血涂片制备染色与白细胞形态(ZCG)课件

血涂片制备、染色及白细胞形态观察医学检验系血涂片制备、染色及白细胞形态观察医学检验系实验内容n1.血涂片制备 n2.血涂片染色n3.正常白细胞形态观察实验内容目的目的目的目的：掌握血涂片的制备方法、瑞吉氏染色方 法，观察正常白细胞形态。染色原理染色原理染色原理染色原理：根据不同种类细胞及细胞的不同成分 ，对酸性及碱性染料结合能力不同，而使各种细胞呈现各自的特点。器材器材器材器材：载玻片、推片、染架、吸耳球、显微镜、微量吸管、拭镜纸。试剂试剂试剂试剂：瑞吉氏染液、磷酸盐缓冲液、香柏油、乙醇-乙醚溶液。标本标本标本标本：抗凝血。目的：掌握血涂片的制备方法、瑞吉氏染色方左手持载玻片，右手持推片，将推片置血滴前方，向后移动到接触血滴，使血滴沿推片边缘展开成线状。1.血 涂 片 制 备血液充分抗凝。微量吸管虹吸取血7-8l，置血滴于载玻片一端。左手持载玻片，右手持推片，将推片置血滴前方，向后移动到接触血血 涂 片 制 备推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度。一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾 涂片干燥后用铅笔铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B 1 2 3血 涂 片 制 备推片载玻片血液将推片匀速向前，勿停顿。涂片2.血 涂 片 染 色再加再加瑞氏染色瑞氏染色液液5-8滴，滴，液和液和液充分混匀静置液充分混匀静置5分钟分钟直接在无血膜处无血膜处流水冲洗3-5分钟血涂片干燥后用油镜分类计数200个白细胞李四李四123123涂片干燥后加瑞氏染色涂片干燥后加瑞氏染色液液5-8滴覆盖整个血膜滴覆盖整个血膜1分钟分钟2.血 涂 片 染 色再加瑞氏染色液5-8滴，液和3.血涂片的观察l l低倍镜观察低倍镜观察 1.1.染色情况染色情况(满意、偏酸、偏碱）满意、偏酸、偏碱）2.2.细胞分布情况细胞分布情况l l油镜下分类计数：体尾交界处。油镜下分类计数：体尾交界处。油镜下分类计数：体尾交界处。油镜下分类计数：体尾交界处。油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。李四李四1231233.血涂片的观察低倍镜观察李四123中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞单核细胞单核细胞单核细胞单核细胞嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞单核细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒 中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞正 常 细 胞 形 态胞体：圆形，直径 10-15m。胞浆：胞质量丰富，充满浅红色中性颗粒。胞核：核形不一，呈S形、U形等，核色质粗糙成块。中性杆状核粒细胞正 常 细 胞 形 态胞体：圆形，直径 中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞细胞核被染成紫色分叶状，可分3-5叶。中性分叶核粒细胞细胞核被染成紫色分叶状，可分3-5叶。嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞略大于嗜中性粒细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成桔红色。嗜酸性粒细胞略大于嗜中性粒细胞，细胞核染成紫色，通常为2 嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞体积略小于嗜酸性粒细胞，细胞中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性粒细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色。嗜碱性粒细胞体积略小于嗜酸性粒细胞，细胞中有大 单核细胞单核细胞体积最大，细胞圆形。胞浆中有灰蓝色粉尘样颗粒。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。单核细胞体积最大，细胞圆形。胞浆中有灰蓝色粉尘样颗粒。核淋巴细胞淋巴细胞小淋巴细胞：与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成 深紫色。周围细胞质嗜碱性，染成淡蓝。大淋巴细胞：较大，核圆形。直径11-15 m。淋巴细胞小淋巴细胞：与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成 红细胞红细胞淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径6-9m。红细胞淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染血小板血小板形状不规则，一般呈圆形，比红细胞和白细胞小得多，无细胞核，有质膜。血小板在长期内被看作是血液中无功能的细胞碎片。血小板形状不规则，一般呈圆形，比红细胞和白细胞小得多，无细胞血涂片制备染色与白细胞形态(ZCG)课件血涂片制备染色与白细胞形态(ZCG)课件n n1.1.玻片清洗：新玻片玻片清洗：新玻片常有游离碱质常有游离碱质,因此应用因此应用 清洗液或清洗液或10%10%盐酸浸泡盐酸浸泡24h,24h,然后再彻底清洗。然后再彻底清洗。用用过的玻片过的玻片可放入适量肥皂水煮沸可放入适量肥皂水煮沸20min,20min,再用热再用热水将肥皂和血膜洗去水将肥皂和血膜洗去,自来水反复冲洗自来水反复冲洗,必要时必要时再置再置95%95%乙醇中浸泡乙醇中浸泡1h,1h,然后然后擦干或烤干擦干或烤干备用。备用。n n2 2.使用玻片使用玻片：只能手持玻片边缘只能手持玻片边缘,切勿触及玻片切勿触及玻片表面表面,以保持玻片清洁以保持玻片清洁、干燥干燥、中性、无油腻。中性、无油腻。注 意 事 项 玻片1.玻片清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用 清洗液或1n n3.3.良好的血良好的血涂涂片片,厚薄适宜厚薄适宜,头体尾分明头体尾分明,分分布均匀布均匀,边缘整齐边缘整齐,两侧留有空隙。两侧留有空隙。血滴越大，角度越大，速度越大，血膜越厚。血滴越大，角度越大，速度越大，血膜越厚。n n4.4.血涂片血涂片干透干透后方可染色，否则染色过程中后方可染色，否则染色过程中血膜容易脱落。血膜容易脱落。血血涂涂片制好后最好片制好后最好立即固定立即固定染色染色,以免细胞溶解和发生退行性变。以免细胞溶解和发生退行性变。注 意 事 项 推片3.良好的血涂片,厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,n n5.PH5.PH值影响细胞染色值影响细胞染色,配制染液必须用配制染液必须用优质甲醇优质甲醇,稀释染稀释染液必须用液必须用缓冲液缓冲液,近中性水近中性水冲洗冲洗,否则各种细胞染色反应否则各种细胞染色反应异常异常,致使细胞的识别困难致使细胞的识别困难,甚至造成错误。甚至造成错误。n n6.6.染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关。染色时间与染液浓度、室温高低、细胞多少有关。染染液越淡、室温越低、细胞越多液越淡、室温越低、细胞越多,染色时间越长或适当增染色时间越长或适当增加染液量。加染液量。n n7.7.染液不可过少染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血涂片上难以防蒸发干燥染料沉着于血涂片上难冲洗干净。冲洗干净。流水冲去染液流水冲去染液,不能先倒掉染液不能先倒掉染液,以免染料沉以免染料沉着于血涂片上。着于血涂片上。冲洗时间冲洗时间不宜过久，以防脱色。不宜过久，以防脱色。注 意 事 项 染色染色5.PH值影响细胞染色,配制染液必须用优质甲醇,稀释染液必须1.6种白细胞形态绘图。2.本次实验的关键环节是什么？作业作业作业