发酵罐操作培训

微生态发酵车间,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,发酵罐操作技能培训,意识的培养,发酵罐罐体管道结构介绍,触摸屏操作界面介绍,发酵罐操作,我们的发酵属于纯培养，是由单一菌种接种以,后进行的培养，其中不可以有任何杂菌，否则会影,响产品的使用效果，所以为了确保每一批发酵的成,功，在上罐之前，发酵人员必须具备以下两种意识：,无菌意识,安全意识,无菌意识,由于微生物个体小、分布广泛等特性，发酵染菌,的途径有很多，而且如果染菌的话，我们无法及时,做出判断，必须培养一段时间才能看出来，发现以,后的结果只能是倒罐，造成不小的损失，所以操作,之前必须具备无菌意识，每一步操作都按照操作规,程进行，抓住每一个细节，才能确保不会染菌。,安全意识,空气压力能达到,0.250.3MPa,；,蒸汽压力能达到,0.25MPa,，温度能达到,139,；,设备,用电；,机械搅拌；,酸碱腐蚀。,发酵罐罐体管道结构介绍,空气路：培养过程中向罐内通无菌空气,取样路：培养过程中取样监控菌体生长情况,尾气路：排气,出料路：移种、放罐,夹套进水路：进冷却水和加热水进行控温,夹套回水路：回收冷却水和加热水重复利用,各种图形的代表的意义,截止阀、球阀、隔膜阀,电磁阀,止回阀,空气管道,排污管道,水管道,物料管道,蒸汽管道,各种管道颜色标识代表的意义,发酵罐的操作,罐检,空消,电极标定,配料,实消,接种,中控培养,放罐,洗罐,检修,第一步：罐,检,目的：快速检查发酵罐，确保发酵罐正常，可以上罐。,检查项目：,阀门：所有阀门是否处于正确的位置。,压力表：压力表是否归零。,PH,和溶氧电极：电极是否拔出并正确保养。,罐体：罐内是否清洗干净。,搅拌电机：点动电机，看电机运转是否正常。,第二步：空,消,空消主要目的是在进罐生产前对设备清洁和杀灭其他微生物，防止因设备清洁不彻底或设备停用时间过久，微生物滋生，从而对生产造成影响。,空消操作流程,升温,从空气路、取样路和出料路进蒸汽,排净罐内的冷空气后关小排气阀，节省蒸汽,灭菌,调节空气一阀、取样一阀、出料一阀和排气阀控制压力,压力,0.140.16MPa,温度,126128,，时间,30,分钟,降温,排空罐内冷凝水,自然冷却,第三步：电极标定,目的：为了确保电极准确测量，必须在使用前对电极进行标定。,注意事项：,新电极或放置很久的电极必须激活以后才可以进行标定和使用。,PH,电极用,3moL/L,的,KCl,溶液浸泡,6,小时激活，溶氧电极通电,6,小时激活。,PH,电极标定的时候需要将接地电极放入盛放标准液的烧杯内。,接种以后设定好发酵参数，然后进行溶氧电极百分百标定。,电极标定所需试剂：,PH,电极,利用,6.86,的标准液进行电极零点标定，电压值在,3000,左右；,利用,4.0,的标准液进行电极斜率标定，斜率在,260,左右；,溶氧电极,利用饱和,NaSO,3,溶液进行电极零点标定，电压值在,1300,左右；,百分百标定。,电极标定参数：,电极标定操作流程：,清洗,用去离子水冲洗电极头和接地电极,用吸水纸吸干水以后放到对应的标准液中,标定,将测量切换成标定，自动补偿切换成手动补偿,点击相应的标定项目开始标定,数据保存,电压值稳定以后结束标定项目，清洗电极头,将自动切换成手动，标定切换成测量，点击保存,第四步,：,配料,增容：,实消过程中部分蒸汽会冷凝形成冷凝水进入,培养基中，从而导致培养基体积变大，变大的部分,即为增容。不同的地区，不同的气候，增容量都会,不同的，需要通过多次实消灭菌总结才能得到一个,经验值。,配料操作流程：,领料,正确填写领料单，从保管处领取原料,领料人签字确认,溶料,按工艺要求顺序溶解各种原料,原料全部溶解，无杂质，无硬块,投料,确保电极已经插上，出料一阀已经关闭,考虑增容和种子液量，定容到发酵所需体积,第五步：实,消,发酵罐实消是对发酵培养基进行彻底的灭菌处,理,利用高温过饱和蒸汽的强穿透能力使各种细菌、,真菌蛋白质凝固而死亡。实消结束以后罐内是无菌,的环境，需通入无菌空气进行保压直到培养结束。,实消操作流程,预热,通过夹套通蒸汽进行预热,当温度升到,90,时停止预热，关闭搅拌,升温,从空气路、取样路和出料路进蒸汽升温,压力升到,0.05MPa,以后打开所有和罐体连接的阀门,灭菌,调节空气一阀、取样一阀、出料一阀和排气阀控制压力,温度：,123125,，压力：,0.120.13MPa,，时间,30,分钟,冷却,通过夹套通冷却水进行降温，当温度低于,90,时开启搅拌,罐内压力不能低于,0.05MPa,第六步：,接种,接种方法：压差接种法,接种材料：种子液、火焰圈、,95%,酒精、酒精棉、镊子、打火机、石棉手套,注意事项：,环境：关闭车间门窗和排气扇，接种环境周围禁止人员来回走动，降低空气流动性；,无菌：拔接种针护套时需靠在火焰附近，接种壶不可倾斜过度，避免种子液流出；接种操作过程中罐压不能掉零；,安全：拔出接种壶时接种针不可以指向人员，避免接种针飞出后造成人员受伤；点燃火焰圈不可随处乱扔，熄灭以后才可以继续操作。,接种操作：,准备,准备好接种所需材料,关闭门窗、排气扇,操作人员合理分工，一个为主操作，一个为副操作,消毒,副操作用酒精棉擦拭接种口进行消毒,消毒以后用火焰圈保护好接种口,接种,主操作在火焰掩护下拔掉接种针护套，快速插入接种口，双手摁住接种壶,副操作调节罐内压力慢慢升到,0.15MPa,，然后快速降到,0.05MPa,，进行接种,消毒,接种完以后主操作快速拔出接种壶,副操作用酒精棉擦拭接种口消毒以后迅速盖上接种盖，设置好参数后进行培养,第七步：中控,培养,工艺控制与记录,每间隔,1,小时记录一次参数；,主要参数有,PH,值、溶氧值、温度、发酵罐压力和过滤器压力。,取样,依据工艺要求按时取样送交化验部并做好镜检工作。,设备巡查,检查搅拌电机，看电机有没有异响、过热等；,检查酸碱罐、消泡罐和补料罐装液量，及时补充；,检查管道、阀门，看有无外漏。,第八步：放罐,菌体生长情况符合下罐条件以后即可放罐，放,罐操作流程如下：,提前,1,小时通知后提取车间准备放罐,取样,蒸汽吹洗放罐管道,检查,升压,放罐,填写记录表格,第九步：洗,罐,放罐结束以后立即进行洗罐，洗罐流程如下：,卸压：打开罐盖前要先卸掉罐压；,电极保养：拔出电极清洗干净以后进行正确保养；,PH,电极用,3,摩尔每升的,KCl,溶液浸泡电极头；,溶氧电极直接通电。,冲洗罐壁：用高压水枪冲洗罐壁，如果罐壁培养基冲洗不掉则考虑碱煮（,10%,的碱液用夹套升温到,90,以后保温,30,分钟）；,排污：排掉污水。,第十步：检修,目的：确保阀门、法兰、机械密封和试镜灯等不会泄漏，以备下批生产使用；,方法：罐体通入空气保压在,0.15MPa,，然后用肥皂水进行试漏，出现泄漏的阀门待压力卸掉以后进行检修，更换相应的垫片。,