果蝇的伴性遗传杂交

,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实验五 果蝇的伴性遗传杂交,一 实验目的,1,掌握果蝇不同性状的决定机制,2,记录交配结果和掌握统计处理方法。,3,正确认识单因子杂交或伴性遗传的正、反交差别。,二 伴性遗传实验原理,位于性染色体上的基因，其传递方式与位于常染色体上的基因不同，它的传递方式与雌雄性别有关。,果蝇的性染色体有,X,、,Y,两种，雌性为,XX,，雄性为,XY,。,基础知识,染色体上的基因控制生物的性状。性染色体上的基因所控制的性状与性别相关联。这种特殊的遗传方式叫伴性遗传（人的色盲，血友病都属于伴性遗传。控制红绿色盲的基因（,b,）是隐性基因，正常色觉基因（,B,）是显性基因。等位基因,B,、,b,在,X,染色体上，因而红绿色盲是,X,染色体上隐性基因的遗传，是随,X,染色体向后传递的。根据基因,B,和基因,b,的显隐性关系，人的正常色觉与红绿色盲的基因型有五种情况。,二、实验原理,红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因（,W,）位于,X,染色体上，且红眼（,W,）对白眼（,w,）为完全显性。当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，无论雌雄均为红眼，,F,2,中红眼,:,白眼,=3:1,，但雌蝇全为红眼，雄蝇中红眼,:,白眼,=1:1,；反交时,F1,中雌蝇为红眼，雄蝇为白眼，,F,2,中红眼,:,白眼,=1:1,，雌蝇和雄蝇中的红眼与白眼的比例均为,1:1,。,正常翅（,Sn,3,）对小翅（,sn,3,）为显性，正常刚毛（,M,）对焦刚毛（,m,）为显性，与红眼（,W,）和白眼（,w,）一样，均位于（,X,）染色体上。利用三点测交的方法只需通过一次杂交和一次测交就能同时确定三个基因在染色体上的位置顺序和基因的相对距离，绘出连锁图。,让白眼小翅焦刚毛蝇与野生型蝇杂交，,F,1,雌蝇是三杂合体：表型为野生型。,F,1,蝇是白眼焦刚毛小翅。,F,1,代的雌雄蝇互交实际上相当于三杂合体雌蝇与三隐性雄蝇的测交。通过对互交后代中各种表型比例的分析，就可进行,w,、,sn,3,和,m,等基因的定位。,正交,白眼雄果蝇 红眼雌果蝇,雌雄都是红眼果蝇 （,F1,）,红眼与白眼的数量比,3:1 (F2),白眼果蝇都是雄性,反交,红眼雄果蝇 白眼雌果蝇,雌果蝇为红眼，雄果蝇为白眼 （,F1,）,雌果蝇红眼与白眼的数量比,1:1 (F2),雄果蝇红眼与白眼的数量比,1:1 (F2),红 眼,白 眼,三、实验材料,果蝇品系：野生型（红眼）：,18,突变型：,22,（白眼,白眼基因在,X,染色体上）,6,(,白眼残翅）,四、实验仪器及用具,双筒解剖镜、麻醉瓶、镊子、解剖针、滴管，吸水纸、培养皿,五、药品和试剂,白糖、琼脂、干酵母、玉米粉、乙醚,六、实验步骤,1,、收集处女蝇：需收集孵化时间在,8,小时以内的雌果蝇作为处女蝇，将雌雄果蝇分开装。,2,、按正交与反交的组合，分别引入,4,5,对果蝇，贴上标签。（两个组合并）,3,、见到一定数量的,F1,幼虫后，去除亲本。,4,、观察,F1,代成蝇性状，记录实验结果。（雌雄，红眼与白眼）,5,、分别从,F1,代正交与反交果蝇中挑,3,5,对，转移到新的培养瓶进行培养。,6,、待,F2,代幼虫出现后，去除,F1,代亲本。,7,、待成蝇出现，隔,1-2,天记录实验结果。,8,、根据获得的实验结果进行数据分析（全班的结果）。,七、注意事项,1,处女蝇的收集。,2,认真观察获得的果蝇后代，做好清晰的实验记录。,果蝇的单因子实验杂交组合,18,x 22,(,正交）,22,x 18,(,反交,),3,把握好每个实验的时间。（去除的亲本果蝇由实验室统一收集，每天定个时间，让大家来实验室进行杂交处理。）,1.,果蝇要适度麻醉，挑蝇,用毛笔，忌用镊子和其他工,具，以免影响果蝇生长繁育,注意事项,2.,挑处女蝇时，,每次只挑,12,小时内羽化成,虫，超过,12,小时的成虫已逐渐,有交配能力,必须一只不留地倒,出处死,才能进行第,二次挑选,3.,刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，,难辨，务必小心区别,4.,使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球,消毒，同时必须凉干才能使用。,5.,每个杂交组合放果蝇,3,4,对，用毛笔把果蝇扫进,试管，试管要平放，待蝇醒后，,方能竖起，避免果蝇粘在培养,基上被闷死，杂交组合配,好后，放回培养箱。,伴性遗传遗传具体的实验流程参照,P14-19,单因子杂交具体的实验流程参照,P8-14,X,2,(,将全班的结果代入,求和,),P,值,P,红眼,白眼,F,1,红眼、,F,2,红眼,红眼,白眼,2,：,1,：,1,正交,白眼,红眼,红眼 白眼,红眼,红眼,白眼,白眼,反交,加酵母粉、放飞亲本,2-14,找处女蝇（雌、雄分开，各,4,对）,F0,一个星期（,7-8,天，,20,号左右）放飞亲本（,4,对果蝇）,F1,出来后开始统计，雌红、雌白、雄红、雄白（统计每,2,天一次，时间坚持至少,8,天）,F1,正反交每个瓶各,4,对放入，观察,F2,一个星期（,7-8,天，,20,号左右）放飞亲本（,4,对果蝇）,F1,出来后开始统计，雌红、雌白、雄红、雄白（统计每,2,天一次，时间坚持至少,8,天）,实验报告要求,1,各小组要有详细的数据记录（包括接种时间、雌雄统计数量、时间等）；,2,表格见,P13,和,P16,3,最后数据，全班统计（分伴性遗传组和单因子杂交组分开统计）；,4,分析至少要涉及以下几个方面：,1,）为什么要选在处女蝇？,2,）杂交的正交和反交,F1,、,F2,表型有何差别，为什么？,3,）杂交结果是否符合预期理论结果？你的实验结果是否对全班实验结果造成很大的不利影响；,下次实验,：（第六周休假）,第七周 实验六 染色体核型分析,考虑到第六周放假，综合创新性实验也从第七周开始。,