一种子宫癌筛查的新方法课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,一种子宫癌筛查的新方法,温鑫编写,恶性肿瘤的形成过程,前致,癌物,终致,癌物,DNA,损伤,基因,突变,癌前,病变,恶性肿瘤,活化,解毒,凋亡,增生,修复,损伤,致癌因素,健 康 疾 病,主观感觉,客观指标,健康指标,疾病指标,暴露因素,健康态,潜在疾病态临界疾病态亚临床态临床态,机体易感性因素,健康疾病连续带示意图,（health-disease continuum，HDC）,亚健康态,潜在疾病态,健康态,临床态,亚临床态,临界疾病态,“,冰山,”,现象,患者,亚,临床者,健 康,者,“,海平面,”,子宫癌是指发生在子宫阴道部及宫颈管的恶性肿瘤。,最常见的子宫癌,：,【,宫颈癌,】,【,子宫内膜癌,】,【,绒毛膜上皮癌,】,子宫癌,系列,宫颈癌,子宫,内膜癌,绒毛膜,上皮癌,浸润性,鳞状细胞癌,浸润性,宫颈腺癌,微小,浸润癌,腺鳞癌,透明,细胞癌,疣状癌,梭形,细胞癌,其它少见,宫颈癌,腺癌,腺癌伴鳞状 上皮化生,透明癌肿瘤,细胞癌,浆液性,乳头样腺癌,子宫,癌,分类,宫颈癌,(,cervical cancer,),宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一，发病原因目前尚不清楚，早婚、早育、多产及性生活紊乱的妇女有较高的患病率。病毒或真菌感染,如,单纯疱疹病毒型、人乳头瘤病毒、人巨细胞病毒以及真菌感染可能与宫颈癌的发生有关。,初期没有任何症状，后期可出现异常阴道流血。目前治疗方案以手术和放射治疗为主，但中晚期患者治愈率很低。,宫颈癌是由人类乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，简称HPV）引起的，HPV病毒可直接通过皮肤接触传播，有十几年的潜伏期，故初期没有任何症状,。,宫颈癌可防可测，按时进行宫颈癌筛查就能有效避免不幸发生。,子宫内膜癌,(carcinoma of the endometrium),子宫内膜癌又称为子宫体癌，是妇科常见的恶性肿瘤，仅次于子宫颈癌。子宫内膜癌患者多为老年妇女，绝经期延迟，或月经不规则；常为不孕或产次不多，合并肥胖、高血压、糖尿病；绝经后又有不规则阴道流血或排液臭。,子宫内膜癌的真正发病原因迄今不明，但其,发病,危险因素有：,1、,肥胖、糖尿病与高血压三者并存于子宫内膜癌患者，称为,“,宫内膜的三联征,”,或,“,宫内膜癌综合征,”,。,2、,月经失调 宫内膜癌患者月经紊乱、量多者，比正常妇女高3倍。,3、,初潮早与绝经迟12岁以前比12岁以后初潮者，宫内膜癌的发生率多60%。宫内膜癌的绝轻年龄较正常妇女迟6年。,4、,孕产次,：,宫内膜癌发生于多产、未产、不孕症者较多。,5、,多囊卵巢综合征,、,卵巢肿瘤,、,子宫内膜不典型增生,。,6、,外源性雌激素,：,服用雌激素的妇女具有高度发生子宫内膜癌的危险，其危险与剂量大小、服用时间长短，及是否合用孕激素、中间是否停药，以及病人特点等有关。,子宫内膜癌的阴道细胞学检查诊率比宫颈癌低，诊断性刮宫为确诊不可缺少的方法。宫腔镜检查诊断内膜癌的准确性为94%,。,对放射治疗不敏感，治疗以手术为主，其他尚有放疗、化疗,、,孕激素治疗及其他药物等综合治疗。,绒,毛,膜,上,皮,癌,（Choriocarcinoma ),绒毛膜上皮癌,是,一种高度恶性肿瘤，早期就可血行转移至全身，破坏组织及器官，引起出血坏死。最常见的转移部位依次为肺、阴道、脑及肝。死亡率20-30%,。多,继发于葡萄胎、流产、足月产,，,比率,为,2:1:1 , 少数可发生在异位妊娠之后,。,多为生育年龄妇女，也可发生在绝经之后,。,主要,临床表现,是,阴道不规则流血,，,产后、流产后闭经,。出现,下腹隐痛,甚至,急性腹痛,。,阴道转移,导致,大出血,；,肺转移,出现,咳嗽、胸痛血痰或反复咯血,；,脑转移,是致死的主要原因,。,凡流产、分娩、异位妊娠以后，HM清宫后一年以上出现症状或转移灶、并有HCG升高均可诊断。HM清宫后半年-一年内发病则侵蚀性HM或绒癌均有可能,。,治疗以化疗为主，手术为辅。,子宫癌筛查的新方法,子宫上皮细胞稳定性检测技术,细胞游离亚铁原卟啉,检测,子宫,上皮细胞稳定性检测技术,是通过检测宫颈渗液中是否含有细胞游离亚铁原卟啉,（Cells Free Ferrous Protoporphyrin FH）,而了解鼻咽部细胞是否癌变的一种检测技术。,细胞游离亚铁原卟啉是,子宫癌,发生过程中产生的因果性生物标志因子,。,FH,是,含,亚铁原卟啉蛋白的分解产物。,FH具有强氧化作用，导致细胞自稳调节功能紊乱。,FH含量具有连续可测量性，且与细胞癌变程度呈密切正相关。采用直接生物学介质（,宫颈,渗液）进行靶向定位检测，即可显示,子宫上皮,细胞恶变过程。,致癌因素,基因突变,FH析出,细胞代谢改变,细胞癌变,细胞稳定性失调,瓦博格效应,细胞周期改变,p53,缺失,细胞蛋白构象改变,DNA损伤,DNA,错误转录,FH与细胞恶 变过程演绎,能量代谢重编程是肿瘤细胞的重要特征之一,快速增殖的肿瘤细胞以高速率的糖酵解为主要的供能方式。,肿瘤细胞能量代谢重编程与线粒体的氧化损伤有重大关系。,【,正常细胞的能量来源,】,1、葡萄糖、氨基酸和脂肪酸等能源物质分解代谢。 共同途径：三羧酸循环。 2、氧化磷酸化反应。,葡 萄 糖 6-磷酸葡萄糖 3-磷酸甘油酸 丙 酮 酸,氧化磷酸化反应（ oxidative phosphoryla-tion ）是与电子传递偶联并从ADP生成ATP的过程。在呼吸基质氧化中游离出来的能量确保了ATP的高能磷酸键。该反应系统在于线粒体内膜进行。,能量计算（以一个葡萄糖分子完全氧化计算）,第一阶段（胞液）：2ATP,2NADH,2,计7（5）ATP,第二阶段（线粒体）：2NADH,2,2CO,2,计5ATP,第三阶段（线粒体） ：6NADH,2,4CO,2,2FADH,2,2GTP（或2ATP）,计20ATP,共计 32（30）ATP和6CO,2,【,癌细胞的代谢异常】,充足的营养和能量供应是癌细胞得以无限增殖、浸润和转移的基础和前提。癌细胞的葡萄糖、氨基酸和脂肪代谢都与正常细胞不同,存在着普遍的能量代谢重编程，ATP生成受阻。,在人体正常组织中,90%ATP,来源于细胞线粒体氧化磷酸化反应，而仅有,10%,来源于细胞浆糖酵解。在有氧情况下,有氧氧化对糖酵解产生抑制，这种现象称为,Pasteur,效应。,诺贝尔奖获得者德国生物化学家奥托.海因里希.瓦博格（Otto Heinnich Warburg ）发现肿瘤细胞的耗糖速度是正常细胞的10倍，却仅产生1/10的能量。肿瘤细胞主要通过磷酸戊糖途径产能，使即便在有氧情况下有氧氧化过程也不能对糖酵解产生抑制，这称为瓦博格氏效应（Warburg effect）。,磷酸戊糖途径（,pentose phosphate pathway,）是指从,G-6-P,脱氢反应开始，经一系列代谢反应生成磷酸戊糖等中间代谢物，然后再重新进入糖氧化分解代谢途径的一条旁路代谢途径。该旁路途径的起始物是,G-6-P,，返回的代谢产物是,3-,磷酸甘油醛和,6-,磷酸果糖，其重要的中间代谢产物是,5-,磷酸核糖和,NADPH,。整个代谢途径在胞液中进行。关键酶是,6-,磷酸葡萄糖脱氢酶。,戊糖途径的主要特点是葡萄糖直接氧化脱氢和脱羧，不必经过糖酵解和三羧酸循环，脱氢酶的辅酶不是NAD+而是NADP+，产生的NADPH作为还原力以供生物合成用，而不是传递给O2，无ATP的产生和消耗。,【总反应式】,3 G-6-P + 6NADP+ 3CO2 + 6NADPH,+2 F-6-P + 3-P-,甘油醛,阻抑蛋白,p53,+葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶,p53,葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶,葡萄糖,丙酮酸,乙酰辅酶A,三羧酸循环,ATP,二氧化碳,水,葡萄糖,戊糖磷酸代谢途径,NADPH,果糖-6-磷酸,二氧化碳,Warburg,效应,正常能量编程,3-,磷酸甘油醛,肿瘤细胞主要通过戊糖磷酸途径产能，使肿瘤细胞的耗糖速度是正常细胞的,10,倍。中国科学技术大学生命科学学院吴缅教授和美国宾夕法尼亚大学医学院杨小鲁教授的合作研究结果,“,p53 regulates biosynthesis through direct inactivation of glucose-6-phosphate dehydrogenase,”,显示，这种代谢异常与抑癌基因,p53,等突变有关。,p53,基因是人类肿瘤中突变率最高的基因。它因编码是一种分子质量为,53 kDa,的蛋白质而得名，是一种抑癌基因。其表达产物为基因调节蛋白（,p53,蛋白）。当,DNA,受到损伤时表达产物急剧增加，可抑制细胞周期进一步运转。一旦,p53,基因发生突变，,P53,蛋白失活，细胞分裂失去节制，发生癌变。,吴缅教授等研究发现：阻抑蛋白,p53,可以与磷酸戊糖途径上第一步反应的关键酶,“,葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶,”,相结合,并且抑制它的活性。在正常情况下,p53,参与阻止这一旁路的进行,细胞中的葡萄糖主要通过三羧酸循环代谢,产生细胞生长所需的大量能量。,但是，在,p53,发生突变或缺失的肿瘤细胞中,失去了与葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶结合的能力和对该酶的抑制,大量的葡萄糖通过戊糖磷酸途径代谢,只能进行大量的生物合成,产生大量还原型辅酶,，（烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸,NADPH,）,使肿瘤细胞快速、无限生长,形成,“,瓦博格效应,”,。,致癌因素,阻抑蛋白,p53,葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶,P53突变,突变的,p53,葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶,葡萄糖,-6-,磷酸脱氢酶激活,启动因子,葡萄糖,戊糖磷酸代谢途径,TAC,NADPH,果糖-6-磷酸,3-,磷酸甘油醛,二氧化碳,抑制,瓦博格氏效应,NADPH,在人体内的化学反应中起递氢体的作用，作为,GSH,还原酶的辅酶，它可以使氧化型谷胱甘肽（,GSSG,）还原成为还原型谷胱甘肽（,GSH,）,使细胞内,GSH,含量增高。,谷胱甘肽过氧化物酶以还原型谷胱甘肽,(GSH),作为供氢体来分解,H2O2,，生成氧化型谷胱甘肽,(GSSG),，使细胞内,GSH:GSSG,的比率下降。,GSH,生成,GSSG,过程中形成肿瘤细胞的低氧状态，激活氧感受器和缺氧信号传导通路。,细胞内氧化型,/,还原型谷胱甘肽,(GSSG/GSH),的改变作用于氧感受器分子，使其构象发生改变，导致蛋白质的巯基由氧化型向还原型转变，促使缺氧特异性转录因子,-,低氧诱导因子（,hypoxia-inducible factor,；,HIF,）,HIF-1a,的磷酸化并与,HIF-1b,结合而形成一个完整的,HIF-1,转录复合体。,HIF-1,转录复合体对糖代谢基因的调控是肿瘤能量代谢重编程的重要机制之一，它对肿瘤细胞糖代谢进行调控，对谷氨酸替代途径调节，与相应靶基因上的缺氧反应元件,(HRE),结合，促进基因的表达,.,并通过第二信使,-,活性氧族,(ROS),与激酶系统发生联系并激活该激酶系统。,谷胱甘肽过氧化物酶使细胞,GSH:GSSG,的比率下降。,H2O2,与细胞内的铁离子作用，通过,Feton,反应，产生,OH,。,OH,和,GSSG,都可与蛋白质分子上的巯基相互作用，影响蛋白质构象。低氧时,H2O2,浓度下降，使,OH,的浓度随之下降，同时使,GSH,的浓度升高，导致蛋白质的巯基由氧化型向还原型转变，使一些转录因子（如,HIF-1,）的构象发生改变，激活其结合,DNA,的活性，促进低氧敏感基因,EPO,的转录表达。,过氧化氢酶催化,H2O2,过程中可间接激活鸟苷酸环化酶（,soluble guanylate cyclase,，,sGC,），增加,cGMP,（鸟嘌呤核糖苷,-3,5-,环磷酸酯）的水平。而,cGMP,抑制低氧敏感基因的表达。低氧时,H,2,O2,浓度下降，使这条信号途径的活性降低。,在氧含量正常的条件下，由,NAD,（,P,）,H,所脱下的电子迅速传递给氧分子，产生超氧阴离子，这在细胞浆中造成了一种相对高的氧化状态。超氧阴离子歧化生成过氧化氢，最终导致活性氧（,ROS,）的增加，在结合铁离子的部位容易引起,feton,反应（人体内的过氧化物与低,Fe,反应生成氧自由基的反应,),，诱导调节蛋白的位置专一性氧化。在低氧条件下，氧含量的减少将引起这一系统氧转运率的降低，由此降低了,ROS,的产生速率，导致细胞内环境处于一个低氧和相对还原性的状态。,低氧时血红素氧合酶及一氧化氮合成酶（,NOS,）活性受到抑制，使内源性,CO,及,NO,产生量下降，调控,cGMP,的产生下降，从而对低氧敏感基因,EPO,的抑制作用减弱。,肿瘤细胞,瓦博格,效应,NADPH,增加,GSH/GSSG,比例下降,激活氧感受器,和缺氧信号,传导通路,缺氧特异性转录因子,HIF-1a,稳定和活性增强,激活,第二信使,-ROS,与激酶系统,EPO,基因,表达水平升高,NADPH,氧化酶,H,2,O,2,下降,cGMP,抑制,激活,鸟苷酸环化酶,OH,下降，,GSH,升高，,激活,HIF-1,结合,DNA,的活性,血红素氧合酶,及,NOS,活性抑制,内源性,CO,及,NO,下降,FH合成,和释放增多,缺氧可使线粒体出现线粒体单价电子渗漏（univalent leak）；胞内Ca,2+,超载，触发线粒体摄取Ca,2+,并使Ca,2+,在线粒体内积聚；抑制线粒体内脱氢酶的功能；以上改变可使线粒体肿胀、嵴断裂崩解、钙盐沉积、外膜破裂和基质外溢。,线粒体损伤导致含还原态铁原卟啉自由体（,FH,）的蛋白，诸如细胞色素、氧感受器、,FixL,跨膜蛋白、过氧化氢酶、过氧化物酶、血红素加氧酶（,heme oxygenase, HO,） 、,NAD,（,P,）,H,氧化酶、鸟氨酸氧化酶（,guanylatc cyclase,GC,）和一氧化氮合成酶（,nityic oxide syathase,NOS,）等外溢、游离。,FH,位于细胞蛋白的肽链靠近表面的一个疏水核内，它主要依靠,Fe2+,与,F8His,的咪唑氮配位而挂在,Pr,链上。但是它之所以能固定在蛋白质的固定位置上而且取向一定，主要是因为还有大约,21,个残基逼近,FH,，距离在,4A,之内，这些残基中有,60,多处与,FH,比较靠近，可以发生极性与非极性的相互作用，足以保持,FH,在细胞蛋白中的位置。,FH,的极性部分丙酸基侧链伸向亲水的表面，在生理,pH,下解离成负离子，在,链中，有一个丙酸基与,CD3His,相连；在,链中，,FH,的两个丙酸基分别与,CD3Ser,和,E10Lys,相连。,FH,与肽链之间的静电引力对于维持,FH,在细胞蛋白中的位置有很大作用。,第二信使,-ROS,与激酶系统使一种亲脂性物质（,Hydrophilic fatty molecules,）进入细胞蛋白疏水核内，它所带的负电荷中和了肽链上,His,、,Lys,所带的正电荷，使它们不再与,FH,丙酸基侧链保持静电吸引，从而使,FH,在细胞蛋白中脱落。,还有的学者认为亲脂性物质进入细胞蛋白疏水核，与,FH,中心的,Fe2+,通过,Fenton,反应产生 ,OH,（羟自由基）,， ,OH,具有极高的氧化还原势，反应力极强，几乎可以和生物细胞内所有类型的分子以的反应速率作用。,109,1011mol-1,s-1,化学反应,0,级，相当于几个飞秒。,飞秒（,femtosecond,）也叫毫微微秒，即,10,的负,15,次秒，简称,fs,。,1,飞秒只有,1,秒的一千万亿分之一。,但是，,OH,寿命短暂，因而最靠近 ,OH,的部位受到攻击的可到性也最大，同,Fe2+,络合的,FH,卟啉环由于在空间位置上的态势，首先受到 ,OH,的攻击，共价键断裂，其结构遭到不可逆转的破坏，,FH,析出。,细胞内,GSH,含量增高,细胞蛋白构象改变,EPO,基因表达增强,Text,in here,缺氧特异性转录因子,HIF-1a,稳定和活性增强,第二信使,-ROS,与激酶系统,细胞色素,P450,高度表达,血管内皮生长因子（,V EGF,）生成增多,激活氧感受器和缺氧信号传导通路,肿瘤组织FH物质积聚,细胞稳定性调节紊乱,细胞的增殖、分化和凋亡始终贯穿于生命的全过程，它们相互伴随，相互关联。既受细胞外信号的影响，又依靠细胞内的级联反应进行调控，使细胞的增殖、分化或凋亡有序地进行，这就是机体的稳态调节（steady-state adjust ）。,细胞始终处于增殖和死亡的动态平衡中，不断地增殖以补充衰老脱落或死亡的细胞，这种更新称为稳态更新（,steady-state renewing,）。,正常状态下，通过细胞增殖（,cell proliferation,）增加细胞的数量，通过细胞分化（,cell differetiation,）形成特定形态、结构和生理功能的子代细胞；通过细胞凋亡（,cell apoptosis,）参与胚胎的发育和形态的造就，清除体内无能的、有害的、突变的或受损的细胞，以保证细胞的数量和质量。,细胞的增殖、分化和凋亡始终贯穿于生命的全过程，它们相互伴随，相互关联，在机体的稳态调节中发挥重要的作用。它们即受细胞外信号的影响，又依靠细胞内的级联反应进行调控，使细胞的增殖、分化或凋亡有序的进行。如果其中的任一环节发生障碍，可使机体内特定的细胞、组织和器官的结构、功能和代谢异常，导致疾病的发生。,细胞增殖周期分为四个阶段：,G1,期（,first gat phase,，,DAN,合成前期）,S,期（,synthetic phase,，,DNA,合成期）,G2,期（,second gap phase,，,DNA,合成后期）,M,期（,mitotic phase,，有丝分裂期）,其中最关键的是,S,期，此期细胞进行,DNA,倍增和染色体复制。,DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前的分裂间期进行的复制过程，复制的结果是一条双链变成两条一样的双链（如果复制过程正常的话），每条双链都与原来的双链一样。这个过程通过边解旋边复制和半保留复制机制得以顺利完成。,细胞周期的特点：,1,、单向性：细胞只能沿着,G1,、,S,、,G2,、,M,方向推进而不能逆行。,2,、阶段性：各期细胞形态和代谢特点有明显差异。,3,、在各期交叉处存在着检查点（,checkpoint,）。,4,、细胞周期是否顺利推进与细胞微环境密切相关。,DNA,损伤检查点,（,DNA damage checkpoint,）,DNA,复制检查点,（,DNA replication checkpoint,）,纺锤体组装检查点,（,spindle assembly checkpoint,）,细胞周期的主要检查点是,DNA,损伤检查点，分别位于,G1/S,和,G2/M,交界处。当它探测到,DNA,损伤包括基因组或纺锤体损伤时，就会打断细胞周期进程。正是在检查点的正确调控下，确保细胞周期精确和有序地进行。,P53,基因是人类肿瘤中突变率最高的基因。在,G1/S,交界处，,P53,作为一个,DNA,损伤检查分子，能保证细胞在,DNA,损伤后，停顿于,G1,期，以使,DNA,在复制前有充分的时间对,DNA,进行修复。,如果,DNA,损伤修复失败，,P53,则过度表达，通过直接激活,bax,凋亡基因或下调,bcl-2,抗凋亡基因表达而诱导凋亡。这样可以消除癌前病变细胞不恰当地进入,S,期，否则促进癌症的发生和发展。,正常中心粒的复制开始于,G1/S,转变期，缺失,P53,时，一个细胞周期可产生多个中心粒，最终导致有丝分裂时染色体分离异常，又导致染色体数目和,DNA,倍数改变，细胞进一步逃避免疫监视而演变成恶性肿瘤细胞，同时可见肿瘤侵袭性和转移性的增加。,DNA,双链断裂还可在,G2/M,转变期激活,DNA,损伤检查点，阻止细胞进入有丝分裂，以增加修复时间和诱导修复基因转录，完成,DNA,断裂损伤的修复。如果失去,G2/M,检查点的阻滞作用，就会引起染色体端粒附近,DNA,序列丢失以及染色体的重排和基因扩增。,P53缺失,，,FH,物质游离，,FH,催生羟自由基、氧自由基、亚硝基自由基等多种自由基，引起细胞膜脂质、脂蛋白、细胞骨架、,DNA,等的氧化损伤，干扰细胞的微环境，干扰细胞周期，使组织细胞发生恶变。,细胞增殖过度还与周期素,D,（,cyclinD,bcl-1）过量表达有关。bcl-1是一种生长因子感受器，可导致基因扩增、染色体倒位或易位。另外还与周期素依赖性蛋白激酶（,cyclin dependent kinase,，,CDK,）增多、,CDK,抑制因子（,cyclin dependent kinase inhibitor,CDI,）表达不足和突变有关。,bcl-2,是第一个被确认有抗凋亡作用的基因。主要通过抗氧化、抑制线粒体释放凋亡诱导因子（,AIF,）、抑制凋亡蛋白酶（,caspases,）的激活等发挥细胞抗凋亡作用。另外，,p53,突变失去促进细胞凋亡的作用，反之驱动细胞周期。由于凋亡不足使肿瘤发生、发展和转移。,除了细胞的无限增殖和凋亡不足之外，,FH,还使细胞表面特征改变，细胞骨架紊乱，核质比显著高于正常细胞（可达,1:1,），出现巨核、双核或多核，染色体呈非整倍性（,aneuploidy,），线粒体肿胀增生、呈多形性等。,细胞的增殖和分化脱耦联导致细胞异常分化：,（,1,）低分化：表现为形态上的幼稚性，失去正常排列极性和细胞功能异常；,（,2,）去分化或反分化：表现为表型返回到原始的胚胎细胞表型；,（,3,）趋异性分化：主要表现为肿瘤细胞分化程度和分化方向的差异性。,FH,物质在肿瘤的演进中扮演重要角色，表现于肿瘤细胞永生化、基因组不稳定性、肿瘤血管生成、肿瘤细胞能量代谢、肿瘤自分泌生长因子信号转导、肿瘤侵袭转移以及肿瘤耐药等各层面。,细胞癌变经历细胞过度增生、细胞异样增生、癌前病变、原位癌、浸润癌几个阶段。,随着细胞的上述演变，细胞膜损伤（膜通透性增强、流动性下降和受体功能障碍）愈重，溶酶体内蛋白水解酶溢出引起细胞自溶愈重，加之瓦博格氏效应愈加明显，,FH,物质渗出愈多。,代谢改变,HIF-1,V EGF,不典型增生,癌前病变,原位癌,浸润癌,细胞增生,形态学改变,NADPH,GSH,ROS,瓦博格,效 应,链,CD3His,链,CD3Ser,、,E10Lys,HP,FH,p53等基因突变,致癌因素,Hfm,细胞高增生、低凋亡、低分化,致癌因素,p53基因突变,瓦博格效应,FH析出,细胞自稳调节紊乱,分化异常,细胞周期紊乱,凋亡不足,细胞癌变,无限增殖,综上所述：恶性肿瘤病人因细胞代谢改变和形态学改变，导致局部组织渗液中,FH,物质含量增加，在细胞自稳调节失调早期（细胞过度增生和异样增生阶段）即可出现，FH物质含量与上皮细胞癌变程度呈正相关。测定局部组织渗液细胞中,FH,物质含量即可显示是否存有组织细胞癌变及其程度。,细胞游离亚铁原卟啉,检测技术,采用一种脂溶性较强的物质，使之很容易进入细胞与细胞器中，其与,FH,物质的氧化,-,还原产物使子宫上皮细胞,内含有的内源性过氧化物酶等酶染,色。作为筛查手段，观察局部渗液宫颈上皮细胞中,FH,物质,对细胞内酶的,染色情况，即可显示宫颈上皮细胞是否存有恶变及其程度。,FH物质检测技术由四个部分组成：,（1）核心系统：优选脂溶性较强的、很容易进入细胞与细胞器中的物质组合，与FH物质发生化学反应而,行酶染,色。该组合对FH物质具有高亲和力和专一性，保证检测技术的高灵敏度和特异度。,（2）稳定系统：采用双重抗干扰措施，消除样本差异，保证精准度。,（3）支持系统：使用简约物器，保证技术的方便、快捷和可操作性。,（4）采集系统：设计多种一次性采样器，灭菌包装，以无创手段采集样本，保证采样安全、准确。,根据需要，,采集系统,又分为宫颈渗液采集系统和宫腔渗液采集系统两种。,检测步骤：,1),带上乳胶手套，用采样器在宫颈部位稍加压力擦拭获取渗液；其中，渗液量为,0.51ml,；,2),把带有渗液的采样器放入标本瓶内搅动，使渗液与样本保存液充分混合；,3,）在测试池内顺序加入样品液,1ml,，试剂,A 0.5ml,，试剂,B 0.5ml,；混匀，,2,分钟内观察颜色变化，与比色板比对记录检测结果。,【检测结果判读】,在橘红色滴管内的试剂滴入测试池2分钟内观察其内液体是否变色。若不变色，为阴性反应；若变色，则为阳性反应。具体判读标准如下：,1、,阴性(细胞游离亚铁原卟啉含量低于0.5ng/ml）： 不变色。,（1）,无色,（2）,淡蓝色,2、,可疑阳性(细胞游离亚铁原卟啉含量0.55ng/ml）：变色。,无色变为淡蓝色。,3、,阳性(细胞游离亚铁原卟啉含量5200ng/ml）：,（1）,蓝绿色,（2）,蓝色,4、,强阳性(细胞游离亚铁原卟啉含量200ng/ml以上）：深蓝色,5、,若标本即刻显深蓝色后转为深黄色或棕红色，表明标本 内内混有血液，亦应视为强阳性。即刻显深蓝色是FH的征象，转为深黄色或棕红色是血液的征象。,结果判定,1,、,子宫上皮细胞稳定性良好,（,细胞游离亚铁原卟啉,小于0.5ng/ml）,结果,阴性,阴性,结果判定,2,、,子宫上皮细胞稳定性不良，建议,TCT,或其它检查,（,细胞游离亚铁原卟啉,5ng200ng）,结果,阳性,阳性,结果判定,3,、,子宫上皮细胞很不稳定，,TCT,检查或其它检查,（,细胞游离亚铁原卟啉,200ng/ml以上）,结果,强阳性,强阳性,阴性,强阳性,阳性,阴性,阳性,强阳性,可疑阳性,技术优势,可自检,医疗资源投入少,无医源性感染,优势,无采样漏诊,检测费低廉,不用仪器设备,孕妇可用,普查可用,凡有性行为者均可用,无采样创伤,1,分钟出结果,子宫癌的发病与捕获,Title,1,、致癌病因，细胞代谢改变,2,、基因表达失控（基因突变）,3,、上皮细胞自稳调节紊乱,DNA,复制、转录错误,4,、,5,、形态学改变,6,、形成癌细胞,原位癌,7,、浸润癌、转移癌,不可逆阶段,临床现实水平,5-7,FH,分子生物学检测,1-7,可逆,阶段,子宫上皮细胞癌变的任何阶段均有,FH,物质析出,不可逆阶段,技术总结,因此,该方法适用于筛查宫颈癌前病变和宫颈癌,1,、,FH,物质检测技术符合筛检疾病可疑病人,的试验方法“快速、简便、经济、,安全及真实可靠”的标准。,2,、为子宫癌,（宫颈癌、子宫内膜癌、,绒毛膜上皮癌）,普查普治,提供了新的、,性价比高的有效方法。,3,、经验证，根据阳性结果判断为子宫癌，,具有较高的,敏感,度和阳性预测值及阳性似然比。,根据阴性结果区分为非子宫癌患者时，,具有很高的特异性和阴性预测值。,4,、有效地提高子宫癌的治愈率、,降低子宫癌的发病率、,改善子宫癌病人的生活质量，,节约医疗成本。,5,、有利于子宫癌早发现、,早诊断、早治疗、,早预防。,幸福,快乐,谢谢,