维生素C的定量测定

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实验五 维生素C含量的测定,(2，6,二氯酚靛酚滴定法),一、目的,掌握2，6-二氯酚靛酚法测定维生素C含量的原理和方法,二、原理,维生素C,因其能防治坏血病，并有酸味,因此又称为抗坏血酸。抗坏血酸（还原型）能还原染料2，6-二氯酚靛酚,本身则被氧化成脱氢抗坏血酸。2，6-二氯酚靛酚，在中性或碱性,1,溶液中呈蓝色，而在酸性溶液中则呈红色，被还原后变为无色。因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后，稍多加一些染料，使滴定液呈微红色，即为终点。如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的抗坏血酸量成正比。,三、操作,1. 提取 称取新鲜辣椒4g于研钵中，加入2%HCl 溶液10mL,研磨成匀浆，静置5min后,将提取液通过两层纱布经漏斗滤入50mL容量瓶中(并用2%HCl溶液冲洗研钵，洗出液转入容量瓶)，最后用2%HCl溶液定容至刻度并混匀。,2,2. 脱色 若有色样品提取液的颜色妨碍滴定终点的观察，则可以将提取液倒入干燥锥形瓶中，加白陶土2.5g(1g/20mL样品液),充分振摇5min,再静置5min后,通过滤纸过滤,滤液备用。,3. 滴定 取50mL锥形瓶两个,各加脱色的滤液10mL及2%HCl 溶液2mL，然后用2,6-二氯酚靛酚溶液滴定，直至出现微红色，并保持15s不褪色为终点，记录两次滴定所用2，6-二氯酚靛酚溶液的mL数,取其平均值。,（注意：滴定过程应迅速进行，一般不超过2min。滴定所用的染料不应少于1mL或多于4mL，如果偏高或偏低则可酌情增减样品量或进行适当稀释）,3,四、计算,式中：,V为滴定样品所耗用的2，6-二氯酚靛酚的平均mL数；,T为1mL2，6-二氯酚靛酚相当于维生素C的mg数；(0.0834),C为样品提取液的总mL数； (50mL),D为滴定时所取的样品提取液的mL数；(10mL),W为样品的重量(g) (4g),4,试剂和器材,1. 试剂：,（1）,2%盐酸,； （2）,白陶土；,（3）,标准维生素C溶液（0.5mg/mL） ：,精确称取25mg纯维生素C ，溶于 25mL 2% HCl溶液中，移入50mL容量瓶中并用2% HCl溶液稀释至刻度,置冰箱中保存。,（4）,0.025% 2，6-二氯酚靛酚溶液：,称取氧化型2，6-二氯酚靛酚0.25g，溶于1000mL蒸馏水中，加NaHCO,3,0.21g充分振荡，装入棕色瓶内，置冰箱内保存。临用前过滤，用标准维生素C溶液标定其浓度。,标定方法：取5mL标准维生素C溶液及5mL 2% HCl溶液于50 mL的锥形瓶中，用配制好的2，6-二氯,5,酚靛酚溶液滴定呈微红色，并保存15 s不褪色为终点。计算2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度。最后将2，6-二氯酚靛酚溶液调节至每毫升相当于维生素C 0.088mg。,（5）含维生素C的样品：新鲜水果或蔬菜如青辣椒。,2. 器材 ：,(1) 研钵 (2) 吸管 (3) 容量瓶（50mL）(4) 锥形瓶（50mL） (5) 滴定管（25mL） (6) 漏斗 (7) 纱布(8) 滤纸 (9) 药物天平,6,