、细胞的比较,),酶工程,课程复习,复习提纲,第七章(,重点,难点,),有机介质中酶催化的基本理论(,,,难点,),抓住,“,酶分子表面的,水,”,、,“,有机溶剂,极性,”,两条主线,学会利用有机相中酶催化基本理论解释实验现象,1),水的影响(,,,难点,),几个重要概念,必须掌握,:,必需水,、,最适水含量,、,水活度,记住:酶需要一层水化层以维持构象,最适含水量、水活度与酶促反应速度的关系,“,水的影响,”,讨论出发点,:,(1),酶的构象,;,(2),反应速度,酶工程,课程复习,复习提纲,第七章(,重点,难点,),2),有机溶剂的影响(,,,难点,),重要概念,必须掌握,:,极性参数,lg,P,值,(定义、大小),有机溶剂影响:,对酶结构、活性的影响:,夺取必需水,溶剂极性判据,、,lg,P,对底物、产物分配的影响:,底物必须穿过酶表面的必需水层!,容易混淆的概念,极性 亲水性,非极性 疏水性,有机溶剂的选择,极性参数,、,lg,P,值判据,对底物、产物分配的影响:,必需水层,是否容易穿过,酶工程,课程复习,复习提纲,第七章(,重点,难点,),3),有机介质中酶的催化特性(,,,难点,),底物专一性随溶剂而改变(,,,难点,),书上的解释:底物与溶剂的,极性、亲疏水性比较,(关键在于底物能否穿过必需水层),对映体选择性,记住变化趋势,:水中选择性较强、疏水性有机相中较差,区域选择性、键选择性,不同溶剂中的区域选择性、键选择性不同,热稳定性(,),书上的解释(,注意与水有关!,),pH,特性(,),pH,记忆(印迹)、有机相缓冲液,酶工程,课程复习,复习提纲,第七章(,重点,难点,),4),有机相中的反应类型(掌握几个重要的反应),水解的逆反应(改变平衡移动的方向),合成反应,酯交换反应,例如生物柴油的生产,醇解、氨解反应(水相中难以进行,因为水的原因),5),有机介质中酶催化反应条件和控制(,),酶的选择、底物的选择(,注意极性问题!,),有机溶剂选择(,注意极性问题!,),水含量,/,活度控制(水活度一般控制在,0.5,0.6,范围内),温度控制,pH,控制(有机相缓冲液调节),酶工程,课程复习,复习提纲,第七章(,重点,难点,),6),有机介质中酶催化的应用(简单掌握),要求:能完成反应方程式(写出产物),手性药物(两种对映体药效差异,,5,种类型),食品添加剂生产,甘油酯水解、阿斯巴甜(天苯肽)合成,生物柴油生产(酯交换),7),其他介质中的酶催化反应(不作考试要求),两个定义要记住:,离子液体,、,超临界流体,酶工程,课程复习,复习提纲,第九章(,重点,),1),六种酶反应器的定义、特点、比较、适用性(,),表,9-1,(书,p 224,225,),搅拌罐式反应器(,STR,),分批式、流加式、连续式,特点:结构简单、混合均匀、对各种底物均适用、剪切力大,填充床式反应器(,PBR,),特点:催化剂负载量高、连续式操作、固定化酶适用、颗粒强度要求高,流化床式反应器(,FBR,),特点:混合较均匀、床层压降小、流速要求(上下限),鼓泡式反应器(,BCR,),三相流化床,与流化床类似,酶工程,课程复习,复习提纲,第九章(,重点,),1),六种酶反应器定义、特点、比较、适用性(续,,,),膜反应器(,MR,),特点:酶,/,细胞与产物分离容易、膜易受污染,中空纤维膜反应器、超滤酶膜反应器,喷射式反应器(,PR,),特点:适用于耐高温游离酶的连续催化反应,2),反应器选择及其依据,参照表,9-1,复习(比较法),3),反应器设计(不作考试要求),4),反应器操作(不作考试要求),酶工程,课程复习,复习提纲,第十章(,重点,内容较琐碎,),内容较多,较琐碎,以,小题目,为主,注意,:,(1),反应方程式;,(2),起催化作用的酶(,),记住,:,一些酶的实际应用(,在理解的基础上记忆,),1),医药方面的应用,疾病诊断,记住几种与疾病诊断相关的酶,肝病相关的酶,癌症相关的酶,糖尿病检测相关的酶,酶工程,课程复习,复习提纲,第十章(,重点,内容较琐碎,),1),医药方面的应用,疾病治疗,记住几种酶在疾病治疗中的作用,蛋白酶,天冬酰胺酶,药物制造,两种酶的应用,青霉素酰化酶,半合成抗生素,-,酪氨酸酶,神经递质,“,多巴,”,的生产,酶工程,课程复习,复习提纲,第十章(,重点,内容较琐碎,),2),食品方面的应用,食品保鲜,除氧,葡萄糖氧化酶,除菌,溶菌酶,食品生产,淀粉酶,制糖、果葡糖浆,果胶酶,果汁生产,食品添加剂,蛋白酶,甜味剂(阿斯巴甜),脂肪酶,食品乳化剂(甘油单酯),酶工程,课程复习,复习提纲,第十章(,重点,内容较琐碎,),3),轻工、化工方面的应用,原料处理,纺织业,-,淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶等,造纸业,木质素酶、纤维素酶等,产品制造,延胡索酸酶,催化延胡索酸与水加成合成,L-,苹果酸,增强产品使用效果,加酶洗涤剂,碱性蛋白酶等,酶工程,课程复习,复习提纲,第十章(,重点,内容较琐碎,),4),环境保护方面应用,有机磷农药检测,胆碱酯酶,废水处理,5),生物技术方面应用,除去细胞壁,不同微生物使用不同的酶去除细胞壁,酶工程,课程复习,祝大家顺利通过考试!,
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