吸附色谱法的分离效果如何课件

第二章第二章提取、分离和鉴别方法提取、分离和鉴别方法 第二章提取、分离和鉴别方法1 第二章第二章 提取、分离和鉴别方法提取、分离和鉴别方法 目的要求目的要求 一、天然药物有效成分提取分离方法的原理一、天然药物有效成分提取分离方法的原理溶剂提取溶剂提取法与水蒸气蒸馏法的原理、操作及其特点。法与水蒸气蒸馏法的原理、操作及其特点。二、天然药物有效成分分离与精制二、天然药物有效成分分离与精制中草药有效成分中草药有效成分各种分离方法的原理。各种分离方法的原理。三、掌握色谱技术中洗脱剂选择的原则。三、掌握色谱技术中洗脱剂选择的原则。重点：讲解各种层析方法（硅胶、聚酰胺、葡聚糖凝胶、重点：讲解各种层析方法（硅胶、聚酰胺、葡聚糖凝胶、离子交换树脂、大孔树脂法及分配层析）和两相溶剂萃取法离子交换树脂、大孔树脂法及分配层析）和两相溶剂萃取法的原理及方法。的原理及方法。难点：讲解各种层析方法和两相溶剂萃取法的原理。难点：讲解各种层析方法和两相溶剂萃取法的原理。第二章 提取、分离和鉴别方法 目的要求2第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术 一、溶剂提取法一、溶剂提取法（extraction with solvent）1.相似相溶相似相溶原理：原理：根据相似者相溶原理，选择与化合物极根据相似者相溶原理，选择与化合物极性相当的溶剂将化合物从植物组织中溶解出来。同时，由于某性相当的溶剂将化合物从植物组织中溶解出来。同时，由于某些化合物的增溶或助溶作用，其极性与溶剂极性相差较大的化些化合物的增溶或助溶作用，其极性与溶剂极性相差较大的化合物也可溶解出来。合物也可溶解出来。理想溶剂理想溶剂（ideal solvents）：（1 1）对有效成分溶解度大；）对有效成分溶解度大；（2 2）对无效成分溶解度小；）对无效成分溶解度小；（3 3）与有效成分不起化学反应；）与有效成分不起化学反应；（4 4）安全，成本低，易得。）安全，成本低，易得。第一节 提取方法与技术 一、溶剂提取法（3 第二章第二章 提取分离方法提取分离方法 二、溶剂提取法的提取过程二、溶剂提取法的提取过程 将适宜的溶剂加入到药材中，溶剂通过渗透将适宜的溶剂加入到药材中，溶剂通过渗透 扩散进入到扩散进入到细胞中，溶解可溶性成分。形成细胞内外浓度差，产生渗透压，细胞中，溶解可溶性成分。形成细胞内外浓度差，产生渗透压，细胞内溶质向细胞外扩散，最后达到动态平衡，细胞外溶剂就细胞内溶质向细胞外扩散，最后达到动态平衡，细胞外溶剂就溶解了大量溶质，从而把大量有效成分提取出来。溶解了大量溶质，从而把大量有效成分提取出来。第二章 提取分离方法 二、溶剂提取法的提4 第一节第一节 提取分离方法提取分离方法 三、常用溶剂的特点：三、常用溶剂的特点：环己烷，石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇环己烷，石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇极性：小极性：小 大大亲脂性：大亲脂性：大 小小 亲水性：小亲水性：小 大大 （1）比水重的有机溶剂：氯仿。）比水重的有机溶剂：氯仿。（2）与水分层的有机溶剂：环己烷）与水分层的有机溶剂：环己烷 正丁醇。正丁醇。（3）能与水分层的极性最大的有机溶剂：正丁醇。）能与水分层的极性最大的有机溶剂：正丁醇。（4）与水可以任意混溶的有机溶剂：丙酮）与水可以任意混溶的有机溶剂：丙酮 甲醇。属于亲水性溶剂。甲醇。属于亲水性溶剂。（5）极性最大的有机溶剂：甲醇）极性最大的有机溶剂：甲醇（6）极性最小的有机溶剂：环己烷）极性最小的有机溶剂：环己烷（7）介电常数最小的有机溶剂：石油醚）介电常数最小的有机溶剂：石油醚（8）常用来从水中萃取苷类、水溶性生物碱类成分的有机溶剂：正丁醇）常用来从水中萃取苷类、水溶性生物碱类成分的有机溶剂：正丁醇（9）溶解范围最广的有机溶剂：乙醇）溶解范围最广的有机溶剂：乙醇 第一节 提取分离方法 三、常用溶剂的特点5Simple percolate assembly 1、冷提：、冷提：适用于受热不稳定的成分。适用于受热不稳定的成分。浸渍浸渍(Maceration)渗漉（渗漉（Percolation）第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术Simple percolate assembly 1、冷提6工业生产用的渗漉装置工业生产用的渗漉装置第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术工业生产用的渗漉装置第一节 提取方法与技术72、热提：煎煮法（、热提：煎煮法（Decoction）回流（回流（Refluxing）连续回流（连续回流（Continuous Refluxing）Simple refluxing assembly Assembly of Soxhlet extractor 第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术2、热提：煎煮法（Decoction）Simple refl82.水蒸气蒸馏法（水蒸气蒸馏法（water-steam distillation）提取具有挥发性，能随水蒸气提取具有挥发性，能随水蒸气蒸馏而不被破坏的成分，如挥发油。蒸馏而不被破坏的成分，如挥发油。Simple water-steam distillation refluxing assembly第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术2.水蒸气蒸馏法（water-steam distillat93.升华法（升华法（sublimation）用于具有升华性的成分提取，如香豆素，蒽醌，用于具有升华性的成分提取，如香豆素，蒽醌，樟脑等。樟脑等。第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术3.升华法（sublimation）第一节 提取方10l 超超临临界界流流体体的的密密度度与与液液体体很很接接近近，而而它它又又具具有有气气体体扩散性能扩散性能l常用的临界流体有常用的临界流体有CO2、N2O、乙烷、丙烷乙烷、丙烷等。等。4.超临界流体提取法（超临界流体提取法（supercritical fluid extraction SFE)利用溶剂在超临界条件下特殊的流体性能对样品进利用溶剂在超临界条件下特殊的流体性能对样品进行提取，为行提取，为20世纪世纪80年代迅速发展起来的一种提取方法年代迅速发展起来的一种提取方法。第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术 超临界流体的密度与液体很接近，而它又具有气体扩散性能411控温面板控温面板高压泵高压泵超临界超临界超临界超临界COCO2 2萃取实验装置示意图萃取实验装置示意图萃取实验装置示意图萃取实验装置示意图原原料料萃取柱萃取柱玻玻璃璃珠珠脱脱脂脂棉棉超临界萃取实验装置与实验方法超临界萃取实验装置与实验方法CO2钢瓶P PCOCO2 2冷温槽恒恒恒恒温温温温箱箱箱箱流量计接接收收瓶瓶小试实验装置图小试实验装置图实验装置实验装置小试实验装置小试实验装置控温面板高压泵超临界CO2萃取实验装置示意图原萃取柱玻脱超临12上世纪上世纪上世纪上世纪5050年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青7070、8080年代，年代，年代，年代，SFESFE越来越多的用于食品、香料的提取越来越多的用于食品、香料的提取越来越多的用于食品、香料的提取越来越多的用于食品、香料的提取9090年年年年代代代代，开开开开始始始始从从从从植植植植物物物物药药药药中中中中提提提提取取取取成成成成分分分分，如如如如蛇蛇蛇蛇床床床床子子子子、茵茵茵茵陈陈陈陈蒿、桑白皮中提取成分。蒿、桑白皮中提取成分。蒿、桑白皮中提取成分。蒿、桑白皮中提取成分。中中小小型型SFESFE装装装装置置置置图图图图上世纪50年代初进入试验阶段，如从石油中脱沥青中小型SFE装13 为物理过程，无化为物理过程，无化学反应，生物活性不学反应，生物活性不减。大能量的超声波减。大能量的超声波产生的极大压力造成产生的极大压力造成植物物细胞壁及整个植物物细胞壁及整个生物体破裂，胞内物生物体破裂，胞内物质的释放、扩散及溶质的释放、扩散及溶解。解。5.超声提取法（超声提取法（ultrasonic extraction)实验室用小型超声仪实验室用小型超声仪第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术 为物理过程，无化学反应，生物活性不减。大能量的14工工业业生生产产用用超超声声仪仪工业生产用超声仪156.微波提取法（微波提取法（microwave extraction）具具有有穿穿透透力力强强、选选择择性性高高、加加热热效效率率高高等等显显著著特特点点，而而且且其其操操作作简简便便、快快速速、节节能能、高效。高效。缺缺点点：工工业业化化设设备备少少、成成分分变变化化、生生物物活活性性变化。变化。工业生产用微波提取罐工业生产用微波提取罐第一节第一节 提取方法与技术提取方法与技术6.微波提取法（microwave extraction）16第二节第二节 分离与精制分离与精制 二、分离方法二、分离方法一一 、系统溶剂分离法：、系统溶剂分离法：1 1、此法是选用、此法是选用3434种不同极性的溶剂由低级性到高极性分步种不同极性的溶剂由低级性到高极性分步对上述总提取液进行提取分离，是提取物中各组分按其在不对上述总提取液进行提取分离，是提取物中各组分按其在不同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。同极性溶剂中溶解度的差异而得到分离。2 2、在中草药提取液中加入另一种溶剂以改变混合物溶剂的极、在中草药提取液中加入另一种溶剂以改变混合物溶剂的极性，使一部分物质沉淀析出，从而实现分离。如：水性，使一部分物质沉淀析出，从而实现分离。如：水醇法醇法除多糖、蛋白质等水溶性杂质；醇除多糖、蛋白质等水溶性杂质；醇水法除树脂、叶绿素等水法除树脂、叶绿素等水不溶性杂质；醇水不溶性杂质；醇醚法或醇醚法或醇丙酮法使苷类成分，而脂溶丙酮法使苷类成分，而脂溶性树脂等杂质则存留在母液中。性树脂等杂质则存留在母液中。第二节 分离与精制 二、分离方法一、系统溶剂分离法：17第二节第二节 分离与精制分离与精制 二、分离方法二、分离方法一一 、两相溶剂萃取法、两相溶剂萃取法（1 1）原理：利用混合物中各成分在两相互不相溶的溶剂中分）原理：利用混合物中各成分在两相互不相溶的溶剂中分配系数的不同而实现分离。萃取时如果各成分在两相溶剂中配系数的不同而实现分离。萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大，则分离效率越高。分配系数相差越大，则分离效率越高。分配系数分配系数K K值（即分配比）：溶质在两相溶剂中的分配比值（即分配比）：溶质在两相溶剂中的分配比（K K）在一定温度及压力下为一常数）在一定温度及压力下为一常数第二节 分离与精制 二、分离方法一、两相溶剂萃取法182.1 影响分离的因素影响分离的因素分离因子分离因子，分配系数，分配系数K=KA/KB KAKB,K=CU/CL（CU,CL被分离物质在上相和下相中浓度）被分离物质在上相和下相中浓度）根据根据值的大小可决定分离采用的方法值的大小可决定分离采用的方法:100，简单的一次萃取，可基本分离，简单的一次萃取，可基本分离.10010，10-12次萃取，次萃取，CCD法。法。2，100次以上萃取，次以上萃取，DCCC法。法。第二节第二节 分离与精制分离与精制2.2.根据物质在两相溶剂中的根据物质在两相溶剂中的分配比分配比不同进行分离不同进行分离2.1 影响分离的因素第二节 分离与精制2.根据物质19或用或用PC法求法求值，选择理想分离条件。值，选择理想分离条件。纸色谱（纸色谱（PC）也叫纸分配色谱（）也叫纸分配色谱（PPC，Paper Partition Chromatography）。）。（纸色谱定数）纸色谱定数）Rfa，Rfb为为A，B两物质在两物质在PC上上Rf值值=第二节第二节 分离与精制分离与精制或用PC法求值，选择理想分离条件。（纸色谱定数）Rf202.1 影响分离的因素影响分离的因素 pH值值 对对于于酸酸性性、碱碱性性、两两性性化化合合物物，pH值值可可改改变变它它们们的的存存在在状状态态（游游离离型型和和解解离离型型），分分配配比比受受pH值值的影响，因为的影响，因为HA达到达到99%解离时，解离时，pH=pKa+2HA达到达到99%游离时，游离时，pH=pKa-2第二节第二节 分离与精制分离与精制2.1 影响分离的因素HA达到99%解离时，pH=pKa 21第二节第二节 分离与精制分离与精制2.2 酸碱性成分的分离酸碱性成分的分离pH-梯度萃取法梯度萃取法 按酸碱性强弱不同分离酸性、碱性、中性物质，按酸碱性强弱不同分离酸性、碱性、中性物质，改变改变pH值值使酸碱成分呈不同状态。使酸碱成分呈不同状态。2.3 逆流分溶法、液滴逆流色谱、高速逆流色谱逆流分溶法、液滴逆流色谱、高速逆流色谱 逆流分溶法逆流分溶法(CCD)：多次连续液多次连续液-液萃取分离过程。液萃取分离过程。特点特点：条件温和，样品易回收，适用于中等极性、：条件温和，样品易回收，适用于中等极性、不稳定物质的分离。不稳定物质的分离。第二节 分离与精制2.2 酸碱性成分的分离pH-梯度22 液滴逆流色谱液滴逆流色谱(DCCC):一一种种液液-液液分分配配色色谱谱，流流动动相相呈呈液液滴滴形形式式垂垂直直上上升升或或下下降降，通通过过固固定定相相的的液液柱柱，实实现现物物质质的的逆逆流流色谱分离。色谱分离。特特点点：不不易易乳乳化化，样样品品可可定定量量回回收收，分分离离效效果果好好，特别适合于分离皂苷等水溶性成分。特别适合于分离皂苷等水溶性成分。缺点缺点：样品处理量小。：样品处理量小。第二节第二节 分离与精制分离与精制 第二节 分离与精制23高速逆流色谱高速逆流色谱（HSCCC）通过特定的高速行星式旋转所产生的离心力场通过特定的高速行星式旋转所产生的离心力场作用，使无载体支持的固定相稳定地保留在蛇形管作用，使无载体支持的固定相稳定地保留在蛇形管内，并使流动相单向、低速通过固定相，实现连续内，并使流动相单向、低速通过固定相，实现连续逆流萃取分离物质的目的。逆流萃取分离物质的目的。用于各种物质的分离，包括蛋白、酶、三萜、生用于各种物质的分离，包括蛋白、酶、三萜、生物碱、皂苷等。物碱、皂苷等。第二节第二节 分离与精制分离与精制高速逆流色谱（HSCCC）第二节 分离与精制24三、沉淀法三、沉淀法 1、酸碱沉淀法：利用某些成分在酸中或碱中溶解，又在、酸碱沉淀法：利用某些成分在酸中或碱中溶解，又在碱中或酸中沉淀的性质达到分离。对酸性、碱性或两性有碱中或酸中沉淀的性质达到分离。对酸性、碱性或两性有机化合物来说，通常通过加入酸、碱以调节溶液的机化合物来说，通常通过加入酸、碱以调节溶液的pH，以，以改变分子的存在状态（游离型或解离型），从而改变溶解改变分子的存在状态（游离型或解离型），从而改变溶解度而实现分离。如：酸提碱沉法，碱提酸沉法等度而实现分离。如：酸提碱沉法，碱提酸沉法等2、试剂沉淀法：在天然产物的提取液中，加入某些试剂，、试剂沉淀法：在天然产物的提取液中，加入某些试剂，使与有效成分结合而产生沉淀，借此进行分离。该方法与使与有效成分结合而产生沉淀，借此进行分离。该方法与简单萃取法相配合即析出被另一相不相混溶的有机溶剂。简单萃取法相配合即析出被另一相不相混溶的有机溶剂。3、铅盐沉淀法：利用有效成分或杂质能与铅离子形成难、铅盐沉淀法：利用有效成分或杂质能与铅离子形成难溶性盐，从而使有效成分与杂质分开，本方法可用来沉淀溶性盐，从而使有效成分与杂质分开，本方法可用来沉淀杂质，也可用来沉淀有效成分。例如鞣质的提取分离。酸杂质，也可用来沉淀有效成分。例如鞣质的提取分离。酸性或碱性化合物还可通过加入某种沉淀试剂使之生成水不性或碱性化合物还可通过加入某种沉淀试剂使之生成水不溶性的盐类沉淀等析出。如加入铅盐、雷氏铵盐等溶性的盐类沉淀等析出。如加入铅盐、雷氏铵盐等第二节第二节 分离与精制分离与精制三、沉淀法 第二节 分离与精制25四、吸附法：四、吸附法：分两种情况，一种是吸附杂质，另一分两种情况，一种是吸附杂质，另一种是吸附有效成分。常用吸附剂有，种是吸附有效成分。常用吸附剂有，氧化铝、氧化镁、酸性白土、活性炭氧化铝、氧化镁、酸性白土、活性炭等。从活性炭上洗脱被吸附的物质时，等。从活性炭上洗脱被吸附的物质时，溶剂的极性越小，洗脱能力越强。溶剂的极性越小，洗脱能力越强。第二节第二节 分离与精制分离与精制四、吸附法：第二节 分离与精制26五、盐析法：五、盐析法：在在提提取取液液中中，加加入入无无机机盐盐，使使其其达达到到一一定定浓浓度度或或饱饱和和，促促使使有有效效成成分分在在水水中中溶溶解解度度降降低低，而而沉沉淀淀析析出出，使使有有效效成分与其他水溶性较大的杂质分离。成分与其他水溶性较大的杂质分离。第二节第二节 分离与精制分离与精制五、盐析法：第二节 分离与精制27六、透析法：六、透析法：透析法是膜过滤法中的一种。透析法是膜过滤法中的一种。（1）原理：透析法是利用小分子物质在溶液中可）原理：透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜、而大分子物质不能透过半透膜的性通过半透膜、而大分子物质不能透过半透膜的性质，以达到分离的目的，本质上是一种分子筛作质，以达到分离的目的，本质上是一种分子筛作用。用。（2）应用：对于生物大分子，一般可以通过透析）应用：对于生物大分子，一般可以通过透析法进行浓缩和精制。如药用酶的精制。法进行浓缩和精制。如药用酶的精制。分离和纯化皂苷、蛋白质、多肽、多糖等大分子分离和纯化皂苷、蛋白质、多肽、多糖等大分子物质，可将其留在半透膜内，而将如无机盐、单物质，可将其留在半透膜内，而将如无机盐、单糖、双糖等小分子的物质透过半透膜，进入膜外糖、双糖等小分子的物质透过半透膜，进入膜外的溶液中，而加以分离精制。的溶液中，而加以分离精制。第二节第二节 分离与精制分离与精制六、透析法：第二节 分离与精制28七、升华法七、升华法 也可以用于提取。第二节第二节 分离与精制分离与精制七、升华法 第二节 分离与精制29八、分馏法：根据物质的沸点进行分离八、分馏法：根据物质的沸点进行分离1概念：概念：分馏法是利用中药中各成分沸点分馏法是利用中药中各成分沸点的差别进行提取分离的方法。一般情况下，的差别进行提取分离的方法。一般情况下，液体混合物沸点相差液体混合物沸点相差100以上时，可用反以上时，可用反复蒸馏法；沸点相差复蒸馏法；沸点相差25以下时，需用分以下时，需用分馏柱；沸点相差越小，则需要的分馏装置越馏柱；沸点相差越小，则需要的分馏装置越精细。精细。2应用：挥发油、一些液体生物碱的提取应用：挥发油、一些液体生物碱的提取分离常采用分馏法。分离常采用分馏法。第二节第二节 分离与精制分离与精制八、分馏法：根据物质的沸点进行分离第二节 分离与精制30原理：利用不同温度可引起物质溶解度的改变的性质以分原理：利用不同温度可引起物质溶解度的改变的性质以分离物质。离物质。a将不是结晶状态的固体物质处理成结晶状态的将不是结晶状态的固体物质处理成结晶状态的操作称结晶；操作称结晶；b将不纯的结晶进一步精制成较纯的结晶的将不纯的结晶进一步精制成较纯的结晶的过程称为重结晶。过程称为重结晶。一溶剂选择的一般原则：一溶剂选择的一般原则：1不反应；不反应；2冷时对所需要的成分溶解度较小，而热时溶解度较大；冷时对所需要的成分溶解度较小，而热时溶解度较大；对杂质溶解度很大或很小；对杂质溶解度很大或很小；3沸点低，易挥发；沸点低，易挥发；4无毒或毒性小；无毒或毒性小；5若无理想的单一溶剂时，可以考虑使用混合溶剂；若无理想的单一溶剂时，可以考虑使用混合溶剂；6一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等。第三节第三节 结晶及重结晶法结晶及重结晶法 原理：利用不同温度可引起物质溶解度的改变的性质以分离物质。a31二、结晶操作：二、结晶操作：结晶操作实际是进一步分离纯化过程：一般结晶操作实际是进一步分离纯化过程：一般是应用适量的溶剂在加热至沸点的情况下将是应用适量的溶剂在加热至沸点的情况下将化合物溶解，制成过饱和溶液，趁热过滤去化合物溶解，制成过饱和溶液，趁热过滤去除不溶性杂质，放置冷处，以析晶。除不溶性杂质，放置冷处，以析晶。第三节第三节 结晶及重结晶法结晶及重结晶法 二、结晶操作：第三节 结晶及重结晶法 32三、结晶纯度的判定：三、结晶纯度的判定：1、结晶形态和色泽：单一化合物的结晶具有结晶形状均、结晶形态和色泽：单一化合物的结晶具有结晶形状均一和均匀的色泽。一和均匀的色泽。2、熔点和熔距：单一化合物具有一定的熔点和较小的熔、熔点和熔距：单一化合物具有一定的熔点和较小的熔距，结晶前后的熔点应一致，熔距很窄，在距，结晶前后的熔点应一致，熔距很窄，在1(2的范围的范围内。但要注意双熔点，如汉防己乙素、芫花素及一些与糖内。但要注意双熔点，如汉防己乙素、芫花素及一些与糖结合的苷类化合物。结合的苷类化合物。3、色谱法：单一化合物在薄层色谱或纸色谱层析中经三、色谱法：单一化合物在薄层色谱或纸色谱层析中经三种不同的溶剂系统展开，均为一个斑点者为单一化合物。种不同的溶剂系统展开，均为一个斑点者为单一化合物。流动相：固定相饱和的氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极性流动相：固定相饱和的氯仿、乙酸乙酯、丁醇等弱极性有机溶剂。有机溶剂。洗脱顺序：化合物极性越小，越先出柱；反之，化合物洗脱顺序：化合物极性越小，越先出柱；反之，化合物极性越大，越后出柱。极性越大，越后出柱。应用：通常用于分离水溶性或极性较大的成分，如生物应用：通常用于分离水溶性或极性较大的成分，如生物碱、苷类、糖类、有机酸等化合物。碱、苷类、糖类、有机酸等化合物。第三节第三节 结晶及重结晶法结晶及重结晶法三、结晶纯度的判定：第三节 结晶及重结晶法33一、吸附色谱法一、吸附色谱法利用同一吸附剂对混合物中各成分吸附能力的差利用同一吸附剂对混合物中各成分吸附能力的差异而使各成分达到分离的色谱方法。特别适用于异而使各成分达到分离的色谱方法。特别适用于脂溶性中等分子量成分的分离。其中以固脂溶性中等分子量成分的分离。其中以固液液吸附用的最多，并有物理吸附（硅胶、氧化铝、吸附用的最多，并有物理吸附（硅胶、氧化铝、活性炭为吸附剂进行的吸附色谱）、化学吸附活性炭为吸附剂进行的吸附色谱）、化学吸附（黄酮等酚酸性物质被氧化铝吸附、生物碱被酸（黄酮等酚酸性物质被氧化铝吸附、生物碱被酸性硅胶吸附等）及半化学吸附（聚酰胺与黄酮类、性硅胶吸附等）及半化学吸附（聚酰胺与黄酮类、醌类等酚性化合物之间的氢键吸附，吸附力较弱，醌类等酚性化合物之间的氢键吸附，吸附力较弱，介于物理吸附与化学吸附之间）之分。介于物理吸附与化学吸附之间）之分。第四节第四节 色谱分离法色谱分离法 一、吸附色谱法第四节 色谱分离法 341物质的吸附规律：物质的吸附规律：（1）物理吸附过程一般无选择性，但吸附强弱大体遵循）物理吸附过程一般无选择性，但吸附强弱大体遵循“相似者易于吸附相似者易于吸附”的经验规律。的经验规律。（2）被分离的物质与吸附剂、洗脱剂共同构成吸附层析）被分离的物质与吸附剂、洗脱剂共同构成吸附层析的三要素，彼此紧密相连。的三要素，彼此紧密相连。2极性及其强弱判断：极性及其强弱判断：（1）一般化合物的极性按下列官能团的顺序增强：）一般化合物的极性按下列官能团的顺序增强：CH2CH2，CH2=CH2，OCH3，COOR，C=O，CHO，NH2，OH，COOH（2）溶剂的极性可大体根据介电常数的大小来判断。介）溶剂的极性可大体根据介电常数的大小来判断。介电常数越大，则极性越大。一般溶剂的介电常数按下列顺电常数越大，则极性越大。一般溶剂的介电常数按下列顺序增大：序增大：环己烷（环己烷（1.88），苯（），苯（2.29），无水乙醚（），无水乙醚（4.47），氯仿），氯仿（5.20），乙酸乙酯（），乙酸乙酯（6.11），乙醇（），乙醇（26.0），甲醇），甲醇（31.2），水（），水（81.0）第四节第四节 色谱分离法色谱分离法 1物质的吸附规律：第四节 色谱分离法 353吸附柱色谱法用于物质的分离：吸附柱色谱法用于物质的分离：以硅胶或氧化铝为吸附剂进行柱色谱分离时：以硅胶或氧化铝为吸附剂进行柱色谱分离时：（1）尽可能选用极性小的溶剂装柱和溶解样品，或用极）尽可能选用极性小的溶剂装柱和溶解样品，或用极性稍大的溶剂溶解样品后，以少量吸附剂拌匀挥干，上柱。性稍大的溶剂溶解样品后，以少量吸附剂拌匀挥干，上柱。（2）一般以）一般以TLC展开时使组分展开时使组分Rf值达到值达到0.2-0.3的溶剂系的溶剂系统作为最佳溶剂系统进行洗脱。实践中多用混合的有机溶统作为最佳溶剂系统进行洗脱。实践中多用混合的有机溶剂系统。剂系统。（3）为避免化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜）为避免化学吸附，酸性物质宜用硅胶、碱性物质宜用氧化铝作为吸附剂进行分离。通常在分离酸性（或碱性）用氧化铝作为吸附剂进行分离。通常在分离酸性（或碱性）物质时，洗脱溶剂中常加入适量的醋酸（或氨、吡啶、二物质时，洗脱溶剂中常加入适量的醋酸（或氨、吡啶、二乙胺），以防止拖尾、使斑点集乙胺），以防止拖尾、使斑点集 中。第四节第四节 色谱分离法色谱分离法 3吸附柱色谱法用于物质的分离：第四节 色谱分离法 362.4 液液-液分配柱色谱液分配柱色谱正正相相色色谱谱：固固定定相相极极性性大大，如如水水、缓缓冲冲液液等等；流流动相动相极性小极性小，如氯仿、乙酸乙酯等。，如氯仿、乙酸乙酯等。载体：硅胶（含水可达载体：硅胶（含水可达17%），硅藻土，纤维素等。），硅藻土，纤维素等。分离极性大或水溶性成分，如苷类、糖、生物碱等。分离极性大或水溶性成分，如苷类、糖、生物碱等。洗脱顺序：极性小的物质先被洗脱出来。洗脱顺序：极性小的物质先被洗脱出来。第四节第四节 色谱分离法色谱分离法2.4 液-液分配柱色谱第四节 色谱分离法37（一）基本原理：（一）基本原理：各各种种吸吸附附剂剂的的表表面面都都存存在在着着吸吸附附活活性性，对对有有机机化化合合物物表表现现出出不不同同程程度度的的吸吸附附能能力力，用用一一定定的的溶溶剂剂系系统统展展开开，溶溶剂剂与与混混合合物物各各成成分分竞竞争争吸吸附附活活性性表表面面，因因而而就就会会发发生生吸吸附附和和解解吸吸附附的的过过程程，吸吸附附能能力力差差的的物物质质易易被被解解吸吸附附，从从而而随随溶溶剂剂先先流流出出，吸吸附附能能力力强强的的物物质质，不不易易被被解解吸吸附附，从从而而后后流流出，流出先后顺序与吸附强弱有关。出，流出先后顺序与吸附强弱有关。吸吸附附色色谱谱法法的的分分离离效效果果如如何何，完完全全由由吸吸附附剂剂、溶溶剂剂和和被被分离物质的性质决定的。分离物质的性质决定的。第四节第四节 色谱分离法色谱分离法（一）基本原理：第四节 色谱分离法382.4 液液-液分配柱色谱液分配柱色谱反反相相色色谱谱：固固定定相相极极性性小小于于流流动动相相。如如HPLC反反相相柱柱，反相板。反相板。固定相固定相：硅胶硅醇基结合烷基，如：硅胶硅醇基结合烷基，如RP-2，RP-8，RP-18。亲脂性：。亲脂性：RP-18 RP-8 RP-2。流动相流动相(洗脱剂洗脱剂)：MeOH-H2O，CH3CN-H2O 洗脱顺序：洗脱顺序：分离极性大的成分分离极性大的成分，极性大者先洗脱，极性大者先洗脱下来。下来。第四节第四节 色谱分离法色谱分离法2.4 液-液分配柱色谱第四节 色谱分离法39吸附色谱法的分离效果如何课件403.1 吸附分类：吸附分类：物物理理吸吸附附：无无选选择择性性的的吸吸附附，吸吸附附解解析析发发生生迅迅速速。吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等；吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭等；化化学学吸吸附附：不不可可逆逆性性。如如碱碱性性氧氧化化铝铝对对酚酚酸酸性性成成分分的吸附，硅胶对生物碱的吸附等。的吸附，硅胶对生物碱的吸附等。半化学吸附半化学吸附：聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附。：聚酰胺对酚酸类、醌类的氢键吸附。第四节第四节 色谱分离法色谱分离法3.3.根据物质的根据物质的吸附性吸附性差别进行分离差别进行分离吸附色谱法吸附色谱法3.1 吸附分类：第四节 色谱分离法3.根据物质的吸附41吸附原理：相似相吸吸附原理：相似相吸影响吸附过程的三要素：影响吸附过程的三要素：吸附剂（固定相），吸附剂（固定相），溶质（被分离物质），溶质（被分离物质），溶剂（洗脱剂，展开剂，流动相）溶剂（洗脱剂，展开剂，流动相）第二节第二节 分离与精制分离与精制吸附原理：相似相吸第二节 分离与精制423.2 硅胶、氧化铝：硅胶、氧化铝：极性吸附剂极性吸附剂：载样量大，吸：载样量大，吸附力强附力强 硅胶硅胶：应用最广，：应用最广，适用于各适用于各类成分分离类成分分离 氧化铝氧化铝：有中性、酸性、碱：有中性、酸性、碱性氧化铝。性氧化铝。碱性氧化铝不适合碱性氧化铝不适合于分离酸性成分，多用于分离于分离酸性成分，多用于分离生物碱生物碱。第二节第二节 分离与精制分离与精制3.2 硅胶、氧化铝：第二节 分离与精制433.2 硅胶、氧化铝：硅胶、氧化铝：被分离物质吸附力与结构的关系被分离物质吸附力与结构的关系 被分离物质极性大，吸附力强，被分离物质极性大，吸附力强，Rf值小，洗脱难，值小，洗脱难，后被洗脱下来。后被洗脱下来。官能团极性大小排列顺序：官能团极性大小排列顺序：-COOH Ar-OH R-OH R-NH2,RNHR,RNR R R-CO-NRR RCHO RCOR RCOOR ROR RH第二节第二节 分离与精制分离与精制3.2 硅胶、氧化铝：第二节 分离与精制443.2 硅胶、氧化铝：硅胶、氧化铝：溶剂溶剂(洗脱剂洗脱剂)的极性与洗脱力的关系的极性与洗脱力的关系洗脱剂极性越大洗脱剂极性越大,洗脱力越强洗脱力越强.第二节第二节 分离与精制分离与精制3.2 硅胶、氧化铝：第二节 分离与精制45 练习练习:从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷成从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷成分分,比较极性大小和硅胶柱上洗脱顺序比较极性大小和硅胶柱上洗脱顺序.名称名称RR黄夹苷黄夹苷ACHO(D-Glc)2黄夹苷黄夹苷BCH3(D-Glc)2黄夹次苷黄夹次苷ACHOH黄夹次苷黄夹次苷BCH3H黄夹次苷黄夹次苷CCH2OHH黄夹次苷黄夹次苷DCOOHH单乙酰黄夹单乙酰黄夹次苷次苷BCH3H单乙酰黄夹次苷单乙酰黄夹次苷B R”=COCH3,其它其它R”=H第二节第二节 分离与精制分离与精制 练习:从黄花夹竹桃果仁中分离到七种强心苷成分,比较46第二节第二节 分离与精制分离与精制答案：答案：1.1.极性大极性大 小：黄夹苷小：黄夹苷A A黄夹苷黄夹苷B B 次次苷苷D D次苷次苷C C次苷次苷A A次苷次苷B B2.2.硅胶柱上的出柱顺序：后硅胶柱上的出柱顺序：后 先先 第二节 分离与精制答案：1.极性大 小：黄夹苷A473.2 活性炭活性炭非极性吸附剂非极性吸附剂吸附力与结构的关系吸附力与结构的关系 分子量大者分子量大者 分子量小者分子量小者 芳香族芳香族 脂肪族脂肪族 含含OH,COOH,NH2多者多者 少者少者洗脱力与溶剂的关系洗脱力与溶剂的关系 吡啶吡啶 15%酚酚/醇醇 7%酚酚/H2O 醇醇 含水醇含水醇H2O应用应用:黄酮、生物碱的富集，糖的分离、脱色等。黄酮、生物碱的富集，糖的分离、脱色等。第二节第二节 分离与精制分离与精制3.2 活性炭非极性吸附剂第二节 分离与精制483.4 聚酰胺聚酰胺(Polyamide)是由己酰胺聚合成的一类高是由己酰胺聚合成的一类高分子化合物。分子化合物。第二节第二节 分离与精制分离与精制分离原理分离原理：主要通过：主要通过酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成酰胺键与酚羟基、酸、醌等形成氢键氢键，产生，产生吸附吸附作用。吸附力取决于作用。吸附力取决于形成氢键缔合的形成氢键缔合的能力能力。3.4 聚酰胺(Polyamide)是由己酰胺聚合成的一49 3.4 聚酰胺聚酰胺 吸附力与结构的关系吸附力与结构的关系 a.a.形成氢键的基团数目越多形成氢键的基团数目越多,吸附力越强吸附力越强;b.b.形成分子内氢键者形成分子内氢键者,吸附力减少吸附力减少;第二节第二节 分离与精制分离与精制 3.4 聚酰胺第二节 分离与精制50d.d.芳香苷苷元芳香苷苷元 苷苷,单糖苷单糖苷 双糖苷双糖苷 叁糖苷叁糖苷 c.c.芳香化程度越高或共轭键越多芳香化程度越高或共轭键越多,吸附力越强吸附力越强;第二节第二节 分离与精制分离与精制3.4 聚酰胺聚酰胺 吸附力与结构的关系吸附力与结构的关系溶剂的洗脱能力溶剂的洗脱能力 水水 含水醇含水醇醇醇 丙酮丙酮NaOH/H2O甲酰胺甲酰胺二二甲基甲酰胺甲基甲酰胺苷,单糖苷双糖苷叁糖苷 c.芳香化程度513.4 聚酰胺聚酰胺 常用溶剂常用溶剂：H2O，EtOH/H2O，EtOH 应用应用:分离黄酮类分离黄酮类;除鞣质除鞣质.第二节第二节 分离与精制分离与精制3.4 聚酰胺第二节 分离与精制52练习练习:某植物中分得某植物中分得3个黄酮化合物，结构如下个黄酮化合物，结构如下,比比较它们的极性大小及在硅胶较它们的极性大小及在硅胶TLC和聚酰胺薄膜上和聚酰胺薄膜上Rf值大小顺序值大小顺序.A:R1=R2=HB:R1=H,R2=RhamC:R1=Glc,R2=Rham极性大小极性大小:SiO2-TLC Rf:Polyamide TLC,Rf:第二节第二节 分离与精制分离与精制练习:某植物中分得3个黄酮化合物，结构如下,比较它们的极53极性大小极性大小:C B ASiO2-TLC Rf:A B CPolyamide TLC,Rf:C B A第二节第二节 分离与精制分离与精制答案：答案：极性大小:C B A第二节 分离与精制答案：543.5 大孔吸附树脂大孔吸附树脂(macro-reticular resin)组成组成:苯乙烯，二乙烯苯和致孔剂苯乙烯，二乙烯苯和致孔剂分离原理分离原理:吸附吸附(范德华力和氢键范德华力和氢键)和和分子筛分子筛作用作用(多多孔性结构孔性结构)树脂类型树脂类型:非极性、中极性和极性三种。非极性、中极性和极性三种。非极性非极性：由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称 芳香吸附树脂。芳香吸附树脂。中极性中极性：含脂基的吸附树脂：含脂基的吸附树脂。极极 性性：含酰氨基、氰基、酚羟基等含氮、氧、：含酰氨基、氰基、酚羟基等含氮、氧、硫不同极性功能的吸附树脂。硫不同极性功能的吸附树脂。第二节第二节 分离与精制分离与精制3.5 大孔吸附树脂(macro-reticular res553.5 大孔吸附树脂大孔吸附树脂 洗脱剂洗脱剂:H2O 及不同比例的含水醇。及不同比例的含水醇。洗脱分离洗脱分离:H2O 洗洗:糖糖,水溶性色素水溶性色素 30%EtOH/H2O:极性大的成分极性大的成分 50-75%EtOH:皂苷类皂苷类 95%EtOH:极性小成分极性小成分 应用应用:除多糖除多糖,水溶性色素水溶性色素,富集苷类成分富集苷类成分第二节第二节 分离与精制分离与精制3.5 大孔吸附树脂第二节 分离与精制564.根据物质根据物质离解程度不同离解程度不同进行分离进行分离离子交换法离子交换法 固定相固定相：离子交换树脂（聚苯乙烯高分子化合物，引：离子交换树脂（聚苯乙烯高分子化合物，引 入交换基团）入交换基团）分类：分类：阳离子交换树脂：强酸型阳离子交换树脂：强酸型 RSO3-H+弱酸型弱酸型 RCOO-H+阴离子交换树脂：强碱型阴离子交换树脂：强碱型 RN+(CH3)3Cl-弱碱型弱碱型 RNH2,RNHR,RNRR”第二节第二节 分离与精制分离与精制4.根据物质离解程度不同进行分离离子交换法第二节 分574.1交换原理交换原理:阳离子交换树脂：阳离子交换树脂：阴离子交换树脂：阴离子交换树脂：4.2应用：应用：主要用于主要用于生物碱生物碱和和有机酸有机酸的分离。的分离。第二节第二节 分离与精制分离与精制4.根据物质根据物质离解程度不同离解程度不同进行分离进行分离离子交换法离子交换法4.1交换原理:阴离子交换树脂：4.2应用：第二节 58 透析法透析法:半透膜半透膜,分子筛滤过作用分子筛滤过作用 超滤法超滤法:分子大小不同分子大小不同,扩散速度不同扩散速度不同 超速离心法超速离心法:溶质在超速离心作用下具有不同的溶质在超速离心作用下具有不同的 沉降性或浮游性沉降性或浮游性 凝胶滤过法凝胶滤过法:分子筛的作用分子筛的作用(凝胶渗透色谱凝胶渗透色谱,分子分子 筛滤过筛滤过,排阻色谱排阻色谱),),被分离物质按分子被分离物质按分子 由大到小的顺序流出色谱柱由大到小的顺序流出色谱柱.5.5.根据物质根据物质分子大小差别分子大小差别进行分离进行分离凝胶滤过法凝胶滤过法 第四节第四节 提取分离方法提取分离方法5.1 5.1 主要的几种方法主要的几种方法 透析法:半透膜,分子筛滤过作用5.根据物质分子大小差别595.2凝胶种类凝胶种类:葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶(Sephadex G):只适于在只适于在水水中应用中应用,分离多糖、分离多糖、蛋白质等蛋白质等.羟丙基葡聚糖凝胶羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-10)：适用于各类化合物的分离，除具有分子筛的特性适用于各类化合物的分离，除具有分子筛的特性外，还起到反相分配色谱的效果。外，还起到反相分配色谱的效果。常用溶剂有常用溶剂有甲醇、氯仿甲醇、氯仿-甲醇甲醇等。等。第四节第四节 提取分离方法提取分离方法5.5.根据物质根据物质分子大小差别分子大小差别进行分离进行分离凝胶滤过法凝胶滤过法5.2凝胶种类:第四节 提取分离方法5.根据物质分子大60 本本 章章 内内 容容第一节第一节 绪论绪论第二节第二节 各类成分简介各类成分简介第三节第三节 生物合成生物合成第四节第四节 提取分离方法提取分离方法第五节第五节 天然产物化学成分结构测天然产物化学成分结构测定定 本 章 内 容第一节 绪论61一一一一 化合物纯度的鉴定化合物纯度的鉴定化合物纯度的鉴定化合物纯度的鉴定（Identification of PurityIdentification of Purity）1.测熔点测熔点:看熔程看熔程 2.外观结晶色泽与形状外观结晶色泽与形状:均一性均一性 3.色谱法色谱法:TLC 三种组成不同的溶剂系统三种组成不同的溶剂系统,单一斑单一斑点点;HPLC 单一峰单一峰 GC 单一峰单一峰 4.核磁法核磁法：不主张。：不主张。第五节第五节 结构研究法结构研究法？一 化合物纯度的鉴定（Identification of 62二、已知化合物鉴定二、已知化合物鉴定二、已知化合物鉴定二、已知化合物鉴定（Known compounds)Known compounds)1.有标准品有标准品(或对照品或对照品):Co-TLC(共薄层，三种系统共薄层，三种系统)测混合熔点测混合熔点(相同溶剂结晶相同溶剂结晶);测测IR(考察是否重叠）考察是否重叠）2.无标准品无标准品:与文献值对照与文献值对照(相同的溶剂条件下：相同的溶剂条件下：mp,IR,UV,1H-NMR,13C-NMR等等)。第五节第五节 结构研究法结构研究法二、已知化合物鉴定（Known compounds)第五63三、未知化合物三、未知化合物 多种谱学结合的结构解析多种谱学结合的结构解析 1.紫外光谱紫外光谱(Ultraviolet spectra UV)为结构解析提供的信息为结构解析提供的信息 用于判断结构中的共轭系统、结构骨架（如香用于判断结构中的共轭系统、结构骨架（如香豆素、黄酮）豆素、黄酮）UV谱一致，不一定是一个化合物谱一致，不一定是一个化合物。应用：应用：确定平面的确定平面的结构骨架结构骨架，立体结构的构型、，立体结构的构型、构象。构象。第五节第五节 结构研究法结构研究法三、未知化合物 多种谱学结合的结构解析 第五节 结构研642.红外光谱红外光谱(Infrared spectra IR)为结构解析提供的信息为结构解析提供的信息 提供各种官能团的信息提供各种官能团的信息 八大区（复习）八大区（复习）如：芳香环如：芳香环:1600-1480cm-1，OH:3000 cm-1,C=O:1700 cm-1.IR相同者为同一化合物相同者为同一化合物.第五节第五节 结构研究法结构研究法2.红外光谱(Infrared spectra IR)653.质谱质谱(Mass spectra MS)为结构解析提供的信息为结构解析提供的信息 给出分子量给出分子量(M+),给出基团或片段信息给出基团或片段信息,HR-MS可计算分子式可计算分子式;MS图一致图一致(同一型号仪器同一型号仪器,同一条件同一条件)一般为同一化一般为同一化合物合物。类型类型 EI-MS:醇、糖苷不能给出分子离子峰醇、糖苷不能给出分子离子峰;FD-MS、FAB-MS、ESI-MS：用于糖苷：用于糖苷,肽肽,核酸核酸类类,可确定分子量。可确定分子量。HR-MS：给处精确的分子量和分子式。：给处精确的分子量和分子式。第五节第五节 结构研究法结构研究法3.质谱(Mass spectra MS)第五节 结66为结构解析提供的信息为结构解析提供的信息 化学位移化学位移:(用于判断用于判断H的化学环境的化学环境 chemical shift);偶合常数偶合常数:J(Hz)用于判断用于判断H与与H的关系的关系 coupling constant)积分强度积分强度(积分面积积分面积):确定确定H的数目的数目.4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.1 质子谱（质子谱（1H-NMR）第五节第五节 结构研究法结构研究法为结构解析提供的信息4.核磁共振谱（Nuclear ma67J8.0Hz 存在偶合存在偶合J8.0Hz 存在偶合68 第五节第五节 结构研究法结构研究法4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.1 质子谱（质子谱（1H-NMR）常见基团的化学位移常见基团的化学位移 值值:Ar-H ：6-8,-CHO ：9.8 -CH3 ：1-1.5,C=C-CH3,COCH3,ArCH3 ：1.9-2.5-OCH3 ：3.5-4.0,-COOCH3与与ArOCH3 ：3.7-4.0 第五节 结构研究法4.核磁共振谱（Nuclear m69 第五节第五节 结构研究法结构研究法影响化学位移因素影响化学位移因素 化学位移值与化学位移值与电子云密度电子云密度有关。电子云密度有关。电子云密度降低降低,去屏蔽作用增强去屏蔽作用增强,向向低场位移低场位移,增大增大。1 1）诱导效应）诱导效应 2 2）共轭效应）共轭效应 3 3）磁各向异性效应）磁各向异性效应 4 4）氢键缔合）氢键缔合 5 5）范德华效应）范德华效应4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.1 质子谱（质子谱（1H-NMR）第五节 结构研究法影响化学位移因素4.核磁共振谱（70.偶合常数偶合常数(J)a.偶合裂分是有原子核引起的偶合裂分是有原子核引起的,通过化学键传递通过化学键传递;b.相互偶合的相互偶合的H核其核其J值相同值相同;c.一级图谱峰的裂分遵循一级图谱峰的裂分遵循n+1规律规律;d.归属归属H核核,判断排列情况判断排列情况.l偶合分类偶合分类 偕偶偕偶(Jgem)又为同碳偶合又为同碳偶合 sp3 J=10-15Hz;sp2 C=CH2 J=0-2Hz,N=CH2 J=7.6-17Hz 第五节第五节 结构研究法（结构研究法（Methods of Structure identification）4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.1 氢谱（氢谱（1H-NMR）.偶合常数(J)第五节 结构研究法（Methods 71邻偶邻偶(Jvic)饱和型饱和型:自由旋转自由旋转J=7Hz 构象固定构象固定:0-18Hz,与两面角有关与两面角有关,J90=0Hz,J180 Jo (7.5Hz);烯型：烯型：Jcis=6-14Hz(10),Jtrans=11-18Hz(15)芳环芳环:Jo=6-9Hz,.远程偶合远程偶合:如烯丙偶合如烯丙偶合 J4=0-3Hz，苯环的间位，苯环的间位Jm=1-3Hz和对和对位偶合位偶合Jp=0-1Hz 第五节第五节 结构研究法（结构研究法（Methods of Structure identification）偶合分类偶合分类邻偶(Jvic)第五节 结构研究法（Methods o72 第五节第五节 结构研究法（结构研究法（Methods of Structure identification）4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.2 碳谱（碳谱（13C-NMR）为结构解析提供的信息为结构解析提供的信息化学位移：碳处的化学环境化学位移：碳处的化学环境峰高或峰面积峰高或峰面积:一般不与碳数成正比一般不与碳数成正比 第五节 结构研究法（Methods of Struct73 第五节第五节 结构研究法（结构研究法（Methods of Structure identification）4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.2 碳谱（碳谱（13C-NMR）常见一些基团的化学位移常见一些基团的化学位移 值值:脂肪脂肪C:50 连杂原子连杂原子C:C-O,C-N,C-S :50-100 C-OCH3:55;糖端基糖端基C:95-105 芳香碳芳香碳,烯碳烯碳:98-160 连氧芳碳连氧芳碳:140-165 C=O:168-220 第五节 结构研究法（Methods of Struct74 C=O:168-220 醛醛CHO：190205 酮：酮：195220 羧酸：羧酸：170185 酯及内酯：酯及内酯：165180 酰胺及内酰胺酰胺及内酰胺:165180 第五节第五节 结构研究法结构研究法 C=O:168-220 第五节 结构研究法75 a 全氢去偶谱全氢去偶谱(COM)或或噪音去偶谱噪音去偶谱(PND)或或质子宽带质子宽带去偶谱去偶谱(BBD)特点特点:图谱简化图谱简化,所有信号均呈单峰所有信号均呈单峰.b 偏共振去偶谱偏共振去偶谱(OFR)特点特点:由于部分保留由于部分保留1H的偶合影响的偶合影响,可识别伯、可识别伯、仲、叔、季碳。仲、叔、季碳。CH3,q，CH2,t，CH,d，C,s。第五节第五节 结构研究法结构研究法4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.2 碳谱（碳谱（13C-NMR）常见的常见的13C-NMR谱的类型及二维谱谱的类型及二维谱 a 全氢去偶谱(COM)或噪音去偶谱(PND)或质子宽带去76BBDBBD77练习：练习：一化合物，分子式为一化合物，分子式为C6H14，高度对称，在噪音去，高度对称，在噪音去偶谱（偶谱（COM）上只有两个信号，在偏共振去偶谱）上只有两个信号，在偏共振去偶谱（OFR）上只有一个四重峰（）上只有一个四重峰（q）及一个二重峰）及一个二重峰(d)，试写出其结构，试写出其结构 第五节第五节 结构研究法（结构研究法（Methods of Structure identification）练习：一化合物，分子式为C6H14，高度对称，在噪音去78.常见的常见的13C-NMR谱的类型及二维谱谱的类型及二维谱 c.DEPT谱谱特点：特点：不同类型不同类型13C信号呈单峰分别朝上或向下信号呈单峰分别朝上或向下,可可识别识别CH3，CH2，CH，C.脉冲宽度脉冲宽度 =135CH3,CH ,CH2（常用常用）=90CH ,=45CH3,CH2,CH ,季碳不出现季碳不出现 第五节第五节 结构研究法结构研究法4.核磁共振谱（核磁共振谱（Nuclear magnetic resonance NMR）4.2 碳谱（碳谱（13C-NMR）.常见的13C-NMR谱的类型及二维谱 第五节