中药化学其他成分课件

第十二章第十二章 其他成分其他成分第一节第一节 脂肪酸类化合物脂肪酸类化合物 一、概述一、概述1.定义定义 脂肪酸是脂肪族中含有羧基的一类化合物。脂肪酸是脂肪族中含有羧基的一类化合物。2.分布分布 此类化合物广泛分布于动植物中。此类化合物广泛分布于动植物中。3.生物合成生物合成 以乙酰辅酶以乙酰辅酶A和丙二酸单酰辅酶和丙二酸单酰辅酶A为原料而被为原料而被生物合成的，它们在生物体内几乎均以酯的形生物合成的，它们在生物体内几乎均以酯的形式存在。式存在。1饱和脂肪酸饱和脂肪酸 棕榈酸棕榈酸（16:0）：）：CH3-(CH2)14-COOH 硬脂酸（硬脂酸（18:0）：）：CH3-(CH2)16-COOH2不饱和脂肪酸不饱和脂肪酸（1）单不饱和脂肪酸）单不饱和脂肪酸 分子中有一个双键。分子中有一个双键。油酸（油酸（18:1）：）：CH3-(CH2)7-CH=CH-(CH2)7-COOH 棕榈油酸（棕榈油酸（16:1）：）：CH3-(CH2)5-CH=CH-(CH2)7-COOH（2）多不饱和脂肪酸）多不饱和脂肪酸 分子中有两个以上双键。分子中有两个以上双键。二、脂肪酸的结构分类二、脂肪酸的结构分类u亚油酸（亚油酸（18:2）：）：CH3-(CH2)4-(CH=CH-CH2)2-(CH2)6-COOHu-亚麻酸（亚麻酸（18:3）：）：CH3-CH2-(CH=CH-CH2)3-(CH2)6-COOHu-亚麻酸（亚麻酸（18:3）：）：CH3-(CH2)4-（CH=CH-CH2)3-(CH2)3-COOHu 花生四烯酸（花生四烯酸（20:4）：）：CH3-(CH2)4-(CH=CH-CH2)4-(CH2)2-COOHu二十碳五烯酸（二十碳五烯酸（20:5）CH3-CH2-(CH=CH-CH2)5-(CH2)2-COOH，EPAu二十二碳六烯酸（二十二碳六烯酸（22:6）：）：CH3-CH2-(CH=CH-CH2)6-CH2-COOH,DHA分布：含分布：含2 2个或个或3 3个双键的脂肪酸个双键的脂肪酸-植物油脂植物油脂4 4个以上双键的多不饱和脂肪酸个以上双键的多不饱和脂肪酸-海洋动物的脂肪海洋动物的脂肪三、脂肪酸的理化性质三、脂肪酸的理化性质三、脂肪酸的理化性质三、脂肪酸的理化性质1 1溶解性溶解性 脂肪酸不溶于水，溶于乙醚、己烷、苯、氯仿、脂肪酸不溶于水，溶于乙醚、己烷、苯、氯仿、热乙醇等有机溶剂，可溶于冷氢氧化钠溶液。热乙醇等有机溶剂，可溶于冷氢氧化钠溶液。2 2酸性酸性 脂肪酸含有羧基，可与碱结合成盐。脂肪酸含有羧基，可与碱结合成盐。3 3羟基的置换反应羟基的置换反应 羧基中的羟基可被卤素、烃氧基、酰氧基、氨基羧基中的羟基可被卤素、烃氧基、酰氧基、氨基等置换，分别生成酰卤、酯、酸酐和酰胺。等置换，分别生成酰卤、酯、酸酐和酰胺。4 4酸败酸败 脂肪酸在空气中置久，会产生难闻的气味，这种脂肪酸在空气中置久，会产生难闻的气味，这种变化称为酸败。变化称为酸败。5 5显色反应显色反应显色反应显色反应（1）碘酸钾）碘酸钾-碘化钾试验碘化钾试验（2）溴的四氯化碳试验）溴的四氯化碳试验（3）高锰酸钾试验）高锰酸钾试验（4）溴）溴-麝香草酚蓝试验麝香草酚蓝试验 样品溶液加溴样品溶液加溴-麝香草酚蓝试液，呈蓝色。麝香草酚蓝试液，呈蓝色。四、脂肪酸的提取与分离四、脂肪酸的提取与分离四、脂肪酸的提取与分离四、脂肪酸的提取与分离1 1提取提取（1 1）有机溶剂提取法）有机溶剂提取法 常用乙醚、石油醚及环己烷等亲脂性有机溶剂进常用乙醚、石油醚及环己烷等亲脂性有机溶剂进行提取，回收溶剂即得粗脂肪酸。行提取，回收溶剂即得粗脂肪酸。（2 2）超临界流体萃取法）超临界流体萃取法 通常在通常在0.1Kpa0.1Kpa5Kpa5Kpa，温度，温度30304545下提取总脂下提取总脂肪酸。肪酸。2 2分离分离（1 1）蒸馏法）蒸馏法 减压分馏和分子蒸馏两类方法。减压分馏和分子蒸馏两类方法。（2 2）丙酮冷冻法）丙酮冷冻法 原理：碳链长度及饱和程度不同的脂肪酸，在过原理：碳链长度及饱和程度不同的脂肪酸，在过冷的丙酮溶剂中溶解度不同，借此达到分离的目冷的丙酮溶剂中溶解度不同，借此达到分离的目的。的。操作：将脂肪酸混合物加到预先冷至操作：将脂肪酸混合物加到预先冷至-25-25以下的以下的丙酮中，搅拌，滤过，除去结晶，浓缩后，即得丙酮中，搅拌，滤过，除去结晶，浓缩后，即得含有较高浓度的含有较高浓度的EPAEPA及及DHADHA。（3 3）脂肪酸盐结晶法）脂肪酸盐结晶法 将脂肪酸混合物经氢氧化钠醇溶液皂化为脂肪酸将脂肪酸混合物经氢氧化钠醇溶液皂化为脂肪酸盐，冷却，使饱和及单不饱和脂肪酸盐析出，滤盐，冷却，使饱和及单不饱和脂肪酸盐析出，滤液酸化提取，得高浓度的多不饱和脂肪酸。液酸化提取，得高浓度的多不饱和脂肪酸。此法适用于工业生产。此法适用于工业生产。（4 4）尿素结晶法）尿素结晶法 原理：尿素能与脂肪族化合物形成加合物，形成原理：尿素能与脂肪族化合物形成加合物，形成加合物的能力与脂肪酸的饱和程度有关，不饱和加合物的能力与脂肪酸的饱和程度有关，不饱和程度愈低，愈易形成加合物。程度愈低，愈易形成加合物。操作：将脂肪酸混合物与尿素的醇溶液混合，保操作：将脂肪酸混合物与尿素的醇溶液混合，保温搅拌，冷却，滤过，得较高浓度的温搅拌，冷却，滤过，得较高浓度的EPAEPA和和DHADHA。第二节第二节第二节第二节 有机含硫化合物有机含硫化合物有机含硫化合物有机含硫化合物1.1.芥子苷类芥子苷类-白芥子与黑芥子白芥子与黑芥子 芥子苷通式芥子苷通式白芥子苷白芥子苷sinalbin 黑芥子苷黑芥子苷sinigrin 芥子苷类化合物的特点：芥子苷类化合物的特点：1.1.在植物体内通常以钾盐的形式存在，但有时也以在植物体内通常以钾盐的形式存在，但有时也以钠盐、铵盐的形式存在。钠盐、铵盐的形式存在。2.2.水解水解 在中性条件下，以芥子苷酶进行水解，先生成葡在中性条件下，以芥子苷酶进行水解，先生成葡萄糖和硫代羟肟酸，后者经转位最后产生异硫氰萄糖和硫代羟肟酸，后者经转位最后产生异硫氰酸酯。酸酯。2.2.大蒜新素（大蒜新素（allitridiallitridi）-大蒜大蒜 性质：淡黄色油状液体，相对密度性质：淡黄色油状液体，相对密度1.0851.085，折光率，折光率1.5801.580（2020）。）。药理作用：大蒜新素具有抗病原微生物、抗肿瘤、药理作用：大蒜新素具有抗病原微生物、抗肿瘤、降血脂、清除自由基及保护肝、胃等作用。降血脂、清除自由基及保护肝、胃等作用。CH2=CHCH2SSSCH2CH=CH2 大蒜新素（大蒜新素（allitridi）蔊菜（蔊菜（Rorippa montana）的全草或花）的全草或花 水煮沸，滤过水煮沸，滤过滤滤 液液减压浓缩减压浓缩浓缩液浓缩液加入乙醇至乙醇含量为加入乙醇至乙醇含量为75%，过滤，过滤沉沉 淀淀滤滤 液液减压浓缩，减压浓缩，10下放置，滤过下放置，滤过 沉沉 淀淀滤滤 液液3.蔊菜素蔊菜素Rorifon 沉沉 淀淀40%NaOH溶液处理，水洗至中性溶液处理，水洗至中性 粗粗 品品乙醇重结晶，硅胶柱色谱，乙醇重结晶，硅胶柱色谱，EtOAc洗脱洗脱乙酸乙酯洗脱液乙酸乙酯洗脱液浓缩，加浓缩，加Et2O至混浊，滤过至混浊，滤过 蔊菜蔊菜素素祛疾作用较强，镇咳作用次之，平喘作用微弱。祛疾作用较强，镇咳作用次之，平喘作用微弱。用于慢性支气管炎，可使痰量减少，咳喘减轻。用于慢性支气管炎，可使痰量减少，咳喘减轻。此结晶不溶于酸或碱溶液，此结晶不溶于酸或碱溶液，遇碘化铋钾呈橙红色。遇碘化铋钾呈橙红色。第三节第三节第三节第三节 氨基酸、环肽、蛋白质和酶氨基酸、环肽、蛋白质和酶氨基酸、环肽、蛋白质和酶氨基酸、环肽、蛋白质和酶使君子氨酸（使君子氨酸（quisqualic acid）海人草氨酸（海人草氨酸（kainic acid）使君子使君子（Quisqualis indica）鹧鸪茶鹧鸪茶（Caloglossa leprieuii）一、氨基酸一、氨基酸南瓜子氨酸（南瓜子氨酸（cucurbitine）三七素（三七素（dencichine）田七氨酸田七氨酸天门冬素（天门冬素（asparagine）（二）氨基酸的结构与分类（二）氨基酸的结构与分类（二）氨基酸的结构与分类（二）氨基酸的结构与分类中性、酸性和碱性氨基酸中性、酸性和碱性氨基酸氨基和羧基氨基和羧基相对位置相对位置 氨基和羧基氨基和羧基的数目的数目-氨基酸、氨基酸、-氨基酸、氨基酸、-氨基酸等氨基酸等（三）氨基酸的理化性质（三）氨基酸的理化性质（三）氨基酸的理化性质（三）氨基酸的理化性质性状性状无色结晶，具较高熔点无色结晶，具较高熔点 溶解性溶解性易溶于水，难溶于有机溶剂易溶于水，难溶于有机溶剂成盐成盐与强酸、强碱均能成盐；分子内氨基和羧基可相互作用生成盐与强酸、强碱均能成盐；分子内氨基和羧基可相互作用生成盐等电点等电点 当将氨基酸溶液调至某一特定当将氨基酸溶液调至某一特定pH值时，氨基酸分子中值时，氨基酸分子中羧基电离和氨基电离的趋势恰好相等，这时溶液的羧基电离和氨基电离的趋势恰好相等，这时溶液的pH值称值称为该氨基酸的等电点。为该氨基酸的等电点。不同的氨基酸，具有不同的等电点。不同的氨基酸，具有不同的等电点。在氨基酸的等电点时，其溶解度最小，可以沉淀析出。在氨基酸的等电点时，其溶解度最小，可以沉淀析出。酸性氨基酸酸性氨基酸 2.83.2 中性氨基酸中性氨基酸 4.86.3 碱性氨基酸碱性氨基酸 7.610.8茚三酮反应茚三酮反应与亚硝酸反应与亚硝酸反应 除亚氨基酸（脯氨酸、羟脯氨酸）外，除亚氨基酸（脯氨酸、羟脯氨酸）外，-氨基酸中的氨氨基酸中的氨基能与亚硝酸作用，放出氮气，生成基能与亚硝酸作用，放出氮气，生成-羟基酸。羟基酸。（四）氨基酸的检识（四）氨基酸的检识（四）氨基酸的检识（四）氨基酸的检识1理化检识理化检识（1）Ninhydrin反应反应 取供试液取供试液1ml，加，加0.2%茚三酮溶液茚三酮溶液23滴，滴，摇匀，在沸水浴中加热摇匀，在沸水浴中加热5分钟，冷却后，如显分钟，冷却后，如显蓝色或蓝紫色，表明含有氨基酸、多肽或蛋蓝色或蓝紫色，表明含有氨基酸、多肽或蛋白质。白质。供试液制备：取中药粗粉供试液制备：取中药粗粉12g，加水，加水1020ml温浸温浸 1小时，滤小时，滤 过过，得滤液。，得滤液。（2）吲哚醌试剂（）吲哚醌试剂（Isatin反应）反应）(3)1,2茶醌茶醌4硫酸试剂（硫酸试剂（Folin试剂）试剂）2 2色谱检识色谱检识色谱检识色谱检识（1 1）纸色谱）纸色谱 展开剂：展开剂：正丁醇正丁醇-醋酸醋酸-乙醇乙醇-水（水（4:1:1:24:1:1:2）甲醇甲醇-水水-吡啶（吡啶（20:20:420:20:4）水饱和的酚水饱和的酚（2 2）薄层色谱）薄层色谱展开剂：展开剂：正丁醇正丁醇-醋酸醋酸-水（水（4:1:54:1:5，上层），上层）氯仿氯仿-甲醇甲醇-17%-17%氨水（氨水（2:2:12:2:1）96%96%乙醇乙醇-26%-26%氨水（氨水（77:2377:23）酚酚-水（水（3:13:1）（五）氨基酸的提取分离（五）氨基酸的提取分离（五）氨基酸的提取分离（五）氨基酸的提取分离（1）水提法）水提法（2）稀乙醇提取法）稀乙醇提取法(1(1）溶剂法）溶剂法 原理：根据各种氨基酸在水和乙醇等溶剂中溶解原理：根据各种氨基酸在水和乙醇等溶剂中溶解度的不同，将氨基酸彼此分离。度的不同，将氨基酸彼此分离。胱氨酸和酪氨酸在冷水中极难溶解，而其它氨胱氨酸和酪氨酸在冷水中极难溶解，而其它氨基酸易溶，故可将这两种氨基酸与其他氨基酸分基酸易溶，故可将这两种氨基酸与其他氨基酸分离；离；酪氨酸在热水中溶解度大，而胱氨酸在冷、热酪氨酸在热水中溶解度大，而胱氨酸在冷、热水中溶解度均小，借此分离。水中溶解度均小，借此分离。氨基酸的分离氨基酸的分离氨基酸的分离氨基酸的分离（2）成盐法）成盐法（3）电泳法）电泳法 将总氨基酸水溶液调至适当将总氨基酸水溶液调至适当pH，于电泳槽或纸片上，于电泳槽或纸片上，在一定电场中，中性氨基酸留在原点，带净正电荷的碱性在一定电场中，中性氨基酸留在原点，带净正电荷的碱性氨基酸移向阴极，带净负电荷的酸性氨基酸则移向阳极，氨基酸移向阴极，带净负电荷的酸性氨基酸则移向阳极，此种现象称为电泳。此种现象称为电泳。氨基酸的电泳移速，与氨基酸本身所带电荷、缓冲液离氨基酸的电泳移速，与氨基酸本身所带电荷、缓冲液离子性质、子性质、pH值、粘度、温度等有关。溶液的值、粘度、温度等有关。溶液的pH越接近等越接近等电点，氨基酸净电荷越低，离子移动速度越慢；反之，则电点，氨基酸净电荷越低，离子移动速度越慢；反之，则加快。加快。控制电泳液控制电泳液pH，可使氨基酸完全分离。，可使氨基酸完全分离。电压：电压：030kV；分离柱为毛细管空管，内径分离柱为毛细管空管，内径100m；紫外检测器，检测波长紫外检测器，检测波长280nm；缓冲液：缓冲液：5mM NaH2PO4缓冲液（缓冲液（pH3.0）；）；样品：色氨酸样品：色氨酸(0.50g/L)、酪氨酸、酪氨酸(饱和饱和)的混合稀盐酸溶液。的混合稀盐酸溶液。高高效效毛毛细细管管电电泳泳仪仪 总氨基酸水液总氨基酸水液pH5.5时时阳离子交换树脂交换氨基酸强度阳离子交换树脂交换氨基酸强度 碱性碱性中性中性酸性酸性阴离子交换树脂交换氨基酸强度阴离子交换树脂交换氨基酸强度 酸性酸性中性中性碱性碱性（4）离子交换树脂法离子交换树脂法 二、环肽（二、环肽（二、环肽（二、环肽（cyclopeptidescyclopeptides）1 1定义定义 指由酰胺键或肽键形成的一类环状肽类化合物。指由酰胺键或肽键形成的一类环状肽类化合物。主要来源于植物、海洋生物和微生物等。主要来源于植物、海洋生物和微生物等。2.生物活性生物活性 抗肿瘤、抗病毒和免疫调节作用：抗肿瘤、抗病毒和免疫调节作用：didem B-海洋被囊动物海洋被囊动物(Trididemnum solidum)安眠作用：安眠作用：Zizyphine-酸枣仁（酸枣仁（Ziziphus jujuba）二、分二、分二、分二、分 类类类类IIIIIIA-B=-CHH-，CH（CO）CH2-，-COCH2R1，R2=芳基，烷基芳基，烷基 R3=氨基酸残基部分氨基酸残基部分3环肽的理化性质环肽的理化性质（1）性状）性状 一般易于结晶，熔点多高于一般易于结晶，熔点多高于260，有旋光性。，有旋光性。（2）溶解性）溶解性 易溶于水，可溶于甲醇、氯仿等有机溶剂。易溶于水，可溶于甲醇、氯仿等有机溶剂。4环肽的提取分离环肽的提取分离（1）酸碱法）酸碱法 采用经典的生物碱提取法，即酸提取液经中和、采用经典的生物碱提取法，即酸提取液经中和、浓缩、碱化后，用硅胶柱色谱分离，不同比例氯仿浓缩、碱化后，用硅胶柱色谱分离，不同比例氯仿-甲甲醇（醇（99:170:30）洗脱。）洗脱。适用范围：适用范围：型型型环肽分离。型环肽分离。（2 2）溶剂法）溶剂法 甲醇或乙醇提取，提取液浓缩，经溶剂（多甲醇或乙醇提取，提取液浓缩，经溶剂（多用醋酸乙酯或氯仿）分离，通过硅胶柱色谱、高用醋酸乙酯或氯仿）分离，通过硅胶柱色谱、高效液相色谱、制备薄层色谱以及制备衍生物等方效液相色谱、制备薄层色谱以及制备衍生物等方法进一步分离。法进一步分离。此法适合于此法适合于型和型和型环肽分离。型环肽分离。5 5环肽的检识环肽的检识 -薄层色谱薄层色谱吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶G G或硅胶或硅胶H H展开剂：氯仿展开剂：氯仿-甲醇（甲醇（9:19:1）显色剂：显色剂：0.2%0.2%茚三酮溶液茚三酮溶液茜草中环肽的提取与分离茜草中环肽的提取与分离三、蛋白质和酶三、蛋白质和酶三、蛋白质和酶三、蛋白质和酶一、概述一、概述 （一）定义（一）定义 蛋白质为氨基酸经肽键相连聚合而成得高分子化合物（分蛋白质为氨基酸经肽键相连聚合而成得高分子化合物（分子量几万几百万），酶为具高度特异催化性的蛋白质。子量几万几百万），酶为具高度特异催化性的蛋白质。蛋白质一般作为杂质除去（中药注射剂中有蛋白质可引蛋白质一般作为杂质除去（中药注射剂中有蛋白质可引起异性蛋白过敏）。但有些蛋白质具一定生理活性或药理作起异性蛋白过敏）。但有些蛋白质具一定生理活性或药理作用。用。天花粉蛋白天花粉蛋白 中期引产中期引产 菠萝蛋白酶菠萝蛋白酶 抗水肿，抗炎抗水肿，抗炎 雷丸素（蛋白酶）雷丸素（蛋白酶）杀绦及钩虫杀绦及钩虫 超氧化歧化酶（超氧化歧化酶（SOD）延缓机体衰老延缓机体衰老 蛋白质和酶的理化性质蛋白质和酶的理化性质蛋白质和酶的理化性质蛋白质和酶的理化性质（1 1）溶解性）溶解性 多数蛋白质和酶溶于水，不溶于有机溶剂。蛋白质多数蛋白质和酶溶于水，不溶于有机溶剂。蛋白质的溶解度受的溶解度受pHpH影响。影响。（2 2）分子量）分子量 蛋白质和酶的蛋白质和酶的 溶液具有亲水胶体特性，分子量多溶液具有亲水胶体特性，分子量多在一万以上，高的可达一千万左右，为高分子物质，在一万以上，高的可达一千万左右，为高分子物质，不能透过半透膜，此性质可用于提纯蛋白质。不能透过半透膜，此性质可用于提纯蛋白质。（3 3）两性和等电点）两性和等电点 蛋白质分子两端有氨基和羧基，同氨基酸一样具有蛋白质分子两端有氨基和羧基，同氨基酸一样具有两性和等电点。两性和等电点。（4 4）盐析和变性）盐析和变性 蛋白质和酶在水溶液中可被高浓度的硫酸铵或氯蛋白质和酶在水溶液中可被高浓度的硫酸铵或氯化钠溶液盐析而沉淀，此性质是可逆的。化钠溶液盐析而沉淀，此性质是可逆的。当蛋白质和酶被加热，或与酸、碱等作用时，则当蛋白质和酶被加热，或与酸、碱等作用时，则变性而失去活性，此反应不可逆。变性而失去活性，此反应不可逆。（5 5）水解）水解 蛋白质在酸、碱、酶等作用下可逐步水解，最终蛋白质在酸、碱、酶等作用下可逐步水解，最终产物为各种产物为各种-氨基酸。氨基酸。（6 6）酶解）酶解 酶具有很高的催化性及专属性。如麦芽糖酶酶具有很高的催化性及专属性。如麦芽糖酶（maltasemaltase）只能水解）只能水解-苷键，而对苷键，而对-苷键无作苷键无作用。用。（7 7）沉淀反应）沉淀反应与酸作用：蛋白质与鞣质、三氯醋酸、苦味酸、与酸作用：蛋白质与鞣质、三氯醋酸、苦味酸、硅钨酸等反应产生不溶性物质。硅钨酸等反应产生不溶性物质。与金属盐作用：蛋白质与多种金属盐如氯化高汞、与金属盐作用：蛋白质与多种金属盐如氯化高汞、硫酸铜等反应产生沉淀。硫酸铜等反应产生沉淀。（8 8）颜色反应）颜色反应BiuretBiuret反应：蛋白质在碱性溶液中与稀硫酸铜溶反应：蛋白质在碱性溶液中与稀硫酸铜溶液作用，产生红色或紫红色。液作用，产生红色或紫红色。DansylDansyl反应：分子中末端氨基在碳酸氢钠溶液中反应：分子中末端氨基在碳酸氢钠溶液中与与1-1-二甲氨基萘二甲氨基萘5-5-磺酰氯反应生成相应的磺酰胺磺酰氯反应生成相应的磺酰胺衍生物，显黄色荧光衍生物，显黄色荧光3.3.蛋白质与酶的提取与分离蛋白质与酶的提取与分离蛋白质与酶的提取与分离蛋白质与酶的提取与分离一般采用水或一般采用水或5%8%的氯化钠水溶液提取蛋白质的氯化钠水溶液提取蛋白质 1分级沉淀法分离分级沉淀法分离（1）有机溶剂分级沉淀法）有机溶剂分级沉淀法 溶剂：溶剂：EtOH,MeOH（2）无机盐分级沉淀法）无机盐分级沉淀法（3）pH分级沉淀法分级沉淀法利用蛋白质在等电点时溶解度最小的原理改利用蛋白质在等电点时溶解度最小的原理改变变pH值进行沉淀。值进行沉淀。透析法透析法 除去粗蛋白中的盐类及其它小分子杂质除去粗蛋白中的盐类及其它小分子杂质超速离心法超速离心法 不同分子量的蛋白质经超速离心，其沉降速不同分子量的蛋白质经超速离心，其沉降速度有显著差异，借以分离不同分子量的蛋白质混度有显著差异，借以分离不同分子量的蛋白质混合物。合物。色谱法色谱法 常用的色谱法有离子交换色谱法、葡聚糖凝胶色常用的色谱法有离子交换色谱法、葡聚糖凝胶色谱法等。谱法等。加热沉淀实验加热沉淀实验 Biuret反应反应 Solway purple反应反应 3.3.蛋白质与酶的检识蛋白质与酶的检识蛋白质与酶的检识蛋白质与酶的检识薄层吸附剂：硅胶薄层吸附剂：硅胶G展开剂：氯仿展开剂：氯仿-甲醇（或丙酮）（甲醇（或丙酮）（9:1）显色剂：显色剂：2%茚三酮溶液茚三酮溶液天花粉蛋白的提取天花粉蛋白的提取天花粉蛋白的提取天花粉蛋白的提取第十三章第十三章第十三章第十三章中药复方中药复方药效物质基础研究药效物质基础研究复方复方复方复方原意：以两个或两个以上的单方组成的方剂原意：以两个或两个以上的单方组成的方剂 金人成无己的金人成无己的伤寒明理论伤寒明理论序序现代人所说复方：由两味或两味以上的中药现代人所说复方：由两味或两味以上的中药组成。组成。六味地黄丸、麻黄汤、四君子汤六味地黄丸、麻黄汤、四君子汤第一节第一节第一节第一节 研究意义及必要性研究意义及必要性研究意义及必要性研究意义及必要性中药复方物质基础研究中药复方物质基础研究1 1、是中药复方研究的关键问题、是中药复方研究的关键问题2 2、有利于阐释中医药理论、有利于阐释中医药理论3 3、可搭建中西医结合的纽带和桥梁、可搭建中西医结合的纽带和桥梁4 4、中药现代化的必经途径、中药现代化的必经途径5 5、促进中药制剂等相关学科的发展、促进中药制剂等相关学科的发展第二节第二节第二节第二节 研究进展研究进展研究进展研究进展一、中药复方配伍理论的物质基础研究一、中药复方配伍理论的物质基础研究u四逆汤四逆汤伤寒论伤寒论中回阳救逆代表方中回阳救逆代表方u生脉散生脉散u半夏泻心汤配伍半夏泻心汤配伍u四物汤四物汤u白头翁汤白头翁汤二、中药复方化学成分或有效部位的分二、中药复方化学成分或有效部位的分离鉴定离鉴定u补阳还五汤补阳还五汤 （临床用于治疗缺血性中风后遗症）（临床用于治疗缺血性中风后遗症）活性成分：异黄酮类和紫檀烷类活性成分：异黄酮类和紫檀烷类u银翘散银翘散 抗病毒效部位群：黄酮类化合物抗病毒效部位群：黄酮类化合物u有机成分和无机成分的配合物有机成分和无机成分的配合物三、中药复方提取分离新技术的应用三、中药复方提取分离新技术的应用u超声波提取法超声波提取法u超临界流体萃取法超临界流体萃取法u大孔吸附树脂大孔吸附树脂u超滤技术超滤技术u半仿生提取法半仿生提取法 四、中药复方定性、定量研究四、中药复方定性、定量研究 （一）依据化学反应定性（一）依据化学反应定性 （二）薄层色谱法定性（二）薄层色谱法定性 （三）指纹图谱检查（三）指纹图谱检查 （四）中药复方定量分析（四）中药复方定量分析第三节第三节第三节第三节中药复方药效物质基础中药复方药效物质基础中药复方药效物质基础中药复方药效物质基础研究思路与方法探讨研究思路与方法探讨研究思路与方法探讨研究思路与方法探讨一、指导思想一、指导思想 既要认识中药复方完整性和复杂性，又要明确本既要认识中药复方完整性和复杂性，又要明确本领域研究必须引进现代科学技术和方法，才能促领域研究必须引进现代科学技术和方法，才能促进学术的进步，促进中医药的发展。进学术的进步，促进中医药的发展。二、坚持化学成分和药理研究相结合的原则二、坚持化学成分和药理研究相结合的原则三、中药复方血清靶成分研究三、中药复方血清靶成分研究四、中药复方中化学物种形态和生物活性的研究四、中药复方中化学物种形态和生物活性的研究五、其他新思路五、其他新思路 1.1.采用化学剂量学的方法进行研究采用化学剂量学的方法进行研究 2.2.组合化学研究组合化学研究 3.3.体内代谢化学成分研究体内代谢化学成分研究