消毒灭菌和病原微生物实验室安全培训课件

消毒消毒灭灭菌和病原微生菌和病原微生物物实验实验室安全室安全基本概念基本概念*1.物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 2.化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法3.影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素2消毒灭菌和病原微生物实验室安全3.3.清洁清洁(cleaning)cleaning)基本概念基本概念1.1.消毒消毒(disinfection)disinfection)2.2.灭菌灭菌(sterilization)sterilization)4.4.防腐防腐(antisepsis)antisepsis)5.5.无菌无菌(asepsis)asepsis)6.6.无菌操作无菌操作3消毒灭菌和病原微生物实验室安全(3)(3)常用化学法常用化学法,用以消毒的药品用以消毒的药品称为称为消毒剂消毒剂(disinfectant)disinfectant)。1.1.消毒消毒(disinfection)disinfection)(1)(1)杀死物体上病原微生物的方法杀死物体上病原微生物的方法(2)(2)并不一定能杀死含芽胞的细菌并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。或非病原微生物。4消毒灭菌和病原微生物实验室安全2.2.灭菌灭菌(sterilization)sterilization)杀灭物体上所有微杀灭物体上所有微生物的方法。生物的方法。比消毒要求高，比消毒要求高，包括杀灭细菌包括杀灭细菌芽胞芽胞在在内的全部内的全部病原微生物病原微生物和和非病原微生物非病原微生物。5消毒灭菌和病原微生物实验室安全 3.3.清洁清洁(cleaning)(cleaning)：通过除去尘埃和一切污秽通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。以减少微生物数量的过程。6消毒灭菌和病原微生物实验室安全 4.4.防腐防腐(antisepsis)antisepsis)：防止或抑制体外细菌生长繁防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。殖的方法。细菌一般不死亡。7消毒灭菌和病原微生物实验室安全5.5.无菌无菌(asepsis)asepsis)不存在活菌不存在活菌8消毒灭菌和病原微生物实验室安全 6.6.无菌操作：无菌操作：防止微生物进入人体或其它物品的操作方法。防止微生物进入人体或其它物品的操作方法。9消毒灭菌和病原微生物实验室安全热力灭菌法热力灭菌法辐射杀菌法辐射杀菌法滤过除菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法干燥与低温抑菌法10消毒灭菌和病原微生物实验室安全 （一）干热灭菌法（一）干热灭菌法 1.1.焚烧焚烧：废弃物、尸体：废弃物、尸体 2.2.烧灼烧灼：接种环、试管口：接种环、试管口 3.3.干烤干烤：玻璃：玻璃,160,160170170，2 2 h.h.4.4.红外线红外线：医疗器械：医疗器械11消毒灭菌和病原微生物实验室安全（二）湿热灭菌法原理（二）湿热灭菌法原理 使细菌在含水量高的情况使细菌在含水量高的情况下容易变性凝固，而且蒸汽的下容易变性凝固，而且蒸汽的穿透力强。穿透力强。12消毒灭菌和病原微生物实验室安全湿热灭菌的特点湿热灭菌的特点湿热中的菌体蛋白容易变性湿热中的菌体蛋白容易变性湿热的穿透力强湿热的穿透力强湿热的蒸汽有潜能存在湿热的蒸汽有潜能存在 在在100下，下，1克水由气态转变克水由气态转变 为液态可释放为液态可释放529cal的热量的热量13消毒灭菌和病原微生物实验室安全常用的湿热灭菌法常用的湿热灭菌法1.1.巴氏消毒法：巴氏消毒法：61.61.1 162.862.8，3030minmin或或71.771.7,15-30s,15-30s主要用于牛乳消毒主要用于牛乳消毒 14消毒灭菌和病原微生物实验室安全 2.2.煮沸法煮沸法:煮沸煮沸100100，5-105-10minmin,杀灭细菌繁殖杀灭细菌繁殖 体，细菌芽胞经体，细菌芽胞经1-21-2h h被杀死。被杀死。常用于食具、刀剪等。常用于食具、刀剪等。15消毒灭菌和病原微生物实验室安全3.3.流动蒸汽消毒法：流动蒸汽消毒法：一个大气压下一个大气压下100 100 的水蒸汽消的水蒸汽消毒。细菌繁殖体毒。细菌繁殖体15-3015-30min.min.可被杀死，可被杀死，但芽胞不一定被全部杀灭但芽胞不一定被全部杀灭4.4.间歇蒸汽消毒法：间歇蒸汽消毒法：利用反复多次的流动蒸汽间歇加热利用反复多次的流动蒸汽间歇加热消毒，消毒，100 100，15-3015-30min.min.37 37过夜后过夜后,再蒸再蒸,如此反复如此反复3 3次次.16消毒灭菌和病原微生物实验室安全 5.5.高压蒸汽灭菌法：高压蒸汽灭菌法：103.4103.4kPa(1.05kg/cm2)kPa(1.05kg/cm2)121.3 121.3，15-2015-20min.min.17消毒灭菌和病原微生物实验室安全18消毒灭菌和病原微生物实验室安全19消毒灭菌和病原微生物实验室安全1.1.紫外线紫外线 （UVUV）波长波长2 240-300nm40-300nm的紫外线具有杀菌的紫外线具有杀菌作用。其主要作用于作用。其主要作用于DNADNA，使一条使一条DNADNA链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合形链上相邻的两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，导致细菌变异和死亡。成二聚体，导致细菌变异和死亡。具有可逆性。具有可逆性。穿透力弱，故仅用于空气和物体穿透力弱，故仅用于空气和物体表面消毒。表面消毒。对人体有害。对人体有害。20消毒灭菌和病原微生物实验室安全UV-lamp21消毒灭菌和病原微生物实验室安全2.2.电离辐射电离辐射:高速电子、高速电子、X X射线、射线、射线，用于医用塑料，食物射线，用于医用塑料，食物3.3.微波微波:波长波长1 1mmmm1m1m，适用于适用于非金属用品等非金属用品等22消毒灭菌和病原微生物实验室安全24消毒灭菌和病原微生物实验室安全 生物洁净技术是涉及多学科的一门生物洁净技术是涉及多学科的一门边缘学科，它利用空调技术、物理边缘学科，它利用空调技术、物理过滤、气流组织、压差控制等诸多过滤、气流组织、压差控制等诸多技术手段，控制污染颗粒来控制微技术手段，控制污染颗粒来控制微生物污染，从而对控制的环境对象生物污染，从而对控制的环境对象建立一个完善的保障体系。建立一个完善的保障体系。25消毒灭菌和病原微生物实验室安全 层流室层流室26消毒灭菌和病原微生物实验室安全干燥法干燥法:细菌在空气干燥条件细菌在空气干燥条件时会死亡。时会死亡。低温法：低温法：低温可使细菌的新低温可使细菌的新陈代谢减慢，常用作保存细陈代谢减慢，常用作保存细菌菌种。菌菌种。冷冻真空干燥法：冷冻真空干燥法：是目前保是目前保存菌种的最好方法。存菌种的最好方法。27消毒灭菌和病原微生物实验室安全低温与干燥在低温状态下真空抽去水分在低温状态下真空抽去水分用途：用途：保存菌种冷冻真空干燥法：冷冻真空干燥法：28消毒灭菌和病原微生物实验室安全1.1.化学消毒剂的杀菌机制化学消毒剂的杀菌机制(1)(1)促进菌体蛋白质变性或凝固促进菌体蛋白质变性或凝固(2)(2)干扰细菌的酶系统或代谢干扰细菌的酶系统或代谢(3)(3)损伤菌细胞膜损伤菌细胞膜2.2.消毒剂的主要种类和应用消毒剂的主要种类和应用29消毒灭菌和病原微生物实验室安全类别类别机机 制制用用 途途酚类酚类蛋白变性，细胞蛋白变性，细胞膜损伤膜损伤石炭酸石炭酸醇类醇类蛋白变性蛋白变性乙醇乙醇重金属盐重金属盐氧化氧化,蛋白酶变性蛋白酶变性红汞红汞,硫柳汞硫柳汞氧化剂氧化剂 氧化氧化、蛋白沉淀蛋白沉淀高锰酸钾高锰酸钾,过过氧乙酸氧乙酸,碘酒碘酒表面活表面活性性 剂剂蛋白变性蛋白变性、细胞膜损伤细胞膜损伤新洁而灭新洁而灭染染 料料干扰氧化干扰氧化、抑抑制繁殖制繁殖龙胆紫龙胆紫30消毒灭菌和病原微生物实验室安全类别类别机机 制制用用 途途氯氯氧化氧化/蛋白蛋白沉淀沉淀饮水消毒饮水消毒新洁新洁尔灭尔灭蛋白凝固沉蛋白凝固沉淀淀,膜损伤膜损伤皮肤黏膜皮肤黏膜,手手,器器械浸泡械浸泡甲醛甲醛/戊戊二醛二醛蛋白蛋白,核酸核酸烷基化烷基化浸泡组织浸泡组织,物品表物品表面和面和,空气消毒空气消毒31消毒灭菌和病原微生物实验室安全种类种类浓度浓度(%)(%)用途用途石炭酸石炭酸3 35 5地面地面、器具表面器具表面、皮肤消毒皮肤消毒乙醇乙醇70-7570-75皮肤皮肤、体温计消毒体温计消毒高锰酸甲高锰酸甲0.10.1皮肤皮肤、尿道尿道、蔬菜蔬菜、水果消毒水果消毒红汞红汞2 2皮肤皮肤、粘膜粘膜、小创伤消毒小创伤消毒硫柳汞硫柳汞0.10.1皮肤消毒皮肤消毒、手术部位消毒手术部位消毒过氧乙酸过氧乙酸 0.2-0.30.2-0.3 塑料塑料、玻璃器材消毒玻璃器材消毒碘酒碘酒2-2.52-2.5皮肤消毒皮肤消毒新洁而灭新洁而灭3 35 5手术洗手手术洗手、浸泡手术器械浸泡手术器械龙胆紫龙胆紫2 24 4浅表创伤消毒浅表创伤消毒32消毒灭菌和病原微生物实验室安全影响消毒剂作用的因素影响消毒剂作用的因素消毒剂消毒剂种种类类浓浓度度时时间间细细 菌菌菌龄菌龄/种类种类 环环 境境酸碱酸碱度度有机有机物物温度温度33消毒灭菌和病原微生物实验室安全 一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类 第第一一类类是是指指能能够够引引起起人人类类或或者者动动物物非非常常严严重重疾疾病病的的微微生生物物，以以及及我我国国尚尚未未发发现现或者已经宣布消灭的微生物。或者已经宣布消灭的微生物。第第二二类类是是指指能能够够引引起起人人类类或或者者动动物物严严重重疾疾病病，比比较较容容易易直直接接或或者者间间接接在在人人与与人人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。动物与人、动物与动物间传播的微生物。第五节 病原微生物实验室安全34消毒灭菌和病原微生物实验室安全 一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类第第三三类类是是指指能能够够引引起起人人或或动动物物疾疾病病，但但一一般般情情况况下下对对人人、动动物物或或环环境境不不构构成成严严重重危危害害，传传播播风风险险有有限限，实实验验室室感感染染后后很很少少引引起起严严重重疾疾病病，并并且且具具备备有有效效治治疗疗和和预预防防措措施的微生物。施的微生物。第第四四类类是是指指在在通通常常情情况况下下不不会会引引起起人人或或动动物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。第第一一类类、第第二二类类统统称称为为高高致致病病性性病病原原微微生生物物。35消毒灭菌和病原微生物实验室安全一级生物安全实验室36消毒灭菌和病原微生物实验室安全二级生物安全实验室37消毒灭菌和病原微生物实验室安全三级生物安全实验室38消毒灭菌和病原微生物实验室安全四级生物安全实验室39消毒灭菌和病原微生物实验室安全1 1、掌握概念、掌握概念:灭菌灭菌(sterilization),消毒消毒(disinfection)2 2、掌握紫外线灭菌的机制、掌握紫外线灭菌的机制,应用应用,特点？特点？3 3、理解湿热灭菌的方法及应用、理解湿热灭菌的方法及应用,滤过除滤过除菌的应用。菌的应用。4 4、了解化学消毒灭菌、了解化学消毒灭菌本节要点40消毒灭菌和病原微生物实验室安全