免疫学PPT课件细胞因子

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,细胞因子,（Cytokine,CK）,本章教学内容,第一节细胞因子的概述,第二节细胞因子的结构及其受体,第三节细胞因子的生物学活性,第四节细胞因子的临床意义,本章教学目的：,1、掌握细胞因子的概念，细胞因子的共同特,点及主要生物学活性；,2、熟悉细胞因子的分类；,3、了解细胞因子受体的特点及其分类,4、了解细胞因子的临床意义,教学重点及难点,1,、细胞因子的概念，细胞因子的共同特点；,2,、细胞因子的分类；,3,、细胞因子的主要生物学活性,第一节细胞因子的概述,一、细胞因子的概念,二、细胞因子的种类,三、细胞因子的共同特征,一、,细胞因子,（Cytokines）,的概念,由机体的,免疫细胞,和,非免疫细胞,合成和分泌的,小分子蛋白,（或糖蛋白），它既是,免疫调节分子,，又是,效应分子,。它与,相应受体,结合而作用于靶细胞。,根据来源，细胞因子包括：,淋巴细胞,产生的,淋巴因子；,单核-巨噬细胞,产生的,单核因子；,非淋巴细胞、非单核巨噬细胞产生的因子,：主要由骨髓、胸腺基质细胞、血管内皮细胞等产生。,第一节细胞因子的概述,淋巴因子和单核因子,目前已知,白细胞介素,（interleukin，IL）、,干扰素,（interferon，IFN）、,集落刺激因子,（colony stimulating factor，CSF）、,肿瘤坏死因子,（tumor necrosis factor，TNF）、,转化生长因子,（transforming growth factor，TGF-）,等均是免疫细胞产生的细胞因子，它们在免疫系统中起着非常重要的调控作用，在异常情况下也会导致病理反应。,二、细胞因子的种类,（一）,白细胞介素,（interleukin，IL）,将介导白细胞间相互作用的一些细胞因子命名为,白细胞介素,（IL）。,许多IL不仅介导白细胞相互作用，,还参与其它细胞的相互作用,，如：造血干细胞、血管内皮细胞、纤维母细胞、神经细胞、成骨和破骨细胞的相互作用。,目前已发现IL-1、IL-2、IL-333等,33种,以上。,白细胞介素的主要作用是,：,促使,T,和,B,细胞增殖和分化,；,增强,NK,细胞以及单核细胞的杀伤活性,；,刺激造血细胞参与炎症反应,；,诱导抗体的产生,；,促进血小板的生成等,。,IL-2：,目前在临床广泛使用。主要Th1细胞分泌，133aa多肽，为免疫系统最重要分子之一。在帮助免疫系统与疾病的斗争中被广泛使用并起重要作用。,生物学效应：,促进T、B细胞分化成熟，维持T细胞活性；,诱导和增强细胞毒活性: 例如,可促进NK细胞活性并诱导成为杀伤肿瘤新型细胞LAK细胞; 诱导CD8,+,T细胞,CTL；,促进抗体生成，促进干扰素、肿瘤坏死因子的产生和释放。,具显著免疫增强作用，故具很好的抗病毒、抗肿瘤作用和巨大临床应用潜力。,（二）,集落刺激因子,（colony stimulating,factor，CSF）,指,可刺激,多能,造血干细胞,和,不同发育分化阶段的造血祖细胞,增殖分化,，,在,半固体培养基中,形成细胞集落的细胞因子，被称为,集落刺激因子,（CSF）。,按其作用范围分为,：,粒细胞,CSF（G-CSF），,巨噬细胞,CSF（M-CSF），,粒细胞和巨噬细胞,CSF（GM-CSF）,和,多集落刺激因子,（multi-CSF，IL-3）,等,。,广义上，凡是刺激造血细胞的细胞因子都可以统称为,CSF，,如刺激红细胞的,红细胞生成素,(erythro-poietin, Epo)，,刺激造血干细胞的,干细胞因子,(stem cell factor, SCF)，,刺激胚胎干细胞的,白血病抑制因子,(leukemia inhibitory factor, LIF),临床应用,：,肿瘤化疗引起的血细胞减少；,骨髓移植后重建造血功能；,再生障碍性贫血、慢性肾衰、肿瘤及失血引起的贫血；,艾滋病、骨髓发育异常综合征,。,（三）,干扰素,（interferon，IFN）,IFN是最先发现的细胞因子,。,早在1957年，Issacs等人发现病毒感染的细胞产生一种因子，可抵抗病毒的感染和干扰病毒的复制，因而命名为干扰素,。,根据其来源和结构，可将IFN分为,IFN-,、,IFN-,和,IFN-,。,IFN-属于IFN-家族，其结构和大小与其它IFN-稍有差异，但抗原性有较大的不同。,IFN-,/,：,型干扰素。由浆细胞样树突状细胞及,病毒感染细胞产生。,抗病毒和抗肿瘤,为主。,IFN-,：,型干扰素。主要由T细胞和NK细胞产生。,免疫调节,为主。,名称,氨基酸,受体,主要产生细胞,主要功能,残基数,IFN-,166,CD118,淋巴细胞、,抗病毒、 免疫调节促进,单核巨噬细胞,MHCI类和II类分子表达,IFN-,166,CD118,成纤维细胞,抗病毒、抗细胞增殖免疫,调节促进MHCI类和II类分,子表达,IFN-,143,CD119,活化T细胞、,激活巨噬细胞、抗病毒，,NK细胞,促进MHC分子表达和提呈,，抑制Th2细胞,干 扰 素,干扰素型别（亚型）,适应症,IFNa1b,IFNa2a,IFNa2b,IFN,IFN,病毒性疾病,病毒性疾病，肿瘤,病毒性疾病，肿瘤,多发性硬化症,类风湿性关节炎,目前临床应用干扰 素,干扰素,生物学效应,：,第一个用于临床的基因工程产品，目前,IFN-,、IFN-,和IFN-,皆有基因工程产物，主要用于抗病毒、抗肿瘤方面治疗,。,抗病毒作用: 型干扰素；,抗肿瘤作用: /II型干扰素；,诱导细胞因子产生；,免疫调节作用。,（四）,肿瘤坏死因子,（tumor necrosis factor, TNF）,TNF,是一类能直接造成肿瘤细胞死亡的细胞因子。,分为两种,：,TNF-,：,由,细菌脂多糖,活化的,单核巨噬细胞,产生，,可引起肿瘤组织出血坏死.,又称,恶液质素,(cachectin)；,TNF-,：,由,抗原或丝裂原,刺激的,T细胞,产生，,具有,肿瘤杀伤及免疫调节功能。,又称,淋巴毒素,(lymphotoxin)。,生物学活性,：,抗肿瘤及抑瘤作用,:TNF抗瘤机制尚不完全清楚，可能包括,通过,TNF受体介导,的直接效应；,诱导组织内凝血活性，导致病理性凝血，,阻断进入瘤区的血流,；,诱导,肿瘤局部的炎症反应,及,血管改变,；,介导,多种细胞的杀瘤性效应,，如自然细胞毒细胞（NC）、杀瘤性单核巨噬细胞等。,抗病毒作用,:对,RNA病毒,和,DNA病毒,均有抑制作用。,免疫调节,:能够增强T细胞产生以,IL-2,为主的淋巴因子，提高IL-2R的表达水平，从而促进T细胞的增殖；还能促进B细胞增殖、分化和产生抗体。,参与炎症和发热发生,:有,中性粒细胞,和,单核细胞趋化作用,，并使之活化和脱颗粒，释放炎症介质。,TNF是迄今为止所发现的抗肿瘤活性最强的细胞因子,之一。,1984年TNF-基因工程产品开始试用于临床。大量临,床试验表明，,天然的TNF-全身用药不良作用严重,，,临床应用受到极大限制。为此，近二十年来，国内外,众多学者进行了,优化TNF-抗肿瘤作用,的研究，包括,局部用药、联合用药、TNF-变构体,及,基因疗法,等，,使之抗肿瘤作用增强、毒副作用减轻，呈现出较好的,临床应用前景。,（五）,生长因子,（Growth factor,GF）,：,主要包括转化生长因子,（ TGF-） 、,表皮生长,因子（EGF） 、血管内皮生长因子（VEGF） 、神经,生长因子（NGF）等。,生物学作用,：,炎症、组织修复,和,胚胎发育,等方面,。,抑制免疫活性细胞的增殖；,调节细胞表型；,抑制淋巴细胞分化；,抑制细胞因子产生；,与原癌基因表达有关。,临床应用：,在,治疗伤口愈合,、,促进软骨修复,及,通过免疫抑制剂治疗自身免疫性疾病,方面具潜在前景。,（六）,趋化性细胞因子,（chemokine）,又称,趋化性细胞因子,（chemoattractant cytokine）,由,白细胞,与,造血微环境中的基质细胞,分泌，可结合在,内皮细胞,的表面，具有对,中性粒细胞,、,单核细胞,、,淋巴细胞,、,嗜酸性粒细胞,和,嗜碱性粒细,胞的,趋化和激活活性,。,已发现,50余个,成员。,该家族成员依据其分子,N端半胱氨酸的数目及其间隔,，可分为,CC、CXC（半胱氨酸任一氨基酸半胱氨酸）、C、CX3C,四个亚家族。,如：CXC亚家族（如IL-8）主要对中性粒细胞具有趋化和激活作用；,三、 细胞因子的共同特征,天然细胞因子是由细胞产生的, 正常的静息或休止状态的细胞,必须经过激活后，才能合成和分泌细胞因子,，细胞被,激活后6-8h出现,，,24-72小时达到最高,。,绝大多数CK为,低分子量（1530KD）糖蛋白,，,多数,以,单体,、少数以双体、个别以三体形式存在；,常以,旁分泌,或,自分泌形式作用,于邻近细胞或CK产生细胞；,生理状态下，绝大多数CK只在,局部起作用,，,少数,CK可通过内分泌的形式,作用于,远处细胞,；,多种细胞都有产生CK的能力，如活化的免疫细胞、基质细胞和某些肿瘤细胞等；,CK的功能,没有特异性,，也,不受MHC的限制,；,CK作用的,多向性,：即一种细胞可产生多种CK，而一种CK又可由多种细胞产生；,功能的,高效性,：即在pmol/L的水平就能发挥作用；,多效性,：即一种CK可作用于多种细胞，并产生多种生物学效应；,重叠性,：即多种CK可对同一细胞产生相同或相似的效应,A：CK的产生和功能概况,B：CK发挥功能的模式,CK功能,的,多效,性,、,重,叠性,、,协同性,和,拮抗,性,作用,示意图,抗原于,单核细胞,作用后导致,TH细胞活化,并产生,细胞因子,，从而在整个免疫应答的不同过程中发挥相应的调节作用,第二节细胞因子的结构及其受体,一、细胞因子的结构,二、细胞因子的受体,第二节细胞因子的结构及其受体,一、 细胞因子的结构,不同细胞因子之间在结构上有很大差异，多数细胞因子为,小分子多肽,，分子量,不超过60KD,，多由,100个左右的氨基酸,组成。不同细胞因子之间无明显的氨基酸序列同源性。,多数细胞因子以,单体形式存在,，少数因子如IL-5、IL-12、M-CSF、TGF-等以双体形式存在。,绝大,多数,因子,带有糖基,，糖基多与细胞因子的生物活性无关，可能起延长细胞因子体内半衰期的作用。,IL-8,二、细胞因子的受体,细胞因子都是通过与,靶细胞表面,高亲合力的特异性,受体结合,后才能发挥其生物学效应的。,细胞因子受体与其他膜表面受体一样，均由3个功能区组成，即,膜外区,（细胞因子结合区）、,跨膜区,（疏水性氨基酸富有区）和,膜内区,（信号传导区）。,细胞因子受体存在有单链、双链或三链不同形式的结构。,研究发现，有些细胞因子受体,共同使用一条多肽链,，如IL-3、IL-5和GM-CSF共同使用同一链，IL-2、IL-4和IL-7共同使用同一链。由于,细胞因子在受体水平存在相似性,，因而,会使用共同的信号传导途径，发挥类似的生物学效应,。,(信号传导和转录因子),(家族胞浆酪氨酸激酶),根据细胞因子受体膜外区的,氨基酸序列,，可将其主要,分为以下受体家族：,1,I型,细胞因子受体家族,该家族胞外区约200个氨基酸具有同源性，有,4个保守,半胱氨酸,及,色氨酸-丝氨酸-任一氨基酸-色氨酸-丝氨酸,（WSXWS）结构域，包括IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、,IL-6、IL-7、IL-9、IL-11、IL-12、G-CSF、GM-CSF,等的受体。,2II型细胞因子受体家族,该家族胞外段,含4个保守的半胱氨酸,，但无WSXWS结,构域，包括所有类型IFN和IL-10等的受体。,3,免疫球蛋白,超家族,该家族胞外区含,免疫球蛋白分子的结构域,，包括IL-1、,M-CSF、SCF等的受体。,4TNF受体家族,（,I I I型细胞因子受体家族,）,该家族胞外区含若干由,40个氨基酸组成的富含半胱氨,酸的结构域,，包括TNF-,R、TNF-,R以及其他重要的,膜分子（如CD40、CD27及死亡受体Fas、DR4、DR5,等）。,5趋化因子受体家族,该家族成员分子含,7个跨膜结构域,，包括CCR111、,CXCR15, CR1与CX3CR1。多数趋化因子受体可与,若干不同的趋化因子结合。,细胞因子受体的公有亚基,第三节 CK的生物学活性,一、,免疫细胞的调节剂,二、免疫效应分子,三、造血细胞刺激剂,四、炎症反应的促进剂,五、其它活性,第三节 CK的生物学活性,细胞因子具有广泛的生物学活性，能,促进靶细胞的增殖和分化,，,增强抗感染和细胞杀伤效应,，,促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达,，,促进炎症过程,，,影响细胞代谢,等。,一、,免疫细胞的调节剂,免疫细胞之间存在,错综复杂的调节关系,，细胞因子是,传递这种调节信号,必不可少的信息分子。,二、免疫效应分子,在免疫细胞针对抗原（特别是细胞性抗原）行使免疫效应功能时，,细胞因子是其中重要效应分子,之一。,与抗体和补体的免疫效应分子相比，细胞因子的免疫效应功能特点是,作用强、持续时间短,。,主要为,非抗原特异性作用,，并,主要参与细胞免疫功能,，在抗肿瘤、抗细胞内寄生感染、移植排斥等功能中起重要作用，例如：1.TNF -和INF-可直接造成肿瘤细胞的凋零（apoptosis），使瘤细胞DNA断裂，细胞萎缩死亡。2.干扰素、可干扰各种病毒在细胞内的复制，从而防止病毒扩散。,三、 造血细胞刺激剂,从,多能造血干细胞到成熟免疫细胞的分化,发育漫长道路中，几乎每一阶段都需要有细胞因子的参与。,一些造血干细胞的细胞因子可明显,刺激,这些,集落的大小和数量,。,四、 炎症反应的促进剂,炎症是机体对外来刺激产生的一种病理反应过程。症状表现为,局部的红肿热痛,，病理检查可发现有,大量炎症细胞，如粒细胞、巨噬细胞的局部浸润和组织坏死。,在这一过程中，,一些细胞因子起到重要的促进作用,，如IL-1、IL-6、IL-8、TNF等可促进炎症细胞的聚集、活化和炎症介质的释放，可直接刺激发热中枢引起全身发烧，加重炎症症状。,五、 其它活性,许多细胞因子除参与免疫系统的调节效应功能外，还参与,非免疫系统的一些功能,。例如，IL-8具有促进新生血管形成的作用；M-CSF可降低血胆固醇；IL-1刺激破骨细胞、软骨细胞的生长；IL-6促进肝细胞产生急性期蛋白等。,这些作用为免疫系统与其他系统之间的相互调节提供了新的证据。,第四节细胞因子的临床意义,一、,细胞因子与疾病,二、细胞因子与治疗,三、细胞因子的检测,第四节细胞因子的临床意义,一、,细胞因子与疾病,（一）细胞因子及其受体的缺陷,包括,先天性缺陷,和,继发性缺陷,两种病理情况。如人类免疫缺陷病毒（HIV）感染并破坏TH后，可导致TM细胞产生的各种细胞因子缺陷，免疫功能全面下降，从而表现出获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的一系列症状。,（二）细胞因子表达过高,在,炎症、自身免疫病、变态反应、休克,等疾病时，某些细胞因子的表达量可成百上千倍地增加。例如类风湿关节炎的滑膜液中可发现IL-1、IL-6、IL-8水平明显高于正常人，而这些细胞因子均可促进炎症过程，使病情加重。,应用细胞因子的抑制剂有可能治疗这类炎症性细胞因子水平升高的疾病,。,（三）可溶性细胞因子受体水平升高,细胞因子受体从细胞膜上脱落下来,，存在于体液和血清中，使,可溶性细胞因子受体水平升高,。这类分子可能,结合细胞因子,，使其不再与膜表面受体结合，因而,封闭了细胞因子的功能,。,二、细胞因子与治疗,目前利用,基因工程技术生产重组细胞因子,，作为生物应答调节剂（BRM）治疗肿瘤、造血障碍、感染等已收到良好疗效，成为新一代的药物。,细胞因子疗法,（cytokine therapy）基本上可分为两种，即,细胞因子补充和添加疗法,及,细胞因子阻断和拮抗疗法,。,（一）细胞因子补充和添加疗法,通过各种途径使患者体内细胞因子水平增加，充分发挥细胞因子的生物学作用，从而抵御和治疗疾病,。经过大量临床资料验证，以下几种细胞因子的临床适应症比较明确、临床疗效比较肯定:,1,IFN,：IFN-2主要用于治疗病毒性感染和肿瘤。对病毒性肝炎、疱疹性角膜炎、带状疱疹、慢性宫颈炎等有较好疗效。,2,IL-2,：目前多将IL-2与LAK/TIL合用治疗实体肿瘤，对肾细胞瘤、黑色素瘤、非何杰金淋巴瘤、结肠直肠癌有较显著的疗效,3,TNF,：局部应用，全身应用副作用严重。,4,CSF,：用于各种粒细胞低下患者，如化疗后的辅助治疗。,（二）细胞因子阻断和拮抗疗法,其基本原理是,抑制细胞因子的产生,和,阻断细胞因子与其相应受体的结合,及,受体的信号传导过程，,使细胞因子的病理性作用难以发挥,，该疗法适用于自身免疫疾病、移植排斥反应、感染性休克等的治疗。,例如抗TNF单克隆抗体可以减轻甚至阻断感染性休克的发生，IL-1受体拮抗剂对于炎症、自身免疫性疾病等具有较好的治疗效果。,三、细胞因子的检测,细胞因子检测是,判断机体免疫功能,的一个重要指标，在疾病的诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测方面有重要意义。,目前的检测方法：,（一）依赖性细胞株,一些肿瘤细胞株必须依赖于细胞因子方能在体外增殖，因而可利用这些依赖细胞检测相应的细胞因子。,（二）功能检测,利用一些细胞因子的功能，建立相应的活性测定方法。,（三）免疫测定,利用抗原抗体反应的原理，制备出抗细胞因子的单克隆抗体或多克隆抗体，可进行免疫检测。,（四）功能测定与抗体抑制,（五）分子杂交技术,制备出细胞因子的基因探针，通过分子杂交技术检测细胞内细胞因子mRNA的表达。,（六）多聚酶链反应技术,（ploymerase chain reaction，PCR）首先将细胞因子产生细胞的RNA提取出来，再经逆转录合成cDNA，以cDNA为模板，在细胞因子引物的引导下，即可进行PCR扩增。,思考题：,1、细胞因子有哪些共同的基本特征？,2、细胞因子有哪些主要生物学功能？,3、简述IL-2作用特点及其主要的生物学功能。,4,、,细胞因子的结构及其受体。,5、名词解释： 细胞因子、干扰素（IFNs）、白细胞介素（ILs）、白细胞介素（ILs）、集落刺激因子（CSFs）、肿瘤坏死因子（TNFs）,1,、,细胞因子的种类。,