实验四放线菌酵

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,实验四 放线菌、酵母菌和霉菌形态观察,1.1 了解放线菌、酵母菌、霉菌的培养方法。,1.2 掌握放线菌、酵母菌、霉菌的制片技术和染色方法。,1.3 掌握观察放线菌、酵母菌、霉菌的形态特征的方法。,1 实验目的,1,2.1 放线菌、霉菌和酵母菌在形态特征和生殖方式上有什么异 同?,2.2 如何鉴别酵母菌细胞的活性?,2.3 用乳酸石碳酸棉兰染色液对霉菌制片有哪些优点?,2 实验原理,(通过了解下列问题来掌握实验原理),2,3,孢子囊,孢子囊梗,4,5,3 材料与方法,3.1 实验器材,3.1.1 药品：,酵母菌染色液：,吕氏碱性美蓝染液。,霉菌染色液：,乳酸石碳酸棉兰染色液,3.1.2 菌种：,Streptomyces sp.,（链霉菌 ）,Saccharomyces cerevisiae,（酿酒酵母 ），,Penicillum citrinum,（桔青霉）,Rhizopus oryzae,（米根霉），,Aspergillus niger,(黑曲霉)。,3.1.3 仪器：,显微镜（MODEL E100）,3.1.4 其它物品：,酒精灯，载玻片，盖玻片，擦镜纸，接种环，镊子、大头针等。,6,3.2 方法,3.2.1.1 插片法培养放线菌。按无菌操作要求，取链霉菌培养物,在高氏一号培养基上密集划线接种。用镊子取无菌载片以45,。,角,插入培养基平板上。将平板倒置，于28,培养35天,。,3.2.1 放线菌制片与观察。,3.2.1.2 制片、镜检、绘图。用镊子取长有培养物的盖玻片，用,擦镜纸擦去背面培养物，将有菌面朝上放在载片上。先用低倍镜,观察基内菌丝、气生菌丝、孢子丝和孢子的位置，接着换高倍镜,观察各部位的细微结构，绘图并说明各部位的名称。,7,3.2.2 酵母菌制片与观察。,3.2.2.1 酵母菌培养。在麦芽法培养基平板上划线接种酿酒酵母，,于28,培养12天。,3.2.2.1 美兰染液水浸片法制片。滴一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液,于载片中央，用接种环按无菌操作取菌落边缘培养物少许置于染,液中，混合均匀。或取啤酒培养物少许滴加在染液中。加盖片。,3.2.2.2 镜检及绘图。将制片放置3 min 后，分别用低倍镜和高倍,镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并区分死、活细胞。染色,3 0 min,后，比较死、活细胞的比例。绘图注意标明各部分结构。,（细胞质部分以细点表示）,8,3.2.3 霉菌制片与观察。,3.2.3.1 霉菌培养。按无菌操作方式将霉菌点接于在PDA培养基,平板上，于28,培养35天。,3.2.2.2 直接制片观察法。滴一滴乳酸石碳酸棉兰染液于载片上，,用镊子取霉菌培养物少许，先于50%乙醇中浸一下先去脱落的孢子，,然后将培养物置于染液中，用大头针小心将菌丝分开。加盖片。,3.2.3.1 霉菌观察。先用低倍镜观察菌体的各个部位，认识霉菌,各部分结构，必要时用高倍镜观察，尤其注意观察产孢子结构。,绘图并标明各部分名称。,9,实验报告,1 用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法.,实验结果。,按绘画要求进行。,3 实验分析。分析制片、观察过程中存在的问题，如何改进？,10,