血液分析仪

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第三章,血液分析仪,Hematologic,Analyzers,血液分析仪,临床血液一般检查最常用仪器。,50,年代，美国库尔特,（,W.H.Coulter,）,发明电子血细胞计数仪并申请专利。,血液分析仪优势,检测项目多,速度快,精度高,易操作,第一节 检 验 原 理,一、仪器基本结构,1,、机械系统,2,、电学系统,3,、光学系统,二、电阻抗法,2,、白细胞计数和分类计数原理,仪器将体积为,35,450fL,的血细胞，分为,256,个通道（,channel,）。,每个通道：,1.64fl,。根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图,(Histogram),。,经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生,了变化！,第一群（,35,90fl,）,小细胞区：淋巴细胞,（体积最小）,。,第二群（,90,160fl,）,单个核细胞区，（中,间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱,性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。,第三群（,160fl,以上）,大细胞区：嗜中性粒细,胞（体积最大）,。,三分群血液分析仪,正常白细胞分类模式图（直方图）,%,35 90 160 300 400 450(fl),3,、红细胞检测原理,红细胞计数和血细胞比容测定与白细胞计数相似。,100 200 300 400 (fl),%,4,、血小板检测原理,血小板计数（,platelet, PLT,）：,随红细胞在一个系统中进行检测,。,直方图在,2,28fl,（,不同仪器不一）。,10 20 30(fl),%,二、射频电导法,三、光散射法血液分析仪检测原理,组合应用,电学,光学,细胞化学等,四、分光光度法,1,、白细胞检测,（,1,）容量、电导、光散射,（,volume,，,conductivity,，,scatter, VCS,）,法,原理,细胞体积技术,（测量细胞大小）,电导性技术,（测量细胞内部结构）,光散射技术,（测量细胞形态、细胞核和细胞颗粒）。,体积 电导 光散射,VCS,可显示,3,种细胞散点图,DF1,DF2,DF3,（,2,）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）。,RF:,射频电流,细胞内部结构信息,DC:,直流电,细胞大小的信息,（,3,）激光与细胞化学法,过氧化物酶检测通道,嗜碱性粒细胞,/,分叶核检测通道,。,（,4,）多角度偏振光散射（,multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS,）,法,0,：前角光散射,（,1,3,），可粗略测定细胞大小。,10,：狭角光散射,（,7,11,），可测定细胞内部结构相对特征。,90,：垂直光散射,（,70,110,），测定细胞核分叶情况。,90,：消偏振光散射,（,70,110,），区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。,2,、光散射法红细胞、血红蛋白检测原理,低角度,(2,3,),：测量红细胞体积。,高角度,(5,15,),：测定红细胞血红蛋白浓度。,3,、血红蛋白检测原理,比色法,4,、网织红细胞计数原理,原理：,用新亚甲蓝染色使红细胞,RNA,着色或用荧光染料对,RNA,进行染色。,光散射法网织红细胞检测散点图,第二节 血细胞分析仪检验参数,一、,检测参数,中高档仪器检测参数：,20,项左右或超过,40,多项。,二、相关参数的临床应用,一、血细胞直方图,横坐标为血细胞体积大小,纵坐标为不同体积细胞的相对频率。,1,、白细胞直方图,正常白细胞直方图,异常白细胞直方图,2,、红细胞直方图,（,1,）正常红细胞分布：,50,200fl,（,2,）,异常红细胞直方图,3,、血小板直方图,正常血小板直方图呈左偏态分布：,2,30fl,分布，主要在,2,15fl,。,异常血小板直方图,第四节 仪器质量保证,一、,可比性,(comparability,),指血液分析仪测定结果，与常规方法所 测结果相比较。显微镜法是血细胞检验基础。,P,0.05,有可比性；,P,0.05,无可比性。,结论：,计数细胞越多、选用吸管、计数盘越多，计数结果接近真值。,实际工作中，镜检法很难达到此要求。,二、准确性,(accuracy),准确性是指测定结果与真值一致性的程度。,三、总重复性,(,overall repeatability,),指同一份标本多次测量的结果接近的程度。重复测定,1,份抗凝静脉血,10,次，计算,CV,值。,四、精密度,(precision),批内,（,within-batch,）,精密度：同一批样本重复测定结果的评价。,批,间,(between-batch),精密度：对两批或两批以上样本重复测定结果的评价。,精确度,和准确度,五、携带污染率,(carry over),连续测定,1,份高值样本,3,次（,i1,、,i2,、,i3,）,再测定,1,份低值样本,3,次（,j1,、,j2,、,j3,）,携带污染率（,%,）（,j1-j3,）,/,（,i3-J3,）,六、稀释效果,指测定值与稀释倍数是否呈比例关系。,线性关系范围越宽越理想。,P,0.01,非线性相关；,P,0.05,，,未偏离线性。,稀释效果,MCH,MCV,MCHC,RBC,