2011大肠杆菌

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,肠杆菌科,（表）,第,9,章 肠杆菌科,一大群居住在人和动物肠道中,生物学性状近似的,G,-,杆菌,多数是肠道的正常菌群,有,44,个菌属，1,70,个以上的菌种,少数为致病菌，是胃肠传染病的最重要病原菌,共同特性,1,.,相似的形态染色,中等大小两端钝圆的,G,-,杆菌,无芽胞,多数有,周鞭毛,大多有,菌毛,少数有荚膜或包膜。,光滑型菌落,有的有,型溶血,在液体培养中呈均匀混浊生长。,2,.,简单的培养条件,S-S,平板,3,.,活泼的生化反应,肠道致病菌与非致病菌,鉴定中重要的生化反应,乳糖发酵试验,肠道非致病菌,（埃希菌,+,）,志贺菌、,沙门菌等,-,4,.,抗原构造复杂,鞭毛抗原（,H）,K,或,Vi,抗原,菌体抗原,(O),5,.,抵抗力,不强,用胆盐、煌绿等可,制备肠道杆菌选择,性培养基来分离肠,道致病菌。,6,.,易变异,溶源性转换,生化反应性变异,通过,引起,耐药性变异,毒力性变异,接合,转导,7,.,致病物质,8,.,传播方式,污染的饮水及食物、经消化道传播。,内毒素是肠道杆菌的主要致病物质，部分肠杆菌产生外毒素致病。,第一节 埃希菌属,Escherichia,是人类和动物肠道中的正常菌群,出生后数小时就进入肠道，并终生伴随,以大肠埃希氏菌（,E.coli）,最为重要,绝大多数为正常菌群，一般不致病,但可条件致病,某些带有致病基因的血清型，引起肠道感染,细菌居住部位改变引起的肠外感染：,尿路感染最常见,少数致病菌株可致病,在分子生物学和基因工程实验中,重要的实验材料和研究对象,大肠杆菌也是重要的实验材料和研究对象,一、生物学性状,（一）形态与染色,无芽胞，大多有周身鞭毛。有普通菌毛与性菌毛，有多糖包膜，,G,-,杆菌。,(图,1)(,图,2),（二）培养特性,兼性厌氧,23,mm、,灰白色,S,型菌落。,有的有,型溶血。能产生大肠菌素。,葡,乳,麦甘蔗 尿素酶 H,2,S,IMViC,动力,-+-+,（三）生化反应,（四）抗原构造,有,O、K、H,三种抗原。,O,抗原,:,为脂多糖，17,0,多种，是分群的基础,K,抗原,:,100,多种，有抗吞噬和补体杀菌作用，与细菌毒力有关。分为,L、A、B,三种。一个菌株一般只含一个型别的,K,抗原。,H,抗原,:,50,多种，与运动有关。,表明大肠杆菌血清型方式是按,OKH,排列,（五）抵抗力,对热的抵抗力较其他肠道杆菌强,胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用,对磺胺类、链霉素、氯霉素、庆大霉素等,敏感，但易耐药。,二、致病性和免疫性,1黏附素,定植因子抗原,、,、,(CFA/),、集聚黏附菌毛,、,（,AAF/,）、束形成,菌毛,(Bfp),、紧密黏附素、,P,菌毛、,Dr,菌毛、,型菌毛、侵袭质粒抗原,(Ipa),蛋白等。,使人类致泻的为,CFA、CFA,，,有较强的,免疫原性,能刺激机体产生特异性抗体。,使细菌能紧密黏着在泌尿道和肠道细胞上。,致病物质,2.,外毒素,除内毒素、荚膜、载铁蛋白、,型分,泌系统外,还能产生多种类型的外毒素：,志贺毒素,和,（,Stx-1,Stx-2,）,耐热肠毒素,a,和,b,（,STa,STb,）,不耐热肠毒素,和,（,LT-,LT-,）,溶血素,A(HlyA),1,肠道外感染：,以,化脓性,和,泌尿系感染为主，,多为内源性感染。,（,1,）败血症：,婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病,、大面积烧伤患者,可侵入血流,引起败血症,占,45%,。,（,2,）新生儿脑膜炎：,1,岁内多见。,（,3,）泌尿系统感染：,尿路致病性大肠埃希菌,（,UPEC,）,所致疾病,2,肠内感染（胃肠炎）：,根据其致病机理不同分：,菌株,作用部位,疾病与症状,致病机制,ETEC,小肠,旅行者腹泻；婴幼儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，腹痛，低热,质粒介导,LT,和,ST,肠毒素，大量分泌液体和电解质；黏附素,EIEC,大肠,水样便，继以少量血便，腹痛，发热,质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞,EPEC,小肠,婴儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，发热,质粒介导,A/E,组织病理变化，伴上皮细胞绒毛结构破坏，导致吸收受损和腹泻,EHEC,大肠,水样便，继以大量出血，剧烈腹痛，低热或无，可并发,HUS,、血小板减少性紫癜,溶原性噬菌体编码,Stx-I,或,Stx-II,，中断蛋白质合成,;A/E,损伤，小肠绒毛结构破坏，导致吸收受损,EAEC,小肠,婴儿腹泻；持续性水样便，呕吐，脱水，低热,质粒介导集聚性粘附上皮细胞，伴绒毛变短，单核细胞浸润和出血，液体吸收下降,致病物质,定植因子,肠毒素,:LT,、,ST,内毒素,K,抗原,各型大肠埃希菌引起胃肠炎的机制,（,1,）肠产毒性大肠杆菌,（,Enterotoxigenic E.coli,ETEC）,所致疾病,5,岁以下婴幼儿腹泻,旅游者腹泻,水样便，恶心、呕吐，腹痛，低热,ETEC,的肠毒素,不耐热肠毒素（,LT,）,耐热肠毒素（,ST,）,STa,：致泻,STb,：与人类疾病无关,LT-,：致泻,LT-,：与人类疾病无关,ETEC,肠毒素：,LT-,LT-,A,：,1,个，,A,1,为毒性部分,B,：,5,个，介导作用,与霍乱肠毒素有共同抗原关系,STa,激活,鸟苷环化酶,使胞内,cGMP,，改变空肠的液体运,转,使肠腔积液而导致腹泻。,ST,与霍乱毒素无共同的抗原关系。,引起,婴幼儿和旅游者腹泻,常为自限性。,（,2,）肠侵袭性大肠杆菌,（,Enteroinvasive E.coli,EIEC）:,致病物质,不产生肠毒素,侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中生长繁殖,所致疾病,主要侵犯较大儿童和成人,腹泻呈脓血便，有里急后重,致病类似菌痢，较少见,（三）肠致病性大肠杆菌,（,Enteropathogenic E.coli,EPEC）,婴幼儿腹泻,致病机制,黏附到小肠上皮细胞，破坏刷状缘，导致邻近微绒毛破坏，,A/E,组织病理损伤，引起严重水样腹泻。,Brett Finlay,University of British Columbia,（四）肠出血性大肠杆菌,（,Enterohemorrhagic E.coli,EHEC）,主要型别,:O157:H7,。,致病因子,:,菌毛和毒素,。,致病机制,:,细菌紧密粘附回肠末端、盲肠和结肠上皮细胞,释放毒素,(,志贺毒素,),裂解,60S,核糖体上的,28S rRNA,中断蛋白质合成,;A/E,损伤,小肠绒毛,结构破坏,导致吸收受损，引起,轻度水泻,、,血性腹泻、出血性结肠炎和溶血性尿毒综合症,(,HUS,),。,可逾万人流行,、死亡率 3%5%。,传染源,:,牛肉、牛奶是,EHEC,感染的重要传染源。,（五）肠集聚型大肠杆菌,（,Enteroaggregative E.coli,EAEC）,婴儿、旅行者持续性水样腹泻,致病机制,黏附肠细胞表面聚集，形成砖状排列。,导致微绒毛变短，单核细胞浸润和出血,产生肠,毒素,三、微生物学检查法,(,一,),标本,:,肠道外感染取中段尿、血液、脓液、脑脊液等,腹泻者取粪便。,(,二,),分离培养与鉴定,1、肠外感染,(1),涂片染色检查,(2),分离培养,观察菌落并涂片染色镜检。,(3),鉴定,初步鉴定,IMViC,试验为“+、+、-、-”，,最后鉴定采用一系列生化反应。,泌尿系统感染还应计数，每毫升尿含菌量超过100,000,时，才有诊断价值。,2、肠内感染,鉴定为大肠杆菌后,再检测肠毒素、,毒力因子和血清型。,(1)ETEC,过去用动物或细胞培养测,LT,或,ST,现用,ELISA,法或基因探针检测。,(2)EIEC,多无动力,乳糖不发酵或迟缓发酵,毒力(,Senery),试验阳性。,(3)EPEC,用特异,O、H,抗血清测定特异血清型,也可用细胞培养或,ELISA,法。,(4)EHEC,O157H7,血清型多数对山梨醇不发酵或迟缓发酵,VT,毒素可用,ELISA,法测定,也可用,PCR,法结合基因探针检测,VT,基因。,(5)EAEC,用液体培养-集聚试验检测粘附性,或用探险针技术测定,EAST,基因。,3、卫生学检测,大肠杆菌越多,表示样品被粪便污染越严重,也表明样品中存在肠道致病菌的可能性越大。,3个大肠菌群/1,L,饮水,100个细菌总数/1,ml,饮水,卫生学指标,大肠菌群指数,每1000,ml,水中大肠菌群数,我国饮用水卫生标准：,细菌总数,每1,ml,或1,g,样品中细菌总数,5个大肠菌群/100,ml,瓶装汽水、果汁等,四、防治原则,疫苗接种预防已在畜牧业中广泛研究,。,预防人类ETEC感染、O157感染的疫苗正在研究,牛肉、牛奶等要,彻底加热消毒,，其中的,EHEC,可能患出血性结肠炎。,尿道插管和膀胱镜检查应,严格无菌操作,。对腹泻病人应进行隔离治疗,。,抗生素治疗,应在药物敏感试验的指导下进行,。,可选用庆大霉素、丁胺卡那霉素等。,肠杆菌科中与医学有关的常见菌属和菌种,埃希菌属 大肠杆菌,志贺菌属 痢疾志贺菌,爱德华菌属 迟钝爱德华菌,沙门菌属 伤寒沙门菌,枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌,克雷伯菌属 肺炎克氏菌,肠杆菌属 产气肠杆菌,哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌,沙雷菌属 粘质沙雷菌,变形杆菌属 普通变形杆菌,摩根菌属 摩氏摩根菌属,普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌,耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌,欧文菌属 草原居民欧文菌,菌属（菌种数）代表种,