血细胞计数培训课件最终

推 片 倾 斜 45 1， 推 成 血 膜 长 度 2535mm， 宽 度 18 20mm， 血 膜 四 周 留 有 空 隙区 ， 血 膜 终 尾 离 玻 片 终 端 至 少 10mm， 血 膜 均匀 ， 薄 如 蝉 翼 ， 尾 端 形 如 弧 状 ， 迅 速 扇 （ 摇 ）干 ， 血 膜 具 有 头 、 体 、 尾 不 同 厚 薄 区 域 。 此外 ， 涂 片 时 ， 还 要 考 虑 患 者 的 血 液 状 态 ， 如贫 血 程 度 、 血 液 粘 稠 度 、 WBC或 有 核 细 胞 多少 等 因 素 ， 调 整 推 片 技 巧 。 血 膜 至 玻 片 边 缘约 5mm血 膜 至 玻 片 一 端 约为 总 长 1/3血 涂 片 头 部 ， 涂 片 厚血 涂 片 体 部 的检 查 区 域血 涂 片 尾 部 ， 涂 片 太 薄 n 将 血 液 充 分 混 匀 ， 尽 早 推 成 血 片 并 染 色 。n 先 用 低 倍 或 高 倍 镜 观 察 。 了 解 血 片 染 色 和 细 胞 分 布 情 况 、 有 无血 小 板 或 红 细 胞 聚 集 （ 成 串 、 成 堆 ） ， 尾 部 有 无 大 型 、 成 堆 异常 细 胞 等 ； 继 续 用 油 镜 在 涂 片 厚 薄 适 中 处 浏 览 血 片 ， 仔 细 观 察红 细 胞 、 白 细 胞 及 血 小 板 的 形 态 ， 并 估 计 其 数 量 。 如 果 观 察 结果 与 仪 器 报 告 相 符 ， 不 需 进 行 任 何 补 充 试 验 ， 即 可 按 仪 器 测 定的 结 果 发 出 报 告 。n 如 为 贫 血 或 其 他 血 液 病 患 者 ， 其 红 细 胞 数 量 及 相 关 的 指 标 （ 如MCV、 MCH、 MCHC） 红 细 胞 体 积 分 布 宽 度 （ RDW） 、 直 方图 或 散 点 图 出 现 异 常 ， 则 着 重 观 察 红 细 胞 的 大 小 、 形 态 、 内 涵物 、 着 色 性 、 大 小 一 致 性 以 及 有 无 有 核 红 细 胞 等 。 如 有 异 常 ，应 加 以 描 述 并 报 告 。n 正 常 情 况 下 ， 在 血 片 厚 薄 适 中 区 域 （ 每 个 红 细 胞 彼 此 相 互 接 触但 双 不 重 叠 ） ， 每 个 油 镜 视 野 ， 约 有 血 小 板 8 15个 ； 或 每10 30 个 红 细 胞 见 到 一 个 血 小 板 。 缩 写 百 分 比 绝 对 值 / 109 L 中 性 粒 细 胞 NETU 50 70 % 2.0 7.0 109 淋 巴 细 胞 LYM 20 40 % 0.8 4.0 109 单 核 细 胞 MON 3 8% 0.12 0.8 109 嗜 酸 性 粒 细 胞 EO 0.5 5% 0.02 0.5 109嗜 碱 性 粒 细 胞 EASO 0 1% 0 1 109 分 叶 核n 细 胞 大 小 为 10 15m。n 细 胞 核 与 细 胞 浆 比 率 为 1:3。n 细 胞 呈 圆 形 或 卵 圆 形 。n 细 胞 核 分 叶 ， 叶 间 有 丝 状 连 接 ， 分 为 2 5叶 。n 核 染 色 质 聚 集 。n 无 核 仁 。n 细 胞 浆 染 成 淡 粉 红 色 ， 含 大 量 特 异 性 颗 粒 。杆 状 核n 细 胞 大 小 为 10 18m。 n 细 胞 核 与 细 胞 浆 比 率 为 1:1.5 1:2。n 细 胞 呈 圆 形 或 卵 圆 形 。n 细 胞 核 呈 S形 ， C形 ,U形 或 分 叶 形 ， 可 见 峡 状 染 色 质 。n 核 染 色 质 粗 颗 粒 状 聚 集 。n 无 核 仁 。n 细 胞 浆 丰 富 ， 染 成 粉 红 色 ； 含 大 量 特 异 性 颗 粒 ， 罕 见 嗜 天 青 颗 粒 。 “成 熟 的 粒 系 白 细 胞 ， 具 有 弯 曲 、 带 状 的核 形 ， 核 叶 间 没 有 线 样 丝 （ threadlike filament） 形 成 ， 称 为 杆 状 核 ； 如 果 连 接 核 叶之 间 的 桥 （ bridge） 内 有 染 色 质 ， 这 种 桥 就 不算 细 丝 ， 也 是 杆 状 核 ” ； “ 如 果 细 胞 核 扭 曲（ twist） 、 缠 绕 ， 造 成 一 部 分 核 压 在 另 一 部 分核 之 上 ， 以 至 整 个 核 的 外 形 看 不 清 楚 ， 应 判为 分 叶 核 ” 细 胞 大 小 为 10 15m。 细 胞 核 与 细 胞 浆 比 率 为1:2 1:3。 细 胞 呈 圆 形 或 卵 圆 形 。 细 胞 核 分 叶 状 ， 常 被 颗粒 覆 盖 。 核 染 色 质 聚 集 。 无 核 仁 。 细 胞 浆 含 粗 大 、 致 密 、深 紫 色 或 黑 色 颗 粒 。 临 床 表 现 白 细 胞 特 点 白 细 胞 绝 对 值（ 109/L） 细 胞 百 分 率 （ ）急 性 炎 症 粒 细 胞 增 多 9.0 80细 菌 感 染 左 移 *（ 杆 状 核 ） 0.9 6慢 性 炎 症 单 核 细 胞 增 多 0.8 10寄 生 虫 感 染 ， 过 敏 反 应 嗜 酸 性 粒 细 胞 增 多 0.5 7病 毒 感 染 淋 巴 细 胞 增 多 3.5 50传 染 性 单 核 细 胞 增 多 症 ， 巨 细胞 病 毒 感 染 ， 传 染 性 肝 炎 异 型 淋 巴 细 胞 0.7再 障 ， 化 疗 粒 细 胞 减 少 1.5 10HIV感 染 淋 巴 细 胞 减 少 1.0 2严 重 贫 血 ， 骨 髓 病 性 贫 血 有 核 红 细 胞 0.02 2 正 常 红 细 胞n直 径 7.27.6mm， 厚 度 2mm圆 盘 状 ， 两 面 凹 陷 ， 中 央 较 薄 ，着 色 较 浅 ， 在 涂 片 中 形 态 基 本 一 致 。n正 常 RBC在 体 内 能 经 受 通 过 微 血 管 的 严 重 变 形 而 不 受 损 害 。在 高 度 粘 稠 血 液 中 的 RBC变 成 椭 圆 形 ， 红 细 胞 膜 围 绕 着 所 含Hb旋 转 ， 像 坦 克 的 踏 板 （ Tread） 。 脾 脏 可 筛 选 缺 乏 弹 性 的红 细 胞 、 红 细 胞 异 常 变 形 或 丧 失 弹 性 的 红 细 胞 ， 并 加 强 对 这些 红 细 胞 的 清 除 。 n参 考 值 ： 成 年 男 性 （ 45.5） 10 12/L； 成 年 女 性（3.55.0）1012/L RBC/Hb、 网 织 RBC、 MCV、 MCH、 MCHC及 RBC体 积 分 布 宽 度 （ RDW）是 判 定 贫 血 类 型 重 要 依 据 ： n(1)Hb/RBC比 值 ： 正 常 人 ： Hb/RBC比 值 为 3gHb/L=100万 RBC/ L即 3:1。 AA、溶 血 性 贫 血 及 继 发 性 贫 血 等 属 此 类 。 3:1者 即 为 大 细 胞 高 色 素 性 贫 血 ,5%。 其 网 织 RBC内 嗜 碱 性 网 织 增 多 ， 代 偿 性 功 能 减 低 者 ， 低 于 正常 水 平 。 多 见 于 AA， 但 有 不 典 型 AA（ 1/4） 患 者 可 有 网 织 RBC增 高 。 网 织 RBC计数 1000个 RBC中 有 多 少 网 织 RBC， 以 其 %数 表 示 ， 是 一 个 比 值 数 ， 不 是 绝 对 值 。精 确 应 计 算 绝 对 值 或 用 流 式 细 胞 仪 计 数 更 为 确 切 。 n(3)MCV、 MCH、 MCHC反 映 RBC病 理 变 化 ： 可 将 贫 血 分 为 大 细 胞 性 贫 血 、 正 常细 胞 性 贫 血 、 小 细 胞 低 色 素 性 贫 血 及 单 纯 小 细 胞 性 贫 血 （ 即 小 细 胞 性 正 常 色 素 性贫 血 ） ， 其 诊 断 标 准 及 其 病 因 。 (1)观 察 RBC形 态 一 般 以 外 周 血 涂 片 较 为 可 靠 。 (2)RBC形 态 与 排 列 （ 如 重 叠 、 缗 钱 状 ） 与 涂 片 技 术 、 涂 片 部 位 及 厚 薄 有 很 大 关系 。 这 点 在 镜 检 时 应 予 注 意 。 (3)即 是 合 格 涂 片 ， RBC形 态 依 然 与 涂 片 部 位 及 厚 薄 等 多 种 因 素 有 关 ： 如 取 涂 片 中 心 区 域 ， RBC中 心 淡 染 ， 多 1/3细 胞 面 积 大 小 ; 取 自 涂 片 薄 处 或 尾 部 ， RBC形 态 误 给 人 以 “ 球 形 ” ， 失 去 双 凹 盘 形 ， 中 心 淡 染消 失 ， 所 谓 类 球 形 改 变 ； 取 厚 片 或 制 片 干 燥 过 慢 ， RBC未 摊 开 ， 收 缩 变 形 ， 甚 至 出 现 人 工 中 心 染 色 过 淡等 ； 取 厚 片 RBC则 重 叠 堆 积 ， 呈 假 “ 缗 钱 状 ” ， 不 便 查 清 形 态 ； 玻 片 不 清 洁 ， 油 脂 过 多 或 骨 髓 脂 肪 过 多 ， 制 片 干 燥 不 快 ， RBC则 会 形 成 人 工 的中 心 淡 染 区 或 空 白 区 。 在 显 微 镜 下 观 察 悬 浮 的 微 粒 ， 或 在 无 风 情 形观 察 空 气 中 的 烟 粒 、 尘 埃 时 都 会 看 到 这 种 运 动 。这 种 运 动 会 随 着 温 度 的 升 高 而 越 激 烈 。 它 是 1827年 植 物 学 家 R-布 朗 首 先 发 现 的 。 作布 朗 运 动 的 粒 子 非 常 微 小 ， 直 径 约 10-7 10-5米 ， 在 周 围 液 体 或 气 体 分 子 的 碰 撞 下 ， 产 生 一 种 涨 落不 定 的 净 作 用 力 ， 导 致 微 粒 的 布 朗 运 动 。 计 数 池 共 有 9个大 方 格 ； 每 个 大 方 格内 分 为 16中 方 格 ， 每一 中 方 格 又 分 为 25小方 格 。 细胞计数板使用方法 实 验 原 理 ： 当 待 测 细 胞 悬 液 中 细 胞 均 匀 分 布 时 ， 通 过 测 定一 定 体 积 悬 液 中 的 细 胞 的 数 目 ， 即 可 换 算 出 每 毫 升 细 胞 悬 液中 细 胞 的 细 胞 数 目 。 具 体 操 作 ：1. 将 计 数 板 及 盖 片 擦 拭 干 净 ， 并 将 盖 片 盖 在 计 数 板 。2. 将 细 胞 悬 液 吸 出 少 许 ， 滴 加 在 盖 片 边 缘 ， 使 悬 液 充 满 盖 片和 计 数 板 之 间 ， 静 置 3min， 注 意 盖 片 下 不 要 有 气 泡 ， 也 不 能让 悬 液 流 入 旁 边 槽 中 。 3. 计 算 板 四 大 格 细 胞 总 数 ， 压 线 细 胞 计 数 原 则 （ 计 上 不 计 下 ，计 左 不 计 右 ） 。 2ml红 细 胞 稀 释 液 中 加 血 10 注 意 ： 1.镜 下 偶 见 有 两 个 以 上 细 胞 组 成 的 细 胞 团 ， 应 按 单 个 细 胞 计 算 ，若 细 胞 团 10%以 上 ， 说 明 分 散 不 好 ， 需 重 新 制 备 细 胞 悬 液 ； 2.大 方 格 间 的 细 胞 计 数 结 果 相 差 不 应 超 过 10%， 否 则 应 重 新 充 池 白 细 胞 稀 释 液 0.38ml中 加 血 20 注 意 ： 1.镜 下 偶 见 有 两 个 以 上 细 胞 组 成 的 细 胞 团 ， 应 按 单 个 细 胞 计 算 ， 若细 胞 团 10%以 上 ， 说 明 分 散 不 好 ， 需 重 新 制 备 细 胞 悬 液 ； 2.大 方 格 间 的 细 胞 计 数 结 果 相 差 不 应 超 过 10%， 否 则 应 重 新 充 池