生物:11《DNA重组技术的基本工具》课件(新人教版选修3)

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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,专题1 基因工程,1,基因工程的概念:,基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术或基因拼接技术。,2,第一节,DNA重组技术的基本工具,3,基因工程培育抗虫棉的简要过程:,普通棉花,(,无抗虫特性,),苏云金芽孢杆菌,提取,抗虫基因,棉花细胞,(,含抗虫基因,),棉花植株,(,有抗虫特性,),重组DNA,导入,形成,4,DNA重组技术的基本工具,准确切割DNA的工具(“分子手术刀”),DNA片段的连接工具(“分子缝合针”),基因转移工具(“分子运输车”),基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具:,5,一、 “分子手术刀”,限制性核酸内切酶,6,1、作用限制性核酸内切酶,能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,,并在使每一条链中,特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,断开。,磷酸二酯键,即脱氧核糖、磷酸之间的连接,A,T,G,G,C,A,T,C,T,T,C,G,A,A,7,大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,例如,EcoR,、Sma,,也有少数有4、5或8个核苷酸组成。,G A A,T T C,C T T,A A G,中轴线,C T T,A A,G,A A,T T C,G,大肠杆菌的一种限制酶(EcoR)能识别GAATTC序列,SmaI识别CCCGGG序列:,C C C,G G G,G G G,C C C,C C C,G G G,G G G,C C C,黏性末端,平末端,8,原核生物很容易受到自然界中外源DNA的入侵,,但是长期的进化过程中,这些原核生物却没有因为,外源DNA的入侵而灭绝。,根据我们刚刚掌握的知识,你能推测这其中的,原因吗?,原核生物细胞中的限制酶会将外源DNA切割掉,使之,失效,以保证自身的安全,但是不会切割自身的DNA,,这是原核生物在长期进化过程中形成的一套防御机制。,9,动手操作吧!,10,2、 DNA连接酶,“分子缝合针”,作用把两条DNA末端之间的缝隙“缝合”起来。,G,A,A T T C,C T T A,A,G,即脱氧核糖、磷酸基之间的连接,G,P,A,P,自己动手吧!,11,限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否一样呢?,E.coliDNA连接酶:连接黏性末端,T,4,DNA连接酶:连接黏性末端和平末端,12,寻根问底,:,DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗?为什么?,13,基因进入受体细胞的载体,要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,还得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。,14,质粒,拟核,大肠杆菌细胞,15,作为载体的必要条件,能自我复制,有切割位点,有标记基因,对受体细胞无害,16,随堂练习:,1、关于限制酶的说法中,正确的是( ),A、限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列,B、EcoRI切割的是GA之间的氢键,C限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA,D限制酶只存在于原核生物中,答案:C,17,2.,(多选),有关基因工程的叙述中,错误的是,A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状,培育生物新品种,B、重组DNA的形成在细胞内完成,C、目的基因须由运载体导入受体细胞,D、质粒都可作为运载体,答案:BD,18,3.下列四条DNA分子,彼此间具有粘性末端的一组是,A B C D,答案:D,19,
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