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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级, plate,）,抗药性突变株的筛选,抗药性突变株的应用：,作为菌株的遗传标记,作为生产菌种（结构类似物抗性变异株）,抗生素抗性变异株的筛选：,与营养缺陷突变有关的三类遗传型个体：,营养缺陷型,：,经诱变产生的一些合成能力出现缺陷，而必须在培养基内加入相应有机养分才能正常生长的变异菌株。,如：,lys,-,，,bio,-,野生型,：,自然界分离到的任何微生物，在其发生营养缺陷突变前的原始菌株，为该微生物的野生型。,如：,lys,+,; bio,+,;,原养型,：,指营养缺陷型突变菌株回复突变或重组后产生的菌株，与野生型的表型相同。,4.3.4,营养缺陷型,(,auxotroph,),的筛选,与筛选营养缺陷型突变株有关的三类培养基,基本培养基,（,MM,）,-,：,凡是能,满足野生型菌株营养要求,的,最低成分的,合成培养基,。,完全培养基,（,CM,）,+,：满足一切,营养缺陷,型,菌株,生长的天然或半,合成,培养基。,补充培养基,（,SM,）,x,：在,MM,中有针对性地加入一或几种营养成分以满足相应,营养缺陷,型,菌株,生长的,合成,培养基。,营养缺陷型诱变筛选步骤及方法,auxo,的鉴定,诱变处理,auxo,的浓缩,auxo,的检出,缺陷,型,的浓缩：,抗生素法,原理： 青霉素、制霉菌素等抗生素作用于生长着的微生物细胞，对休止态细胞无作用。,方法：将菌培养在含抗生素的,MM,基中,菌丝过滤法,适用于：,丝状（放线菌、霉菌）,原理：,基本培养基上只有发育成菌丝；,auxo,孢子可通过滤膜，野生型菌丝不能通过。,逐个检出法：,缺陷,型,的检出：,影印平板培养法,夹层培养法,生长谱法,方法简便；,回变和污染不影响,结果,测定物质可为粉末,或纸片,缺陷型,的鉴定,：,测定一般应分两阶段：,第一阶段：测定是哪类物质的缺陷,型；,第二节段：根据第一阶段确定的范围，进一步确定是哪种具体化合物的,缺陷,型；,组合营养物法：,步骤（以氨基酸缺陷型的鉴定为例）：,a.,将多种营养因子编组；,b.,将组合液的纸片放在涂菌的基本培养基上培养；,c.,结果分析；,如： 一组：,1,2 3 4 5,二组：,2,6,7 8 9,三组：,3 7,10,11 12,四组：,4 8 11,13,14,五组：,5 9 12 14,15,营养因子分组编排时注意；,1,）每组内无重复的营,养因子,2,）每组中应包含只出,现一次的因子,3,）每组中其他因子应,分别出现二次,一组：,1,2 3 4 5,二组：,2,6,7 8 9,三组：,3 7,10,11 12,四组：,4 8 11,13,14,五组：,5 9 12 14,15,组合补充培养基法：,将待测的菌点种到各种补充培养基上，逐个分析各菌的,缺陷,类型，或快速分离出所需,缺陷,类型的菌株。,A,B,F,E,D,C,H,G,缺陷型,的应用,作为菌株的遗传标记：进行基因工程、诱变育种、,研究代谢过程时用作亲本标记；,作为生产菌种：,aa,、核苷酸等生产菌种；,作为,aa,、维生素、碱基的测定菌株。,
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