紫外可见分光光度计的应用课件

Version 1.0 紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计的应用 及日常维护和注意事项及日常维护和注意事项内容提要内容提要一、紫外可见分光光度计的简单原理一、紫外可见分光光度计的简单原理二、影响紫外仪器质量的几个重要指标二、影响紫外仪器质量的几个重要指标三、紫外系列顶级产品介绍三、紫外系列顶级产品介绍19系列系列四、四、19系列紫外可见分光光度计的特点系列紫外可见分光光度计的特点五、应用中的几个问题五、应用中的几个问题普析通用普析通用普析通用普析通用 一、紫外可见分光光度计的简单原理：朗朗伯伯定定律律（17601760年年）：物物质质对对光光的的吸吸收收与与物物质质厚度成正比厚度成正比:A=f(b):A=f(b)比比耳耳定定律律（18521852年年）：物物质质对对光光的的吸吸收收与与物物质质浓度成正比浓度成正比:A=f(c):A=f(c)朗朗伯伯比比耳耳定定律律：A=A=bcbc；成成立立条条件件：单单色色光光稀溶液稀溶液 注注：朗朗伯伯比比耳耳定定律律A=A=bcbc,是是一一切切UV-VISSUV-VISS设设计计者者、制制造造者者、使使用用者者必必须须严严格格遵遵守守的的最最基基本、最重要的定律。本、最重要的定律。普析通用普析通用普析通用普析通用 1945年UVS问世（1940年开始实验、设计；简单、粗糙、手动）；当前已成为全世界历史最优久、使用最多、覆盖面最广的分析仪器！已成为全世界公认的光、机、电、计算机结合的高科技产品一般的紫外可见分光光度计都有以下几部分组成：光源；单色器；样品池；检测器等。普析通用普析通用普析通用普析通用 应用领域：应用领域：应用领域：应用领域：紫外可见分光光度计是一种历史悠久、覆盖面很广、紫外可见分光光度计是一种历史悠久、覆盖面很广、紫外可见分光光度计是一种历史悠久、覆盖面很广、紫外可见分光光度计是一种历史悠久、覆盖面很广、使用很多的分析仪器，已在使用很多的分析仪器，已在使用很多的分析仪器，已在使用很多的分析仪器，已在有机化学、生物化学、药有机化学、生物化学、药有机化学、生物化学、药有机化学、生物化学、药品分析、食品检验、医药卫生、环境保护、生命科学品分析、食品检验、医药卫生、环境保护、生命科学品分析、食品检验、医药卫生、环境保护、生命科学品分析、食品检验、医药卫生、环境保护、生命科学等等等等各个领域的科研、生产工作中都得到了极其广泛的各个领域的科研、生产工作中都得到了极其广泛的各个领域的科研、生产工作中都得到了极其广泛的各个领域的科研、生产工作中都得到了极其广泛的应用。应用。应用。应用。可以说有实验室的地方就会有它。可以说有实验室的地方就会有它。可以说有实验室的地方就会有它。可以说有实验室的地方就会有它。普析通用普析通用普析通用普析通用二、影响紫外仪器质量的几个重要指标1.1.光度准确度与重复性定义：多次测量的光度平均值与真值之差为定义：多次测量的光度平均值与真值之差为光度准确度（光度准确度（T T、A A）；）；最大值与最小值最大值与最小值之差为光度重复性。之差为光度重复性。测定方法：用标准滤色片或重铬酸钾溶液，测定方法：用标准滤色片或重铬酸钾溶液，进行波长扫描、峰值检出，连续测量三次。进行波长扫描、峰值检出，连续测量三次。重要性：严重影响测定的准确度，是测定误重要性：严重影响测定的准确度，是测定误差的主要来源。见下图：差的主要来源。见下图：普析通用普析通用普析通用普析通用2 2 杂散光杂散光定义：单色器额定通带以外的透射辐射能量与定义：单色器额定通带以外的透射辐射能量与总的透射能量之比，也就是光谱通带以外总的透射能量之比，也就是光谱通带以外“不不要的要的”光通量就是杂散光。光通量就是杂散光。测定方法：标准滤色片法或测定方法：标准滤色片法或NaI(220NaI(220nmnm处处)、NaNONaNO2 2(340nm(340nm处处)。主要来源：主要来源：光栅光栅、光学元件、电光源系统、化、光学元件、电光源系统、化学发光、试池荧光、粒子散射等。学发光、试池荧光、粒子散射等。重重要要性性：限限制制测测定定浓浓度度的的上上限限从从而而影影响响分分析析的的准确度。准确度。普析通用普析通用普析通用普析通用 举例：如对某生物酶检测：它的吸光度为举例：如对某生物酶检测：它的吸光度为1.95Abs,1.95Abs,要求要求1%1%误差；仪器的误差；仪器的SL=0.2%SL=0.2%，行不行？行不行？不行！因其误差为不行！因其误差为3.6%3.6%！只有！只有SL=0.05%,SL=0.05%,才才可达可达1%!1%!请见上图！请见上图！普析通用普析通用普析通用普析通用 3 噪声定义：无样品时仪器自身的波动。测定方法：开机预热、500nm处时间扫描120秒。主要来源：光学系统、光源、检测器、电子元器件及电路设计等。重要性：限制测定浓度的下限，从而影响分析的准确度。普析通用普析通用普析通用普析通用 4 4 稳定性（即漂移稳定性（即漂移）定义：一小时内仪器自身的漂移量。定义：一小时内仪器自身的漂移量。重重要要性性：如如不不好好，影影响响测测定定的的重重现现性性与与准准确确度度，严重甚至根本无法测定。严重甚至根本无法测定。影响稳定性的主要因素：影响稳定性的主要因素：光光源源（氘氘灯灯：电电源源1%-1%-光光6.7%6.7%；钨钨灯灯：电电源源1%-1%-光光3.4%3.4%）、光光电电倍倍增增管管(电电源源1%-1%-放放大大后后的信号的信号12%)12%)、温度、环境等温度、环境等普析通用普析通用普析通用普析通用 5 5 基线基线平直度平直度定义：全波段的噪声、含滤光片和光源切换等。定义：全波段的噪声、含滤光片和光源切换等。测试方法：测试方法：OAOA、SBW2nmSBW2nm、全波长扫描。全波长扫描。基线平直度与噪声的区别：基线平直度与噪声的区别：基线平直度：全波段扫描、动态；与狭缝基线平直度：全波段扫描、动态；与狭缝、光源切换有关。光源切换有关。噪声：单波长噪声：单波长500nm500nm、静态静态 时间扫描；与狭时间扫描；与狭缝、缝、光源切换无关。光源切换无关。基线平直度与稳定性的区别：基线平直度与稳定性的区别：基基线线平平直直度度：0A,0A,SBW2nmSBW2nm、开开机机半半小小时时后后，全全波波长长慢慢（中）速扫描（中）速扫描 稳稳定定性性：0A,0A,SBW2nmSBW2nm，定定波波长长500nm500nm。开开机机两两小小时时后后 时间扫描时间扫描(1h)(1h)普析通用普析通用普析通用普析通用 6 6 波长准确度与重复性波长准确度：多次测量平均值与真值之差。波长准确度：多次测量平均值与真值之差。波长重复性：多次测量值中最大最小值之差。波长重复性：多次测量值中最大最小值之差。测测 定定 方方 法法：用用 汞汞 灯灯（871.60871.60、546.07nm546.07nm、253.65nm)253.65nm)、氘氘灯灯(656.1nm(656.1nm、486.0nm)486.0nm)或或者者用用标准滤色片。标准滤色片。重重要要性性：吸吸光光度度是是随随波波长长而而变变化化的的，波波长长准准确确度不合格，测量的吸光度肯定也不准确。度不合格，测量的吸光度肯定也不准确。普析通用普析通用普析通用普析通用三、TU-1901/1900介绍普析通用普析通用普析通用普析通用1、性能指标（与国外同档次仪器的比较）普析通用普析通用普析通用普析通用2、功能指标：光度测量：测量样品在指定波长下的吸光度或透过率。可进行单波长或多波长测量普析通用普析通用普析通用普析通用并可对测量值进行简单的计算。普析通用普析通用普析通用普析通用 光谱扫描：测量样品在指定的波长范围内吸光度或透过率随波长变化的曲线可对扫描参数进行任意设置。普析通用普析通用普析通用普析通用 多文件管理；同时可实现对图谱进行峰值检出、四则运算、A-T转换、14次导数、三维图谱等多种功能。普析通用普析通用普析通用普析通用 定量测定：定量测定：基于工作曲线，基于工作曲线，而对样品浓度而对样品浓度进行定量测定进行定量测定的相对测量法。的相对测量法。具有单波长、具有单波长、双波长、三双波长、三波长、波长、1414次导数等多次导数等多种测量方法。种测量方法。普析通用普析通用普析通用普析通用 可对校正曲线（工作曲线）自动进行14次的曲线拟合，并自动计算出未知样品的浓度。普析通用普析通用普析通用普析通用 时间扫描：测量样品在指定波长下吸光度随时间变化的曲线。常用于研究化学反应历程、化学动力学等。普析通用普析通用普析通用普析通用 举例：显色反应中有色物质的稳定性。普析通用普析通用普析通用普析通用 DNA/蛋白质检测器：测量DNA/蛋白质的浓度。提供三种方法，快速测量DNA/蛋白质的浓度。普析通用普析通用普析通用普析通用四、我公司紫四、我公司紫外外可见分光光度计可见分光光度计1919系列主要特点系列主要特点1.1.杂散光小（杂散光小（1901-0.015%1901-0.015%）：采用进口闪耀全息优质光：采用进口闪耀全息优质光栅和生产工艺，保证了整机的杂散光非常小，从而大栅和生产工艺，保证了整机的杂散光非常小，从而大大扩展了仪器分析测试样品浓度的上限，可减少分析大扩展了仪器分析测试样品浓度的上限，可减少分析测试误差，拓宽仪器的适应范围测试误差，拓宽仪器的适应范围(DNA)(DNA)。2.2.噪声小（噪声小（1901-0.00041901-0.0004）：采用进口氘灯、光电倍增管）：采用进口氘灯、光电倍增管和电子元件等，检测工艺先进，保证了整机的噪声非和电子元件等，检测工艺先进，保证了整机的噪声非常小，进一步降低了仪器分析测试样品浓度的下限常小，进一步降低了仪器分析测试样品浓度的下限,扩扩展了仪器的适应范围展了仪器的适应范围3 3、光度准确度好（指标：光度准确度好（指标：0.3%T0.3%T；实测实测0.1%T0.1%T）：由）：由于仪器的杂散光很小、噪声很小，所以，大大提高了于仪器的杂散光很小、噪声很小，所以，大大提高了仪器的光度准确性，保证了分析测试数据的可靠性。仪器的光度准确性，保证了分析测试数据的可靠性。普析通用普析通用普析通用普析通用 4 4、稳定性好（指标：、稳定性好（指标：0.0004A/h0.0004A/h；实测实测0.0002A/h0.0002A/h）采用）采用双光束动态比例记录和进口电子元件，先进的制造工艺，双光束动态比例记录和进口电子元件，先进的制造工艺，大大减小了仪器的漂移，保证了整机的稳定性和可靠性。大大减小了仪器的漂移，保证了整机的稳定性和可靠性。、自动化程度高：全机只手动一个电源开关，其余全部、自动化程度高：全机只手动一个电源开关，其余全部自动控制；开机全方位自检，狭缝、滤色片、波长电机、自动控制；开机全方位自检，狭缝、滤色片、波长电机、钨灯、氘灯、波长校准等保证整机最佳工作状态，提高钨灯、氘灯、波长校准等保证整机最佳工作状态，提高可靠性。可靠性。、性能价格比高（性能优秀，价格合理）；相当国外同、性能价格比高（性能优秀，价格合理）；相当国外同类高档仪器的质量，但只相当国外同类中档仪器的价格。类高档仪器的质量，但只相当国外同类中档仪器的价格。7 7、多种可选附件扩展您的适用范围（积分球、恒温池架、多种可选附件扩展您的适用范围（积分球、恒温池架、试管架、微量超微量池架、各种规格的比色皿等试管架、微量超微量池架、各种规格的比色皿等1010种）。种）。普析通用普析通用普析通用普析通用五、紫外产品应用中可能遇到问题的处理方法五、紫外产品应用中可能遇到问题的处理方法开机后仪器无任何反应开机后仪器无任何反应电源线接触不良电源线接触不良没有供电电压没有供电电压电源开关处的保险管熔断电源开关处的保险管熔断自检波长原点时电机有异常响声，波长电机自检波长原点时电机有异常响声，波长电机自检错误自检错误此故障为撞丝杆此故障为撞丝杆(正弦臂越过光电开关正弦臂越过光电开关)解解决办法为关闭电源，打开仪器的底板，用手决办法为关闭电源，打开仪器的底板，用手拨动正弦机构与电机的联结轴，把正弦臂转拨动正弦机构与电机的联结轴，把正弦臂转到丝杆的中间位置即可到丝杆的中间位置即可普析通用普析通用普析通用普析通用 钨灯自检不过钨灯自检不过样品池挡光检查样品池中是否有异物，或样品池挡光检查样品池中是否有异物，或光路中有其他物品挡光光路中有其他物品挡光(18(18和和T6T6系列要设置正确系列要设置正确的样品池模式的样品池模式)钨灯坏，更换（注意，更换前要用干净的钨灯坏，更换（注意，更换前要用干净的纸套将光源镜罩上）纸套将光源镜罩上）光源镜氧化生锈光源镜的表面为金属镀膜，光源镜氧化生锈光源镜的表面为金属镀膜，长期处于潮湿及有腐蚀气体的环境中，金属膜易长期处于潮湿及有腐蚀气体的环境中，金属膜易氧化生锈（联系我们，更换光源镜）氧化生锈（联系我们，更换光源镜）钨灯与钨灯架接触不良，或钨灯架与钨灯座钨灯与钨灯架接触不良，或钨灯架与钨灯座接触不良解决方法是用小内六角或一字解刀分接触不良解决方法是用小内六角或一字解刀分别紧固别紧固普析通用普析通用普析通用普析通用联机自检时，样品池原点定位错误联机自检时，样品池原点定位错误样品池为固定池，软件设置为多联池将软件样品池为固定池，软件设置为多联池将软件设置为固定池，重新开机自检（反之亦然）设置为固定池，重新开机自检（反之亦然）多联池电机连线插头松动多联池电机连线插头松动多联池光电开关连线插头松动多联池光电开关连线插头松动联机自检时，氘灯定位错误，以及波长定位错误联机自检时，氘灯定位错误，以及波长定位错误氘灯坏，更换氘灯坏，更换光源镜氧化生锈光源镜氧化生锈灯电源板上的灯电源板上的mAmA保险管熔断，解决方法保险管熔断，解决方法是是1818打开仪器上盖，将灯电源板上的打开仪器上盖，将灯电源板上的mAmA保险管保险管更换更换1919的保险管在仪器后面。的保险管在仪器后面。普析通用普析通用普析通用普析通用n n 做样品时，数值不稳定做样品时，数值不稳定比色皿脏，清洗比色皿比色皿脏，清洗比色皿在紫外区用了玻璃比色皿应使用石英比色皿在紫外区用了玻璃比色皿应使用石英比色皿样品溶液有问题有的样品组分的化学反应有一定的样品溶液有问题有的样品组分的化学反应有一定的时间过程，各组分的浓度随时间变化生物的运动也会影响数时间过程，各组分的浓度随时间变化生物的运动也会影响数值的稳定值的稳定仪器噪声大仪器噪声大仪器稳定性超标仪器稳定性超标表现为测吸光度和透射比不稳定，其原因也是仪器噪声大表现为测吸光度和透射比不稳定，其原因也是仪器噪声大普析通用普析通用普析通用普析通用 基线指标超标基线指标超标预热时间不够预热时间不够仪器噪声大仪器噪声大注意：做基线前必须校基线，系列仪器基线校注意：做基线前必须校基线，系列仪器基线校正时用中速，系列仪器基线校正时用慢速正时用中速，系列仪器基线校正时用慢速仪器噪声大仪器噪声大供电电压不稳，需安装稳压器供电电压不稳，需安装稳压器光源镜氧化，更换光源镜光源镜氧化，更换光源镜样品池挡光，需对样品池进行适当调整样品池挡光，需对样品池进行适当调整没做暗电流把黑挡块插入样品池，做暗电流没做暗电流把黑挡块插入样品池，做暗电流光路中镜子很脏，须处理干净（注意：光源光路中镜子很脏，须处理干净（注意：光源镜只能用洗耳球吹，不能用任何东西擦拭镜只能用洗耳球吹，不能用任何东西擦拭普析通用普析通用普析通用普析通用 仪器无法与联机仪器无法与联机RS232RS232串口连线松动，重新插好，把两个螺丝拧串口连线松动，重新插好，把两个螺丝拧紧紧软件与实际联接的软件与实际联接的COMCOM口不一致口不一致地址可能被其他程序占用，可更换地址可能被其他程序占用，可更换COMCOM口解决口解决此问题此问题机串口损坏机串口损坏仪器无法打印仪器无法打印(指单机的指单机的1818系列和系列和T6T6系列系列)并口打印电缆松动，重新接好并口打印电缆松动，重新接好.打印机型号不兼容只支持打印机型号不兼容只支持HPHP并口打印机：激并口打印机：激光型光型5L,6L,5100,1100,1200,5000LE5L,6L,5100,1100,1200,5000LE喷墨型喷墨型630C,5652630C,5652等等普析通用普析通用普析通用普析通用 六、日常维护与注意事项n n1、注意事项n n严格按照仪器操作手册安全使用仪器，严禁违规操作。n n不能擅自拆卸仪器零件，尤其不能碰伤光学镜面，也不可随意檫拭。n n严禁将腐蚀性的溶液泼撒在仪器表面及内部，如不小心沾上，必须及时清洁处理。普析通用普析通用普析通用普析通用 n n2、日常保养n n严格按照仪器的安装条件为仪器提供一个良好的工作环境。n n保持仪器整体干净整洁，仪器使用完毕应盖好防尘罩。n n每次测试前,必须开机预热半小时。n n定期进行性能指标检测，发现问题即使与我们联系。n n长期不使用仪器时，注意保存环境的温度和湿度，每月至少开机2小时。