实验室基础操作

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验室基础知识,一、玻璃仪器的基本操作,二、天平的规范使用,三、药品的取用和溶液的配制,四、重量分析和,分光光度分析操作技术,五、化验室安全细则,一、玻璃仪器的基本操作,（一）认领仪器,（二）玻璃仪器的洗涤,（三）仪器的干燥,（四）常见玻璃仪器的使用,（一）认领仪器,按仪器单领取和认识基础化学实验中的常用仪器。,试管 试管夹 试管刷 试管架,烧杯 锥型瓶 平底烧瓶 园底烧瓶,量筒 吸量管 滴定,(,台,),管 滴管,抽滤瓶 泥三角 干燥器 研钵,冷凝管 坩埚 坩埚钳 离心机,药,(,括,),勺 广口瓶 漏斗 分液漏斗,布氏漏斗 表面皿 蒸发皿 培养皿,酒精灯 本生灯 直交夹 铁环,蒸馏烧瓶 打孔器 塑料杯,天平,洗瓶 容量瓶 滴定管夹,灭火器,加热器,（二）玻璃仪器的洗涤,1,、振荡水洗,（,1,）烧瓶的振荡 （,2,）试管的振荡,注入少一半水，稍用力振荡把水倒掉，照此连洗数次,2,、内壁附有不易洗掉物质，可用毛刷刷洗,(1),倒废液,(2),注入，一半水,(3),选好毛刷,确定手拿部位,(4),来回柔力刷洗,3,、刷洗后，再用水连续振荡数次，必要时还应用蒸馏水淋洗三次,(1),洗净,(2),未洗净,水均匀分布,(,不挂水珠,),器壁附着水珠,(,挂水珠,),洗净标准,玻璃仪器里如附有不溶于水的碱、碳酸盐、碱性氧化物等可先加盐酸溶解，再用水冲洗。,附有油脂等污物可先用热的纯碱液洗，然后用毛刷刷洗，也可用毛刷蘸少量洗衣粉刷洗。,对于口小、管细的仪器，不便用刷子洗，可用少量王水或重铬酸盐洗液涮洗。,用以上方法清洗不掉的污物可用较多王水或洗液浸泡，然后用水涮洗。,(1),不要未倒废液就注水,(2),不要几支试管一起刷,（三）仪器的干燥,1,、晾干,2,、烤干,仪器外壁擦干后，用小火烤干，同时要不断地摇动使受热均匀。,3,、吹干,4,、烘干,(105,左右控温,),5,、气流烘干,6,、快干,(,有机溶剂法,),先用少量丙酮或酒精使内壁均匀润湿 一遍倒出，再用少量乙醚使内壁均匀润湿一遍后晾干或吹干。丙酮或酒精、 乙醚等应回收。,（四）常见玻璃仪器的使用,1,、量筒和量杯,2,、移液管,移液管使用注意事项：,（,1,）应根据不同的需要选用大小合适的移液管，如取,1.5ml,的溶液，显然选用,2ml,移液管要比选用,5ml,移液管误差小。,（,2,）吸取溶液时要把移液管插入溶液，避免吸入空气而将溶液从上端溢出。,（,3,）移液管从液体中移出后必须用滤纸将管的外壁擦干，再行放液。,（,4,）不可用移液管直接从瓶中移取溶剂或溶液，剩余溶剂或溶液不可倒回贮液瓶，应作废弃物处理。,3,、滴定管,操作步骤：,（,1,）洗涤,（,2,）涂凡士林,（,3,）检漏,（,4,）装入操作液,（,5,）滴定管排气,（,6,）滴定操作,碱式滴定管排气示意图,滴定,装,置,滴定管分碱式和酸式滴定管两大类。 通常放在滴定管底下用来装被滴定物的容器都是锥形瓶。而锥形瓶中一般都装未知浓度的待滴定液。滴定管中则装入准备制备的已知浓度的准备溶液。,滴 定,左图为操作滴定管活栓的手法。通常要以手轻握活栓，再用姆指和中指或食指来转动活栓，控制下滴液体的流速。 右图为当滴定时，位于滴定管口的悬垂溶液也应引入锥形瓶中的待滴定液内。而在滴定开始时管口的悬垂液滴也要以同样的方法移走。确保由滴定管上读取的滴定的实际用量准确。,滴定管读数：,手拿管上部无刻度处，使滴定管保持垂直。 无色或浅色溶液，读弯月面下缘最低点的数值，且眼睛与此最低点在同一水平上，如图,若溶液颜色太深,(,如,KMnO4,溶液,),，可读液面两侧的最高点。常量滴定管读数必须出小数点后第二位。,滴定操作中应注意以下几点：, 摇瓶时，应使溶液向同一方向作圆周运动（左右旋转均可），但勿使瓶口接触滴定管，溶液也不得溅出。, 滴定时，左手不能离开活塞任其自流。, 注意观察溶液落点周围溶液颜色的变化。,开始时，应边摇边滴，滴定速度可稍快，但不能流成,“,水线,”,。接近终点时，应改为加一滴，摇几下。最后，每加半滴溶液就摇动锥形瓶，直至溶液出现明显的颜色变化。,加半滴溶液的方法如下：微微转动活塞，使溶液悬挂在出口管嘴上，形成半滴，用锥形瓶内壁将其沾落，再用洗瓶以少量蒸馏水吹洗瓶壁。用碱管滴加半滴溶液时，应先松开拇指和食指，将悬挂的半滴溶液沾在锥形瓶内壁上，再放开无名指与小指。这样可以避免出口管尖出现气泡，使读数造成误差。,每次滴定最好都从,0.00mL,开始，减小误差。,(6),滴定结束后，滴定管内剩余的溶液应弃去，不得将其倒回原瓶，以免沾污整瓶操作溶液。,装满或放出溶液后，必须等,1,2,分钟，使附着在内壁的溶液流下来，再进行读数。如果放出溶液的速度较慢（例如，滴定到最后阶段，每次只加半滴溶液时），等,0.5,1,分钟即可读数。每次读数前要检查一下管壁是否挂水珠，管尖是否有气泡。,(7),必须读到小数点后第二位，即要求估计到,0.01mL,。估计读数时，应该考虑到刻度线本身的宽度。,(8),读取初读数前，应将管尖悬挂着的溶液除去。滴定至终点时应立即关闭活塞，注意不要使滴定管中的溶液有稍许流出，否则终读数便包括流出的半滴液。因此，在读取终读数前，应注意检查出口管尖是否悬挂溶液，如有，则此次读数不能取用。,4,、容量瓶,操作步骤：,（,1,）检漏,（,2,）配制溶液,容量瓶的使用,容量瓶使用前应检查容量瓶的瓶塞是否漏水，合格的瓶塞应系在瓶颈上，不得任意更换。容量瓶刻度以上的内壁挂有水珠会影响准确度，所以应该洗得很干净。称量的任何固体物质必须先在小烧杯中溶解或加热溶解，冷却至室温后才能转移到容量瓶中。容量瓶绝不应加热或烘干。容量瓶定容完再翻转摇匀，若翻转摇匀后定容，会因加的水或溶剂过多，导致溶液浓度偏小。,二、天平的规范使用,（一）天平室规章制度,（二）托盘天平,（三）电子分析天平,（一）天平室规章制度,1,、操作者工作时穿好工作服，班前班后整理好岗位卫生，保持天平、操作台、地面及门窗洁净。,2,、操作者应熟悉分析天平的原理、构造和正确的使用方法，避免因使用不当和保管不妥而影响称量准确度或损伤天平某些部件。,3,、所用分析天平，每年由市计量部门定期校正计量一次。任何人不得随意拆装其部件或改变其灵敏度。,4,、与本室无关人员不得随便入内，更不得随意操作使用天平。,（二）托盘天平,用于精密度要求不高的称量。所附砝码是天平上称量时衡定物质质量的标准。,使用注意事项：,1,、称量前天平要放平稳，游码放在刻度尺的零处，调节天平左右的平衡螺母，使天平平衡。,2,、称量时把称量物放在左盘，砝码放在右盘。砝码要用镊子夹取，先加质量大的砝码，再加质量小的砝码。,3,、称量干燥的固体药品应放在纸上称量。,4,、易潮解、有腐蚀性的药品（如氢氧化钠），必须放在玻璃器皿里称量。,称量完毕后，应把砝码放回砝码盒中，把游码移回零处。,（三）电子分析天平,用于精密度要求高的称量使用电子分析天平。被称物重量不得超过天平最大载荷。若被称物较重，应先在粗天平上试称。,1,、每次称量前检查天平位置是否水平，零点偏差多少。,2,、天平机构有任何损坏或不正常情况时，在未消除故障以前应停止使用。,3,、被称物的温度必须和天平室的室温一致。,4,、被称物须盛在干净的容器中称量，具有腐蚀性的蒸气或吸湿性的物质必须放在密闭的容器内称量。,5,、被称物要放在天平盘的中央。,6,、天平的前门不得随意打开。称量过程中只能打开左右两个边门。,7,、使用完毕后清洁天平，断开电源，再用罩把天平罩好，必须登记使用情况后方可离开天平室。,三、药品的取用和溶液的配制,（一）固体试剂的取用规则,（二）液体试剂的取用规则,（三）溶液的配制,（四）溶液配置的注意事项,（五）溶液储存时可能的变质原因,（一）固体试剂的取用规则,1,、要用干净的药勺取用。用过的药勺必须洗净和擦干后才能再使用，以免沾污试剂。,2,、取用试剂后立即盖紧瓶盖。,3,、称量固体试剂时，必须注意不要取多，取多的药品，不能倒回原瓶。,（二）液体试剂的取用规则,1,、从滴瓶中取液体试剂时，要用滴瓶中的滴管，滴管绝不能伸入所用的容器中，以免接触器壁而沾污药品。从试剂瓶中取少量液体试剂时，则需要专用滴管。装有药品的滴管不得横置或滴管口向上斜放，以免液体滴入滴管的胶皮帽中。,2,、使用胶头滴管,“,四不能,”,：不能伸入和接触容器内壁，不能平放和倒拿，不能随意放置，未清洗的滴管不能吸取别的试剂。,3,、配制一定物质的量溶液时，溶解或稀释后溶液应冷却再移入容量瓶。,4,、配制一定物质的量浓度溶液，要引流时，玻璃棒的上面不能靠在容量瓶口，而下端则应靠在容量瓶刻度线下的内壁上（即,下靠上不靠，下端靠线下,）。,5,、容量瓶不能长期存放溶液，更不能作为反应容器，也不能互用。（一般用于配制标准溶液的容量瓶最好专用）,（三）溶液的配制,1,、配制溶质质量分数一定的溶液,计算：,算出所需溶质和水的质量。把水的质量换,算成体积。如溶质是液体时，要算出液体,的体积。,称量：,用天平称取固体溶质的质量；用量筒量,取所需液体、水的体积。,溶解：,将固体或液体溶质倒入烧杯里,加入所需的,水,用玻璃棒搅拌使溶质完全溶解,.,2,、配制一定物质的量浓度的溶液,计算：,算出固体溶质的质量或液体溶质的体积 。,称量：,用托盘天平称取固体溶质质量，用量筒量取所需,液体溶质的体积。,溶解：,将固体或液体溶质倒入烧杯中，加入适量的蒸馏水,用玻璃棒搅拌使之溶解，冷却到室温后，将溶液,引流注入容量瓶里。,转移：,用适量蒸馏水将烧杯及玻璃棒洗涤,2,3,次，将,洗涤液注入容量瓶，振荡，使溶液混合均匀。,定容：,继续往容量瓶中小心地加水，直到液面接近刻度,2,3cm,处，改用胶头滴管加水，使溶液凹面最低处,恰好与刻 度相切。把容量瓶盖紧，再振荡摇匀。,（四）溶液配置的注意事项,1,、分析实验所用的溶液应用,GB6682,中规定的三级水配制，容器应用纯化水洗涤三次。特殊要求的溶液应事先作空白值检验。,2,、溶液要用带塞的试剂瓶盛装，见光易分解的溶液要装于棕色瓶中，挥发性试剂瓶塞要严密，见空气易变质及放出腐蚀性气体的溶液也要盖紧，必要时用蜡封住。浓碱液应用塑料瓶盛装。,3,、每瓶试剂必须有标明名称、规格、浓度和配制日期的标签。,4,、配制硫酸、磷酸、硝酸、盐酸等溶液，都必须将酸倒入水中。配制时不可在试剂瓶中进行配制。,5,、用有机溶剂配制溶液时，有时有机物溶解较慢，应不时搅拌，可以在热水浴中温热搅拌，不可直接加热，必须避免火源。,6,、不可用手接触带腐蚀性或剧毒的溶液。剧毒废液必须经解毒处理，不可直接倒入下水道,7,、一般溶液保存时间不可超过,6,个月，如果试剂发生浑浊变质，就必须废弃不得使用。,（五）溶液储存时可能的变质原因,1,、玻璃与水和试剂作用后多少会被侵蚀（特别是碱性溶液），使溶液中含有钠、钙、硅酸盐等杂质。某些离子容易被吸附于玻璃表面，这对于低浓度的离子标准液更不可忽视。故低,1mg/ml,的离子溶液不适合长期保存。,2,、由于试剂瓶密封不好，空气中的二氧化碳、氧气、氨或酸雾侵入使溶液发生变质。,3,、某些溶液见光分解（硝酸银、汞盐），有些溶液放置时间长了会水解（铋盐、锑盐），有些溶液会受微生物的分解。,4,、含有易挥发的组分，使其浓度降低。,四、实验室操作技术,（一）重量分析操作技术,（二）分光光度分析操作技术,（一）重量分析操作技术,1,、过滤,2,、干燥,3,、称量,1,、过滤,过滤是利用滤纸、滤膜或滤器将溶液中的固态物质（悬浮物和沉淀等）进行有效分离的分析操作。,常用的仪器：漏斗、滤纸和滤膜等,（,1,）滤纸的选择：定量滤纸（无灰滤纸，,0.08mg,）,快速,白,非晶形沉淀,中速,蓝,中等粒度沉淀,慢速,红,晶形沉淀,（,2,）漏斗的选择：,锥体角度应为,60,颈的直径一般应为,3,5mm,颈长为,15,20 cm,颈口处磨成,45,角,滤纸的上缘应低于漏斗上沿,0.5,1cm,（,3,）滤纸的折叠：,四折法 ，,三层一边外层撕下一角,备用,（,4,）滤纸的安放：,三层,的一边放在漏斗出口,短,的一边，,做水柱,2,、干燥,干燥是指除去样品，沉淀或试剂中所含水分或溶剂过程，常用烘烤，冷冻，化学和吸附等方法。,必须根据被干燥物质的物理性质，热稳定性以及与水结合的形式选择干燥方法。,常用的干燥剂和干燥设备,干燥剂：无水氯化钙、无水硫酸钠、无水硫酸钙、浓硫酸、硅胶、活性炭,干燥设备：电烘箱、红外干燥箱、热浴,温度：一般都在,100120,之间,3,、称量,称量是重量法的关键，在确定了天平精度的条件下，提高分析准确的关键是选择合格的称样量和使用正确的称量方法。,称样量的选择：选择适宜的称样量是保证重量分析的重要条件之一，例如一般分析天平的称量误差为,0.2mg,（万分之一天平），或者,0.02mg,（十万分之一天平），为使称量相对误差小于,0.1%,，必须有适当的称样量。,称量操作中的误差主要来自,被称物性质变化,环境因素变动,天平和砝码影响,操作误差,表面容易吸附水分,物质本身挥发性强,（二）分光光度分析操作技术,分光光度法是基于物质分子对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。,按物质吸收光的波长不同，分光光度法可分为可见分光光度法、紫外分光光度法及红外分光光度法（又称红外光谱法）。,分光光度法主要用于测量样品中,1%0.001%,有效量成分，其特点：灵敏度高，准确定好，使用范围广，几乎所有的无机离子和有机化合物都可以采用此方法。,紫外,可见分光光度计,一、目视比色法,用眼睛比较溶液颜色的深浅以确定物质浓度的方法称为目视比色法。,特点：设备简单、操作简便；无需单色光；准确度不高。,二、分光光度计,（,一,）,基本组成,光源,单色器,样品室,检测器,显示器,1.,光源,在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。,可见光区：,钨灯,作为光源，其辐射波长范围在,320,2500 nm,。,紫外区：,氢、氘灯,。发射,185,400 nm,的连续光谱。,2.,单色器,又称波长控制器，其作用是,将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。,包括,狭缝,、,色散元件,和,准光装置,。,色散元件,的作用是,将复合光分解成单色光,，有,棱镜或光栅,两种。,3.,样品室,样品室放置各种类型的吸收池（,比色皿,）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。,在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。,4.,检测器,利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。,5.,结果显示记录系统,检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理,参比溶液的选择,1,、在测定波段，参比液本身无明显吸收。,2,、如果全程序试剂空白无色透明，也可做参 比液。,3,、显色剂无色，而试样有色，则采用不加显色剂的试样溶液作参比。,4,、当显色剂与试样都有颜色时，可取一份试液加入适当的掩蔽剂，使待测组分被掩蔽而不显色，然后以之作参比液。,五、化验室安全细则,一切劳动工作以人为本。保证化验人员的安全与健康、防止污染环境、保证化验室工作安全而有效的进行是化验室管理工作的重要内容。化验室安全包括防火、防爆、防毒、防腐蚀、电气安全和防止污染环境等方面。,1,、防止中毒、化学灼伤、割伤,一切药品和试剂要有与其内容物相符的标签。,严禁试剂入口以及用鼻子直接接近瓶口进行鉴别。鉴别时应将试剂瓶远离鼻子，用手轻轻煽动，稍闻即止。,取用带腐蚀性的药品，如强酸、强碱、浓氨水、冰乙酸等，建议戴上防护手套。拿比较重的瓶子时，应一手托住底部，一手拿住瓶口。,处理有毒有害的气体、有挥发性的药品及有毒有机试剂时（如氮氧化物、溴、氯、硫化物、汞、砷化物等），应在通风橱内进行。,溶解氢氧化钠、氢氧化钾等药品时，因其会大量放热，故必须用耐热容器处理。浓酸浓碱必须在各自稀释后再中和。,2,、防火、防爆,操作易燃物时必须远离火源，瓶塞打不开时，切忌用火加热或用力敲打。倾倒易燃液体时还必须谨防静电。,加热可燃易燃物时，必须在水浴或者严密的电热板上缓慢进行，严禁用明火或电炉加热。,蒸馏液体时，如果需要补充液体时，应先等其冷却后再补充。蒸馏易燃物时应先通水再通电加热。,烘箱、电炉周围严禁放有易燃物或带挥发性的易燃液体。,3,、灭 火,发生火灾时不得大呼小叫、到处乱跑，应及时灭火。发生大规模火灾时，首先应快速从安全通道离开失火场所，安全后拨打,119,，不可单独冲入火灾现场灭火。发生局部火灾时，应立即切断电源，选择使用合适的灭火器灭火。身上的衣物着火时不可跑动。应迅速脱去衣物，或在地上打滚扑灭。灭火器不可对人脸。,4,、常用有毒有害化学物质的处理,无机酸类：将废酸慢慢倒入过量的含碳酸钠或氢氧化钙的水溶液中或用废碱相互中和。中和后用大量水冲洗。,氢氧化钠、氨水：用盐酸水溶液中和后，再用大量水冲洗。,含氰废液：加入氢氧化钠使,PH,大于,10,，加入过量的,3%,的高锰酸钾溶液，使,CN-,氧化分解。,含氟废液：加入石灰使生成氟化钙沉淀。,5,、常见化学试剂中毒应急处理,二硫化碳中毒的应急处理方法：,吞食时，给患者洗胃或用催吐剂催吐。将患者躺下并加保暖，保持通风良好。,有机磷中毒的应急处理方法：,使患者确保呼吸道畅通，并进行人工呼吸。万一吞食时，用催吐剂催吐，或用自来水洗胃等方法将其除去。沾在皮肤、头发或指甲等地方的有机磷，要彻底把它洗去。,三硝基甲苯中毒的应急处理方法：,沾到皮肤时，用肥皂和水，尽量把它彻底洗去。若吞食时，可进行洗胃或用催吐剂吐，将其大部份排除之后，才服泻药。,苯胺中毒的应急处理方法：,如果苯胺沾到皮肤时，用肥皂和水把其洗擦除净。若吞食时，用催吐剂、洗胃及服泻药等方法把它除去。,氯代烃中毒的应急处理方法：,把患者转移，远离药品处，并使其躺下保暖。若吞食时，用自来水充分洗胃，然后饮服于,200,毫升水中溶解,30,克硫酸钠制成的溶液。不要喝咖啡之类兴奋剂。吸入氯仿时，把患者的头降低，使其伸出舌头，以确保呼吸道畅通。,草酸中毒的应急处理方法：,立刻饮服下列溶液，使其生成草酸钙沉淀：,1,、在,200,毫升水中，溶解,30,克丁酸钙或其它钙盐制成的溶液,2,、大量牛奶，可饮食用牛奶打溶的蛋白作镇痛剂。,乙醛、丙酮中毒的应急处理方法：,用洗胃或服催吐剂等方法，除去吞食的药品。随后服下泻药。呼吸困难时要输氧。丙酮不会引起严重中毒。,强酸（致命剂量,1,毫升）,吞服时立刻饮服,200,毫升氧化镁悬浮液，或者氢氧化铝凝胶、牛奶及水等东西，迅速把毒物稀释。然后至少再食,10,多个打溶的蛋作缓和剂。因碳酸钠或碳酸氢钠会产生二氧化碳气体，故不要使用。,进入眼睛时撑开眼睑，用水洗涤,15,分钟。,沾着皮肤时用大量水冲洗,15,分钟。如果立刻进行中和，因会产生中和热，而有进一步扩大伤害的危险。因此，经充分水洗后再用碳酸氢钠之类稀碱液或肥皂液进行洗涤。但是当沾着草酸时，若用碳酸氢钠中和，因为由碱而产生很强的刺激物，故不宜使用。也可以用镁盐和钙盐中和。,甲醛中毒的应急处理方法：,吞食时，立刻饮食大量牛奶，接着用洗胃或催吐等方法，使吞食的甲醛排出体外，然后服下泻药。有可能的话，可服用,1,的碳酸铵水溶液。,谢谢！,