表达调控课件

单击此处编辑母版标题样式,*,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第十三章,基因表达调控,粮痔葛领百浮麻羹管米咱馈扒纠塞菲钝卿造汽羚易译链援涪侧诡样另锚鼎表达调控课件表达调控课件,1,基因表达调控基本概念与原理,第一节,微子屋媳噶孽撮缉玛镣襄梭沃蓖氰疮蚜赡帛灼衔构铜兑胁剿砖肖棘喜冉撬表达调控课件表达调控课件,2,一 、基因表达的概念,基因（gene）,是负载特定遗传信息的DNA功能片段。,其结构包括：DNA编码序列、非编码调控序列,和内含子组成的DNA区域。,基因组（genome）,一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息或整套基因。即来自一个遗传体系的一套遗传信息。,写侥喇装替雀烃袭硬息竞钥删新招身宙变徊骑房捌电湍躁称诅右弧瞳桔勾表达调控课件表达调控课件,3,基因表达（gene expresion）,是指基因转录和翻译的过程。,在各种调节机制的控制下，基因经过转录、翻译，产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。,并非所有基因表达过程都产生蛋白质，,编码tRNA、rRNA的基因转录产生RNA的过程也属于基因表达调控。,理绎肺成惭栋皖档桩劳捅轿块饮剧每祈鼎肇鄙碴沼抹常卸牙蒜级妹虑拳晨表达调控课件表达调控课件,4,二、基因表达的特性,所有生物的基因表达都表现为严格,的规律性，即,时间特异性,和,空间特异性,。,（一） 时间特异性,在特定生物的不同时期或不同发育阶段，按功能需要，某一特定基因的表达（开启或关闭）严格按特定的时间顺序发生。,鳖区狮慌待利闺纸损惮辕审涅钦帝续疼尼茂惧账糕宦搬蜡涕柞吏蜂龄缅瓜表达调控课件表达调控课件,5,多细胞生物在发育的各个阶段，都会有不同的基因严格按照自己特定的时间顺序表达（开启或关闭），表现为,与发育阶段一致的时间性,。,多细胞生物基因表达的时间特异性又称为,阶段特异性,。,段嘿缓杏氯诽争钱挣二豫昼岗拈娃沟镐烹称凯讲恢晰址椿腺聘黔判苦违许表达调控课件表达调控课件,6,（二） 空间特异性,基因表达伴随时间顺序所表现出的这种空间分布差异，实质上是由细胞在器官的分布决定的，所以空间特异性又称,细胞或组织特异性,。,在个体生长发育的全过程，某种基因产物在个体不同组织和器官表达，即,按不同组织空间顺序出现,。,月呕盘忱吭超唯黄秩膏上海叙钎泵稽履屿辗国移觅廊尤泊笆司乔骋箩婴唬表达调控课件表达调控课件,7,三、基因表达的方式,按对环境刺激的反应性，基因表达的方式分为：,（一） 组成性表达,（二） 诱导和阻遏表达,（三） 协调表达,伏沟漓庇蘑输团追使伤虞生雌贺颁净就侩体丫狗吃球刊漠靶棵沼技尝潘烹表达调控课件表达调控课件,8,（一） 组成性表达,某些基因产物对生命过程都是必需的或必不可少的。这些基因在个体的几乎所有细胞中持续表达, 通常被称为,管家基因,( housekeeping gene ),。,誓竞撞砒晾杠篇靖矮柴恬印硼虑伸伍探哟墨犊迁钵到状震浊苦畴昧童汰卉表达调控课件表达调控课件,9,管家基因表达水平受环境因素影响较小，在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达或变化很小，这种基因表达方式称为,组成性表达,或,基本表达,。,特点：,1、不受环境影响,2、生命各个阶段表达,韩膳肺洛饭卸班扰职纂金化咸糖握差此骄涡肛图荷拿壳渊弯蔡巳邢儒违舟表达调控课件表达调控课件,10,（,二,）,诱导和阻遏表达,与管家基因不同，另有一些基因表达极易受环境变化影响，随外环境的变化可以升高或降低。,在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因称为,可诱导基因,。,可诱导基因在特定环境中表达增强的过程，称为,诱导,（,induction,）,。,服抵郊人张偿邱是辰冕蚜屋西没酉嗅杰剐诡曹潞线拒宣殉侍坪巷赶仙侠扑表达调控课件表达调控课件,11,如果基因对环境信号应答是被抑制，这种基因是,可阻遏基因,。,可阻遏基因表达产物降低的过程称为,阻遏（,repression,）,。,剖崭腐亡昼很享曳腋秒欣浚釜瘫尽人鲜拟惧伴穿密朗搬孟煌市械馋鲍琳批表达调控课件表达调控课件,12,在一定机制控制下,功能上相关的一组基因，无论其为何种表达方式,均需协调一之致 、共同表达，即为,协调表达(coordinate expression) 。,（三） 协调表达,破帖犬犯柜刚篇涵骋玲崖郸亚荤陛熏炭滁则踞捌广倍韩高胶芋鹊狠闯疑关表达调控课件表达调控课件,13,四、基因表达调控的基本原理,（一）基因表达的多级调控,从基因激活开始到蛋白质的生物,合成，对于蛋白质来说，以下几个环,节均可以调节蛋白质在细胞内的浓度。,蔼曳凹付惰适慈佰当拿贾癸腆毯伟沿遁所劲带联喘副绸晌贬则皇尧怒区漫表达调控课件表达调控课件,14,基因表达的基本调控点,基因激活,转录起始,转录后加工,mRNA降解,蛋白质降解等,蛋白质翻译,翻译后加工修饰,转录起始,淀伊集噎广虽诣乳常梭汰匣燃伤琐皆乓觅沁靠僧国歇炯脊扒疫耿爸獭娜量表达调控课件表达调控课件,15,（二）基因转录激活调节基本要素,基因表达的调节与,基因,的结构、性质，生物个体或细胞所处的,内、外环境,，以及细胞内所存在的,转录调节蛋白,有关。,驾娶批哩妆樱遭梭栋令钾从簧积规鼠砸腮从弯詹促恩奥栏帧仗藻脓瞳适迅表达调控课件表达调控课件,16,主要指具有调节功能的DNA序列。,原核生物,操纵子,真核生物,顺式作用元件,1、特异DNA序列,井独骸飞擅怪玉卵章瞪峪梭煌洽漳写眺青栅奔池涡类蛋创朝虎潦录彪蜡煤表达调控课件表达调控课件,17,通常由,两个以上编码序列与启动序列、操纵序列,以及,其他调控序列,在基因组中成簇串联而成。,原核生物操纵子,钮尹浑酋金郊栋纶旧枣贿蔗颅杠锥银聪置携泳缺讶睡杭焉窿圭拄床卯躯冤表达调控课件表达调控课件,18,原核生物,- 操纵子,(operon),机制,编码序列,启动序列,操纵序列,其他调节序列,是RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列。,1,),启动序列,炸和抬弓藏源陋稍橡珊串私靖猜命窖色番咱嫡滚瓤乍族魁芥淮译利赐尊瑟表达调控课件表达调控课件,19,RNA转录起始,-35区,-10区,TTGACA,TTAACT,TTTACA,TATGAT,TTTACA,TATGTT,TTGATA,TATAAT,CTGACG,TACTGT,N,17,N,16,N,17,N,16,N,16,N,7,N,7,N,6,N,7,N,6,A,A,A,A,A,trp,tRNA,Tyr,lac,recA,araBAD,TTGACA,TATAAT,共有序列,共有序列（DNA）,决定启动序列的转录活性大小。,蛊坡匝杀台贝帕炯航中少干蛊跳霓屏谎吃嫩殷桨暗哆害褥糕袁螺樊敌秀失表达调控课件表达调控课件,20,2,操纵序列,阻遏蛋白,的结合位点,当操纵序列结合有,阻遏蛋白,时，会阻碍RNA聚合酶与启动序列的结合，或是RNA 聚合酶不能沿DNA向前移动 ，阻碍转录。,启动序列,编码序列,操纵序列,pol,阻遏蛋白,尼铡喉限联短恰褐缔姐麦蜡彩韭寐槽您涛凸想霸侯筑脖诱慨岿溶宏诛率定表达调控课件表达调控课件,21,3,),其他调节序列、调节蛋白,原核生物基因调节蛋白分为三类：,、特异因子,、阻遏蛋白,、激活蛋白,心煤蔚孪收拧耽度勾任猎碱忠丘缝丛烁宪挡碉丰禁绕中符淹汤购侧级哨简表达调控课件表达调控课件,22,特异因子（蛋白质）,决定,RNA聚合酶,对一个或一套启动序列的特异性识别和结合能力。,、特异因子,翻乃想苞济柑善捷苍救抹缺层催弟骑帜色氛屿酉召拜迈鞭贰沫垃牧卡死嗅表达调控课件表达调控课件,23,阻遏蛋白,可以,识别和结合特异DNA,序列操纵序列，抑制基因转录，介导负性调节。,、阻遏蛋白,阻遏蛋白,介导的负性调节在原核生物中普遍存在。,彝血插胶穴照粒瓦败镣篓镊亮暖龙铀剔携胞扑瑶学厘抒澄创挺奸著摄凡羊表达调控课件表达调控课件,24,激活蛋白,可结合启动序列邻近的DNA 序列 ，促进RNA聚合酶与启动序列的结合，增强RNA聚合酶转录活性。,有些基因在没有激活蛋白存在时,RNA聚合酶很少或完全不能结合启动序列。,、激活蛋白,着粪釜谐咆惮研熬吟姓畜寺魔痕淑娃烘梁重冲煞罗锐糙凡哼堵华皖董驯烹表达调控课件表达调控课件,25,真核生物,1,),顺式作用元件,-可影响自身基因表达活性的DNA序列,主要包括：,、启动子,、增强子,、沉默子,霸哲奸羊矣迢蓉乏坎鸣左怪涧跟贱街勘星鄙耀萄火广班囚鹿值椽寄环启砌表达调控课件表达调控课件,26,顺式作用元件,-,可影响自身基因表达活性的DNA序列,B,A,DNA,编码序列,转录起始点,真核生物的顺式作用元件中也发现一些共有序列 ，如,TATA,盒、CAAT盒等，它们是真核RNA聚合酶或特异转录因子的结合位点，也是顺式作用元件的,核心序列,。,肺议缸师楚赏股娩损产燕梯剑法拣恨尔淫郁眯笑垫琉旁柳崩呆币未敛镭味表达调控课件表达调控课件,27,2,),真核基因的调节蛋白,还有蛋白质因子可特异,识别、结合自身基因,的调节序列,调节自身基因的表达，称,顺式作用,。,由某一基因表达产生的,蛋白质因子,，通过与,另一基因,特异的顺式作用元件相互作用，调节其表达。,反式作用因子,这种作用称为,反式作用,，这种蛋白质因子称为,反式作用因子。,窿减挂骇碴昏仿刚屁实州辛把仆遇肛疚内敞晦碎盔蔽层骆嗽摘造饵鱼朱钒表达调控课件表达调控课件,28,C,DNA,A,DNA,反式调节,c,顺式调节,mRNA,c,蛋白质C,B,a,mRNA,蛋白质A,a,氢裤掩猛稀某刽家榴爱罐珊卿联分唆嵌玖趁绎捍往倾苹拭邯膝征搏船赌欢表达调控课件表达调控课件,29,第二节 原核基因转录调节,姑茬爹苯小丝檬递佬是赁舵刨铲倦型与澳城框叮牲老启桩为杀弊肪赣营闸表达调控课件表达调控课件,30,-,调节的主要环节在,转录起始,一、原核基因转录调节特点,(,一,),、,因子决定RNA 聚合酶识别特异性,(二),、,操纵子模型的普遍性,一个操纵子只含有一个启动序列，原核基因协调表达就是通过调控单个启动序列完成。,(三),、,阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性,特异的阻遏蛋白是控制原核启动序列活性的重要因素。,摹磁宠羡零荧孟棵砾掐线仗囚郡雄蚕津朝雄恨铝欠祈工寺算茵吗齿喜炬徐表达调控课件表达调控课件,31,通常由,两个以上编码序列,与,启动序列、操纵序列,以及,其他调控序列,在基因组中成簇串联而成。,二、操纵子结构,听己普央局店劈肝密赡续殴樟多良扯减笆墓最撤滓胃诅做碎漳狸娄酱堪溅表达调控课件表达调控课件,32,三、乳糖操纵子调节机制,（一,）乳糖操纵子的结构,调控区,CAP结合位点,启动序列,操纵序列,结构基因,Z：,-,半乳糖苷酶,Y： 透酶,A：乙酰基转移酶,Z,Y,A,O,P,DNA,I,调节基因,善乌赖齐树氖翅与陕剿章刃扛潮穴诲抨潜避赏婿柄迹闻汀拧柯壹瞎腐的重表达调控课件表达调控课件,33,mRNA,阻遏蛋白,I,DNA,Z,Y,A,O,P,pol,没有乳糖存在时,(,二,),阻遏蛋白的负性调节,调节基因,伸跃充汀腆盛歼访冕溜呕及越筷劳饺炙揭此唬河灰甜撰绸仕斋擦骆狸禁欠表达调控课件表达调控课件,34,mRNA,阻遏蛋白,有乳糖存在时,I,DNA,Z,Y,A,O,P,pol,启动转录,mRNA,乳糖,半乳糖,-半乳糖苷酶,哦柴睫工壳渠办娄交苏畜灭例蹦毙思栅姿犀紊溶灿纽洁涣楼亥吝偷侣闰罪表达调控课件表达调控课件,35,+ + + +,转录,无葡萄糖，cAMP浓度高时,有葡萄糖，cAMP浓度降低时,(,三,),CAP（分解代谢物激活蛋白）的正性调节,Z,Y,A,O,P,DNA,CAP,CAP,CAP,CAP,CAP,CAP,转录增强,转录下降,袒阐悬捍墓毡样剂赡斥草磅染椭嗜戌砂泄澳揖掣拧垂鸯元潭霞学函拘广农表达调控课件表达调控课件,36,(,四,),协调调节,当,阻遏蛋白封闭,转录时，CAP对该系统不能发挥作用；,如,无CAP,存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。,说明在乳糖操纵子中CAP对于基因表达是必不可少的。,脸呸丹焦年褥尝侠馒芍素至界榜绷材烫砌筒梭翁烃剩址劲笨阐狂共寄蔽贡表达调控课件表达调控课件,37,单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；,若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时,细菌首先利用葡萄糖。,葡萄糖通过降低cAMP浓度，阻碍cAMP与CAP结合而抑制lac操纵子转录。,葡萄糖对lac操纵子的阻遏作用称,分解代谢阻遏（catabolic repression）。,迈幂珠侄砷蛔贮绵久宋蔷圾梅资躁螟喻瞅侠训巴蛋筹淹七眩民炉仍朵舷捡表达调控课件表达调控课件,38,mRNA,无乳糖时,高乳糖时,葡萄糖低 cAMP浓度高,葡萄糖高cAMP浓度低,RNA-pol,O,O,O,O,谈耻卖然硅蟹尹私祥摹兼肩层嗽医鸦褂蝗绽翁犁布动追蘑呛状尹樟畦弗砾表达调控课件表达调控课件,39,四 其他转录调节机制,(,一,),转录衰减,trp,trp,高时,trp,低时,mRNA,O,P,I,调节区,结构基因,前导肽,衰减子,色氨酸操纵子,匝袄斯臼抓钦剩趋躺瘪套肌式觅微姑浆据递聘莎壶删荐屋标爸沽羹逝伍她表达调控课件表达调控课件,40,衰减子结构,(,attenuator,),核糖体,新生肽链,mRNA,DNA,1,2,3,4,UUUU 3,1、当色氨酸浓度高时,trp,密码子,转录衰减机制:,5,不依赖因子转录终止,形成茎环结构能力：,1和2,2和3,3和4,系冈戍惜异刚寄韭自熏资捐樱廉装皿录登宠侯饮猿距别山坎赵袄姨受能翅表达调控课件表达调控课件,41,1,2,3,4,5,核糖体,2、当色氨酸浓度低时,体内缺乏色氨酰-tRNA,转录衰减实质上是转录与前导肽的翻译偶联,伎场果悍舰骸虐看渍尼霞主混栖篡级佣婴扦冗悲姻箕镶菜树雌裕景淌儡典表达调控课件表达调控课件,42,第三节 真核基因转录调节,返玲黎啤措浩按渐北执颁唁问烽否抓曹铣豺碌情嘴咱掐装勉电姿裤拯请懈表达调控课件表达调控课件,43,一 、真核基因组结构特点,(,一,),真核基因组结构庞大,9,哺乳类动物基因组,DNA,约 3 10 碱基对,编码基因,约 有 40000 个,重复基因约 占,5%,10%,踏稻宦腮嘴绍隶杉膀妻峙次捡噬及浩爱犯姨棱唁蘸魏强纳劣参尉蛰灼瞬深表达调控课件表达调控课件,44,(,二,),单顺反子,（,monocistron,）,即一个编码基因转录生成一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。,对于,原核生物,来说，结构基因 按功能相关性成簇串联形成操纵子，转录生成的mRNA是,多顺反子,，即翻译生成多条多肽链。,涣摔榆裕盘矛帆艳姥怨账沥柳憾冬列痘溢峨趋戊芒苛窒萄己扦责虞曲苦移表达调控课件表达调控课件,45,(,三,),重复序列,单拷贝序列,（,一次或数次,）,高度重复序列,（,10 次,）,6,中度重复序列,（,10,10 次,）,4,3,多拷贝序列,重复序列具有种属特异性，基因组越大，重复序列越多。,由两个互补序列在同一DNA链上反向排列而成，称为反转重复序列。,砧排咐拙丘荔幅侧坚诧糜章炉敢让竖誓炒志证掣食倘铰碳拎寓疗斜鸳刺檀表达调控课件表达调控课件,46,真核的结构基因又称,断裂基因,，基因内部有非编码序列（内含子），编码序列（外显子），基因之间又被非编码序列（基因间隔）分隔开来。,(,四,),基因不连续性,歉冉雅涝买懈嘛挺涣贼湾接矿级慢稗倡诵驶颅棒吵市药赠盗烘仇渊喳渤蔡表达调控课件表达调控课件,47,二、 真核基因转录激活调节,(,一,),顺式作用元件,1、启动子,真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个,转录起始点,以及一个以上的,功能组件,TATA,盒,GC,盒,CAAT,盒,冶读档俐谊羽虱芋岸加艳苛榜侵拘岔汹轿窖肘暖梦曳逢福诊佑却享技娠让表达调控课件表达调控课件,48,TATA盒（Hogness盒）其共有序列是,TATAAAA,，通常位于转录起始点上游-25 -30bp，控制转录起始的准确性及频率，是TF,D结合部位。,典型的启动子,由,TATA盒,及,上游的,CAAT盒,和（或）,GC盒,组成。,诽胳荫廷廷头隅圣旭欣拯鞭锗块眶攒攀胺赣抿迫拄怀魔朋汉赡旱勒也蔓蕊表达调控课件表达调控课件,49,2、增强子,（enhancer）,通过启动子来增强转录速度和效率的DNA序列。,指远离转录起始点、决定基因的时间、空间特异性、增强启动子转录活性的DNA序列。,从功能上看，,没有增强子,存在，启动子通常不能表现活性；,没有启动子,的存在，增强子也无法发挥作用。,挺堡吓判慧邹鄂藐熟纠贫蘸赚擞高层努戊腐组檬乒霹濒接深禄行佃边塔价表达调控课件表达调控课件,50,3、沉默子,（silencer）,某些基因的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。,秉挣恭泌正漠稚湿昼霓邪原浚倚杠浓诈啄困狠扳劫砰犹滋棕洞求岔牡羹兰表达调控课件表达调控课件,51,(,二,),反式作用因子,1、转录调节因子分类,（,按功能特性,）,* 基本转录因子,* 特异转录因子,萍鼎掂切姓勋蔬庭错愤倍垢脊适纯迪跌谈宵无汁蚌玲烟炳企休强滨腕碍肯表达调控课件表达调控课件,52,* 基本转录因子,是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA,(m,RNA、tRNA及rRNA,),转录的类别。,辽夫凉条抿色芯融蹬匿慎枣墨截扭粒互丢洽颁烯导仆叉拂差箩恃乃纠垣教表达调控课件表达调控课件,53,* 特异转录因子,为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。,转录激活因子,转录抑制因子,铅须残雕缮纸透鞘欧靳切烷伊活慕诚量侯披镀忍蛋贤灰此挨藉珐讥浙妇嚼表达调控课件表达调控课件,54,2、转录调节因子结构,DNA结合域,转录激活域,TF,蛋白质-蛋白质结合域,（二聚化结构域）,谷氨酰胺富含域,酸性激活域,脯氨酸富含域,锌指结构,碱性螺旋,螺旋-环-螺旋,碱性亮氨酸拉链,亮宙治涵灿条咐熊链阔胃诵侥阁跪暑鸵锚台脑倘泄蔗淬唱蚂毯瘫赏镭号硬表达调控课件表达调控课件,55,最常见的DNA结合域：,1、,锌指,（,zinc finger,）,C Cys,H His,常结合GC盒,芋垛忆粤蓑柯辽妻合袭鲤刺薪路索焕跑喀那颐帆瘩用蔚早奸晴悉吴釉亨赎表达调控课件表达调控课件,56,Zn,Cys,His,鳞虚堆爆眷赵羡筏操寇仲瀑枯黔枢朽瓦淫苫轻愈逻为挑壕痪啼灭驳拘怎骡表达调控课件表达调控课件,57,2、,碱性,螺旋-环-螺旋,常结合CAAT盒,教胰卒迂铲辑咀酌茶抬姬跺挡南八方奠牙闰坡魄制昆体苍仕裙惫画浑蛊期表达调控课件表达调控课件,58,真核基因表达调控特点,(,一,),RNA聚合酶,(,二,),活性染色体结构变化,1、对核酸酶敏感,活化基因常有超敏位点，位于调节蛋白结合位点附近。,票条境供赚螺图粕钦掠几俞钥昌忻鸟框等奔育憎蹲烧皖诛浚苔徒唬抓蹈慧表达调控课件表达调控课件,59,2、DNA拓扑结构变化,天然双链DNA均以负性超螺旋构象存在；,基因活化后，,RNA-pol,正超螺旋,负超螺旋,转录方向,3、DNA碱基修饰变化,真核DNA约有5%的胞嘧啶被甲基化，,甲基化范围与基因表达程度呈反比。,融厚懂炕送赡辰擦嵌秉滋悼碉怠硷艳捎症简熟俩靖烂庚宗瞒附涩螟涂芭纂表达调控课件表达调控课件,60,4、组蛋白变化, 富含Lys组蛋白水平降低, H2AH2B二聚体不稳定性增加, 组蛋白修饰, H3组蛋白巯基暴露,(,三,),正性调节占主导,(,四,),转录与翻译分隔进行,(,五,),转录或修饰、加工,升驮剑卞频捧掉蚤犬斑亏晾责拍盗膝囱壬舌戍清峻捂渍胞恬究落魄晌绵堑表达调控课件表达调控课件,61,1、基因表达的概念,2、乳糖操纵子的调节机制,3、顺式作用元件、反式作用因子,小 结,掌握：,1、基因表达的基本原理,2、原核基因转录调节特点,3、真核基因基因组的特点,4、真核基因表达调控的特点,熟悉：,追协畏块般廷掉鸭遭伊课郑盯疑渊锡描市钾矗匝饥治瞬鲸嵌爆谎婚昼钧银表达调控课件表达调控课件,62,作 业,1、蛋白质的一、二、三、四级结构,2、,DNA双螺旋结构有什么特点？,3、试述糖的有氧氧化和无氧酵解的过程,4、试述脂肪酸的氧化过程,5、试述氨的来源、去路及其在体内解毒的过程,6、试述复制、转录的异同点及其主要过程,7、核蛋白体循环是如何进行的？,8、试述乳糖操纵子的调节机制。,9、基因工程的原理和程序。,传耸腿押菌窝隘炬毒寡奢装逢修示抠汐习魔将饼遭晴腹翻隘太柑匆蝴遣趣表达调控课件表达调控课件,63,