第四章-农产品的化学检验剖析课件

2024/7/151第四章第四章 农产品的化学检验农产品的化学检验粮食、油料的化学检验即粮油化学成分的分析。粮食、油料的化学检验即粮油化学成分的分析。粮粮油油的的化化学学成成分分包包括括水水分分、脂脂肪肪、蛋蛋白白质质、纤纤维维素素、碳碳水化合物及其他微量元素水化合物及其他微量元素等。等。品品种种不不同同，生生长长区区域域不不同同，气气候候条条件件不不同同，耕耕作作技技术术不不同同，其其成成分分和和含含量量也也会会产产生生差差异异。此此外外，粮粮油油在在储储运运期期间间，自自身身的的生生化化变变化化及及储储藏藏条条件件的的影影响响，同同样样灰灰影影响响其其成成分分和和含含量量。这这些些成成分分，有有些些是是人人体体必必需需的的；有有些些对对储储存存不不利利；有有些些则则影影响响到到粮粮油油的的使使用用价价值值。因因此此，通通过过粮粮油油成成分分的的分分析析，对对粮粮油油的的合合理理利利用用、优优良良品品种种的的选选育育、粮粮油油的的依依质质论论价价及及指指导导粮粮油油的的安安全全储储藏藏都都具具有有重重要要的的应应用价值。用价值。2024/7/152第四章第四章 农产品的化学检验农产品的化学检验 第一节第一节第一节第一节 水分水分水分水分第二节第二节第二节第二节 灰分灰分灰分灰分第三节第三节第三节第三节 粗脂肪粗脂肪粗脂肪粗脂肪第四节第四节第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质粗蛋白质粗蛋白质第五节第五节第五节第五节 淀粉淀粉淀粉淀粉第六节第六节第六节第六节 粗纤维素粗纤维素粗纤维素粗纤维素第七节第七节第七节第七节 果蔬品质初步分析果蔬品质初步分析果蔬品质初步分析果蔬品质初步分析第八节第八节第八节第八节 农产品质量安全检测技术农产品质量安全检测技术农产品质量安全检测技术农产品质量安全检测技术返返返返 回回回回2024/7/153第一节第一节 水分水分粮粮食食、油油料料水水分分的的测测定定，在在粮粮油油流流通通领领域域的的各各个个环环节节中中都具有非常重要的作用。都具有非常重要的作用。粮粮油油在在储储藏藏期期间间，其其水水分分必必须须限限制制在在安安全全水水分分之之下下，不不可过高，也不可过低。可过高，也不可过低。在在加加工工过过程程中中，要要求求水水分分适适当当为为好好，以以保保证证产产品品质质量量和和提高出品率。提高出品率。在在购购销销与与运运输输中中，掌掌握握适适当当的的水水分分，对对节节省省资资金金，减减少少仓容及运输力都具有良好的经济效益。仓容及运输力都具有良好的经济效益。因此，在国家标准中，因此，在国家标准中，水分是重要的限制项目之一水分是重要的限制项目之一。2024/7/154第一节第一节 水分水分粮粮食食油油料料水水分分测测定定的的方方法法很很多多，常常用用的的方方法法有有105恒恒质质法法、定定温温定定时时烘烘干干法法、隧隧道道式式电电烘烘箱箱法法、两两次次烘烘干干法法及及利利用用电电阻阻、电电容容、微微波波、红红外外线线、近近红红外外线线、核核磁磁共共振振、气气相相色色谱谱等等原原理理的的快快速测定方法。速测定方法。2024/7/155第一节第一节 水分水分（一）（一）105恒重法恒重法l测测定定原原理理：此此法法是是在在比比水水的的沸沸点点稍稍高高的的温温度度（105）下下，将将试试样样中中的的水水分分蒸蒸发发至至试试样样恒恒质质（前前后后两两次次称称量量差差不不超超过过0.005g），根根据据试试样样减轻的质量计算水分含量。减轻的质量计算水分含量。此此法法所所用用温温度度与与水水的的沸沸点点较较为为接接近近，其其他他成成分分损损失失甚甚微微，测测得得的的水水分分比比其其他他方方法法准准确确度度高高，故故为为标标准准中中第第一一法法。其其缺缺点点是是操操作作繁繁琐琐、费时。费时。2024/7/156第一节第一节 水分水分（一）（一）105恒重法恒重法1.仪器和用具：电热恒温箱；分析天平（感量仪器和用具：电热恒温箱；分析天平（感量0.001g）；实验室用电动粉碎机或手摇粉碎机；）；实验室用电动粉碎机或手摇粉碎机；谷物选筛；备有变色硅胶的干燥器（变色硅胶谷物选筛；备有变色硅胶的干燥器（变色硅胶经呈现红色就不能继续使用，应在经呈现红色就不能继续使用，应在130140温度下烘至全部呈蓝色后再用）；铝盒温度下烘至全部呈蓝色后再用）；铝盒（内径（内径4.5cm、高、高2.0cm）。）。2024/7/157第一节第一节 水分水分粮粮 种种 分样数量分样数量，g制备方法制备方法粒状原粮和成品粮粒状原粮和成品粮 3050除去大样杂质和矿物质除去大样杂质和矿物质，粉碎细度粉碎细度通过通过1.5mm圆孔筛的不少于圆孔筛的不少于90%大大 豆豆3050除去大样杂质和矿物质除去大样杂质和矿物质，粉碎细度粉碎细度通过通过2.0mm圆孔筛不少于圆孔筛不少于90%花生仁、桐仁等花生仁、桐仁等 约约50取净仁用手摇切片机或小刀切成取净仁用手摇切片机或小刀切成0.5mm以下的薄片或剪碎以下的薄片或剪碎花生果、茶籽、桐花生果、茶籽、桐子、蓖麻籽、文冠子、蓖麻籽、文冠果等果等约约100取净果取净果(籽籽)剥壳剥壳，分别称重分别称重，计算计算壳、仁百分比；将壳磨碎或研碎壳、仁百分比；将壳磨碎或研碎;将仁切成薄片将仁切成薄片棉子、葵花子等棉子、葵花子等 约约30取净籽剪碎或用研钵敲碎取净籽剪碎或用研钵敲碎油菜籽、芝麻等油菜籽、芝麻等 约约30除去大样杂质的整粒试样除去大样杂质的整粒试样甘薯片甘薯片 约约100取净片粉碎，细度同粒状粮取净片粉碎，细度同粒状粮甘薯丝甘薯条甘薯丝甘薯条 约约100取净丝、条粉碎，细度同粒状粮取净丝、条粉碎，细度同粒状粮2024/7/158第一节第一节 水分水分3.操作方法操作方法（1）定定温温:使使烘烘箱箱中中温温度度计计的的水水银银球球距距离离烘烘网网2.5cm左右左右,调节烘箱温度定在调节烘箱温度定在1052。（2）烘干铝盒烘干铝盒：取干净的空铝盒，放在烘箱内温：取干净的空铝盒，放在烘箱内温度计水银球下方烘网上，烘度计水银球下方烘网上，烘30min至至1h取出，置取出，置于干燥器内冷却至室温，取出称重，再烘于干燥器内冷却至室温，取出称重，再烘30min，烘至前后两次重量差不超过，烘至前后两次重量差不超过0.005g，即为恒，即为恒重。重。2024/7/159第一节第一节 水分水分3.操作方法操作方法（3）称称取取试试样样：用用烘烘至至恒恒重重的的铝铝盒盒(W0)称称取取试试样样约约3g,对对带带壳壳油油料料可可按按仁仁、壳壳比比例例称称样样或或将将仁仁壳壳分分别别称称样样(W1，准确至准确至0.001g)。（4）烘烘干干试试样样：将将铝铝盒盒盖盖套套在在盒盒底底上上，放放入入烘烘箱箱内内温温度度计计周周围围的的烘烘网网上上，在在105温温度度下下烘烘3h(油油料料烘烘90min)后后取取出出铝铝盒盒,加加盖盖,置置于于干干燥燥器器内内冷冷却却至至室室温温,取取出出称称重重后后,再再按按以以上上方方法法进进行行复复烘烘，每每隔隔30min取取出出冷冷却却称称重重一一次次,烘烘至至前前后后两两次次重重量量差差不不超超过过0.005g为为止止。如如后后一一次次重重量量高高于前一次重量，以前一次重量计算于前一次重量，以前一次重量计算(W2)。2024/7/1510第一节第一节 水分水分4.结果计算结果计算（1）粮食、油料含水量按下式）粮食、油料含水量按下式计算计算：水分（）水分（）式中式中:W0铝盒重，铝盒重，g；W1烘前试样和铝盒重，烘前试样和铝盒重，g；W2烘后试样和铝盒重，烘后试样和铝盒重，g。2024/7/1511第一节第一节 水分水分（2）对带壳油料按仁、壳分别测定水分时，则带壳油）对带壳油料按仁、壳分别测定水分时，则带壳油料含水量按下式计算；料含水量按下式计算；水分水分()=M1 A+M2 (1-A)式中：式中：M1仁水分百分率，；仁水分百分率，；M2壳水分百分率，壳水分百分率，;A出仁总量百分率，。出仁总量百分率，。双试验结果允许差不超过双试验结果允许差不超过0.2，求其平均数，即为，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。采取其他方测定结果。测定结果取小数点后第一位。采取其他方法测定含水量时，其结果与此方法比较不超过法测定含水量时，其结果与此方法比较不超过0.5%。2024/7/1512第一节第一节 水分水分（二）定温定时烘干法（二）定温定时烘干法（二）定温定时烘干法（二）定温定时烘干法F测测测测定定定定原原原原理理理理：此此此此法法法法采采采采用用用用较较较较高高高高的的的的温温温温度度度度（130130）在在在在规规规规定定定定的的的的时时时时间间间间（40min40min）内内内内烘烘烘烘干干干干试试试试样样样样，根根根根据据据据试试试试样样样样减减减减轻轻轻轻的的的的质质质质量量量量计计计计算算算算水水水水分分分分含含含含量量量量。此此此此法法法法具具具具有有有有测测测测定定定定速速速速度度度度快快快快，操操操操作简单方便等特点。作简单方便等特点。作简单方便等特点。作简单方便等特点。2024/7/1513第一节第一节 水分水分（二）定温定时烘干法（二）定温定时烘干法（二）定温定时烘干法（二）定温定时烘干法1.1.仪器和用具和试样制备均同（一）法。仪器和用具和试样制备均同（一）法。仪器和用具和试样制备均同（一）法。仪器和用具和试样制备均同（一）法。2.2.试试试试样样样样用用用用量量量量计计计计算算算算：本本本本法法法法用用用用定定定定量量量量试试试试样样样样，先先先先计计计计算算算算铝铝铝铝盒盒盒盒底底底底面面面面积积积积，再再再再按按按按每每每每平平平平方方方方厘厘厘厘米米米米为为为为0.126g0.126g计计计计算算算算试试试试样样样样用用用用量量量量(底底底底面面面面积积积积0.126)0.126)。如如如如用用用用直直直直径径径径4.5cm4.5cm的的的的铝铝铝铝盒盒盒盒，试试试试样样样样用用用用量量量量为为为为2g;2g;用用用用直径直径直径直径5.5cm5.5cm的铝盒，试样用量为的铝盒，试样用量为的铝盒，试样用量为的铝盒，试样用量为3g3g。3.3.操操操操作作作作方方方方法法法法：用用用用已已已已烘烘烘烘至至至至恒恒恒恒重重重重的的的的铝铝铝铝盒盒盒盒称称称称取取取取定定定定量量量量试试试试样样样样(准准准准确确确确至至至至0.001g)0.001g)，待待待待烘烘烘烘箱箱箱箱温温温温度度度度升升升升至至至至135135145145时时时时，将将将将盛盛盛盛有有有有试试试试样样样样的的的的铝铝铝铝盒盒盒盒送送送送入入入入烘烘烘烘箱箱箱箱内内内内温温温温度度度度计计计计周周周周围围围围的的的的烘烘烘烘网网网网上上上上,在在在在5min5min内内内内,将将将将烘烘烘烘箱箱箱箱温温温温度度度度调调调调到到到到13021302，开开开开始始始始计计计计时时时时，烘烘烘烘40min40min后取出放干燥器内冷却，称重。后取出放干燥器内冷却，称重。后取出放干燥器内冷却，称重。后取出放干燥器内冷却，称重。2024/7/1514第一节第一节 水分水分4.结果计算：结果计算：定温定时法的含水量计算与（一）法相同。定温定时法的含水量计算与（一）法相同。2024/7/1515第一节第一节 水分水分（三）隧道式烘箱法（三）隧道式烘箱法测测定定原原理理：隧隧道道式式电电烘烘箱箱法法与与定定温温定定时时法法测测定定原原理理相相同同，所所不不同同的的式式用用隧隧道道式式烘烘箱箱代代替替恒恒温温电电烘烘箱箱，这这是是一一种种专专用用 水水 分分 测测 定定 仪仪。在在 1602（粮粮 食食），20min；1302（油油料料），30min，两两种种测测定定条条件件下下，样样品品中中水水分分蒸蒸发发，样样品品损损失失的的质质量量即即可可换换算算为为水水分分含含量量。由由于于实实现现了了干干燥燥、称称重重、结结果果换换算算及及现现实实的的机机械械化化，所所以以该该法法的的有有点点为为操操作作简简单单、快快速速以以及及测测定定过过程程的的连连续续化化，适适用用于于水水分分测测定定的的现现场场操操作作。该该法法的的缺缺点点为为测测定定温温度度高高，存在着与定温定时法相同的问题。存在着与定温定时法相同的问题。2024/7/1516第一节第一节 水分水分（三）隧道式烘箱法（三）隧道式烘箱法1.仪器和用具：隧道式烘箱；秒表。仪器和用具：隧道式烘箱；秒表。2.试样制备：同（一）法。试样制备：同（一）法。2024/7/1517第一节第一节 水分水分3.操作方法操作方法（1）定定温温：放放平平仪仪器器，将将温温度度计计插插入入烘烘干干室室内内，使使水银球距烘盒口约水银球距烘盒口约1cm，接通电源进行定温。，接通电源进行定温。（2）烘烘盒盒称称样样：将将干干净净的的烘烘盒盒向向烘烘干干室室内内推推进进三三个个，到到10min后后再再推推进进一一个个，这这时时先先推推进进的的烘烘盒盒有有一一个个被被推推出出隧隧道道，将将这这个个烘烘盒盒放放在在烘烘箱箱上上的的称称盘盘内内，加加10g砝砝码码，调调整整象象限限秤秤上上的的螺螺丝丝，使使指指针针指指向向标标尺尺的的零零点点。取取下下砝砝码码向向烘烘盒盒内内放放入入制制备备的的试试样样，增增减减试试样样样样使使指指针针停停于于零零点点为为止止。再再将将称称好好的的试试样样均均匀匀地地分分布布在在烘烘盒盒内内，推推入入烘烘干干室室,关关闭闭左左门门，同时计时。同时计时。2024/7/1518第一节第一节 水分水分（3）烘干试样：）烘干试样：采采用用160烘烘20min法法时时，每每隔隔6min40s向向烘烘干室内推进一个称有试样的烘盒；干室内推进一个称有试样的烘盒；采采用用130烘烘30min法法时时，每每隔隔10min推推进进一一个称有试样的烘盒。个称有试样的烘盒。待待推推进进第第四四个个试试样样盒盒时时，第第一一个个试试样样盒盒的的烘烘干干时时间间已已到到，即即被被推推出出到到称称盘盘上上，拉拉下下天天平平指指针针的的固固定定托托杆杆，观观察察指指针针所所指指出出的的数数值值，即即为为测测定定的水分百分率。的水分百分率。双试验结果允许差不超过双试验结果允许差不超过0.5。2024/7/1519第一节第一节 水分水分（四）两次烘干法（四）两次烘干法F测测定定原原理理：此此法法为为高高水水分分粮粮食食、油油料料的的水水分分测测定定方方法法。当当粮粮食食水水分分在在18以以上上，大大豆豆、甘甘薯薯片片水水分分在在14以以上上，油油料料水水分分在在13以以上上时时必必须须采采用用两两次次烘烘干干法法。原原因因是是样样品品中中水水分分含含量量高高时时，粉粉碎碎时时不不易易达达到到规规定定的的细细度度，而而且且制制备备中中水水分分损损失失较较大大。即即先先将将整整粒粒试试样样经经低低温温烘烘至至正正常常水水分分含含量量，然然后后将将试试样样粉粉碎碎，经经二二次次烘烘干干，通通过过换换算算得得出出水水分含量。分含量。2024/7/1520第一节第一节 水分水分（四四四四）两两两两次次次次烘烘烘烘干干干干法法法法：粮粮粮粮食食食食水水水水分分分分在在在在1818以以以以上上上上，大大大大豆豆豆豆、甘甘甘甘薯薯薯薯片片片片水水水水分分分分在在在在1414以以以以上上上上，油油油油料料料料水水水水分分分分在在在在1313以以以以上上上上，采采采采取取取取两次烘干法。两次烘干法。两次烘干法。两次烘干法。1.1.操作步骤操作步骤操作步骤操作步骤第第第第一一一一次次次次烘烘烘烘干干干干：称称称称取取取取整整整整粒粒粒粒试试试试样样样样20g(W120g(W1准准准准确确确确至至至至0.001g)0.001g)，放放放放入入入入直直直直径径径径1010或或或或15cm15cm、高高高高2cm2cm的的的的烘烘烘烘盒盒盒盒中中中中摊摊摊摊平平平平。粮粮粮粮食食食食在在在在105105温温温温度度度度下下下下，大大大大豆豆豆豆和和和和油油油油料料料料在在在在7070温温温温度度度度下下下下烘烘烘烘303040min40min，取取取取出出出出，自自自自然然然然冷冷冷冷却却却却至至至至恒恒恒恒重重重重(两两两两次次次次称称称称量量量量差差差差不不不不超超超超过过过过0.005g)0.005g)，此为第一次烘后试样重量，此为第一次烘后试样重量，此为第一次烘后试样重量，此为第一次烘后试样重量(W1)(W1)。第第第第二二二二次次次次烘烘烘烘干干干干：试试试试样样样样制制制制备备备备及及及及操操操操作作作作方方方方法法法法与与与与（一一一一）法法法法（2 2）和（和（和（和（3 3）相同。）相同。）相同。）相同。2024/7/1521第一节第一节 水分水分2.结果计算结果计算用两次烘干法测定含水量时按公式用两次烘干法测定含水量时按公式(3)计算：计算：水分水分(%)=式中：式中：W第一次烘前试样重量，第一次烘前试样重量，g;W1第一次烘后试样重量，第一次烘后试样重量，g；W2第二次烘前试样重量，第二次烘前试样重量，g;W3第二次烘后试样重量，第二次烘后试样重量，g。双双试试验验结结果果允允许许差差不不超超过过0.2，求求其其平平均均数数，即即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。为测定结果。测定结果取小数点后第一位。2024/7/1522第一节第一节 水分水分注意事项：样样品品必必须须具具备备的的条条件件：水水分分是是唯唯一一的的挥挥发发的的物物质质，不不含含或或含含其其它它挥挥发发性性成成分分极极微微。水水分分的的排排除除情情况况很很完完全全，即即含含胶胶态态物物质质、含含结结合合水水量量少少。因因为为常常压压很很难难把把结结合合水水除除去去，只只好好用用真真空空干干燥燥除除去去结结合合水水。食食品品中中其其他他组组分分在在加加热热过过程程中中发发生生化化学学反反应应引引起起的的重重量量变变化化非非常常小小，可可忽忽略略不不计计，适适用用于于对热稳定的食品对热稳定的食品2024/7/1523第一节第一节 水分水分（五）其他快速方法简介（五）其他快速方法简介近红外谷物品质测定仪：非破坏性，水分、蛋白质近红外谷物品质测定仪：非破坏性，水分、蛋白质电阻式分析法：适于含水量电阻式分析法：适于含水量530的样品的样品2024/7/1524第二节第二节 灰分灰分（一）含义（一）含义灰灰分分：样样品品经经高高温温灼灼烧烧后后，剩剩余余的的不不再再氧氧化化燃燃烧烧的的残残渣渣即即为为灰分。灰分。农农作作物物产产品品中中所所含含灰灰分分受受农农作作物物的的生生长长条条件件（土土壤壤、气气候候、栽培等）、品种差异等因素的影响。栽培等）、品种差异等因素的影响。含量一般在含量一般在1.53.0。灰分的组成元素灰分的组成元素：主要为磷、钾、镁、硫、钙、钠、硅等。：主要为磷、钾、镁、硫、钙、钠、硅等。灰灰分分在在粮粮粒粒中中的的分分布布以以皮皮层层最最高高约约为为7，胚胚部部次次之之约约为为5，胚胚乳乳灰灰分分含含量量最最低低0.6。由由于于皮皮层层和和胚胚部部的的灰灰分分含含量量较较大大,因此可以用灰分含量因此可以用灰分含量反映成品粮的加工精度反映成品粮的加工精度。例例如如，在在粮粮油油国国家家标标准准中中，小小麦麦的的灰灰分分指指标标为为，特特制制一一等等粉粉0.70（干干基基）；特特制制一一等等粉粉0.85；标标准准粉粉1.10；普通粉普通粉1.40。2024/7/1525第二节第二节 灰分灰分（一）含义（一）含义测定灰分的测定灰分的意义意义：1.反映成品粮的加工精度，是定等的指标。反映成品粮的加工精度，是定等的指标。2.食食品品的的总总灰灰分分含含量量是是控控制制食食品品成成品品或或半半成成品品质质量量的的重重要要依依据据。比比如如：牛牛奶奶中中的的总总灰灰分分在在牛牛奶奶中中的的含含量量是是恒恒定定的的。一一般般在在0.68%-0.74%，平平均均值值非非常常接接近近0.70%，因因此此可可以以用用测测定定牛牛奶奶中中总总灰灰分分的的方方法法测测定定牛牛奶奶是是否否掺掺假假，若若掺掺水水，灰灰分分降降低低。另另外外还还可可以以判判断断浓浓缩缩比比，如如果果测测出出牛牛奶奶灰分在灰分在1.4%左右，说明牛奶浓缩一倍。左右，说明牛奶浓缩一倍。3.评评定定食食品品是是否否卫卫生生，有有没没有有污污染染。如如果果灰灰分分含含量量超超过过了了正正常范围，说明食品生产中使用了不合理的卫生标准。常范围，说明食品生产中使用了不合理的卫生标准。4.如如果果原原料料中中有有杂杂质质或或加加工工过过程程中中混混入入了了一一些些泥泥沙沙，则则测测定定灰分时可检出。灰分时可检出。2024/7/1526第二节第二节 灰分灰分u测测定定方方法法：灰灰分分测测定定主主要要采采用用高高温温灰灰化化的的方方法法。根根据据灰灰化化温温度度、灰灰化化时时间间的的不不同同以以及及是是否否添添加加助助燃燃剂剂等，分为等，分为550灼烧法灼烧法，醋酸镁醋酸镁法及法及快速快速法。法。2024/7/1527第二节第二节 灰分灰分（二）（二）（二）（二）550550灼烧法灼烧法灼烧法灼烧法1.测测测测定定定定原原原原理理理理：此此此此法法法法以以以以高高高高温温温温灼灼灼灼烧烧烧烧试试试试样样样样，在在在在灼灼灼灼烧烧烧烧的的的的过过过过程程程程中中中中，试试试试样样样样中中中中的的的的有有有有机机机机物物物物被被被被氧氧氧氧化化化化为为为为气气气气体体体体逸逸逸逸出出出出，矿矿矿矿物物物物质质质质则则则则生生生生长长长长氧氧氧氧化化化化物物物物留留留留存存存存下下下下来来来来，留留留留存存存存物物物物的的的的质质质质量量量量即即即即为样品中灰分的量。为样品中灰分的量。为样品中灰分的量。为样品中灰分的量。2.主要试剂和仪器主要试剂和仪器主要试剂和仪器主要试剂和仪器2.12.1主主主主 要要要要 试试试试 剂剂剂剂：0.50.5 三三三三 氯氯氯氯 化化化化 铁铁铁铁 蓝蓝蓝蓝 墨墨墨墨 水水水水 溶溶溶溶 液液液液。（FeCLFeCL6H6H2 2OO）2.2 2.2 仪仪仪仪器器器器：高高高高温温温温电电电电炉炉炉炉；分分分分析析析析天天天天平平平平：感感感感量量量量0.0001g0.0001g；瓷瓷瓷瓷坩坩坩坩埚埚埚埚：181820ml20ml；备备备备有有有有变变变变色色色色硅硅硅硅胶胶胶胶的的的的干干干干燥燥燥燥器器器器；坩埚钳：长柄和短柄。坩埚钳：长柄和短柄。坩埚钳：长柄和短柄。坩埚钳：长柄和短柄。2024/7/1528第二节第二节 灰分灰分3.操作步骤操作步骤3.1 坩坩埚埚处处理理：先先用用三三氯氯化化铁铁蓝蓝墨墨水水溶溶液液将将坩坩埚埚编编号号，然然后后送送入入500550高高温温炉炉内内灼灼烧烧30min至至1h，取取出出坩坩埚埚放放在在炉炉门门口口处处，待待红红热热消消失失后后，放放入入干干燥燥器器内内冷冷却却至至室室温温，称称重重，再再灼灼烧烧、冷冷却却、称称重重（W0），直直至至前前后后两两次次重重量量差不超过差不超过0.0002g为止。为止。3.2 试试样样的的炭炭化化：用用灼灼烧烧至至恒恒重重的的坩坩埚埚称称取取粉粉碎碎试试样样23g（W，准准确确至至0.0002g），放放在在电电炉炉上上错错开开坩坩埚埚盖盖，加加热热至试样完全炭化为止。至试样完全炭化为止。便于通气又便于通气又防止试样溅防止试样溅出出注意：炭化时只许发烟，不许起火，注意：炭化时只许发烟，不许起火，以免火焰带走试样及灰分。以免火焰带走试样及灰分。2024/7/1529第二节第二节 灰分灰分3.试试样样的的灰灰化化：将将炭炭化化好好的的试试样样连连同同坩坩埚埚一一起起放放在在高高温温炉炉口口片片刻刻，再再移移入入炉炉膛膛内内，错错开开坩坩埚埚盖盖，关关闭闭炉炉门门在在500550温温度度下下灼灼烧烧23h。在在灼灼烧烧过过程程中中，可可将将坩坩埚埚位位置置调调换换12次次，灼灼烧烧至至黑黑点点全全部部消消失失，变变成成灰灰白白色色为为止止。取取出出坩坩埚埚冷冷却却至至室室温温，称称重重。再再烧烧30min至至恒恒重重（W1）为为止止。最最后一次灼烧的重量如果增重，取前一次重量计算。后一次灼烧的重量如果增重，取前一次重量计算。2024/7/1530第二节第二节 灰分灰分4.结果计算结果计算灰分（干基）含量按公式（灰分（干基）含量按公式（1）计算：）计算：双双试试验验结结果果允允许许差差不不超超过过0.03，求求其其平平均均数数，即即为为测测定定结果，测定结果取小数点后第二位。结果，测定结果取小数点后第二位。2024/7/1531第二节第二节 灰分灰分（三）乙酸镁法（三）乙酸镁法1.测测定定原原理理：此此法法在在550550灼灼灼灼烧烧烧烧法法法法的的的的基基基基础础础础上上上上，添添添添加加加加了了了了乙乙乙乙酸酸酸酸镁镁镁镁乙乙乙乙醇醇醇醇溶溶溶溶液液液液，并并并并将将将将灰灰灰灰化化化化温温温温度度度度提提提提高高高高到到到到了了了了850850，从而缩短了灰化时间。，从而缩短了灰化时间。，从而缩短了灰化时间。，从而缩短了灰化时间。2.主要试剂和仪器主要试剂和仪器2.1.主主要要试试剂剂：乙乙酸酸镁镁乙乙醇醇溶溶液液，1.5g乙乙酸酸镁镁溶溶于于100ml95的乙醇中。的乙醇中。2.2.仪仪器器：细细口口瓶瓶，100ml；移移液液管管，50ml；玻玻璃璃棒；其余同（二）棒；其余同（二）2.2。2024/7/1532第二节第二节 灰分灰分3.操作步骤操作步骤3.1 坩坩埚埚处处理理：将将坩坩埚埚编编号号后后在在800850温温度度下下灼灼烧烧30min，冷冷却却称称重重，再再灼灼烧烧冷冷却却称称重重至至恒恒重重（W0）。）。3.2 测测定定：用用坩坩埚埚称称取取粉粉碎碎试试样样23g（W），加加入入乙乙酸酸镁镁乙乙醇醇溶溶液液3ml，静静置置23min，用用乙乙醇醇棉棉点点烧烧，按按照照2.2方方法法进进行行炭炭化化，将将坩坩埚埚送送到到高高温温炉炉膛膛口口预预热热片片刻刻，再再移移入入炉炉膛膛内内，错错开开坩坩埚埚盖盖，关关闭闭炉炉门门，在在800850温温度度下下灼灼烧烧1h，待待剩剩余余物物变变成成浅浅灰灰白白色色或或白白色色时时，停停止止灼灼烧烧，取取出出坩坩埚埚置置于于炉炉门门口口处处，待待红红热热消消失失后后，移移入入干干燥燥器器内内，冷冷却却至至室室温温，称称重重（W1）。）。2024/7/1533第二节第二节 灰分灰分3.操作步骤操作步骤3.3 空空白白试试验验：在在已已恒恒重重的的坩坩埚埚（W2）中中加加入入乙乙酸酸镁镁乙乙醇醇溶溶液液3ml，用用乙乙醇醇棉棉点点烧烧并并炭炭化化后后，同同（二）（二）3进行灼烧，取出冷却，称重（进行灼烧，取出冷却，称重（W3）。）。2024/7/1534第二节第二节 灰分灰分4.结果计算结果计算灰分（干基）含量按公式（灰分（干基）含量按公式（2）计算：）计算：双试验结果允许差和小数位数同1.4。注：3ml乙 酸 镁 乙 醇 溶 液 的 氧 化 镁 重 量 约 0.00850.0090g，应以空白试验所得的氧化镁重量为依据。2024/7/1535第三节第三节 粗脂肪粗脂肪（一）含义（一）含义1.含含义义：脂脂肪肪是是参参与与生生命命活活动动的的不不可可缺缺少少的的物物质质，是是人人体体食食物物中中获获取取能能量量的的营营养养素素之之一一，并并含含有有人人体体必必需的脂肪酸及脂溶性维生素。需的脂肪酸及脂溶性维生素。2.不同农作物的不同农作物的含量含量：在在禾禾谷谷类类粮粮食食中中脂脂肪肪含含量量较较少少，稻稻谷谷、小小麦麦中中约约含含脂肪脂肪0.72.5左右；左右；玉玉米米约约含含4.34.6左左右右，而而玉玉米米胚胚中中的的脂脂肪肪约约占胚质量的占胚质量的30左右；左右；在在油油料料中中脂脂肪肪含含量量均均较较高高，大大部部分分在在30以以上上，在在国家标准中油料以含油量定等。国家标准中油料以含油量定等。2024/7/1536第三节第三节 粗脂肪粗脂肪3.测测定定意意义义：粗粗脂脂肪肪的的测测定定，不不仅仅用用于于油油料料等等级级的的确确定定、粮粮食食及及饲饲料料成成分分的的分分析析，而而且且在在油油脂脂生生产产过过程程中中，估估算算油油的的产产量量、饼饼粕粕残残油油量量的的测测定定，对对衡衡量量油油脂脂加加工工工工艺艺及及生生产产技技术术操操作作水水平平都都具具有有指指导性意义。导性意义。l粮粮食食、油油料料、饲饲料料、饼饼粕粕及及其其他他食食品品中中粗粗脂脂肪肪含含量量的的测测定定，常常见见的的方方法法为为索索氏氏抽抽提提法法。对对于于含含结结合合态态脂脂肪肪较较多多的的加加工工食食品品的的脂脂肪肪测测定定，则则常常常常采采用用碱碱性性乙乙醚醚抽抽提提法法和和酸酸水水解解法法。用用阿阿贝贝折折光光仪仪测测定定脂脂肪肪含含量量，既既方方便便快快捷捷，又又节节省省试试剂剂。在在诸诸多多方法中，尤以核磁共振法最为先进。方法中，尤以核磁共振法最为先进。2024/7/1537第三节第三节 粗脂肪粗脂肪（二）索氏抽提法（二）索氏抽提法 1.测测定定原原理理：利利用用脂脂肪肪能能溶溶于于有有机机溶溶剂剂的的特特性性，用用无无水水乙乙醚醚或或者者石石油油醚醚等等沸沸点点较较低低的的溶溶剂剂，借借助助索索氏氏抽抽提提器器，使使样样品品中中的的脂脂肪肪与与其其他他组组分分分分离离，然然后回收溶剂，即可得到脂肪含量。后回收溶剂，即可得到脂肪含量。2024/7/1538第三节第三节 粗脂肪粗脂肪（二）索氏抽提法（二）索氏抽提法 2.主要试剂和仪器主要试剂和仪器2.1试试剂剂：无无水水乙乙醚醚（A.R）或或石石油油醚醚（沸沸程程：3060 ）。）。2.2仪仪器器：分分析析天天平平，感感量量0.0001g；电电热热恒恒温温箱箱；电电热热恒恒温温水水浴浴锅锅；粉粉碎碎机机、研研钵钵；备备有有变变色色硅硅胶胶的的干干燥燥器器；滤滤纸纸筒筒；索索氏氏抽抽提提器器一一套套（各各部部件件必必须须洗洗净净，用用105温温度度烘烘干干，其其中中抽抽提提瓶瓶烘烘至至恒恒重）；广口瓶、脱脂线、脱脂棉、脱脂细砂重）；广口瓶、脱脂线、脱脂棉、脱脂细砂。2024/7/1539第三节第三节 粗脂肪粗脂肪3.操作步骤操作步骤3.1样品制备样品制备3.1禾禾谷谷类类粮粮食食和和豆豆类类（花花生生除除外外）分分取取除除去去杂杂质质的的净净试试样样3050g，磨磨碎碎通通过过直直径径1.0mm圆圆孔孔筛筛装入广口瓶内备用。装入广口瓶内备用。3.2小小粒粒油油料料如如芝芝麻麻、油油菜菜籽籽、亚亚麻麻籽籽等等分分取取除除去去杂质的净试样杂质的净试样20g，装入广口瓶内备用。，装入广口瓶内备用。3.3大大粒粒油油料料如如花花生生果果、蓖蓖麻麻籽籽、葵葵花花籽籽、茶茶籽籽等等分分取取3050g样样品品，除除杂杂后后，逐逐粒粒剥剥壳壳，仁仁、壳壳分分别别称称重重，计计算算出出仁仁总总量量百百分分率率，然然后后将将仁仁剪剪碎碎或切片，装入广口瓶内备用。或切片，装入广口瓶内备用。2024/7/1540第三节第三节 粗脂肪粗脂肪3.操作步骤操作步骤3.2 试试样样包包扎扎：从从备备用用的的样样品品中中，用用烘烘盒盒称称取取25g试试样样，在在105温温度度下下烘烘30min，趁趁热热倒倒入入研研钵钵中中，加加入入约约2g脱脱脂脂细细砂砂一一同同研研磨磨。将将试试样样和和细细砂砂研研到到出出油油状状后后，干干净净地地转转入入滤滤纸纸筒筒内内（筒筒底底塞塞一一层层脱脱脂脂棉棉，并并在在105温温度度下下烘烘30min），用用脱脱脂脂棉棉蘸蘸少少量量乙乙醚醚揩揩净净研研钵钵上上的的试试样样和和脂脂肪肪，并并入入滤滤纸纸筒筒内内，最最后后再再用用脱脱脂脂棉棉塞塞入入上上部部，压压住住试试样。样。2024/7/1541第三节第三节 粗脂肪粗脂肪3.操作步骤操作步骤3.3 抽抽提提与与烘烘干干：将将抽抽提提器器安安装装妥妥当当，然然后后将将装装有有试试样样的的滤滤纸纸筒筒置置于于抽抽提提筒筒内内，同同时时注注入入乙乙醚醚至至虹虹吸吸管管高高度度以以上上，待待乙乙醚醚流流净净后后，再再加加入入乙乙醚醚至至虹虹吸吸管管高高度度的的三三分分之之二二处处。用用一一小小块块脱脱脂脂棉棉轻轻轻轻地地塞塞入入冷冷凝凝管管上上口口，打打开开冷冷凝凝管管进进水水管管，开开始始加加热热抽抽提提。加加热热的的温温度度以以每每分分钟钟回回流流的的乙乙醚醚在在120150滴滴，每每小小时时回回流流七七次次以以上上。抽抽提提的的时时间间须须视视试试样样含含油油量量而而定定，一一般般在在8h以以上上，抽抽提提至至抽抽提提管管内的乙醚用玻璃片检查（点滴实验）无油迹为止。内的乙醚用玻璃片检查（点滴实验）无油迹为止。2024/7/1542第三节第三节 粗脂肪粗脂肪3.操作步骤操作步骤3.3 抽抽提提与与烘烘干干：抽抽净净脂脂肪肪后后，用用长长柄柄镊镊子子取取出出滤滤纸纸筒筒，再再加加热热使使乙乙醚醚回回流流2次次，然然后后收收回回乙乙醚醚，取取下下冷冷凝凝管管和和抽抽提提筒筒，加加热热除除尽尽抽抽提提瓶瓶中中残残余余的的乙乙醚醚，用用脱脱脂脂棉棉蘸蘸乙乙醚醚揩揩净净抽抽提提瓶瓶外外部部，然然后后将将抽抽提提瓶瓶在在105温温度度下下先先烘烘90min，再再烘烘20min，烘烘至至恒恒重重为为止止（前前后后二二次次重重量量差差在在0.0002g以以内内即即视视为为恒恒重重）。抽抽提提瓶瓶增增加加的的重重量量即即为为粗粗脂脂肪肪的重量。的重量。2024/7/1543第三节第三节 粗脂肪粗脂肪4.结果计算结果计算粗粗脂脂肪肪湿湿基基含含量量、干干基基含含量量和和标标准准水水杂杂下下含含量量分分别别按按公公式式（1）、（）、（2）和（）和（3）计算：）计算：2024/7/1544第三节第三节 粗脂肪粗脂肪双双试试验验结结果果允允许许差差：粮粮食食、油油料料不不超超过过0.4，大大豆豆不不超超过过0.2，求求其其平平均均数数，即即为为测测定定结结果果。测定结果取小数点后第一位。测定结果取小数点后第一位。2024/7/1545第三节第三节 粗脂肪粗脂肪如如测测定定带带壳壳油油料料粗粗脂脂肪肪含含量量，则则必必须须分分别别用用公公式式（4）和和公式（公式（5）进行换算：）进行换算：2024/7/1546第三节第三节 粗脂肪粗脂肪l注注：如如无无现现成成的的滤滤纸纸筒筒，可可取取长长28cm、宽宽17cm的的滤滤纸纸，用用直直径径2cm的的试试管管，沿沿滤滤纸纸长长方方向向卷卷成成筒筒形形，抽抽出出试试管管至至纸纸筒筒高高的的一一半半处处，压压平平抽抽空空部部分分，折折过过来来，使使之之紧紧靠靠试试管管外外层层，用用脱脱脂脂线线系系住住，下下部部的的折折角角向向上上折折，压压成成圆圆形形底底部部，抽抽出出试试管管，即成直径即成直径2.0cm、高约、高约7.5cm的滤纸筒。的滤纸筒。2024/7/1547第三节第三节 粗脂肪粗脂肪（三）（三）直滴式抽提法直滴式抽提法1.原原理理：在在索索氏氏抽抽提提法法的的基基础础上上，将将其其进进行行改改进进，抽抽提提方方式式是是使使冷冷凝凝器器滴滴下下的的溶溶剂剂直直接接经经试试样样而而进进入入抽抽提提瓶瓶中中，不不经经回回流流，增增加加了了溶溶剂剂循循环环次次数数，减减少少了了溶溶剂剂量量。增增大大了了抽抽提提瓶瓶口口径径，既既可可将将样样包包直直接接放放入入抽抽提提瓶瓶中中浸浸泡泡加加热热，烘烘干干时时又又可可使使抽抽提提瓶瓶中中水水分分快快速速蒸蒸发发。而而冷冷凝凝管管下下端端为为锯锯齿齿状状，下下滴滴溶溶剂剂可可多多方方位位对对样样包包进进行行冲冲洗洗，大大大大加加快快了抽提速度。了抽提速度。2.主要试剂和仪器主要试剂和仪器2.1试剂：所用试剂同（二）。试剂：所用试剂同（二）。2.2仪器：直滴式抽提器；其他仪器和用具同（二）。仪器：直滴式抽提器；其他仪器和用具同（二）。2024/7/1548第三节第三节 粗脂肪粗脂肪3.操作步骤操作步骤l仪仪器器处处理理同同（二二）。使使用用时时，将将试试样样包包投投入入抽抽提提管管中中，用用乙乙醚醚抽抽提提脂脂肪肪，脂脂肪肪抽抽净净后后，取取出出试试样样包包，关关上上回回流流的的玻玻璃璃活活塞塞，继继续续加加热热即即可可收收回回乙乙醚。其他方法同（二）。醚。其他方法同（二）。2024/7/1549第三节第三节 粗脂肪粗脂肪注：回收乙醚的再制，分三个步骤：注：回收乙醚的再制，分三个步骤：除除去去过过氧氧化化物物：将将乙乙醚醚注注入入分分液液漏漏斗斗中中，加加入入占占乙乙醚醚量量五五分分之之一一的的10硫硫酸酸亚亚铁铁溶溶液液（取取100g硫硫酸酸亚亚铁铁溶溶于于600ml水水中中，加加30ml浓浓硫硫酸酸进进行行酸酸化化，再再用用水水稀稀释释至至1000ml）充充分混合，静置澄清后放出水溶液。分混合，静置澄清后放出水溶液。除除去去乙乙醇醇：加加入入占占乙乙醚醚量量五五分分之之一一的的10氢氢氧氧化化钾钾溶溶液液，振荡洗涤后静置，放出水溶液，再重复洗涤振荡洗涤后静置，放出水溶液，再重复洗涤23次即可。次即可。除除去去水水分分和和蒸蒸馏馏：在在乙乙醚醚瓶瓶中中加加入入适适量量（占占乙乙醚醚量量的的十十分分之之一一至至五五分分之之一一）的的小小颗颗粒粒无无水水氯氯化化钙钙，放放置置一一昼昼夜夜，时时加加振振摇摇，取取上上层层清清液液进进行行蒸蒸馏馏，收收集集3337之之间间的的馏馏分分，乙乙醚醚的的承承接接器器需需用用冰冰或或冷冷水水进进行行冷冷却却，同同时时连连接接一一安安全全瓶瓶，并将瓶内的气体排出室外或排入下水道中。并将瓶内的气体排出室外或排入下水道中。2024/7/1550第三节第三节 粗脂肪粗脂肪（四）其他方法：（四）其他方法：核核磁磁共共振振测测定定法法原原理理：本本法法是是将将干干燥燥的的样样品品，在在核核磁磁共共振振波波谱谱测测定定仪仪中中测测定定核核磁磁共共振振信信号号，其其信信号号大大小小与与油油料料中中含含油油量量成成正正比比。用用已已知知质质量量的的标标准准油油产产生生的的核核磁磁共共振振信信号号与与相相同同条条件件下下测测得得的的已已知知质质量量试试样样的的核核磁磁共共振振信信号号相比较，即可求得试样的含油量。相比较，即可求得试样的含油量。SZC-B脂脂肪肪测测定定仪仪法法优优点点：该该仪仪器器集集加加温温、抽抽提提与与溶溶剂剂回回收收三三大大系系统统于于一一体体，结结构构紧紧凑凑，操操作作方方便便；采采用用了了封封闭闭的的结结构构体体系系，有有效效地地防防止止了了溶溶剂剂外外泄泄，有有利利于于化化验验员员的的劳劳动动保保护护；采采用用试试样样浸浸泡泡和和抽抽提提连连续续进进行行，有有效效的的缩缩短短了了抽抽提提时时间间，大大豆豆、米米糠糠、油油料料饼饼（粕粕）等等试试样样抽抽提提时间在时间在2h以内，并且可同时测试以内，并且可同时测试6个样品。个样品。2024/7/1551第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质（一）含义（一）含义1.含含义义：由由于于农农产产品品的的总总氮氮中中含含有有少少量量非非蛋蛋白白质质氮氮，如酰胺及胺盐等，因此，称为如酰胺及胺盐等，因此，称为粗蛋白质粗蛋白质。2.农产品蛋白质含量农产品蛋白质含量一一般般豆豆类类及及油油料料中中的的蛋蛋白白质质均均比比禾禾谷谷类类粮粮食食高高。大大豆豆蛋蛋白白质质含含量量可可达达3750左左右右，油油料料的的蛋蛋白白质质含含量量为为925，糙糙米米715，小小麦麦1219，玉玉米米为为915.5，小小米米为为1021.5。2024/7/1552第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质（一）含义（一）含义3.意意义义：测测定定蛋蛋白白质质含含量量，对对于于植植物物蛋蛋白白质质营营养养资资源源的的开开发发和和利利用用，对对优优良良品品种种的的繁繁育育，对对粮粮食食、油料的品质评定等方面有着重要意义。油料的品质评定等方面有着重要意义。4.方方法法：测测定定蛋蛋白白质质含含量量的的方方法法很很多多，常常用用的的方方法法为为凯凯氏氏定定氮氮法法。是是我我国国蛋蛋白白质质定定量量的的基基准准方方法法。该方法分为该方法分为常量法、半微量法及微量法常量法、半微量法及微量法三种。三种。此外，还有染料结合法、双缩脲法、荧光法等。此外，还有染料结合法、双缩脲法、荧光法等。2024/7/1553第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质半自动蛋白质测定仪半自动蛋白质测定仪半自动蛋白质测定仪半自动蛋白质测定仪优优点点：省省时时、省省力力、消消耗低、无污染。耗低、无污染。2024/7/1554第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质近红外谷物品质测试仪近红外谷物品质测试仪近红外谷物品质测试仪近红外谷物品质测试仪美美国国、加加拿拿大大等等国国，近近红红外外谷谷物物品品质质测测试试仪仪作作为为标标准准法法代代替替了了凯氏法。凯氏法。2024/7/1555第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质二、凯氏定氮法二、凯氏定氮法（一一）测测定定原原理理：样样品品与与浓浓硫硫酸酸共共热热时时，有有机机物物被被分分解解、脱脱水水、炭炭化化；炭炭化化生生成成的的碳碳与与硫硫酸酸作作用用生生成成二二氧氧化化碳碳；样样品品中中的的含含氮氮物物则则转转化化为为硫硫酸酸铵铵。硫硫酸酸铵铵在在碱碱性性加加热热的的条条件件下下逸逸出出氮氮，用用硼硼酸酸吸吸收收后后，再再用用酸酸标标准准液液滴滴定定，根根据据标标准准液液的的耗耗用用量量得得出出总总氮氮量量，总总氮氮量量乘乘以以蛋蛋白白质质系系数数即即可可计计算算粗粗蛋蛋白含量。白含量。2024/7/1556第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质（二）仪器用具（二）仪器用具（二）仪器用具（二）仪器用具F凯凯凯凯氏氏氏氏烧烧烧烧瓶瓶瓶瓶（50ml50ml）；圆圆圆圆底底底底烧烧烧烧瓶瓶瓶瓶（1000ml1000ml）；万万万万用用用用电电电电炉炉炉炉；锥锥锥锥形形形形烧烧烧烧瓶瓶瓶瓶（100ml100ml）；微微微微量量量量滴滴滴滴定定定定管管管管（5ml5ml、刻刻刻刻度度度度0.01ml0.01ml）；容容容容量量量量瓶瓶瓶瓶（50ml50ml）；移移移移液液液液管管管管（5ml5ml）；量量量量筒筒筒筒（10ml10ml）；洗洗洗洗耳耳耳耳球球球球；凯凯凯凯氏氏氏氏微微微微量量量量蒸馏装置（见下页图）、胶管等。蒸馏装置（见下页图）、胶管等。蒸馏装置（见下页图）、胶管等。蒸馏装置（见下页图）、胶管等。572024/7/15第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质11蒸馏瓶；蒸馏瓶；22冷凝管；冷凝管；33承接瓶；承接瓶；44回流管；回流管；55漏斗；漏斗；66活塞；活塞；77簧夹；簧夹；88烧瓶烧瓶 凯氏微量蒸馏装置图凯氏微量蒸馏装置图2024/7/1558第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质（三）主要试剂（三）主要试剂1.浓浓硫硫酸酸过过氧氧化化氢氢水水混混合合液液（2 1 3）：在在100ml水水中中缓缓慢慢加加入入浓浓硫硫酸酸200ml，冷冷却却后后再再加加入入30过过氧氧化化氢氢300ml，混混匀匀备备用用。此此液液存存放放阴阴凉处可保存一个月；凉处可保存一个月；2.混混合合催催化化剂剂：硫硫酸酸铜铜（CuSO45H2O）10g，硫硫酸酸钾钾（A.R）100g，硒硒粉粉0.2g，在在研研钵钵中中研研细细使使通过通过40目筛，混匀后备用；目筛，混匀后备用；3.40氢氧化钠溶液；氢氧化钠溶液；2024/7/1559第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质（三）主要试剂（三）主要试剂（三）主要试剂（三）主要试剂4.2 2硼酸溶液；硼酸溶液；硼酸溶液；硼酸溶液；5.0.01N0.01N盐酸溶液；盐酸溶液；盐酸溶液；盐酸溶液；6.甲甲甲甲基基基基红红红红乙乙乙乙醇醇醇醇溶溶溶溶液液液液：0.1g0.1g甲甲甲甲基基基基红红红红溶溶溶溶于于于于75ml 75ml 9595乙乙乙乙醇中（先在研钵中加乙醇研磨）；醇中（先在研钵中加乙醇研磨）；醇中（先在研钵中加乙醇研磨）；醇中（先在研钵中加乙醇研磨）；7.次次次次甲甲甲甲基基基基蓝蓝蓝蓝乙乙乙乙醇醇醇醇溶溶溶溶液液液液：0.1g0.1g次次次次甲甲甲甲基基基基蓝蓝蓝蓝溶溶溶溶于于于于80ml 80ml 9595乙乙乙乙醇醇醇醇中中中中。临临临临用用用用时时时时将将将将以以以以上上上上两两两两液液液液按按按按2 2 1 1比比比比例例例例混混混混合合合合即即即即成成成成。在在在在酸酸酸酸域域域域呈呈呈呈紫紫紫紫红红红红色色色色，在在在在pH5.5pH5.5时时时时溶溶溶溶液液液液无无无无色色色色，在在在在碱域呈绿色。碱域呈绿色。碱域呈绿色。碱域呈绿色。2024/7/1560第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质（四）操作步骤（四）操作步骤1.消消化化：按按照照含含有有1030mg粗粗蛋蛋白白质质计计算算试试样样用用量量，一一般般可可称称取取试试样样0.20.3g（W，精精确确到到0.0001g），用用蜡蜡光光纸纸卷卷着着倒倒入入50ml凯凯氏氏烧烧瓶瓶中中，加加混混合合指指示示剂剂1g，同同时时加加入入硫硫酸酸过过氧氧化化氢氢水水混混合合液液35ml，稍稍加加振振摇摇，斜斜置置于于电电炉炉上上，在在通通风风橱橱内内加加热热进进行行消消化化。开开始始时时用用低低温温加加热热，勿勿使使瓶瓶中中泡泡沫沫超超过过瓶瓶肚肚的的三三分分之之二二，待待泡泡沫沫减减少少和和烟烟雾雾变变白白后后再再增增加加温温度度保保持持微微沸沸。消消化化到到溶溶液液呈呈浅浅蓝蓝绿绿色色的的透透明明状状时时，再再继继续续加加热热沸沸腾腾10min，取取出出待待消消化化液液冷冷却却至至室室温温后后，加加水水1020ml，再再待待溶溶液液温温度度降降到到室室温温后后，干干净净地地转转入入50ml容容量量瓶瓶中中，加加水水稀稀释释至至刻刻度度，混混匀匀备用。备用。2024/7/1561第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质2.蒸馏蒸馏F按照凯氏微量蒸馏装置图的安装进行蒸馏和吸收。按照凯氏微量蒸馏装置图的安装进行蒸馏和吸收。F在在烧烧瓶瓶8内内加加水水400ml和和少少量量碎碎玻玻璃璃片片，加加5滴滴混混合合指指示示剂剂，加加几几滴滴酸酸液液使使水水呈呈紫紫红红色色，连连接接4，1，2，并检查有无漏气处。并检查有无漏气处。F量量取取30ml 1硼硼酸酸溶溶液液注注入入锥锥形形瓶瓶3内内，加加混混合合指指示示剂剂2滴滴，使使冷冷凝凝管管下下端端插插入入液液面面下下1cm处处。量量取取稀稀释释的的消消化化液液5ml，由由漏漏斗斗5注注入入瓶瓶1内内，再再加加水水10ml，冲冲洗洗漏漏斗斗5。量量取取40氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液1ml，提提起起活活塞塞注注入入瓶瓶1内内，立立即即用用水水25ml冲冲洗洗漏漏斗斗5，旋旋紧紧活活塞塞。这时瓶这时瓶1内溶液总体积不要超过其容量的一半。内溶液总体积不要超过其容量的一半。2024/7/1562第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质2.2.蒸馏蒸馏蒸馏蒸馏F打打打打开开开开簧簧簧簧夹夹夹夹7 7，关关关关闭闭闭闭活活活活塞塞塞塞6 6，加加加加热热热热烧烧烧烧瓶瓶瓶瓶8 8，待待待待瓶瓶瓶瓶1 1内内内内溶溶溶溶液液液液开开开开始始始始沸沸沸沸腾腾腾腾时时时时开开开开始始始始计计计计时时时时，经经经经2min2min降降降降低低低低瓶瓶瓶瓶3 3，使使使使冷冷冷冷凝凝凝凝管管管管下下下下端端端端露露露露出出出出液液液液面面面面，再再再再蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏1min1min后后后后，用用用用水水水水冲冲冲冲洗洗洗洗管下端。管下端。管下端。管下端。F蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏结结结结束束束束后后后后，掐掐掐掐紧紧紧紧簧簧簧簧夹夹夹夹7 7，断断断断绝绝绝绝蒸蒸蒸蒸气气气气，使使使使瓶瓶瓶瓶1 1内内内内溶溶溶溶液液液液全全全全部部部部吸吸吸吸入入入入管管管管4 4中中中中，放放放放松松松松簧簧簧簧夹夹夹夹7 7，从从从从漏漏漏漏斗斗斗斗5 5加加加加入入入入蒸蒸蒸蒸馏馏馏馏水水水水404050ml50ml，再再再再通通通通蒸蒸蒸蒸气气气气加加加加热热热热和和和和回回回回流流流流，将将将将瓶瓶瓶瓶1 1洗洗洗洗涤一次备用。涤一次备用。涤一次备用。涤一次备用。2024/7/1563第四节第四节 粗蛋白质粗蛋白质3.3.滴定滴定滴定滴