病原微生物学课件：厌氧性细菌

厌氧性细菌厌氧性细菌(Anaerobic bacteria)目的要求 掌握掌握厌氧菌的种类、感染特点；厌氧芽孢杆菌属的生物学特性与鉴别要点，致病性及其特异性防治。熟悉熟悉厌氧性细菌的生物学性状、微生物学检查法和防治原则；无芽孢厌氧菌的种类、致病条件和感染特点。了解艰难梭菌的生物学性状和致病性，无芽孢厌氧菌的种类。Key words C.Tetani;C.Perfringens;C.Botulinum Tetani exotoxin,Botulinum exotoxinObligate anaerobes Killed by high oxygen content lack certain enzymessuperoxide dismutase*O2-+2H+H2O2 catalase*H2O2 H2O+O2peroxidase*H2O2 H2O/NAD to NADH厌氧菌特点特点特点芽胞厌氧菌芽胞厌氧菌无芽孢厌氧菌无芽孢厌氧菌种类种类1个菌属40多属分布分布自然界人和动物体内致病致病外源性感染多以外毒素致病内源性感染多为条件致病菌第一节第一节 厌氧芽胞梭菌厌氧芽胞梭菌(Clostridum)本属菌为G粗大杆菌，芽胞直径大于菌体宽度，呈梭状，故名梭状芽胞杆菌属。破伤风梭菌；产气荚膜梭菌；肉毒梭菌；艰难梭菌一、破伤风梭菌一、破伤风梭菌(C.tetaniC.tetani)（一）生物学性状：（一）生物学性状：1、菌体细长，有周鞭毛。2、圆形芽胞位于菌体顶端，大于菌体横径，呈“火柴棒状”。3、专性厌氧 肉渣培养基：可消化肉渣，微变黑，培养物有腐败臭味。血平板培养基：扩散生长，菌落边缘不整齐，呈羽毛状，伴溶血。4、芽胞抵抗力强，繁殖体对青霉素敏感。破伤风梭菌的鞭毛（电镜，放大16 000倍）obligate anaerobic;swarming on blood agar,faint hemolysis（二）致病性与免疫性：（二）致病性与免疫性：1、致病条件：伤口的厌氧微环境。“深、窄、脏深、窄、脏”（1）窄而深伤口混有泥土、垃圾等物；（2）同时有需氧菌或兼性厌氧菌感染；（3）大面积烧伤；（4）旧法接生新生儿破伤风。2、致病物质：破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素：外毒素，属神经毒素，阻止中枢抑制性神经介质的释放，导致骨骼肌强制性痉挛。破伤风溶血素破伤风溶血素：致病机制未明。tetanospasminone high chain(H)HC：binds to the ganglioside receptors(神经节甘脂受体)of inhibitory neurones in CNSHN：help for the internalization and entrance of the toxinone light chain(L)Toxic part:zinc endopeptidaseblock the release of inhibitory mediators:glycin,g-GABAstops inhibitory nerve impulse to skeletal muscles:persistent muscular contraction so called as spasm occurs which leading to some typical symptoms.A.Neurotransmission is controlled by the balance between excitatory and inhibitory neurotransmitters.B.The inhibitory neurotransmitters(e.g.,GABA,glycine)prevent depolarization of the postsynaptic membrane and conduction of the electrical signal.C.Tetanospasmin does not interfere with production or storage of GABA or glycine,but rather their release(presynaptic activity).D.In the absence of inhibitory neurotransmitters,excitation of the neuroaxon is unrestrained.proteolysisdeoxidization阻止抑制性神经元释放抑制性神经介质 屈、伸肌同时强烈收缩，骨骼肌强直痉挛 角弓反张，牙关紧闭等毒素经HC与神经细胞表面受体结合 轻链发挥毒性作用经HN使轻链进入细胞局部繁殖，产生痉挛毒素毒素经突触逆向运输毒素经淋巴、血流CNS经创口破伤风梭菌3 3、致病机理：、致病机理：体液免疫体液免疫为主(antitoxin)，病后无免疫力。疫苗接种（破伤风类毒素）可获得牢固免疫力。4 4、免疫：、免疫：The neonatal tetanus patient displays sardonic smile(苦笑面容),lockjaw(牙关紧闭)and dyspnea(呼吸困难)This baby has neonatal tetanus.It is completely rigid.Tetanus kills most of the babies who get it.Infection usually happens when newly cut umbilical cord is exposed to dirt.Severe case of adult tetanus.The muscles in the back and legs are very tight.Muscle spasms can break bones（三）防治（三）防治：1、人工主动免疫：（1）军人、野外工作者：破伤风类毒素。（2）6月-6岁儿童：白百破三联疫苗(DPT:diphtheria,pertussis,tetanus)。2、人工被动免疫：破伤风抗毒素(TAT:tetanus antitoxin）中和游离的破伤风痉挛毒素。（1）紧急预防：TAT 1500-3000 U CT！阳性者应用脱敏注射法。原则：早期，足量，防过敏。（2）治疗：TAT 10万-20万U 3、清创，大剂量青霉素等。（一）生物学性状：（一）生物学性状：1、G+粗大杆菌，可形成荚膜。2、芽胞卵圆形，位于菌体次极端，不大于菌体。二、产气荚膜梭菌二、产气荚膜梭菌(C.perfringensC.perfringens)（一）生物学性状：（一）生物学性状：3、血平板上有双层溶血环双层溶血环，内层为完全溶血，外层为不完全溶血。二、产气荚膜梭菌二、产气荚膜梭菌(C.perfringensC.perfringens)-hemolysis is caused by-toxin while the-hemolysis by-toxin.（一）生物学性状：（一）生物学性状：4、肉渣培养基中，分解肉渣中的糖类产生大量气体，不分解肉渣呈粉红色。5、汹涌发酵汹涌发酵：在牛奶培养基中分解乳糖使酪蛋白凝固，同时产生大量气体，将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，气势凶猛，称为汹涌发酵。二、产气荚膜梭菌二、产气荚膜梭菌(C.perfringensC.perfringens)（二）致病性：（二）致病性：本菌分为A、B、C、D、E五型。1、致病因素：、致病因素：（1）侵袭性酶：（2）荚膜：（3）外毒素：（4）分解糖类产生大量气体，引起气肿，加重组织坏死。-毒素：卵磷脂酶。引起溶血、细胞坏死、水肿、出血。-毒素：胶原酶。分解胶原组织，使组织崩解。-毒素：DNA酶。降解菌体DNA。-毒素：透明质酸酶。分解透明质酸，利于组织扩散。外毒素：外毒素：12种。种。2、所致疾病：、所致疾病：（1）气性坏疽气性坏疽：局部组织水肿、气肿（捻发音）、剧痛、恶臭；易引起毒血症；（2）食物中毒食物中毒：由产肠毒素的A型引起。肠毒素的作用机理同霍乱肠毒素。感染后8-12 h发病，腹泻、血便，1-2 d自愈，重者致死。（3）坏死性肠炎坏死性肠炎：C型引起。气性坏疽：局部水肿、气肿，大面积组织坏死 全身中毒症状27C.perfringens infection（三）检查防治（三）检查防治：1、清创、扩创、手术切除坏死组织（气性坏疽）。2、多价抗毒素：3-5万单位。3、大剂量青霉素。4、高压氧舱治疗。目前无有效疫苗目前无有效疫苗（一）生物学性状：（一）生物学性状：1、G大杆菌，周鞭毛，无荚膜，芽胞椭圆形，大于菌体横径，位于次极端，呈球拍状。2、严格厌氧 肉渣培养基：使肉渣变黑，有腐败恶臭；蛋黄培养基：菌落周围出现浑浊圈。三、肉毒梭菌三、肉毒梭菌 (C.botulinumC.botulinum)（二）致病性：（二）致病性：致病因素：致病因素：肉毒毒素：外毒素，是已知最剧烈的神经毒物。阻断神经肌接头处神经递质乙酰胆碱的释放，导致肌肉发生迟缓性麻痹。（二）致病性：（二）致病性：所致疾病：所致疾病：（1）肉毒中毒：食入被肉毒梭菌污染的豆制品、发酵面制品、肉罐头等引起。为特殊类型的食物中毒，表现为神经症状，死亡率极高。（2）创伤感染中毒：感染芽孢。（3）婴儿肉毒病：1岁以下婴儿食入肉毒梭菌污染的食物（如蜂蜜）后引起。（三）检查防治（三）检查防治：1、检测肉毒素 食物中毒、婴儿肉毒患者：粪便、剩余食物。分离病原菌，同时检测毒素活性。2、食品卫生管理和监督 A、B、E三型多价抗毒素。（一）生物学性状：（一）生物学性状：1、G粗大杆菌，芽胞呈卵圆形位于菌体近极端。部分菌株有周鞭毛。2、专性厌氧。对培养基的要求较高，常用的培养基是以蛋黄-果糖琼脂为基础培养基，加入环丝氨酸和头孢西丁作为选择剂，分离率低。四、艰难梭菌四、艰难梭菌 (C.difficileC.difficile)艰难梭菌可以产生 A、B两种毒素：*A为肠毒素：能趋化中性粒细胞浸润回肠壁释放细胞因子，导致液体大量分泌和肠壁出血坏死。*B为细胞毒素：能使机动蛋白解聚，损坏细胞骨架，致细胞团缩坏死，能直接损伤肠壁细胞。这两种毒素基因均在染色体上（二）致病性：（二）致病性：致病因素：致病因素：（二）致病性：（二）致病性：所致疾病：所致疾病：抗生素相关性腹泻和假膜性结肠炎。临床表现为严重腹泻、腹痛、伴有全身中毒症状，严重者可危及生命。治疗可用万古霉素或甲硝唑，并口服调整正常菌群的制剂。细菌细菌 致病物质致病物质 致病机理致病机理所致疾病所致疾病破伤破伤风梭风梭菌菌破伤风痉挛毒素毒素进入CNS，阻止抑制性神经介质的释放，造成强直性痉挛（受刺激时伸肌与屈肌同时强烈收缩，肌肉强直痉挛）破伤风产气产气荚膜荚膜梭菌梭菌外毒素和胞外酶肠毒素发酵肌肉组织糖类气体气肿血管通透性水分渗出水肿，组织坏死；水气夹杂捻发感；毒素入血毒血症，休克肠毒素嵌入肠细胞膜，破坏膜离子功能，改变膜的通透性 腹泻气性坏疽食物中毒肉毒肉毒梭菌梭菌肉毒毒素抑制乙酰胆碱释放，弛缓性麻痹 食物中毒婴儿肉毒病艰难艰难梭菌梭菌 毒素 A（肠 毒 素）毒素 B（细胞毒素）毒素A-肠毒素，致粒细胞浸润肠壁：肠液大量分泌、出血性坏死 毒素B-细胞毒素，损坏细胞骨架，损伤肠壁细胞 抗生素相关性腹泻重症：假膜性肠炎 芽孢如梭厌氧长，释放外素毒力强 产气荚膜气坏疽，汹涌发酵解诸糖 肉毒中毒经口入，肌肉麻痹形匙样 破伤风菌像鼓槌，抽搐咬牙角弓张第二节第二节 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌 主要寄生于人体内，尤其口腔、肠道、阴道内最多，占正常菌群的90。G-厌氧菌 G+厌氧菌感染特征感染特征 内源性感染，多以慢性感染或脓肿为主 无特定病型，大多为化脓性感染 分泌物或脓液粘稠，有恶臭 分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养法无细菌生长 常为多种细菌混合感染药敏指导下，正确选用抗菌素药敏指导下，正确选用抗菌素1、细菌毒力：（1）荚膜、菌毛。（2）毒素、胞外酶、可溶性代谢物。（3）改变其对氧的耐受性。一、致病性：一、致病性：2、致病条件：（1）寄居部位改变。（2）菌群失调。（3）机体免疫力降低。（4）局部组织厌氧微环境。4、感染特征：（1）内源性感染，多以慢性感染或脓肿为主。（2）分泌物或粘液带血或黑色，有恶臭。（3）分泌物直接涂片可见细菌，但普通培养法无细菌生长。（4）分泌物直接镜检有菌，但一般培养无菌。（5）常为多种细菌混合感染。（6）使用氨基甙类抗生素无效。3、所致疾病：化脓性感染、局部炎症、脓肿、败血症。二、微生物学检查二、微生物学检查:注意正确标本采集部位，严格无菌操作，避免与空气接触，采集后立即送检。盆腔腹腔胸皮口 机会感染脓恶臭 常规不长耐多药 灭滴红霉效不愁需氧培养需氧培养生长生长兼性厌氧菌兼性厌氧菌标本标本增菌增菌分离培养分离培养挑取菌落挑取菌落肉眼观察肉眼观察染色镜检染色镜检血标本血标本厌氧培养厌氧培养厌氧培养厌氧培养不生长不生长厌氧培养厌氧培养生长生长专性厌氧菌专性厌氧菌形态染色形态染色 菌落特征菌落特征 生化反应生化反应 药敏鉴定药敏鉴定 气相色谱气相色谱 梭菌属梭菌属 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌形态染色 G+大杆菌 有芽胞 G+/G-,球菌杆菌 存在部位 土壤/人和动物肠道 正常菌群分离培养 厌氧培养 厌氧培养 致病条件 外源性感染,内源性感染 外毒素致病,特定病型 条件致病,无特定病型 厌氧伤口/消化道 多为化脓性感染 微生物学检查 特定病型可诊断 必须,药敏试验防治原则 类毒素/抗毒素/抗生素 防止感染条件发生 药敏指导下使用抗生素