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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,性激素与肿瘤,2,1,性激素与肿瘤21,子宫内膜癌（,endometrial carcinoma,）,是女性生殖道常见三大恶性肿瘤之一。,好发年龄较子宫颈癌晚，平均年龄,60,岁左右。,发病率近年来有增高趋势，在我国也明显上升。,为激素依赖型疾病，与高雌激素水平有关。,2,子宫内膜癌（ endometrial carcinoma ）,年龄分布,绝经后,50-59,岁妇女最多,;,60%,绝经后, 30%,绝经前,;,高发年龄,58,岁，中间年龄,61,岁,;,40,岁以下患者仅占,2%5%;,25,岁以下患者极少 。,3,年龄分布绝经后50-59岁妇女最多;3,子宫内膜癌的高危因素,常与雌激素水平相关疾病伴存：,无排卵性功血、多囊卵巢综合征、,功能性卵巢肿瘤,子宫体癌综合征（内膜癌的高危因素）,肥胖、高血压、糖尿病、,未婚、不孕、少产、绝经延迟,有近亲家族肿瘤史,4,子宫内膜癌的高危因素常与雌激素水平相关疾病伴存：4,子宫内膜癌发病的高危因素,肥胖 超过标准体重的,10%-20% 2,超过标准体重的,21%-50% 3,超过标准体重的,50% 10,雌激素替代 ,4.5,口服避孕药 ,0.5,糖尿病 ,2.0,三苯氧胺 ,7.5,晚绝经 ,2.4,初潮早 ,1.62.4,5,子宫内膜癌发病的高危因素肥胖 超过标准体重的10%-2,子宫内膜癌的病理分型,型为,子宫内膜样的子宫内膜癌,，属于,激素依赖型,，占子宫内膜癌的,80%,，与雌激素持续刺激有关，多发生在子宫内膜增生的基础上，常在早期能够得到确诊。组织学类型以腺癌为主，分化好、肌层浸润浅，对孕激素敏感，预后较好，,5,年生存率约为,70%,。,型子宫内膜癌有,4,个主要的基因变化,抑癌基因,PTEN,失活伴,/,不伴错配修复基因,(,主要是,MLH1,、,MSH2,、,MSH6,等,),异常、癌基因,KRAS,突变和,/(,或,),-,catenin,激活。这些基因的异常可造成,PI3K,通路、,MAPK,通路、,Wnt,通路的信号转导异常及微卫星不稳定,(MI),等。,6,子宫内膜癌的病理分型6,型为,非子宫内膜样的子宫内膜癌,，属于,非激素依赖型,。此型少见，与雌激素水平关系不大，多发生在萎缩内膜基础上，好发于绝经后妇女，确诊时常常已是晚期。组织学类型以浆液性乳头状腺癌多见，分化差，肌层浸润深，早期即发生淋巴转移，预后不良，,5,年治愈率在,25%,以下。,型子宫内膜癌则以抑癌基因,p53,突变和癌基因,HER2,过度表达为主要的基因变化。,7,7,长期应用外源性雌激素者子宫内膜癌发生的危险性可增加,4-8,倍,绝经后单独应用雌激素替代治疗,(Estrogen Replacement Therapy,ERT),可增加子宫内膜癌发生的危险性，子宫内膜癌发病与,ERT,的剂量及时间长短密切相关。,在单用雌激素,18,个月后,子宫内膜增生的发生率近,30%,。,与从来未用雌激素的妇女比较,应用低效雌激素药丸的妇女发生子宫内膜癌的危险性增加一倍。,使用普通雌激素药丸达,5,年或更长时间,发生子宫内膜细胞异常生长的危险性增加,7,倍,患子宫内膜癌的危险性增加,2,倍多。,8,8,型子宫内膜癌中,有独立生物学行为的,KRAS,和,BRAF,突变、,PTEN,突变、,-catenin,的核内表达均明显高于,型内膜癌。,在正常子宫内膜的月经周期中, bcl-2,、,IGF,、,VEGF,等增殖期的表达明显高于分泌期。证实这些基因和信号分子的雌激素依赖性。,长期单一的雌激素刺激是子宫内膜样腺癌的胞外刺激信号。雌激素直接或间接的调控基因和,(,或,),信号分子,干预子宫内膜腺上皮的胞内信号转导、细胞周期和凋亡,。,9,型子宫内膜癌中,有独立生物学行为的KRAS和BRAF突变、,雌激素信号传导机制,基因组效应和非基因组效应,人体内雌激素有三种,:,雌二醇、雌三醇和雌酮,雌二醇主要由卵巢分泌,肾上腺皮质分泌及其周围组织转化而来,卵泡早期雌二醇为,30-50 pg/ml,黄体期大约为,100 pg/ml,卵泡晚期为,250-300 pg/ml,大部分雌激素在血液中以结合的形式而存在,:,38%,与性激素结合球蛋白,(Sexhormone binding globulin,SHBG),结合,60%,与白蛋白结合,2%-3%,游离存在,雌三醇和雌酮的含量相对较低,10,雌激素信号传导机制基因组效应和非基因组效应人体内雌激素有,11,11,ER,𝛼的特点,12,ER𝛼的特点12,4,个功能区,:,(l),氨基末端的转录调控区,A/B,:,含有,配体非依赖转录激活功能区,(Activation function-1,AF-1),可通过与辅激活因子、转录因子以及其他转录因子的相互作用,介导信号向下游传递,进而诱导应答基因的转录,;,(2)C,区,:,又称,DNA,结合区,(DNA binding domain,DBD) :,该结合区含有一个,双锌指结构,每个锌原子与四个半肤氨酸残基结合,在两个锌指结构协同作用下,ER-𝛼66,与,DNA,结合,;,(3),多变铰链区,D,区,:,该区允许受体弯曲、旋转或构象改变,形成二聚体,并与同向或反向重复反应元件结合以发挥作用。此外,D,区还包含有核定位信号,(Nuclear localization signal,NLS),起着稳定,DBD,的,DNA,结合作用,;,(4)E/F,区,:,又可分为,共调节因子结合表面,、,二聚化区,和,配体依赖转录激活,(Activation function-2,AF-2),等功能区,。配体结合区决定着雌激素受体与特异性配基的结合,E/F,区是雌激素药物和转录激活发挥作用的必须组分,。,13,4个功能区:13,ER-𝛼,有三种剪切体,即,ER-𝛼66,ER-𝛼46,和,ER-𝛼36,与,ER-𝛼66,相比较,ER-𝛼46,缺乏氨基末端,ER-𝛼36,缺失了转录激活域,AF-1,和,AF-2,只保留了,DNA,结合区和一部分配体结合区；,ER-𝛼36,梭基末端含有,27,个特异的氨基酸残基,替代了,ER-𝛼66,和,ER-𝛼46,基因第,7,和第,8,个外显子编码的羧基末端,138,个氨基酸残基,14,ER-𝛼有三种剪切体,即ER-𝛼66,ER-𝛼46和E,ER-,𝛽的特点,15,ER-𝛽的特点15,ER-𝛼,和,ER-𝛽,在不同的组织中分布不同,ER-𝛼,：,子宫,、,卵巢,、,阴道,、,下丘脑,、,肾上腺和,附睾,ER-𝛽,：,前列腺,、睾丸、,肺,、,骨组织,、,中枢神经系统,、,心血管系统,、,免疫系统,、,消化系统,16,ER-𝛼和ER-𝛽在不同的组织中分布不同16,ER,的基因组效应,ER,的功能与其在细胞中的定位是极其相关,主要定位在细胞质和细胞核,经典雌激素途径：,在没有配体,(,雌激素,),存在的情况下,雌激素受体与热休克蛋白,(,如,:Hsp90,Hsp70,和,Hsp56),、,P23,和亲免疫因子蛋白,FKBP52,形成复合物存在于细胞中,从而使雌激素受体处于一种非活性状态。,E2,与,ER,的高亲和性结合使,E2,从,Hsp,、,P23,和,FKBP52,复合物中脱离,同时,ER,发生二聚化,并转位于细胞核内,在核内二聚化的雌激素受体与靶基因启动子区域,ERE,结合形成,E2-ERE,复合物，,E2-ERE,复合物接下来激活靶基因调控区的增强子,导致靶基因转录。,17,ER的基因组效应ER的功能与其在细胞中的定位是极其相关,主要,雌激素受体与,ERE,结合的同时,还需要与,辅助调节因子,相互作用调控靶基因转录。辅助因子通过其亮氨酸富集区与雌激素受体相互作用,(,如,LXXLL,L,亮氨酸,X,其他氨基酸,),目前发现雌激素受体有三十多种,协同激活子,常见的有,SRCs,家族,(Steroid receptor co-activators),、组蛋白转移酶类,(HAT) (,如,:CBP/P300),、组蛋白转甲基酶,(HMT)(,如,:CARM1,和,PRMT1),和核小体更新复合物,(,如,:SW1/SNF),18,雌激素受体与ERE结合的同时,还需要与辅助调节因子相互作用调,在细胞核内,ER,除了直接结合靶基因的,ERE,还可以通过蛋白之间的相互作用,形成复合物调节基因转录活性,这些蛋白多是和基因结合的,转录因子,：,E2,与,ER,结合后再,与,Fos,及,Jun,蛋白结合形成复合物,作用于靶基因的,AF-1,结合位点,促进,ovalbumin(,卵清蛋白,),、,IGF-1(,胰岛素样生长因子,-1),、,collagenase,和,cyclinD1,等基因转录,但却抑制胆碱乙,酰,转移酶基因转录,19,在细胞核内,ER除了直接结合靶基因的ERE,还可以通过蛋白之,ER,的,AF-2,激活域在,ER,和,Fos,及,Jun,的结合过程中发挥作用,同时,AF-2,还募集,P160,等协同激活子形成多蛋白复合物,于靶基因启动子区域结合在富含,GC,碱基的启动子区域,ER-𝛽,通常和转录因子,SP1,相互作用调控基因的转录,。,ER,和,转录因子,SP1,的结合具有,组织特异性和配体特异性,当,ER-𝛽 DNA,结合区第二个锌指结构的氨基酸残基发生突变时,ER,就不能区分,AP-1,蛋白和,STAT5,。,20,ER的AF-2激活域在ER和Fos及Jun的结合过程中发挥作,其他机制：,雌激素受体还能与,协同抑制因子,结合,抑制靶基因转录,常见的协同抑制因子主要包括,核受体辅助抑制因子,(,Nuclear receptor corepressor,NCoR,),和,组蛋白脱乙酰基酶,(HDAC),21,其他机制：21,雌激素的基因组效应的主要特点,(l),所需,E2,的浓度为,nM,级,;,(2),在刺激数小时或数天后效应才能明显,;,(3),蛋白合成抑制剂和,ER,阻断剂都可阻断,E2,引起的此效应。,22,雌激素的基因组效应的主要特点(l)所需E2的浓度为nM级;2,雌激素的基因组效应模式所不能解释的问题,:,(1),目前已知有两种受体,可单独作用或形成共聚体。,(2),一种雌激素在不同的靶器官中可显示相反的生理作用。,(3),一些共同调节因子参与转录激活的过程。,(4),激素与受体复合物可与其他转录因子结合,而不是与,ERE,结合。,(5),受体可不依赖激素而被激活。,23,雌激素的基因组效应模式所不能解释的问题:23,非基因组效应,E2,可以在几分钟甚至几秒钟内产生快速的生物学效应,即,E2,受体的非基因组效应,雌激素受体的非基因组效应常常具有以下特点,:,(l),反应迅速,通常持续数秒至数分钟,;,(2),通常对核内雌激素受体阻断剂不敏感,;,(3),对基因表达抑制剂不敏感,;,(4),能够在无核内雌激素受体或者无基因表达的细胞中发生,24,非基因组效应E2可以在几分钟甚至几秒钟内产生快速的生物学效应,非基因组效应常常在较短的时间内引发下游事件,:,(1),能短时间内激活丝裂原活化蛋白激酶,(MAPK),信号通路,;,(2)E2,和小牛血清蛋白,(BSA),偶联后不能通过细胞膜,但可发挥生物学效应,;,(3),通过磷酸脂酶,C,(,PLC,),激活蛋白激酶,C(PKC),并增加内源性钙离子,;,(4),不能被,mRNA,转录或蛋白合成抑制剂阻断,;,(5),增强非受体酪氨酸激酶,Src/Ras/,磷酸肌醇,3,激酶,(PI3K),信号通路活性,;,(6),使,Src,、,Src,同源性胶原蛋白和一些磷脂酶的蛋白表达水平增加,25,非基因组效应常常在较短的时间内引发下游事件:25,膜雌激素受体,(mER),1977,年,pietras,和,szego,首次提出质膜上有种能对,17-p,雌二醇起快速反应的蛋白,由此提出了膜雌激素受体,(mER),的新概念,Todd,等在研究垂体肿瘤细胞,GH3/B6,时发现,用雌激素处理,5,分钟内就能释放催乳素。认为这种雌激素的非基因组效应,可能是由细胞膜上的激素受体介导的。通过使用多种能识别不同的核雌激素受体抗原决定簇的抗体进行标记染色,证明了在,GH3/B6,细胞上存在雌激素的膜受体,Andrea,等使用不含有去污剂的多聚甲醛和戊二醛固定细胞,以及活细胞的免疫荧光染色研究,GH3/B6 /F10,细胞,同样也发现了细胞膜上存在,ER-𝛼,蛋白,26,膜雌激素受体(mER)1977年 pietras和szeg,ER-𝛼,通过与小窝蛋白相互作用定位在细胞膜上,ER-𝛼,本身并不具有酶活性和磷酸酶活性,ER-𝛼,没有代表跨膜结构的疏水段,ER-𝛼,没有能够锚定在细胞膜上的豆蔻酰化或棕榈酰化结构,膜小窝是细胞膜内陷形成的小窝状结构,直径,50-l00nm,参与细胞膜的多种生物学功能,如细胞内吞、胞膜组装和膜起始的信号传导。,小窝蛋白包含,Caveolin-1,、,Caveolin-2,和,Caveolin-3,三个成员,其中,Caveolin-1,、,Caveolin-2,可以与,ER,结合。,27,ER-𝛼通过与小窝蛋白相互作用定位在细胞膜上27,类固醇类受体含有的,F(X6)LL,序列与,Caveolin,具有高度的同源性,在,ER,的配体结合域也含有,F(VCLKSI),序列,此序列中的丝氨酸能在棕榈酰乙酰转移酶的作用下棕榈酰化。,蛋白质的棕榈酰化修饰可以调节蛋白质活性,介导蛋白质的亚细胞定位,参与蛋白质,-,蛋白质以及蛋白质,-,脂质的相互作用。,28,类固醇类受体含有的F(X6)LL序列与Caveolin具有高,棕榈酰化的,ER-𝛼66,与,Caveolin,-1,结合后,Caveolin,-1,把,ER-𝛼,转运到胞膜的膜小窝,在膜小窝内以,Caveolin,-1,为支架,ER-𝛼,和生长因子受体、表皮生长因子受体、,G,蛋白、,Src,酪氨酸激酶、,PI3,激酶及其他的接头蛋白组成一个庞大的多蛋白复合物,调节胞膜起始的信号通路,ER-𝛼46,和,Caveolin,-1,共定位于血管内皮的细胞膜,调节一氧化氮合酶的信号通路,29,棕榈酰化的ER-𝛼66与Caveolin-1结合后, Ca,1,丝裂原活化蛋白激酶通路,(MAPK),MAPK(Mitogen-activated protein kinase),是细胞中关键的信号传导蛋白,介导细胞因子、神经递质、激素和各种应激刺激。参与细胞的增殖、分化和凋亡,在细胞的应激反应过程中发挥作用。,MAPK/ERK,信号转导途径最显著的特点是三级酶促级联反应,:,三个激酶构成最小的功能模块,被级联激活。,MAPK,信号通路的三个激酶分别是,:MAPKKK(Raf),、,MAPKK(MEK),和,MAPK(ERK),。,ERK,是一种,Ser/Thr,蛋白激酶,活化的,MEK,氨基端结合,ERK,催化,ERK,亚功能区的酪氨酸和苏氨酸磷酸化,从而导致,ERK,活化。,研究发现,MEK,不仅是,ERK,的上游激活物还是,ERK,在胞浆中的支架,信号刺激后,MEK,激活,ERK,并将其转移到细胞核内,磷酸化下游底物如,Elk-1,、,SRC,和,CREB,。,30,1 丝裂原活化蛋白激酶通路(MAPK)MAPK(Mitog,ER,活化,MAPK/ERK,的过程主要是与相关分子形成复合体,如,PELP1/MNAR-ER-Src,和,ER-Shc-IGFR,。进而激活核内基因的转录,调节多种生物学作用。,在无雌激素存在时,EGF,和,IGF,可以通过自身的受体与膜雌激素受体相互作用也可以激活,MAPK,通路,提高核内,ER,的转录活性。,膜,ER,起始的,MAPK,信号通路既可以活化目的基因也可以抑制目的基因。,31,ER活化MAPK/ERK的过程主要是与相关分子形成复合体,2,、磷脂酰肌醇,3,激酶,(PI3-kinase),信号系统,32,2、磷脂酰肌醇3激酶(PI3-kinase)信号系统32,研究发现在乳腺癌,MCF-7,细胞中,PI3K,调节亚基,p85,与,ER-a66,相互作用,以非基因组雌激素受体调节蛋白,(Modulator of non-genomic action of estrogen receptor,MNAR),为支架,ER-a66,、,Src,和,p85,组成复合物,调节雌激素对,PI3/AKT,通路的激活。,过表达,MNAR,可增强雌激素诱导的,PI3K,活性,RNAi,降低,MNAR,表达时,可导致雌激素诱导的,PI3K,活性显著降低。,33,研究发现在乳腺癌MCF-7细胞中PI3K调节亚基p85与ER,3.,蛋白激酶,C(PKC),通路,蛋白激酶,C(Protein kinaseC,，,PKC),为存在于细胞质内由钙激活的磷脂依赖性丝氨酸,/,苏氨酸蛋白激酶。早期研究表明,PKC,能够被促肿瘤剂佛波酯,(TPA),激活,随后的大量研究进一步证实,PKC,在肿瘤的发生、发展和转移中均发挥着十分重要作用。,E2,能激活,PKC,和磷脂酰肌醇特异性磷脂酶,C(PI-PLC),而后,激活的,PKC,转运至细胞膜。同时雌激素改变了细胞膜的流动性。而这些并不能被雌激素立体异构体所引发。说明雌激素激活,PKC,是由,ER,所介导的。,34,3.蛋白激酶C(PKC)通路蛋白激酶C(Protein k,经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量,Study Constantly, And You Will Know Everything. The More You Know, The More Powerful You Will Be,写在最后,35,经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量写,感谢聆听,不足之处请大家批评指导,Please Criticize And Guide The Shortcomings,结束语,讲师：,XXXXXX,XX,年,XX,月,XX,日,36,感谢聆听结束语讲师：XXXXXX 36,
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