新西兰白兔制作椎间盘退变动物模型

新西兰白兔制作椎间盘退变动物模型模型建立方法：健康成年新西兰大白兔20只,雌雄各10只，平均年龄3月，平均体重为1.5kg。在标准条件下适应性饲养 3 周。麻醉：实验动物麻醉用氯氨酮，氯丙嗪各 1 支混合，肌肉注射动物。手术方法：20只动物全麻后取左侧卧位,经右侧腹膜外入路，沿右腹直肌外缘做15cm长切 口，顿性剥离腹膜至腰椎横突前外侧，暴露L5、6的横突，因兔的横突较长，遮挡住其相对 应的椎间盘使其不可见。在根部去除L5、6的横突，显露L4、5和L5、6之间的椎间盘并 以特制刀片做1.5 mm深的斜行切口(刀片方向与上下终板成60角，深度约1.4 1.6mm)。分别于术前和手术结束时肌注庆大霉素8万U。术后置于1 m3笼中自由喂养。模型特点及功用：椎间盘退变的组织工程学修复研究，椎间盘退变治疗方法的研究模型建立和使用注意事项：1新西兰大白兔的椎间盘纤维环平均厚度约2.8mm ,注意掌握深度未及纤维环内层防止髓核组织外溢。2.一般4周后在MRI上就可以看到髓核的变化，椎间隙丢失要在8周后比较明显欢迎也在作同样实验研究的同道和我进行交流milita rymedical支持！我也要建立小鼠的幽门螺杆菌模型，上传一篇台湾”國立成功大學醫學院“許博翔的文章与大家共享，等我实践后有什么心得，再与大家讨论。幽門桿菌小鼠感染模式之建立與應用研究.rar (193.0k)尿路感染模型尿路感染模型.doc (32.0k)大家好：我是肾内科的研究生，要用狼疮性肾炎的小鼠作实验，但不知道在国内哪儿有卖的，想请教一下各位，先行谢过啦！急需！大家好：我是妇产科学的研究生，现在欲做子宫内膜异位症模型，请教各位是否有好的动物模型推荐？多谢！大家好：我是妇产科学的研究生，现在欲做子宫内膜异位症模型，请教各位是否有好的动物模型推荐？多谢！各位大侠：我做的是急性坏死性胰腺炎模型。方法是：雄性SD大鼠200 220g,禁食不禁水12h，用20%左旋精胺酸分2次腹腔注射，其间间隔1h,每次2.5mg/g,但是结果却很不理想，不知什么原因，心情很郁闷，不知怎么办啊，请多多指教我正在做大鼠心肌缺血再灌注的模型。哪位高人有没有好的造模方法，请指点一下，谢谢裸鼠人胃癌原位移植模型的建立胃癌是我国发病率及死亡率最高的恶性肿瘤之一, 尽管目前胃癌的防治工作已取得显著的成效,但许多病人仍死于手术后的复发和广泛转移,因此,对胃癌的浸润和转移的研究已成为当前的主要任务之一,动物模型是肿瘤研究的重要方法,以往多采用人胃癌裸鼠皮下移植模型, 但这种模型很少发生远处转移,九十年代以后国内外学者相继建立了人体肿瘤裸鼠原位移植（orthotopic implantation）模型，这种模型可发生类似临床特点的生长及转移过程，我们将 SGC - 7901 人胃癌细胞株移植到裸鼠胃壁,成功地建立了裸鼠人胃癌原位移植模型。1 材料与方法1.动物BALB/ C - nu/ nu裸小鼠购自上海市肿瘤研究所（实验动物合格证号为0001261） , 在 SPF 条件下饲养。2细胞株,SGC - 7901人胃癌细胞株用含10 %小牛血清RPMI - 1640培养液培养于CO2恒温孵育箱中，温度为37 C, CO2浓度为5 % ,隔日换液一次，以0. 02 %EDTA 消化传代。3皮下模型的建立与传代取68周的健康裸鼠，雌雄兼用，将体外培养的人胃癌细胞接种至裸鼠皮下（5 X10 6 个/只），待瘤体长至0. 81. 0 cm左右时，剥取瘤体剪切成1.5mm 左右的小块, 再转种至其他裸鼠皮下, 如此反复进行鼠间传代, 本研究以第八代皮下移植瘤为原位移植的材料。4 原位移植模型的建立取68 周的健康裸鼠12 只,雌雄兼用,随机分为两组, 分别按组织块法及细胞悬液法建立原位模型。所有动物术前禁食12 小时。组织块法组6 只,以0.5 %的戊巴比妥钠麻醉裸鼠（50 mg/ kg 体重） ,常规消毒皮肤,选择左侧正中旁切口,打开腹腔后将胃拉出,用眼科剪细心剪伤腺胃胃壁浆膜,再以8 - 0 丝线将瘤组织块（1. 5 mm/块,34块/只）穿透全层缝挂于胃壁上,最后以4 - 0 丝线分别缝合腹膜（含肌层）及皮肤。精心饲养观察,待动物自然死亡后作尸检,取原位瘤体、肝脏、网膜、肺等处标本固定后行光镜电镜检查,以上方法简称为组织块法。细胞悬液组 6 只, 将体外培养的细胞悬液直接注射至胃壁浆膜下（5 X10 6 个/ 只） ,基本程序与组织块法相同,这种方法简称为细胞悬液法。5 病理组织学检查,所取标本常规固定、切片、染色后行光镜及电镜检查。说的不好,请您原谅.大鼠脑缺血再灌注模型1 动物 Wistar 雄性大鼠，体重 180 克左右。2麻醉5%水合氯醛腹腔麻醉，0.6ml/100g。体重若是超过200克，可按0.7ml/100 g来注射。水合氯醛配置后不要放的太久，最好使用一个星期之内配置的。3造模过程：麻醉生效后颈部正中切口，长1.6-1.9cm,暴露右侧颈总动脉(CCA)和颈外 动脉(ECA), 5/0丝线结扎颈外动脉。分离与颈总动脉伴行的迷走神经，在距颈总动脉分叉 处近端0.50.6 cm处结扎颈总动脉。在结扎线的远端，置丝线备用。用微小动脉夹夹闭 备用线远端的颈总动脉，在备用线的近端用显微手术剪剪一小切口，将黑色 5/0尼龙线栓 送入切口，向上推至动脉夹处,将备用线扎紧，随即松开动脉夹。将线栓沿颈总、颈内动脉顺行向上插入至 MCA 起始部，遇阻力时停止，从颈总动脉分叉处计算插入深度(1702)cm,造成大脑中动脉血供阻断(middle cerebral artery occlusion MCAO)。缺血 2h 后，无需再次麻醉，轻轻抓握动物将栓线后拔退至颈总动脉，即恢复大脑中动脉的血供。4 注意事项:分离颈总时尽量不要刺激迷走神经；线栓的头部要圆钝，以免刺伤血管；插线 栓手法要轻柔，遇阻力即停，强行进入易造成脑出血。若术中大出血，术后可补充适量的生理盐水。自发性肿瘤模型实验动物种群中不经有意识的人工实验处置而自然发生的一类肿瘤称之为自发性肿瘤。自发性肿瘤发生的类型和发病率可随实验动物的种属、品系及类型的不同而各有差异。肿瘤实验研究中，一般应当选用高发病率的实验动物肿瘤模型作为研究对象，否则就无法进行研究。当然，低发病率的肿瘤模型也有一定用处，可以用它作为对照。肿瘤实验研究中选用自发性肿瘤型为对象进行研究有一定优点：首先是自发性肿瘤通常比用实验方法诱发的肿瘤与人类所患的肿瘤更为相似，有利于将动物实验结果推用到人：其次是这一类肿瘤发生的条件比较自然，有可能通过细致观察和统计分析而发现原来没有发现的环境的或其它的致癌因素，可以着重观察遗传因素在肿瘤发生上的作用。但应用自发性肿瘤模型也存在一些缺点：肿瘤的发生情况可能参差不齐，不可能在短时间内获得大量肿瘤学材料，观察时间可能较长，实验耗费较大。某个近交品系动物在一定年龄内，可以发生一定比率的某种自发性肿瘤。目前已培育了 许多种小鼠自发肿瘤，从肿瘤发生学上看，这些自发瘤与人体肿瘤相似，进行肿瘤发病学和 药物筛选等实验应属理想。但由于不易同时获得大批病程相似的自发瘤动物，又因这种肿瘤 生长较慢，实验周期相对较长，所以一般很少用于筛药。近年有人应用 AKR 自发白血病小 鼠进行化研究，该小鼠出生后一年半内有高于 90%的发病率，曾作为研究人体白血病和淋 巴瘤的模型，它对药物的治疗反应类似儿童急性淋巴性白血病。由于病程较长，已用于综合 化疗研究药物诱导缓解和维持缓解的最适治疗方案。此肿瘤可用强的松和长春新碱诱导缓 解，也可以环磷酰胺和甲基-CCNU诱导缓解，再用阿糖胞苷维持缓解，后者疗效最好。自 发肿瘤多数为病毒性，如C3H小鼠出生后有高的乳腺癌发生率，A系小鼠出生扣18个月 内有90%的肺癌发生率，AK和C57小鼠有高的白血病发生率等等，这些肿瘤多发生于体 表部位或易为目前体检新发现的部位。 AKR 白血病的生长规律研究提示，该鼠出生时即带 有致癌的RNA病毒，于鼠龄613月内，每月小鼠自发瘤的死亡率为1520%，而伴有 增殖能力的瘤细胞常于诊断前一个月在小鼠胸腺中出现，诊断后中等生存期为16天，以上 规律的阐明为化疗提供了基础知识。当前新药研究中自发瘤模型应用最多的小鼠自发乳癌， 常用高自发率的C3H小鼠或BALB/C雌鼠与DBA/2雄鼠杂交的第一代CD2F1小鼠（自 发乳癌），它们于生后10个半月可摸到肿瘤，而后生存2035天死亡，大量繁殖此类小 鼠，自发瘤可高达70%。一般于摸到肿瘤块后分组给药，观察其平均生存时间的延长率来 评价药物的疗效。移植性肿瘤模型目前肿瘤化疗所应用的大多数药物，都经动物移植性肿瘤试验而被发现，因此它是筛选抗肿瘤新药中最常用的模型。其优点是接种一定量瘤细胞或无细胞滤液（病毒性肿瘤）后，可以使一群动物带有同样的肿瘤，生长速率较一致，个体差异较小，接种存活率近100%。地宿主的影响也类似，易于客观判断疗效，且可在同种或同品系动物中连续移植，长期保留供试验之用，试验周期一般均较短，因此当前抗癌药筛选中绝大多数用移植瘤试验，如各种体型实肿瘤，腹水瘤和白血病等均被广泛使用。但是这类肿瘤生长速度快，增殖比率高，体积倍增时间短，这些都是与人体肿瘤的显著不同点，特别是与人的实体瘤差别更大。许多国家筛选抗癌药物中选用移植瘤株经常改变，主要原因可能也与此有关。现在世界上保有近500 种的动物移植瘤，但常用于筛药的不到40种，多数为小鼠肿瘤，其次是大鼠和仓鼠移植瘤，包括小鼠L1210淋巴白血病，艾氏腹水瘤，Friehd病毒白血病，肉瘤180, Lewis肺癌，腺癌755，白血病615，白血病P388, Walker-256,吉田肉瘤，肉瘤45, Liol淋巴瘤，Dunning白血病，白血病L5170Y，P1534淋巴白血病，P1798淋巴肉瘤，LPC-1浆细胞瘤，淋巴瘤8，Gardner淋巴肉瘤，B16或Cloadman黑色素瘤，Ridaway骨肉瘤，肉瘤37，P315白血病，Wag ner癌肉瘤，Mu r hy-stu rm淋巴肉瘤，Jen sen肉瘤,Geurin氏癌，仓鼠十二指肠腺癌和人体肉瘤HSL第1代杂交鼠移植。它们对抗癌药作用的敏感性大致可分为敏感，中度敏感，低敏感和不敏感瘤株四类，敏感瘤株多数生长迅速，瘤细胞增殖比率高，倍增时间短，如L1210、P388、W256，吉田肉瘤，Wagner瘤和肉瘤45。中度敏感的有艾氏腹水瘤和实体瘤，肉瘤180，肉瘤37，格氏癌。低敏感瘤有大鼠肉瘤M1和AkR自发白血病。不敏感肿瘤多生长缓慢，瘤细胞增殖比率低，如小鼠皮肤癌， CH3 自发乳腺癌和诱发癌。同样敏感株对抗癌药的疗效水平也不相同。人体肿瘤的异种移植性肿瘤模型将人体肿瘤移植于免疫缺陷动物，因能保持其生物学性，用于研究人体肿瘤对药物的敏感性有较大的帮助，当前日益受到多方面的重视。早期工作是将人体肿瘤移植于动物缺乏免 疫防御机能的特殊部位，如鸡胚，动物的眼前房，地鼠颊囊内，虽有一定比例的存活率，但 因肿瘤生长缓慢又受植入部位包膜的限制，往往肿块生长较小，难以传代，更不能适应需要 较多瘤源的实验治疗工重，近些年来将人体肿瘤移植于免疫缺陷动物或无毛无胸腺小鼠(裸 鼠)，取得了较大的进展，故美国国立癌症研究所(NCI)于1977年已提出包括人体肿瘤 移植于裸鼠的二筛实验模型。人工制造免疫缺陷动物用于异种移植的研究，是先将动物胸腺 切除，后给 900 拉德大剂量照射，照后2 小时输注骨髓或再给抗淋巴细胞血清，进行异种 移植才能生长。由于异种移植需要附加因子，不同于它们生长在人体的自然条件下，对药物 的反应性可能也不同。但由于具有病情类似人体的优点，近年来实验报导日益增多。1966 年以来发现和培育了一种无毛裸小鼠突变株，可能直接作为人体肿瘤异种移植的 接受体，不需进行附加因子的处理，可使人体肿瘤移植后生长良好。肿瘤细胞形态、染色体 含量和同功酶水平与人体肿瘤一样，说明未发生细胞选择和细胞杂交现象，细胞动力学和生 物化学特征也未变，故这种小鼠的异种移植人体肿瘤已成为免疫学和肿瘤学研究中较为理想 的模型，用于实验治疗方面的研究报导也明显增加。随着对裸鼠生殖生理及生长特点知识积 累，目前对如何提高供应量已制订出一套饲养、繁殖和管理办法。目前已成功把将结肠癌、 乳癌、肺癌、卵巢癌、黑色素癌、胃癌、淋巴瘤和白血病、肾病、宫颈癌、软组织肉瘤和骨 肉瘤等移植于裸鼠，获得一定百分比(37.5%)的良好生长肿瘤部分并可传代。若用已建 株的人体肿瘤组织培养细胞作移植材料，接种后成活率更高(41%)。这些成活的肿瘤对 化疗药物的敏感性与临床所见十分相近。黑色素瘤以DTIC和CCNU的抑瘤作用较强，而5-Fu则无效，与其临床客观疗效三药分别为20%, 12%及2.5%的结果相似。人Burkitt 淋巴瘤的祼鼠移植后对环磷酰胺有较高的敏感性，也与临床结果相符，其他肿瘤如乳腺癌和 结肠癌裸鼠移植，对前者阿霉素(5-mg/kg)、5-Fu (5080mg/kg)和苯丙氨酸氮界 (7mg/kg)均有一定的抑瘤效能，对后者甲基一CCNU和丝裂霉素也有明显疗效。有趣的 是对P388无效的六甲密腰，而对人体肺癌异种移植有效，应用其耐受剂量6090mg/kg 都有消瘤作用，对人体乳癌MX-1和结肠CX-1也有效。此药重新临床试用，证明对人支 气管肺癌和淋巴瘤确有治疗作用。最近对过去因毒性较大而中断研究的偶氮氧代正亮氨酸， 重新用人肿瘤裸鼠模型评价，证明对MX-1和肺癌XL-1有明显疗效，又重新进入临床研究。 近有人用胸腺嘧啶核苷444888mg/kg给肿瘤裸鼠连续灌注90140小时，发现它能 明显抑制人体黑色素瘤及畸胎瘤的生长，并导致肿瘤消退而对宿主无明显毒性，这些新结果 已引起临床重视。近来将人癌组织移植入裸鼠肾囊膜内，观察肿瘤生长大小，在双目显微镜下测量肿瘤直径OMU,比较给药组和对照组的差异，在11天左右可以得到药物疗效的结果。此方法比皮下接种快速，新近用正常小鼠代替裸鼠进行类似试验，在6天或更短的时间内也可获得有价值的资料，因为 6 天内免疫机能还不可能发挥作用。这样可以节省繁育裸鼠的工作量，有较大的实际意义。介绍一种改进的实验动物模型(非常好，其成果已发于 SCI)1) 模型建立方法：1取同种大鼠股动脉采血，无菌条件下于37C温箱内自然干燥，制备200“m以下的血凝块备用。2应用时每10mg血凝块加0.3ml生理盐水制成混悬液。3 水合氯醛腹腔麻醉。颈正中切开皮肤，剥离胸骨舌骨肌、肩胛舌骨肌与胸骨乳突肌，暴露颈总动脉、颈外动脉与颈内动脉。4 用金属动脉夹暂时夹闭颈总动脉，儿科头皮针针头逆行穿刺右颈外动脉至右颈内动脉起始处，随即用1ml注射器缓慢注入栓子盐水悬液0.3ml,推注同时开放颈总动脉夹，使栓子通过颈内动脉进入颅内至大脑各动脉，造成多灶性脑梗塞。5 结扎颈外动脉，缝合皮肤。6休息一周后，行Morris水迷宫实验，连续训练5d。取第5d正常组大鼠逃避潜伏期的均 值为参考值，同时计算栓子造模组大鼠第5d的平均逃避潜伏期与参考值之差占该鼠的平均 逃避潜伏期时间的比值，该值20%定为痴呆鼠。2) 模型的特点和功用：现国内外采用最多的方法主要有血管阻断法和栓子注入法两种。 4-血管阻断法是目前较为 经典的 VD 模型之一，但有诸多不足之处，如模型制作较为困难、动物死亡率较高以及在非 直视条件下阻断双侧椎动脉导致制作结果难以肯定等。栓子注入法也是较为常用的方法之一，是将外源性栓子(常用同种或自体血栓子)人工注入 动物体内，造成动物多发性脑栓塞。由于其能在大脑各动脉供血区形成多个梗死灶，且与临 床上VD的临床特征及病理改变有较强的相似性，故不少学者认为将其作为VD模型较为合 适。与非同种栓子比较，其制作虽然较为复杂，但却更接近于临床，它性质松软，不仅可以 随着血液搏动的压力而收缩，还可以在栓塞形成后破裂。这种栓子在脑内分布广泛，并以同 侧大脑中动脉分布区域为主。同种血栓栓子脑内分布的广泛性及易收缩性保证了制作理想的 MID 模型的成功率，而栓塞后其又易于破裂消失，就避免了术后出现严重的偏瘫症状，影 响行为学检测以确定痴呆是否存在。同种血栓子本身所具有的这种特性是其它VD造模方法 所无法比拟的。3) 模型建立和使用注意事项：在各种脑血管疾病中，缺血性脑血管病的发病率最高，也是 VD 最主要的致病因素。因此建立一种脑缺血所致的VD动物模型对于深入探讨VD的发病机理、病理特点以及判定某些治疗手段和药物的作用疗效等均有重要意义。(1) 栓子的剂量 栓子注入量是影响模型制作的关键因素，我们认为10mg栓子溶于0.3ml盐水中，这种剂量既可降低了动物的死亡率，又提高了造模的成功率。(2) 针具的选择 大鼠的颈外动脉较细，血管内压力较高，进针较为困难，容易刺穿血管， 造成血液外流，手术视野模糊，导致手术失败，因此针具的选择非常重要。针具过粗容易穿 破血管，过细又容易使较大直径的栓子不能通过针头。我们选用儿科 头皮针，其粗细较为适用。(3) 行为学的筛选 VD 是在多发性脑梗塞的基础上而引发的痴呆，但并非所有的脑梗塞均发生痴呆，所以必须对造模后的动物进行行为学筛选，以确定痴呆是否存在。(4) 模型制作过程中必须确保针头从颈外动脉逆行穿刺至颈内动脉起始处，即颈内动脉和颈外动脉的分叉处，以使推注的栓子被顺利地冲入颈内动脉。因为颈外动脉前行途中分支较多，从颈总动脉分出不远处即有 3个分支：枕动脉、甲状腺上动脉及咽升动脉。如果针头的位置在颈外动脉中，推注的栓子可能会被血流冲入颈外动脉的上述分支中，使进入脑内的栓子量减少，而出现各种程度不同的梗塞，影响模型间的一致性。以上模型制作标准已发表于Neuroscienee Letters(影响因子为2.019)，详见请版主多加分，多谢！补充上贴，VD，血管性痴呆。此为血管性痴呆的模型类风湿动物模型1、佐剂性关节炎在实验第一天进行造模:用75%酒精消毒大鼠尾巴后，将配制好的CFA 0. lml/只注射于尾巴中、内1/3交界处皮内。正常对照组大鼠则注射生理盐水0. lml/只或者右后足足跖部皮内无菌注射CFA0. lml2、二型胶原 关节炎将溶于0.1 mol/L乙酸的II型胶原10 mg与等量的不完全弗氏佐剂、卡介苗冻干粉溶液混合，制备II型胶原终浓度为1 mg/mL的混合物。然后用注射器反复抽吸,直至混合物完全、充分乳化,以乳化物滴入水中不松散为度。取乳化后的混合物,于大鼠尾根部皮内按 0.10mL/只注射，共含II型胶原100 “g/只，并压迫注射部位30 s,以使乳化物吸收完全。正常对照组给予同等剂量的生理盐水,于大鼠尾根部皮内按0.10 mL/只注射。大鼠急性心肌缺血模型制备:末次给药后30min, 0.5%戊巴比妥钠(30mg/kg. ip)麻醉，仰卧固定于实验台上，切开颈 部皮肤，分离气管并行气管插管，连接动物人工呼吸机，沿胸骨左缘自胸锁关节至第三或第 四肋间隙开胸，用电热灼烧器彻底止血，分离左颈总动脉，并插入动脉插管，内充满肝素钠 溶液，接压力换能器，记录颈总动脉平均动脉压。剪开心包，作心包床，分离左冠状动脉前 降支，距左冠状动脉起点 2-3mm 处穿一细丝线以备结扎，去除遮盖于升主动脉前方的部 分胸腺后，仔细分离升主动脉，将己校准好的电磁血流计探头(直径2mm)套于升主动脉上， 测量心输出量。左心室心尖部插入导管至左心室腔内与压力换能器相连测量左心室内压(LVP)。LVP经直流放大10倍测定左心室舒张来期压力(LVEDP)，并将LVP讯号输入微分器测定左心室压力变化速率最大值和最小值(士 dp/dtmax)。由舌下静脉注入肝素钠5mg/kg。插入针状电极于大鼠四肢皮下，以监测II导联心电图。把以上所有信号输入BIOPAC16导生理记录仪，并联用微机系统进行观察。平衡10min后，记录结扎左冠状动脉前降支 30min,60min,90min 时间点血流动力学指标。脑缺血模型的制作制作脑缺血动物模型的方法很多，但常用方法主要有结扎法和栓塞法两种，结扎法是运用外科手段结扎脑的供血动脉，中止脑的血氧供应，它可以进一步分为颅内结扎和颅外结扎。颅外结扎主要是用于制作全脑缺血模型，可进一步分为4血管结扎，即结扎颈总动脉/颈内动脉和椎动脉；2血管结扎，即结扎两侧颈总/颈内动脉，同时抽取动物一定量的血液，使血压降低到 50mmHg 以下，达到造成全脑缺血的目的。这种方法因为需要监视和控制血压，实验条件要求严格，且因椎动脉未予结扎，往往造成的脑缺血是不完全的。另一种两血管结扎法是用沙土鼠（Gerbil）进行，利用沙土鼠脑底Willis动脉环发育不全后交通动脉缺如的特点，结扎两侧的颈总或颈内动脉造成前脑缺血。栓塞法是用自体血凝块、塑料或玻璃微球来栓塞实验动物颈动脉、脑内大动脉或微动脉，造成脑组织缺血模型，该法简便易行，但可控性、可重复性差，且不能再灌流。1. 实验动物 :实验动物的选择对脑缺血模型是非常重要的，理论上兔、猫、狗和灵长类都可 被用来制作脑缺血模型，但更多的人倾向于选择使用鼠作实验。这主要是基于如下认识：因 为鼠是小动物，价格便宜，躯体小，消耗药品试剂较少；鼠的脑血管解剖和生理与高级动物 无明显差异；一些在体的实验操作更容易进行，甚至在伦理学上更容易接受等等。因此，本节将以鼠类的脑缺血模型为主加以介绍。2. 仪器和设备 :制作脑缺血动物模型的仪器设备分为二类：一类是为动物手术服务，包括 一套手术器械，手术显微镜，颅钻，脑立体定位仪，温度控制装置（控温仪、红外线灯和加 热垫），呼吸机；另一类是用于监测和分析的仪器，包括脑电记录装置，血压记录装置，多谱勒血流记录仪，血气血糖分析仪。3. 四血管结扎脑缺血模型的制作 这是一个广泛应用的脑缺血模型。最常用的为 Pulsinelli 的改良方法。该模型选用 Wistar 大鼠，可以在清醒和自由运动状态下制作严重的脑缺血和恒定的病理学改变。该模型分二个 阶段制作，第一阶段：将动物麻醉，按置在脑立体定位仪上，调节耳杆和门齿高度使鼠头前 倾约30 度，同时用橡皮栓住鼠尾给以轻度的牵拉力，使颈椎伸直，翼孔呈水平位，便于观 察。枕骨下第一颈椎水平正中切口，仔细分离两侧第一颈椎横突，暴露第一颈椎横突上的翼 孔，翼孔下有两则椎动脉通过，用小的单极或双极电凝器插入翼孔烧灼闭塞双侧椎动脉。然 后动物取背位，颈部正中切口，分离颈动脉鞘，注意不要损伤迷走神经和颈动脉鞘后方的颈 交感干。用外科缝线套住两侧颈总动脉（不要结扎），将线头藏于皮下，简单关闭切口；第 二阶段：待动物麻醉清醒后自由饮水，但禁食1224小时后，将动物于清醒状态下，取背 位，分别用绳子固定四肢和门齿，以控制动物挣扎。小心分离颈前部的切口，辩认套在颈总 动脉上的缝线，轻轻牵起，将线套收紧或者用微血管夹夹闭双侧颈总动脉。此时在23 秒 钟内大鼠将昏迷并丧失对光反射。缺血后23分钟可出现异常脑电图，并持续到缺血结束。 颈总动脉的关闭时间根据实验设计而定，通常取1020分钟。昏迷和反射消失是缺血是否 成功的标志。据统计约有四分之三的大鼠经上述二阶段处理可导致缺血成功。缺血期间自主 呼吸和角膜反射的存在提示脑干血液供应的存在，这是因为脊髓前动脉供血的原因。缺血结 束后松开颈总动脉，动物通常很快清醒。但在2472小时内将有一部分动物出现缺血性抽 搐，如果缺血持续30分钟，在24小时内将有20%、72小时有40%的鼠发生缺血性抽 搐，这些发生抽搐的鼠在结果分析时应被排除。 约有四分之一的鼠缺血不成功，其中 2/3 是昏迷不完全，另外 1/3死于呼吸衰竭。该模型的制作的关键是烧灼椎动脉，由于椎动脉 不能直接看到，这就需要操作者具有一定的经验，适当的掌握烧灼的时间和电极与翼孔的角 度，同时要避免损伤脑干。4. 大脑中动脉结扎模型的制作结扎大脑中动脉（MCA ）是制作局灶性脑缺血模型的常用方法，早期大多用较大的实验动物（猫、狗）制作，近年来用大鼠制作的大脑中动脉结扎模型已被大家接受并得到广泛的应用。目前比较标准的模型是Tamura 1981年报道的方法5。他们于近侧段结扎SD大鼠的大脑中动脉，并详细比较了结扎后脑血流改变和组织病理学，结果发现结扎后 4小时产生较为恒定的纹状体和皮质损害的脑血流（CBF）阈值是25ml/100g/min,这一阈值明显较猫、猴要高。具体操作程序是：动物麻醉下，头皮切口，分离颞肌，取外眦和外耳门连线的中点，用牙科钻或环形颅钻钻开颅骨、暴露大脑中动脉，于手术显微镜下辩认大脑中动脉及其分枝，在分枝的下方即MCA的近段，分离结扎或烧灼MCA，同时取颈部切口分离结扎同侧的颈总动脉。在分离结扎或烧灼MCA时，应避免损伤附近的脑组织，通常用钝头的直角钩子固定于定位仪上，操纵定位仪旋钮，轻轻地将MCA提起，然后烧灼或结扎。该模型操作的关键有两点：（1）精确的定位结扎部位，一定要在MCA的豆纹动脉分枝的下方，如果在其上方结扎将很少出现皮质和基底节梗塞灶。但是在实验操作时往往不能辩认出MCA的分支，此时可以嗅沟为标志，在其以下进行结扎；（2）同侧颈总动脉的永久结扎，能够加重MCA供血区的缺血程度，是恒定的脑梗塞出现的必要条件，有时甚至配以暂时的对侧颈总动脉结扎。该法的优势是病理生理变化接近人类的MCA栓塞，经改进后也可进行重灌流研究。其缺点是开颅破坏了颅内压的恒定，扰乱了脑脊液循环的动力学，并易致细菌侵入，从而影响组织病理学评价。此外，附着在MCA上交感神经纤维可因结扎或电凝而损伤，使血管的自调节功能受损。5. 光化学脑梗塞动脉模型的制作 光化学脑梗塞模型是一种新的局灶性脑缺血动物模型，其机理是其些光敏感染料注入机体 后，在特定波长光波作用下发生光化学反应，产生并释放一些活性物质，如氧自由基等。这 些活性物质造成血管内皮细胞损害、血小板粘附、进而发生释放反应，激发血管内凝血过程， 导致血栓形成。最常用的光敏染料是玖瑰红B （四碘四氯荧光素二钠，r ose ben gal），动 物麻醉后用脑立体定位仪固定头部，光敏染料经尾静脉注入，数小时后切开头皮，用卤素灯 或氙灯为光源，滤除红外及紫外光部分后，直接或经光学纤维传导投照到脑部。光线经过颅 骨，对选定的皮质区域照射510分钟，局部照射强度为304Ok/x （千勒克斯）。照射 数分钟即可见软膜及脑实质的血管内广泛的血小板聚集，血脑屏障破坏和血管源性水肿，血 管内膜断裂管径不规则，皮质深层神经元变性，上述病理改变以1224小时最为严重，实 验者可通过调整光束的照射范围、强度、时间和光敏染料的剂量来控制梗塞灶的大小和深度。 典型的梗塞灶边缘整齐呈碗状，深入整个皮质并可延及皮质下结构。该模型具有定位准确， 手术操作相对简便，避免了开颅和操作血管壁交感神经纤维的缺陷。其不利的方面是微血管损害突出，早期血脑屏障开放和血管源性水肿明显，且不能进行重灌流。6. 自发性高血压鼠的脑卒中模型自发性高血压鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）是遗传性高血压大鼠，有许多品种。最常用的为*种SHR，由Okamoto8从Wistar京都鼠中选择较高血压者经遗传定向选种繁殖而成，该鼠出生后数周开始自发性血压升高，峰值可达26.7kPa(220mmHg)。虽然SHR并不倾向于自发性卒中，但它们对脑血管闭塞较正常大鼠敏感很 多。双侧CCA结扎可引起脑血流的明显降落，结扎SHR的大脑中动脉比正常血压大鼠产 生更大的皮质梗塞灶。在SHR基础上培育出的易卒中性高血压大鼠(stroke-prone strain of SHR, SHRSP)其血压更高，峰值可达3233kPa,自发性脑出血或脑梗寒发生率可 达6080%。其卒中发生的部位主要在前内侧皮质、枕皮质和基底节12SHR和SHRSP 的微血管病理学特征包括多灶性血脑屏障开放、血浆蛋白漏出、内皮损伤、血管平滑肌纤维 样溃变、基膜增厚和成纤维细胞增殖。虽说结扎SHR和SHRSP鼠大脑中动脉可制作更大 和更恒定的梗塞，但它们只代表遗传学上的一个小的群体，与原发性高血压患者的性质有很 大差异，且这类鼠来源有限，饲养困难，在国内研究中无法大量开展。7. 血管内栓线技术的局灶缺血模型该法是在无需开颅的条件下产生局灶性脑梗塞，并且可通过拔出栓线实现血流再通。具体操 作步骤是颈部正中切口，暴露颈总和颈外动脉。首先，分离结扎颈外动脉的分枝枕动脉、甲 状腺上动脉和咽升动脉。然后分离颈内动脉，注意勿损伤邻近的迷走神经和舌下神经绊，小 心分离并结扎颈内动脉在颈部的唯一分支翼腭动脉。结扎和切断颈外动脉，用丝线套住颈外 动脉的残端，用微血管夹在颈外动脉起始处夹闭颈总动脉。于颈外动脉的残端或由颈总动脉 分叉处剌一小口，由此插入 4-0 号单尼龙线，如果由颈外动脉残端插入尼龙线，应轻轻牵 拉颈外动脉残端以增大它于颈内动脉的夹角。轻轻推进尼龙线使之由颈外动脉通过分叉处进 入颈内动脉，当缝线在血管内推进时能够看到它到达颅底，此时可感觉到轻微的阻力，这是 颅内动脉穿过颅骨时的弯曲，缝线稍作弯曲后并继续伸延。从分叉处开始计算推进尼龙线的 长度为17.5mm左右。由于分叉处到大脑中动脉起始处的长度为14mm，这样尼龙线的 前端进入了大脑前动脉，从而阻断了大脑中动脉的血液供应。而大脑前动脉可通过前交通动 脉获得血流。放开血管夹，收紧颈外动脉残端的丝线，防止出血。拔出尼龙线便可达到血管 再通的目的。尼龙线的选择和处理：由血管内树脂灌注技术测量而得知颈内动脉颈部和大脑 前动脉近端的内径分别为0.3和0.2mm,所选栓线的直径应为0.2mm为宜。使用前通过 加热使尼龙线的前端形成一个小的球形的膨大，使便于推进。有时，将尼龙线在混有硬化剂 的硅胶中浸一下以增加尼龙线的硬度。为了防止推进过程中出现凝血，用肝素处理一下尼龙 线也是必要的。 该模型是近年来颇受重视的局灶脑缺血模型。具有不开颅，不损伤血管的 交感神经纤维，又能进行重复灌流研究的优点。最近有人证实15，不结扎颈内动脉在颈 部的分支，翼腭动脉并不影响大脑中动脉的栓塞效果，同时还可减少颈内动脉的血栓形成， 从而更有利于重灌流研究。不结扎翼腭动脉也可使手术操作进一步简化。线栓法大鼠脑缺血再灌注模型制备方法实验前准备麻醉剂：乌拉坦(应较好的控制大鼠体温)保温：60W白炙灯高度为37m直接照射能使肛温保持在37C。栓线的制备：1. 取熔点为56C的固体石蜡一块，在瓷杯中加热熔化。直径为o. 24mm、长5cm的鱼 线一端 5mm 长的一段，垂直在熔化的石蜡中迅速浸入并提起，立即凝固的一薄层石蜡可 牢固地粘附在鱼线一端的表面，其直径为0.26mm。就这样，普通的鱼线即可变成规相一 致头端光滑圆钝的栓线。2. 在鱼线 18mm 的位置用涂改液标记一个白色点。TTC的配制：用0.2mol/L磷酸缓冲液（PBS）配成2%TTC溶液（pH7.5），避光保存。体重与栓线直径： 线栓直径 0.25mm 采用的 SD 大鼠，体重 260-350g。实验方法：动物用乌拉坦（1ml）腹腔注射麻醉。仰卧位固定，颈正中线切口，沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜，分离左侧颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA），在CCA远心端和近心端及ECA处挂线备用。用微动脉夹暂时夹闭ICA，然后近心端结扎CCA、ECA。然后在距CCA分叉部4mm处剪一小口，将拴线插入到ICA，这时用绕在CCA 远心端的细线轻轻系牢拴线。（不可过紧，否则近线困难，但松了又会出血。）用眼科镊轻推拴线，从血管分叉处开始算距离，当插入深度在 18 mm 时（一定要将血管放松至原来状态，且保证标记点在分叉处，由于标记的是白色的所以很容易看的），紧紧系牢CCA远心端的细线，此时的关键是动作轻柔，不要使ICA有任何的牵拉，否则栓线会脱出ACA，可能会造成缺血失败。血管外的栓线不要留得过长，更不要缝在皮外，大鼠醒来后会自己拔出。缝合伤口，单笼饲养观察。如果需要再灌的话，就把拴线抽出即可，因为脑底有个动脉环，结扎一侧颈总动脉大脑不会缺血的。绝地细胞你做过裸鼠人胃癌原位移植模型吗最近我要做这部分实验很想和你具体探讨一下我的QQ号80395892请问放射性烧伤或放射性皮肤损伤的大鼠模型应该如何建模呢？动物模型初学者请教各位大侠。受用啊全麻后可以尾静脉给药，但注射阻力较大，且易鼓针。给药前用器械刮刮局部皮表，有助于你找到静脉，如有静推泵更好！子宫内膜异位症动物模型1）模型建立方法：动物：雌性大鼠， 180-220 g.术前准备：手术造模前三天，每天给乙烯雌酚0.1g/只，皮下注射，共3次。手术造模步骤：1. 造模组动物麻醉固定，备皮，铺孔巾，皮肤消毒。2于下腹正中做一纵行切口，长约3-4cm，逐层分离皮下组织、肌层和腹膜。3. 将小肠及网膜提出，寻找呈 Y 字型的子宫。子宫周围脂肪组织较多，且给乙烯雌酚后，子宫增大，血运丰富，很容易辨认。4分离子宫，在距卵巢4cm处将右侧子宫体结扎，剪下约1-1.5cm的子宫，剖开使内膜面暴露，生理盐水冲洗后子宫内膜面向上缝于左侧子宫体上，四角各缝一针即可。5.腹腔洒青霉素粉后，逐层缝合，消毒切口。术后 1-2 周开腹检验造模情况，剔除不合格动物后即可分组给药。检测指标可为血清或血浆，异位的子宫内膜，也可考察免疫器官的变化。模型对照组动物应麻醉，开腹，牵拉子宫。2）模型的特点和功用：该模型的特点是造模成功率高，实验周期较短。移植子宫内膜存活，应呈泡状，与正常子宫内膜一样具有分泌功能。该模型主要用于子宫内膜异位症的药效学研究。3）模型建立和使用注意事项：1.无菌操作要严格，因该实验最难过的就是抗感染关。术后每日应皮肤切口消毒，同时术后可给阿莫西林灌胃一周。2.缝子宫内膜时应注意进针要浅，不要穿透子宫壁，尽量不要伤及肌层。3. 关腹时腹膜、肌层和皮肤要逐层缝合。如用一次性缝合，术后动物易将切口缝线咬开，会增加感染机会。4. 术前3 日给小量乙烯雌酚，更接近于生理性的激素分泌，可使移植的内膜更容易存活。急求糖尿病大鼠模型的建立方法，感激不尽！发一篇关于性功能障碍模型的文献：参考陈奇主编的中药药效研究思路与方法，性功能有如下参考模型：（1）去势大鼠模型（2）大鼠交配试验（3）小鼠交配试验（4）重复应激性小鼠性行为低下动物模型（5）氢化可的松肾阳虚证模型（6）腺嘌呤肾阳虚证模型（7）“劳倦过度，房室不节”致肾虚模型（8）对幼年雄鼠性器官发育的影响（9）果蝇性活力实验观察指标有：阴茎勃起、交配功能、器官重量、形态学观察与激素、生物活性因子及相关酶有关的实验指标等并附文献一篇，详细讨论了上叙各个模型的原理、实验方法、模型复制成功的指标、实验的注意点，最后还讨论了各个方法的评价、观察指标的选择和阳性药的选择等。性功能障碍的药效学试验.pdf （167.6k）一般认为,胚胎发育期的啮齿动物视网膜含有大量的祖先细胞神经前体细胞,它们不断增殖、分化成视网膜的各类神经元、感光细胞及Muller胶质细胞。动物出生后，神经细胞发生基本停止,神经前体细胞逐渐减少并消失。至成年,视网膜的神经元和感光细胞变成终极分化细胞,这些细胞一旦因疾病或损伤死亡后不能再生。最近国外学者从成年小鼠和大鼠眼的睫状体色素上皮分离和培养出具有自我更新和多分化潜能的神经前体细胞 ,提示成年啮齿动物视网膜仍具有神经细胞发生和再生的潜力。然而,目前国内尚无这方面的报道。为此,本研究取成年大鼠睫状体缘处的色素上皮组织进行体外培养神经前体细胞,并用免疫组化反应染色鉴定其表型,为进一步揭示神经前体细胞的生物学特征提供资料。材料和方法试剂:细胞培养试剂MEM/ F12培养液、B27添加剂bFGF，胎牛血清,52溴222脱氧尿嘧啶 。免疫组化反应试剂:小鼠抗大鼠 nestin 单克隆抗体 ,小鼠神经特异性烯醇化酶抗体,小鼠胶质纤维酸性蛋白( GFAP) 及 BrdU 抗体,小鼠 O4 抗体 。神经前体细胞的培养:成年SD大鼠(雌雄不拘，体重300400 g) 15只,1 %戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,摘出眼球。在无菌状态下沿眼轴环行切开眼球,剥离视网膜,剪断睫状体小带,自锯齿缘向前剪出睫状体缘处的色素上皮组织块，用Hanks液漂洗3次,接种于培养瓶，培养液为无血清的DMEM/ F12 (含 bFGF 20 ng/ ml ,B27 2ng/ ml)置含 5 %CO2 .37 的培养箱培养。待组织块长出球形的细胞集落后,收集细胞集落,接种于预先涂有多聚赖氨酸的盖片上,用上述培养液培养48 h，并于最后10 h加入BrdU(3“g/ ml);另一部分细胞集落用含2 %FBS的培养液(无bFGF和B27)培养35d。定时观察细胞集落及其细胞的生长和分化状态。有没有肿瘤的啊老大们？silvernwolf诱发性肿瘤动物模型一、肝癌(1)使用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌：取体重 250g 左右的封闭群大白鼠，雌雄不拘。按性别分笼饲养。除给普通食物外，饲以致癌物，即用0.25%DEN水溶液灌胃，剂量为10mg/kg,每周一次，其余5天用0.025%DEN 水溶液放入水瓶中，任其自由饮用。共约4个月可诱发成肝癌。或单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。(2) 4-2甲基氨基氮苯(DBA)诱发大鼠肝癌：用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠，饲料中维生素B2不应超过1.52mg/kg, 46月就有大量的肝癌诱发成功。(3) 2-乙酰氨基酸(2AAF)诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌：给成年大鼠含0.03%2AAF 标准饲料。每日每平均23mg2AAF (也可将2AAF混于油中灌喂)，34月后有80 90%动物产生肝肿瘤。二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌：用剂量为每日0.314mg/kg体重,混于饲料或饮水中给予， 69个月后255/300大鼠发生了肝癌。(4) 亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱发小鼠肝癌：用1%OAAF苯溶液(约0.1ml含1mg) 涂在动物的两肩胛间皮肤上，隔日一次，每次23滴，一般涂100次。实验后78周即 而出现第一个肝肿瘤，7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。或用2.5mgOAAT溶于葵瓜 子油中，给C3H小鼠皮下注射4次，每日间隔10天，也可诱发成肝癌。黄曲霉素诱发大 鼠肝癌：每日饲料中含0.0010.015ppm,混入饲料中喂6个月后，肝癌诱发率达80%。二、胃癌甲基胆蔥诱发小鼠胃癌：取20g左右的小鼠，无菌手术下，在腺胃粘膜面穿挂含甲基胆蔥（MC）线结。含MC的线结是用普通细线，在一端打结后，将线结置于盛有MC小玻璃试管内，在酒精灯上微微加温，使MC液化渗入线结。MC浓度为0.050.1g20-甲基胆蒽内浸入1020根线。手术埋线后48个月可诱发成功胃癌。用不对称亚硝胺，剂量为0.25ml/kg体重，3个月后全部动物发生前胃乳头状癌，78个月后有85100%发生前胃癌。昆明种最敏感。A系次之，615系小鼠敏感性最差。此外还可用甲基亚硝基醋酸尿素给BD大鼠饮水中加2mg/kg体重，每周5次饮用，520天后全部大鼠均发生了腺胃癌。三、食管癌甲基苄基亚硝胺（MBNA）诱发大鼠食管癌：取体重100g以上的Wistar大鼠，任其食用含甲基苄基亚硝胺的饮水，并将MBNA掺入饲料中使每日摄入量达0.751.5mg/kg体重。 80100 天可诱发成食管癌。四、肺癌（1）二乙基亚硝胺（DEN）诱发小鼠肺癌：小白鼠每周皮下注射1%DEN水溶液一次， 每次剂量56mg/kg, DEN总剂量达到868mg，观察时间为100天左右时，发癌率可达40%。而DEN总剂量达到1176mg,观察时间为半年左右时；发癌率可达94%。（2）乌拉坦诱发肺腺癌：小鼠（A系，111/2月龄）较大鼠敏感，每次每只腹腔注入 10%乌拉坦生理盐水液0.10.3ml,间隔35日再注，共注23个月，每只小鼠用量 约为100mg,注后3个月肺腺癌发生率为100%，而且多数为多发性，这种诱发瘤为良性。五、鼻咽癌二甲基胆蔥（MC）诱发大鼠鼻咽癌：取直径23mm的硬质塑米管，在酒精灯上小 火拉成锥形，每段长约3.5cm，管内填以结晶体MC。小管一端用火封闭，以防药物外溢， 尖端用针刺数孔，使MC能从小妃溢出。取体重120g左右的大白鼠，雌雄均可，乙醚麻 醉后，由前鼻孔将上述含MC的塑料小管插入鼻腔，利用前鼻孔较小管粗端为小的特点，稍 加用力，迫使小管全部进入鼻腔内，待到预定时间（半年以上），发癌率可达60%以上。从中我学到了学多，看到了许多模型的建立方法，但是没有介绍有关室颤模型的建立方法， 在犬上经体外建立室颤模型，我看到许多文献报道经胸前放入两个电极，让其 45V AC 经胸壁传入心脏诱导室颤，但是没有具体说这两个电极的放置的具体位置，请问有没有关于 犬室颤经体外建模的具体方法，从中我学到了学多，看到了许多模型的建立方法，但是没有介绍有关室颤模型的建立方法， 在犬上经体外建立室颤模型，我看到许多文献报道经胸前放入两个电极，让其 45V AC 经胸壁传入心脏诱导室颤，但是没有具体说这两个电极的放置的具体位置，请问有没有关于 犬室颤经体外建模的具体方法STZ造2型糖尿病SD大鼠模型的体会和疑问：Sigma公司的ST乙以40mg/kg腹腔注射，同时以高糖高脂饮食灌胃。造模时间 总例数 血糖16.7 （mmol/L） 成模率11月27日 10只 2只 2 6（造模1周后） 6011月28日19 0 2 17（造模1周后） 8911月29日15 1 0 14（造模1周后） 9312月 1日25 10 1 14（造模第4天） 69其中有2只血糖超过33.3，皮下注射了 2个单位的中效胰岛素；1只注射STZ第3天出 现全身浮肿、腹泻伴行动受限，但血糖在 6.9，不知何故，恐怕快要牺牲了！正在观察中， 目前尚无死亡报道。困惑：大多数老鼠的血糖在20以上，感觉血糖偏高了，不知2周后能否降下来些。这样高的血糖好像是 1 型糖尿病啊，原设计用在某种植物提取物的降糖作用研究的，请问： 1.这样高的血糖，还能继续用高糖高脂饮食灌胃吗？2. 这种糖尿病模型能称之为2型吗？表格乱了，重发一次。STZ造2型糖尿病SD大鼠模型的体会和疑问：Sigma公司的ST乙以40mg/kg腹腔注射，同时以高糖高脂饮食灌胃。 造模时间 总例数 血糖16.7 （mmol/L） 成模率 11月27日10只 2只 2 只 6只（造模1周后）60 11月28日19 只 0只 2只 17只（造模1周后）89 11月29日15只 1只 0只 14只（造模1周后） 93 12月1日25只 10只 1只 14只（造模第4天）69 其中有2只血糖超过33.3，皮下注射了 2个单位的中效胰岛素；1只注射STZ第3天出 现全身浮肿、腹泻伴行动受限，但血糖在 6.9，不知何故，恐怕快要牺牲了！正在观察中， 目前尚无死亡报道。困惑：大多数老鼠的血糖在20以上，感觉血糖偏高了，不知2周后能否降下来些。这样高 的血糖好像是 1 型糖尿病啊，原设计用在某种植物提取物的降糖作用研究的，请问： 1.这 样高的血糖，还能继续用高糖高脂饮食灌胃吗？2. 这种糖尿病模型能称之为2型吗？