临床免疫学和免疫检验--课件

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绪论绪论临床免疫学和免疫检验临床免疫学和免疫检验全国高等医药院校教材全国高等医药院校教材(供医学检验专业用)(供医学检验专业用)临床免疫学和免疫检验临床免疫学和免疫检验 第第3版版2003免疫学和免疫免疫学和免疫学检验学检验第第1版版1989第第2版版1997医学检验医学检验Medical Laboratory检验医学检验医学 Laboratory Medicine检验项目的发展检验项目的发展对临床有重要的意义对临床有重要的意义 诊断诊断 治疗治疗 预后预后 预防预防诊断诊断 感染性疾病感染性疾病 HIV感染,感染,HBV,HCV感染感染SARS,禽流感,禽流感 心血管疾病心血管疾病 急性心肌梗死急性心肌梗死 肌钙蛋白肌钙蛋白 肌红蛋白肌红蛋白 CK-MB 心衰心衰 BNP治疗治疗 预后预后 肿瘤标志肿瘤标志 C-反应蛋白和炎症反应蛋白和炎症 CA 19-9(Cancer Antigen19-9,Carbohydrate Antigen 19-Cancer Antigen19-9,Carbohydrate Antigen 19-9 9)0 2 4 6 8 10 101001,00010,000肿瘤进展肿瘤进展稳定状态稳定状态肿瘤缓解肿瘤缓解CA19-9U/mlRx:5 FU+MTX 5 FU+BCNU Mitomycin C化疗中化疗中CA19-9的监控的监控月份月份CRP 炎症炎症-抗生素治疗抗生素治疗预防预防(风险因子)(风险因子)高敏高敏C-反应蛋白反应蛋白hs-CRP初级风险预测初级风险预测(高血脂,高血压,糖尿病,吸烟史)(高血脂,高血压,糖尿病,吸烟史)心血管疾病风险预测心血管疾病风险预测心梗风险指标心梗风险指标PM Ridker,N Engl J Med 2000免疫检验免疫检验免疫检验技术免疫检验技术免疫检验的临床应用免疫检验的临床应用免疫检验技术免疫检验技术细胞免疫检验技术细胞免疫检验技术 免疫细胞的检测免疫细胞的检测 细胞因子的测定细胞因子的测定体液免疫检验技术体液免疫检验技术 抗原、抗体、补体抗原、抗体、补体的测定的测定 免疫测定免疫测定免疫测定免疫测定IMMUNOASSAY(IA)抗原抗体抗原抗体抗原抗体复合物抗原抗体复合物AgAbAg-Ab 免疫测定分类免疫测定分类 免疫浊度测定免疫浊度测定 Ag+AbAgAb+Ab标记免疫测定标记免疫测定Ag+Ab*AgAb*+Ab*(B)(F)免疫测定分类免疫测定分类 均相免疫测定均相免疫测定HOMOGENOUSIAHOMOGENOUSIA在测定中结合的反应物在测定中结合的反应物(B)与游离的反应物与游离的反应物(F)不需要分离不需要分离异相免疫测定异相免疫测定HETEROGENOUSIAHETEROGENOUSIA在测定中需要分离在测定中需要分离(B)和和(F)免疫测定的敏感度免疫测定的敏感度 免疫浊度测定免疫浊度测定 gng标记免疫测定标记免疫测定ngpg 标记免疫测定标记免疫测定放射免疫测定放射免疫测定1960酶免疫测定酶免疫测定1970荧光免疫测定荧光免疫测定19801990化学发光免疫测定化学发光免疫测定1990膜固相免疫测定膜固相免疫测定1990 可可测测定定项项目目 均相免疫测定均相免疫测定-1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白-1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶白蛋白(投射比浊)白蛋白(投射比浊)载脂蛋白载脂蛋白A1载脂蛋白载脂蛋白B抗抗O补体补体C3c补体补体C4铜蓝蛋白铜蓝蛋白C反应蛋白反应蛋白铁蛋白铁蛋白触珠蛋白触珠蛋白糖化血红蛋白糖化血红蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白A免疫球蛋白免疫球蛋白G免疫球蛋白免疫球蛋白MKappa轻链轻链Lambda轻链轻链脂蛋白脂蛋白a肌红蛋白肌红蛋白前白蛋白前白蛋白类风湿因子类风湿因子可溶性转铁蛋白受体可溶性转铁蛋白受体转铁蛋白转铁蛋白对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚氨甲酰氮卓氨甲酰氮卓地高辛地高辛洋地黄毒苷洋地黄毒苷庆大霉素庆大霉素苯巴比妥苯巴比妥苯妥因苯妥因普鲁卡因普鲁卡因水杨酸盐水杨酸盐茶碱茶碱妥布拉霉素妥布拉霉素丙戊酸丙戊酸特定蛋白特定蛋白治疗药物监控治疗药物监控滥用药物滥用药物乏碳水化合物转铁蛋白乏碳水化合物转铁蛋白苯丙胺苯丙胺巴比妥酸盐巴比妥酸盐苯二氮苯二氮大麻大麻可卡因可卡因乙醇乙醇美沙酮美沙酮鸦片鸦片苯环利啶苯环利啶右丙氧芬右丙氧芬可可测测定定项项目目 异相免疫测定(一)异相免疫测定(一)乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗体乙型肝炎表面抗体乙型肝炎乙型肝炎e抗原抗原乙型肝炎核心抗体乙型肝炎核心抗体乙型肝炎核心抗体乙型肝炎核心抗体IgM甲型肝炎抗体甲型肝炎抗体甲型肝炎抗体甲型肝炎抗体IgM丙型肝炎抗体丙型肝炎抗体HIVcombi甲胎蛋白甲胎蛋白癌胚抗原癌胚抗原总前列腺特异性抗原总前列腺特异性抗原游离前列腺特异性抗原游离前列腺特异性抗原糖类抗原糖类抗原125糖类抗原糖类抗原15-3糖类抗原糖类抗原19-9糖类抗原糖类抗原72-4神经元特异烯醇化酶神经元特异烯醇化酶细胞角蛋白片断细胞角蛋白片断21-1传染病传染病肿瘤标志物肿瘤标志物贫血贫血铁蛋白铁蛋白维生素维生素B12血清叶酸血清叶酸红细胞叶酸红细胞叶酸骨质疏松骨质疏松甲状旁腺激素甲状旁腺激素骨钙素骨钙素-胶原特殊序列胶原特殊序列25-(OH)2VitD可可测测定定项项目目 异相免疫测定(二)异相免疫测定(二)促甲状腺激素促甲状腺激素三碘甲腺原氨酸三碘甲腺原氨酸甲状腺素甲状腺素游离甲状腺素游离甲状腺素游离三碘甲腺原氨酸游离三碘甲腺原氨酸甲状腺球蛋白甲状腺球蛋白抗甲状腺球蛋白抗甲状腺球蛋白抗甲状腺微粒体抗体抗甲状腺微粒体抗体甲状腺吸收率甲状腺吸收率肌钙蛋白肌钙蛋白T肌酸激酶同工酶肌酸激酶同工酶肌红蛋白肌红蛋白脑钠素前体脑钠素前体地高辛地高辛洋地黄毒苷洋地黄毒苷甲状腺甲状腺心梗标志心梗标志糖尿病及其他糖尿病及其他胰岛素胰岛素免疫球蛋白免疫球蛋白E检验技术的进展检验技术的进展 自动化自动化 简便化简便化自动化分析自动化分析 提高工作效率提高工作效率 提高精密度(提高精密度(CV%)手工操作误差手工操作误差 分析仪系统误差分析仪系统误差自动分析系统自动分析系统 自动分析仪自动分析仪 配套的测定试剂配套的测定试剂 配套的校准品配套的校准品检测系统检测系统校准品校准品试剂试剂仪器仪器检测方法检测方法自动分析系统自动分析系统(仪仪 器器 +试试 剂剂 )校准品生化自动分析系统生化自动分析系统生化测定生化测定分析物分析物试剂试剂产物产物吸光度吸光度(化合物)(化合物)(化合物)(化合物)化学反应化学反应温度、时间温度、时间(化合物)(化合物)分光光度计分光光度计波长波长(nm)(A)免疫自动分析系统免疫自动分析系统免疫测定免疫测定分析物分析物试剂试剂产物产物(抗原)(抗原)(抗体)(抗体)化学反应化学反应温度、时间温度、时间(抗原抗体复合物)(抗原抗体复合物)均相免疫测定均相免疫测定异相免疫测定异相免疫测定免疫自动分析系统免疫自动分析系统均相免疫测定(均相免疫测定(B,F不需分离)不需分离)直接在生化自动分析仪中直接在生化自动分析仪中测定测定异相免疫测定(异相免疫测定(B,F需分离)需分离)Ag+Ab*AgAb*+Ab*(B)(F)分析仪中分析仪中需加入需加入B,F分离装置分离装置免疫浊度测定免疫浊度测定均相酶免疫测定均相酶免疫测定血清标本可测定的项目血清标本可测定的项目生化测定生化测定标记免疫测定标记免疫测定均相免疫测定均相免疫测定肝功能甲状腺功能肝功能甲状腺功能特定蛋白特定蛋白药物药物肾功能激素肾功能激素免疫功能免疫功能镇静剂镇静剂心血管疾病肿瘤标志心血管疾病肿瘤标志心血管疾病心血管疾病抗生素抗生素糖尿病心肌标志糖尿病心肌标志炎症炎症心血管病药心血管病药电解质电解质感染性疾病感染性疾病营养监测营养监测毒品毒品50项项50项项50项项模块式自动分析仪模块式自动分析仪Modular 同类型的模块可以整合在一起测定同类型的模块可以整合在一起测定 生化模块生化模块 P800D2400电解质模块电解质模块ISE900/1800标记免疫模块标记免疫模块E1702 Core Unit 核心模块 1 Control Unit 操作单位血清工作区血清工作区Serum Work Area (SWA)Serum Work Area (SWA)生化,免疫联合自动分析系统生化,免疫联合自动分析系统生化,免疫联合自动分析系统生化,免疫联合自动分析系统3 ISE 900/1800 module:电解质测定模块4 D 2400 module:生化测定模块5 P 800 module:生化测定模块6 E170 module:免疫测定模块4523261简简 便便 化化 简便快速简便快速 单份测定单份测定 仪器小巧仪器小巧 试剂稳定试剂稳定POCT检验医学的新领域检验医学的新领域POCT名词解释名词解释 Point-of-caretestingpoint时间、地点时间、地点care保健保健testing检验检验与与POCT相关的名词相关的名词医师诊所检验医师诊所检验家用检验家用检验检验科外的检验检验科外的检验分散检验分散检验床边检验床边检验病人身边检验病人身边检验就地检验就地检验即时检验即时检验POCT与中央检验与中央检验在医院检验科集中进在医院检验科集中进行的检验称为行的检验称为中央检验中央检验(centralizedtesting)病人病人医生医生结果解释(结果解释(1111)(1 1)填写检验申请)填写检验申请传送报告单(传送报告单(1010)填写检验报告单(填写检验报告单(9 9)(3 3)送至检验科)送至检验科(2 2)采取标本)采取标本确认结果(确认结果(8 8)(4 4)登记检验申请)登记检验申请质控检查(质控检查(7 7)(5 5)标本准备)标本准备(6 6)分析标本和质控品分析标本和质控品中央检验工作环节中央检验工作环节检验周转期检验周转期从采取标本到送出检验报从采取标本到送出检验报告所花的时间称为告所花的时间称为检验周转期检验周转期(turnaroundtime,TAT)医院内和医院外的医院内和医院外的POCT医院内的医院内的POCT 急诊检验室急诊检验室 门诊检验室门诊检验室 分科门诊分科门诊POCT 手术室手术室POCT 监护病房监护病房POCT 小儿科小儿科POCT 特殊病人的床边特殊病人的床边POCT医院外的医院外的POCT 医师诊所医师诊所 医务室医务室 救护车上救护车上 事故现场事故现场 出入境检验出入境检验 家庭家庭POCT技术技术 简便快速简便快速 单份测定单份测定 仪器小巧仪器小巧 试剂稳定试剂稳定金标记膜固相免疫测定金标记膜固相免疫测定固相免疫测定固相免疫测定(B)和和(F)的分离的分离(ELISA)AbAg+Ab*AbAgAb*Ab*Ab*膜固相免疫测定膜固相免疫测定(Membrane based immunoassay)以微孔膜(硝酸纤维素膜)为固相以微孔膜(硝酸纤维素膜)为固相以有色微粒(红色的胶体金)为标记物以有色微粒(红色的胶体金)为标记物简便快速测定简便快速测定固相微孔膜固相微孔膜硝酸纤维素膜硝酸纤维素膜孔径:孔径:0.20.6m硝酸纤维素膜与聚苯乙烯微孔板的比较硝酸纤维素膜与聚苯乙烯微孔板的比较膜膜板板对蛋白质的吸附对蛋白质的吸附强强弱弱表面积表面积大(微孔)大(微孔)小(平面)小(平面)吸水性能吸水性能吸水吸水不吸水不吸水洗涤洗涤过滤,移行过滤,移行冲洗冲洗胶体金标记胶体金标记胶体金(胶体金(Colloidal Gold)1560 nm优优 质质劣劣 质质胶体金结合物胶体金结合物CONJUGATE胶体金结合物(胶体金结合物(Conjugate)膜固相免疫测定分类膜固相免疫测定分类 免疫渗滤测定免疫渗滤测定(IMMUNOFILTRATIONASSAY,IFA)免疫层析测定免疫层析测定(IMMUNOCHROMATOGRAPHICASSAY,ICA)IFA穿流(穿流(FLOWTROUGH)ICA横流(横流(LATERALFLOW)免疫层析测定免疫层析测定ICAICA 试剂条结构示意图试剂条结构示意图样样品品垫垫结结合合物物垫垫NC膜膜吸吸水水垫垫ICA 双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法测抗原ICA 间接法测抗体间接法测抗体ICA 结果观察结果观察阳性阳性阴性阴性无效无效膜固相免疫测定的特点膜固相免疫测定的特点优点优点不足之处不足之处简便,快速简便,快速敏感度略低,价格略高(与敏感度略低,价格略高(与ELISAELISA比)比)单份测定单份测定精密度较差精密度较差保存期长(优质试剂)保存期长(优质试剂)定量困难定量困难可测定物范围广(主要为定性试验)可测定物范围广(主要为定性试验)质控困难质控困难感染性疾病的诊断感染性疾病的诊断妊娠、排卵的诊断妊娠、排卵的诊断肿瘤标志肿瘤标志心肌标志心肌标志滥用药物滥用药物金标记膜固相免疫测定的特点金标记膜固相免疫测定的特点Point of Care Testing(POCT)即时单人份测定即时单人份测定试剂简单,易于保存。试剂简单,易于保存。操作简便,不需仪器。操作简便,不需仪器。测定快速,肉眼判断。测定快速,肉眼判断。谢谢 谢谢
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