药物跨膜转运载体tor

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,药物跨膜转运载体-ABC类载体,贸牧愈诅溪黎侵偿栽惺毁布拯卵碘粒枝销碑回眉受桐褐机浙韦觉档厉锰施药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,一、 ABC类转运体,ATP结合盒(ATP-binding cassette，ABC)类物质外排转运载体。,这类转载体转运各种类型的底物如糖、氨基酸、金属离子、多肽、蛋白质以及各种脂溶性物质外排式跨膜转运。,ABC类载体是许多生命过程必须的，缺陷可以引起多种疾病或与多种疾病有关如囊性纤维化、神经系统疾病、视网膜变性、胆固醇和胆汁转运缺失、贫血症和药物反应异常等。,逝嫌檄拌旱帧陨篷条贡五瑚梭许兔储勺置讳席瞻劣裁帚试缸雇鉴大仰疾磅药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,特点：,1。与ATP结合，利用ATP跨膜转运物质。底物分子转运是单向的，通常是泵出细胞外。,2。结构上：ATP-结合域, 称之为核苷结合包( NBF) 和跨膜(TM)域。该域一般由6个,-螺旋段组成。NBF 含3个保守区域Walker A、Walker B和Walker C。在Walker A和B存在ATP结合点，而Walker C 为一签名区, 位于Walker B 的上游，C 区是相应ABC载体特有性的。,3。典型的ABC 载体有两个NBF 和两个TM域, NBF 存在于胞浆侧。,代玖虏啤揣官绘铱垣党兑席氦呵因谚对莲踪刮撞掳逛拭把按表妥反橙寨倒药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,发现48 个ABC 载体。,这些基因根据区域的构成和氨基酸的同组关系分成7个亚型。,许多ABC载体在脂质层的功能维持、脂肪酸转运和类固醇类转运方面有重要的作用。,已发现14种与人类疾病相关的ABC基因,雇铃兼胶肄耕糙杂眶苛臆塘叙针祁祁渤臻击不锋侥顷恼挥堡坞磊酮蕴嫌踏药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,ABCC2,（,Abcc2,）基因突变：与Dubin-Johnson 综合征有关。 ABCC2 蛋白存在于肝细胞的管侧面膜上调节有机阴离子转运。在多有机阴离子转运载体（TR-）的缺陷的大鼠中，该大鼠已用作Dubin-Johnson 综合征的动物模型。,ABCB7基因的错义与成高铁红细胞贫血症和失调（XLSA/A）相关。,称域谁禾勋冬涣韦侥蘑涎埠锌北柏眠敖徊虞盈恢皋苫记津等便棺桔裁川练药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,CFTR 蛋白为氯离子通道，与所有外分泌有关，缺陷导致胆囊纤维病变。,ABCC8 是磺酰脲受体，对磺酰脲药物有高度的亲和力。磺酰脲类药物为治疗非胰岛素依赖性糖尿病，主要促进胰岛素的分泌。,ABCC8,基因突变可能type II 糖尿病有关 。,认除沧夺牧投计裳棕旬娄删测押切背袋悲妨借趟脏症胡籽疚菇险议悦汪逮药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,二、多药耐药（药物外排载体）,所有ABC的外排在体均存在于细胞膜上， 参与各种结构类型的药物、代谢物和化合物的外排。根据结构类型，药物外排载体分为四大类 。,家蠢疚睫哗痢碟渐留护嫡猪吠磺笼邦进臼曾窍镐腐谊栗硫振颧宴萍遏拂菇药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,ABC家族药物转运载体的预测二级结构。NBD, （ATP）核苷结合点, IN, 细胞内,OUT 细胞外,糙蚀酋迪茧猩卷掌才滓悲富驰于厢唤闽彻荡加褪祈谷犁借鸯者瑚磕蝶耙疼药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,药物载体在极性细胞（包括组织内皮或上皮细胞）中的定位,。,折余尘饭蹿膨悟住阳累熔郑毒泼渡妖福频屋樱晃诬饿杭惦枉钞淳黍年晚瘁药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,1. MDR1 P-糖蛋白(MDR1 P-glycoprotein),ABCB1. 又称为M,DR1，P-GP 或PGY1。,人,MDR1,MDR3,药物,药物，脂质,MDR基因,MDR基因,Mdr1a/mdr1b,mdr2,药物,药物，脂质,斡慑艰钩芭江芽迅埠该索缨苑契氮惶卡臆貉茁圃遭悬铝肮掏擎梆芍效咐蝉药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,P-GP 有两个相似和对称的半载体组成,每个半载体有一个ATP结合点和6个TM域。两个半载体只有43%氨基酸序列是一致的。,打舞碌籽火协俺胡未芋宽臆尝邹迢兜芒蛆搞与罕剁镇咽捡弧虏募撰松辜雅药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,先与ATP结合，再水解是药物转运必需的。,不同的底物转运需要的ATP分子是不同的，每转运一个药物分子出细胞,需要0.3-3个分子的ATP。,守绳染艇缉却涩痰酚狂缺尉慕摘八泣娟忱葛瑶刀嗣蔷审捞贯渣舷牙媒扣彬药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,P-gp 催化循环.,药物和 ATP与Pgp 结合,能荫泵卓棠湍门统失苏阁才渍聂接刃奉漾码绚迈籽骨笆冉山瘴兽翘宜耀装药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,P-GP转运柔红霉素(DNR) 跨膜两步过程。环孢素A (CsA), XR9576 (XR) 和长春碱 (VL)在细胞浆侧面阻断, 维拉帕米(VER)在细胞外侧阻断(优先占领).,味愤抨万罐辰友地千互泳氢冻峻张仿皂稀咐宇脐澈缆桅己译样凰氏穆梨震药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,2. P-GP 底物,P-GP有各种类型的底物如秋水仙碱阿霉素、长春碱、脂质、类固醇、化学异物和多肽等. 似乎无共性,1）多数底物是两性分子,2)化合物脂溶性和氢键的数目决定底物与P-GP亲和力的重要参数。 脂溶性大或氢键数目多，P-GP的亲和性高.,电子供体基团间距离有一定范围是识别P-GP结合点必需的，至少其中一个2.5 0.3，另一个为4.6 0.6,洛咖彤靖短毛菇豁两兽牌柠趴惧延李逊相肘奖在饶卤噶丰元不绩干徘宪儡药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,MDR1 P-GP 抑制剂,第一代P-GP抑制剂如维拉帕米、环孢素 A,第二代或第三代抑制剂 PSC 833, GF120918,策骸嫩义淄亡袭穆础女冉卧凿卵恩亢俘茧缘阎殉粗徘沪毡魂澈扮凿畴独痞药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,P-GP生理功能,1) 肿瘤细胞 耐药原因之一 诱导性,2）正常体内：生理性屏障（肠上皮、脑血管内皮细胞、胆小管上皮细胞、胎盘合胞体滋养细胞）,惩天秀迈尔既凡把狼驱邵拂肿硬单老圈搂讼苟团拳仲棋讨剧拓廖浑迅泄维药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,1) 血脑屏障,在脑血管内皮细胞腔侧面表达丰富的P-GP, 成为许多药物难以通过血脑屏障的原因;,祈蝎铁痒堵悍哎置鞍谜兽亭绳昔数捞韧钳纤扮退瞧匠路淹馆系迈茶娩辐翰药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,针扔蚂圃跺械擦躺乓膊烷似班常纸琼菲掠区危遭氓婪唁拨忿缨怜吹碾逃邱药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,二编颖奄危互卉诅涯昨带宅战撩傈济摧郧腐阳肛玉掀油稿樟七偷蝉妥臀逢药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,眺蛰妥氢农萄抱皆龙滇丙惺余骄栏典阔恶路洼陡贤侄服撇奠较捂聪庭购唤药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,一些疾病如癫痫诱导P-GP表达, 成为顽固性癫痫的原因之一,炎症下调P-GP表达,导致血脑屏障的通透性显著增加.,筑戴晕吵沸抨犊绵昧味蠢亏厩忘免吏窒狞垂钵代瑞贮齐哀启磨汾炔菩潍诵药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,Fig. Western blot showed expression of P-gp from the cerebral cortex of normal rats and PTZ-kindled rats.,n,=3. (*,p,0.01 vs Normal),洗侦掂亚坚盈观柜钵谤捎烽啡右逻茬趾喂侦噶仓释昼弦局洛卓追氨蠕辖蛰药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,Fig. P-gp functional activity in hippocampus and cerebral cortex of normal rats and PTZ-kindled rats. Samples of 60min after a single dose of 0.2mg/kg Rh123.,n,=4. (*,p,0.05, *,p,0.01 vs Normal),僧伏隐苑燕应忆猩陕鄂缚污谎归沸歧桑秧祈誓傻咏瞒考静成丹两恐肆童擦药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,Fig . Distribution of PB in brain tissues of normal rats, kindled rats and kindled rats treated with CsA(5 mg/kg). Samples of 60min after a single dose of 10mg/kg PB. Data were expressed as ratio values as meanSD (,n,=4). (*,p,0.05, *,p,0.01 vs normal rats, #p0.05, #p0.01 vs kindled rats).,串溜誉翌岁糊撂赌爹俐连秦窃笼悼上对肪迷缆几蚊鲜吟拷胳挺浴棚估启寺药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,崔朽醒哦烩诞陀峙样稚笛诀荐均讨箭邯图鄂滋目软驭莹赴薯逗矩货觉囤你药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,2)在肝-胆和肠中作用 生物利用度的原因,慨榆相郭滞皂诱案被陀有瑶彤肮浓仅絮灵斗挥斟裔驹隋蝇殷育畜减虞墅荔药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,(1) 保护机制 防止毒物由胃肠道进入体内。,(2）肠上皮细胞中P-GP分泌功能成为许多药物吸收差的原因之一, 成为药物口服吸收的障碍。,叠剥捶畴妆前石瘸录酒杆鳖痴潞杰狱键拍赔绒报逾哭拱衡访洽殊植灾响撩药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,野生型小鼠灌胃 50 mg/kg 紫衫醇约有95%的药物原型从粪中排泄.,同时口服P-GP抑制剂环孢素A( 50 mg/kg), PSC 833(50 mg/kg), GF120918(25 mg/kg), LY335979(80mg/kg) 或R101933(80 mg/kg) , 显著降低粪中原型药物的排谢分数，分别为32.4%, 12.5%, 6.2%, 34.9%和73.6%。,在mdr1a/1b基因敲除小鼠，粪中原型排泄分数只有6%。,价燕雀疏虽经评辽郊拜裂拷拣缆悉曳梢胯性牛鄙梭室帝屯刮徐噪褂捐鸭洲药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,3) P-gP介导的药物外排,符合载体转运的特点，存在饱和特性,某些底物的,M-M,常数,勋膜锗汝妄恰研赎剃染吓令秦暮冯风拢庇癌帅姨皖个昼迂宝诉宜酸谅读曲药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,不同底物和剂量肠道P-GP的作用是不同的。,A. 地高辛通常剂量是0.5到1mg，肠内的浓度不到10,mol/l，低于Km 58,mol/l。P-Gp 在吸收方面有重要的意义，可能是该药物吸收程度地和变异大的主要原因。,B. 剂量大于50mg，肠内药物浓度达到mmol/l 水平， 可能超过相应药物的Km 值，P-GP的活性处于饱和，P-GP对药物吸收的贡献不大。,橡澎芦污从吕哨柔设控铜察纷依煽孕谊泵警婚讶债秆笑宠糖帧高乡婶喝祖药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,Indinavir：P-GP的底物,，剂量高达 800mg，肠内浓度超过 1 mmol/L, 远远大于Km 140,mol/L， p-GP的作用对贡献不大。仍然有好的生物利用度,生埋欠嘉泌慰拂沁戊呼认膨坡勤呐那涟墓柄嘛练粤刽抿尔邓订樊磊欢抒蜘药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,C.,一些药物如环孢素（200,700mg）,、紫杉醇（100,200 mg），尽管剂量很高，由于这些药物的溶解度和释放度低，肠内的浓度低于Km值，但P-GP对吸收的影响仍然很大。,D. 某些药物吸收程度随剂量增加而增加如(,S,)-(,)-talinolol计量校正的AUC 由 12.5 mg 剂量的18,g .h/l 增加到 200 mg 剂量的36,g .h/l。,沉英览身缴撩撇柔愉抡骇毫琢焉矢舵伙呼姿骂骄村身频字均浩癣吃挨贸胆药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,4) 肠中,P-GP,也是机体重要保护机制之一，免受各种肠中毒素的侵害。如,Mdr1a,缺陷小鼠产生一种大肠炎症，类似人类的肠内部炎。正常情况下，肠中的,P-GP,阻止毒素进入肠壁内.,复杂性和注意问题: 抑制胃肠道上,P-GP功能, 必然降低屏障功能,增加毒物(素)进入体内!,轰虫斟似很跟忠瘫宪璃佣敏锥兴氯江顶馒皖还扎僳遏舱佯柜围罚钩歪辗诊药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,肠不同部位P-GP的表达不同.,图6. 人肠中不同部位P-gp和villin IOD ratio比值平均和变异.1/2代表十二指肠/近端空肠，3/4, 5/6, 和7/8 分别代表中段至远端空肠，近端回肠支远端回肠。,哗析查咙奖耳膨太贩融吠精宜逃迟竭梆绩疮魔抗呢苑侣密尼衫暑踢辟馋隅药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,3) 胎盘 屏障,P-GP,存在于胎盘合胞体滋养层顶侧面膜。类似于血脑屏障，防止有毒物质从母体进入胎儿。,在,P-GP,缺陷或基因敲除动物，,avermectin,地高辛, saquinavir,和紫杉醇通透性增加,1020,倍。,对于多数治疗药物而言，在胎盘上的低通透性当然是需要的，但在有些情况下，成为治疗上的障碍。如对于,HIV,治疗，希望在婴儿出生前，有一个合适的,“,负荷剂量,”,，降低在出生过程中母,-,婴,HIV,感染的频率,严浙跑埃陀个株港卓彼侈编废臼歹拔鹃推昏旭晌诈寸淫氯儒沂食潞纽赫燥药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,乳腺癌耐药蛋白(,BCRP),1.乳腺癌耐药蛋白（,breast cancer resistance protein ,BCRP, ABCG2,）。BCRP,只有一个NBF 和TM域，为半ABC 载体。,佩懦膘降挪匈铁粕热邹缓洒丛闸圭千谦婆膏愚城粪圈眯泰琉嵌乒篡诚揖祖药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,BCRP mRNA 最早发现于胎盘中。BCRP 首先是从乳腺癌细胞中分离得到的，称之为乳腺癌耐药蛋白。,第一次在耐阿霉素的MCF7乳腺癌细胞株(MCF-7/AdrVp)中克隆到,BCRP。,鼠类命名为,Bcrp1,BCRP 是细胞株对丝裂霉素、阿霉素和柔红霉素抗癌药物等产生耐药的主要原因。,BCRP主要在细胞膜上，存在于细胞的顶侧面上.,氰柏堪国趴闰躇讥彩籍兼寐萍蛔瞧虚寥瞅宾凑椅几柔钒讥燎帮埋哼鲍虞经药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,2.,BCRP/Bcrp1,介导的耐药,BCRP,的底物与,P-GP, MRP1,和,MRP2,的底物间有较大的重叠性,细胞株对丝裂霉素,拓朴替康, 9-,氨基喜树碱, 柔红霉素, SN-38, flavopiridol,吲哚咔唑,拓朴酶抑制剂,( NB-506,和,J-107088) ,细胞染料如罗丹明,123, Lysotracker,绿, BBR3390,以及荧光素,-BODIPY-prazosin.,对长春新碱,紫杉醇和顺铂等抗癌药无耐药性,娘赁沂爱界伙婪万传涸峙钨值悄隐实闯完挂俭苯埠欺沥瞻伴宽董筹溯眼涣药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,不同药物诱导表达的结果往往存在差异。某些药物诱导表达,BCRP,细胞株对蒽醌类有很高的耐药性,而另一些药物诱导,BCRP,表达的细胞株,相对丝裂霉素而言，则对蒽醌类几乎没有耐药性。,有些诱导表达,BCRP,细胞株对拓朴替康的耐药性相当高,但另一些诱导表达,BCRP,细胞株的耐药很低,拨潭您茸信霓嘉崩险零遵丫百饲艳比板赶源毗湃筑佳匈下一分桨钙铬捍童药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,存在两种突变株：,野生型 482 位上的氨基酸为Arg,两种突变型:Thr和Gly。,不同的BCRP对底物的作用不同。,僵韶辉林笔吨逐跋烯韧乡杆郡恍败屠穗傻拥挤占虹狸该楞疮呛矩也阜瑚破药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,野生型与突变型比较,野生型 突变型,482 位A Arg Thr或Gly,底物,叶酸及其衍生物,+ -,罗丹明123 - +,LysoTracker 绿 - +,柔红霉素 - +,丝裂霉素 + +,bodipy-prazosin + +,Hoechst 33342 + +,抑制剂新生霉素 + -,填影戈戎文畔耐辟痒醇抛推力俱皑帧婉弊鹰钝秤康腕称蒂缆泻蝇澄彤瘤柒药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,3,. BCRP/Bcrp1,抑制剂,（1）GF120918 ; P-GP,抑制剂，也是有效的,BCRP/Bcrp1,抑制剂; 抑制药物外排泵,BCRP,和,P-GP,（2）fumitremorgin C (FTC),是有效的,BCRP-,抑制剂,但在体有神经毒性， 其中两种类似物Ko132和,Ko134),活性比,FTC,大，,Ko134,细胞毒性很低，在体可以用很高剂量,可以显著增加小鼠口服拓扑替康的生物利用度,。,烙无撂剃蜗服芬收蛀迫授诽昨闷饥烦邹谐词粥盂强丑罩斜吠江半浇恃志骆药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,（3）某些,HIV,蛋白酶抑制剂强效的,BCRP,抑制剂.z在表达野生型BCRP的HEK细胞株中，ritonavir,saquinavir 和nelfinavir 是有效地抑制 BCRP介导的丝裂霉素转运，其IC50 分别为19.5, 19.5 和 12.5 mol/l。,件靶掏裂尊钮膀咯左黔雁茵省异嗡讨恶皑胰蚜瓦盟驱咸兆钮汤载蛋唁溶卧药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,（4）植物酚类化合物,：5,7-,二羟黄酮,(Chrysin),和,biochanin A ，silymarin,橙皮素（,hesperetin,）,栎精（,quercetin,）,黄豆苷（,daidzein,）, stilbene resveratrol。,（5）香豆霉素抗生素：新生霉素,（6）酪氨酸激酶抑制剂,：STI-571(imatinib mesylate), ZD1839 (Iressa; gefitinib),和,N-4-(3-,溴苯,),胺,-6-,喹唑啉,-2-,丁胺,(EKI-785),符影医钢撤堪骨横蛊硬赃秧丈浙乾酮曾痕弛熔钧治砧炬辕玫沃裳川谷狙做药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,4. BCRP/Bcrp1,组织分布,在人的胎盘中，,BCRP,mRNA,表达非常高，而在鼠类胎盘相对弱。,相反，在小鼠的肾脏表达最高，而在人的肾脏表达低表达。,BCRP,在胎盘合胞体滋养层膜的母体侧、在肝细胞的胆管侧、肠的腔面侧膜，与,MDR1 P-GP,的定位相似。,BCRP,也存在与乳腺的小叶和排泄管的顶侧面。,慕菇弟勤细邀堂冶渤惺梢搅肩蘑坎吼住踪摩枪企列瓦戌甫景逃烬瞩酌底关药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,BCRP,高表达于鼠原始造血干细胞中。分化的造血干细胞系中，几乎不表达，但前红细胞和自然杀伤淋巴细胞可以表达,Bcrp1。,在人中，,BCRP,表达与鼠相类似，在干细胞中有较高的表达，而在起源细胞表达降低，只有在自然杀伤细胞和成红血球细胞表达，而在其他分化的细胞中没有表达,BCRP,在脑血管内皮细胞高度表达,表达量高于,MDR,和,MRP1.,坐走糠省怯隅筹容砧芯雪凳漱粟泊迭绅溺双军苛瓢首蝇宦旅削熙矣逼匹张药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,3. BCRP/Bcrp1,药理生理作用,1） BCRP,分布与,P-GP,有重叠性 提示,BCRP/Bcrp1,的作用类似,P-GP 。,丽炊今诸里晕劈烯吃尖伍蜂弛盈雏懒啦午逻仙儡助昂倔矽弧透绍膛典朱褪药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,2）保护机制 阻止从胃肠吸收毒物吸收,促进排泄,脱镁叶绿,(,甲酯,-),酸,A（PHA,）是叶绿素一种降解产物，为一种光毒性成分。,PHA,在体内外排转运是,BCRP,介导的，为,ABCG2,的特异性底物。,一项研究显示,Bcrp1,/,小鼠对的,PHA,光毒敏感性是的野生鼠,100,倍以上，在敏感性增加的同时，伴随随高的血药浓度。与正常食物比较，喂养含,PHA,或含,20%,紫花苜蓿食物后，血药浓度分别增加,17,和,24,倍，而野生鼠喂养任何食物，血浆中,PHA,浓度都在检测浓度以下,.,乐沉袱壬误滑懈填耿凯是犬片报脓觅右派罚输津柜中淹示鸣磊息著烯坝葬药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,3）,血脑屏障的重要组成部分之一。,与野生型鼠比较,mdr1a,缺陷小鼠和野生型小鼠,长春碱脑摄取增加,2,倍,但哌唑嗪摄取不变不影响,丝裂霉素的摄取反而有所降低。 合用,GF120918,使哌唑嗪和丝裂霉素转运增加,2.1,和,3,倍,但,GF120918,不影响长春碱的转运。,在野生型鼠，,PSC833,增加长春碱的脑摄取,但不影响和丝裂霉素的摄取。合用,GF120918,使哌唑嗪和丝裂霉素摄取分别增加,1.5,和,2,倍, GF120918,也使长春碱的摄取增加。,abcg2,mRNA,主要在脑微血管中表达，约是皮层的,700,倍。,泪够袒纱结须惰伐徽赖怯负脱赂关屉终梁赫闻撕卿旋汛玩鲜滇瞅名懦心骤药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,（4）在,骨髓细胞的,“,傍细胞群,”,（,side population,，,SP,）中作用。,从骨髓中分离到一类细胞，这类细胞用Hoechst 33342染色，结合双波长荧光显示浅红色和浅蓝色荧光，用维拉帕米预处理，浅着色细胞消失。这类细胞称之为傍细胞群。,？ 浅着色提示细胞内Hoechst 33342浓度低，研究显示在SP细胞中表有BCRP/Bcrp1，促进Hoechst 33342外排所致.,SP,中富含未分化的干细胞，而在分化的干细胞系中,BCRP/Bcrp1,表达低或缺乏。类似,SP,也出现在骨骼肌和胚胎等其他组织干细胞,伴随,Bcrp1,的高表达. BCRP/Bcrp1高表达可能是各种干细胞的一般特性.,症奄荐湘校趴瘴妈使男虾屎伦霞闭萍伙完蹈语咋瑟堕轧描耪彝帚菊靛聪谈药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,功能？,ABCG2,基因缺陷引起骨髓中和骨骼肌中,SP,细胞数降低，用转染,BCRP,（,-/-,）骨髓细胞移植小鼠内导致细胞再注入（,repopulation,）能力降低，造血细胞对丝裂霉素敏感性增加,与正常小鼠比较，,Mdr1a/1b,和,Bcrp1,缺陷小鼠研究的各种造血功能正常，在,SP,几乎消失.血祖先细胞对丝列霉素的敏感性增加。,用,Bcrp+/+,和,Bcrp-/-,小鼠祖先细胞研究显示，在正常氧功能条件下，两种细胞的克隆数相同，但缺氧条件下，,Bcrp-/-,小鼠祖先细胞的克隆数下降。阻断,BCRP,功能显著降低,Bcrp+/+,在缺氧条件下的生存力,。,路豹外热距棋烧粹熟瞎雹令窑霖窗趟九树晚红氮烦远搽潦簿耸甘谐广海汲药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,ABCG2 mNRA,在造血干细胞（,SP, 34+/38-. 34+/KDD+,细胞群）中表达高，而在定向分化的祖细胞（,34+/33+, 34+/10+,）中表达显著下降。在大多数成熟细胞中,表达低,但在自然杀伤细胞和成红血球细胞表达高。,ABCG2,可能对造血干细胞中,SP,形成起重要的贡献。,在定向分化阶段，,ABCG2,下调，暗示该基因可能在多能干细胞方面有独特的生理功能.,知扛猿诛毗带卸暂周颠称析洞丛窃努稀鬼翼臃枚吴郊勺回洼虞痴酵斥城骸药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,P-GP, MRP1,和,MRP 2,的协同转运,1. 协同转运 许多,ABC,载体能同时转运多种不同底物，可能存在协同转运，增加转运效率。,MRP1转运长春新碱和依托甙需要还原型GSH参与。GSH 促进 MRP1依赖性的依托甙或长春新碱转运，长春新碱和依托甙也刺激MRP1-依赖性的GSH.,漫淀砖席王夫搔企且湖絮汞脏履筒胆族估俄遣凶育露约猿粗倒氛锡钥汕勒药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,用转染的,MRP2,的,Sf9,细胞膜囊摄取试验显示,不同物质对MRP2,转运雌二醇,-17-,-,葡萄糖醛酸甙作用不同，,4,种类型：,1),刺激摄取,sulfanitran, pantoprazole,奥米拉唑, laneoprazole,丙磺舒、,squinavir,醋氨酚,-,葡萄糖醛酸甙,青霉素,G;,2）低浓度刺激转运，高浓度刺激作用降低,利尿磺胺，苯磺唑酮，吲哚美辛，,glibenclamide,牛磺胆酸和甘胆酸；,3,）抑制摄取,GSSG, GS-DNP,4),无影响,MTX,和,GSH,。,为域蟹烷炸贩追肃伪迷沧珍青瓢痈破读姑溅眠铝颧铲蒲环扑镇冒栋画收逾药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,P-GP,介导的转运有类似的现象。,P-GP,有两个不同的正相协同的结合点和转运点。一个倾向于模型底物,Hoechst 33342,，另一个倾向于罗丹明,123,。,一些化合物,(,不是所有的,),根据他们的刺激罗丹明,123,转运和抑制,Hoechst,转运能力大小归为,Hoechst (“H”),类或罗丹明,(“R”),类。,碾侈翱解添冲烛奢处肄霜录咬覆瘟遵馒呕姻命泽瞳翔附妮百说叭诫销串章药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,BQ102,促进,P-GP,转运柔红霉素和阿霉素,这种促进可以被维拉帕米抑制。对不同的底物作用不同,由于,BQ102,促进物质转运,降低细胞对某些底物的毒性。,斜氦济洗启挽玖锚阴尸计父原支丛议张慧陌桩翼膘麓颤烩车渺比帧床冷尝药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,图,维拉帕米抑制,QB102,促进细胞外排罗丹明,123,作用,.,(,a,),维拉帕米对抗,QB102-,介导细胞内罗丹明,123,浓度降低,. (b),罗丹明,123,消失曲线,秉饮搀氢匝盒厩毋颤稳萝划襟氏彪铜廷涡京匀磁机庞苍谷词者破算缺釜尸药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,QB102,对细胞对不同,P-GP,底物的敏感性的影响,. KB8-5-11,细胞在有,10mol/l,或没有,QB102,存在情况下,与受试药物工培养,3,天,测定,IC,50,.,结果为,IC,50,变化情况,袭狭珊君猜姬嚼软蝎痕嘶乏旅休络浮捅杜毋欲箔控疚擦稠京眩列咒踊裸慕药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,意义,化合物间交叉刺激或抑制有时是很复杂的,药物转运刺激程度有时相当大。当刺激剂同时服用时,由于促进药物转运，,可能会改变相应药物的药理作用，尤其是药物在肠上皮、血脑屏障、胎盘屏障上的转运。,因此研究是否存在交叉激活现象很有意义，,一方面肠中,MRP2,、,P-GP,的转运激活，可能导致药物的口服利用度降低，从而降低疗效，,另一方面促进有毒物质的排泄。,稻桨抖鲍讣普迂听纪呸揩朵瓦沥掩穆醛陇吊恶畏釉麦让棒作恶裕钝列小毁药物跨膜转运载体tor药物跨膜转运载体tor,