种蔬菜基质中不同技术分析农药残留.ppt

5种蔬菜基质中不同技术分析农药残留,2011年11月14日 厦门,样品说明：,1. 样品共包括芹菜、韭菜、豇豆、普通白菜、甘蓝5种蔬菜。 2. 每种蔬菜均有对照品2瓶，每瓶约为5mL；加标样品2瓶， 每瓶约为5mL；以及标样2瓶，每瓶约为1mL。 3. 对照品1、加标样品1和标样1均用甲醇配置，对照品2、加标样品2和 标样2均用丙酮配置。 4. 标样的组分及其浓度见下表： 5. 加标样品中分别添加了上面两组标样。其中标样1中的组分请分别用液相色谱仪和液相色谱-质谱联用仪测定结果；标样2中的组分请分别用液相色谱-质谱联用仪和气相色谱-质谱联用仪测定结果。 6. 液相色谱样品上机之前请自己过膜。,1. 液相色谱分析第一组,仪器配置：1290液相色谱 二元泵（内置脱气机） 自动进样器 柱温箱 DAD检测器,色谱柱：Zorbax Plus C18 2.1100mm，1.8m 流动相：A=水 B=甲醇：乙腈=3:1 梯度表： 运行时间：10min 流速：0.4mL/min 柱温：40 进样量：1L 检测器 溶剂消耗：4mL,标品色谱图10mg/L,Peak1,Peak2,Peak3,Peak4,Peak5,Peak6,Peak7,标品色谱图0.5mg/L,Peak1,Peak2,Peak3,Peak4,Peak5,Peak6,Peak7,芹菜加标样品和芹菜基质色谱图,芹菜加标样品,芹菜样品基质,芹菜样品重叠图,芹菜加标样品,芹菜样品基质,0.5mg/L的标品,峰5处有较强杂质干扰，芹菜基质在此处的峰面积应主要由杂质及空白贡献,韭菜加标样品和韭菜基质色谱图,韭菜加标样品,韭菜样品基质,韭菜样品重叠图,韭菜加标样品,韭菜样品基质,0.5mg/L的标品,峰5处有杂质干扰，韭菜基质在此处的峰面积应主要由杂质及空白贡献,豇豆加标样品和豇豆基质色谱图,豇豆加标样品,豇豆样品基质,豇豆样品重叠图,豇豆加标样品,豇豆样品基质,0.5mg/L的标品,峰5处有杂质干扰，豇豆基质在此处的峰面积应主要由杂质及空白贡献,白菜加标样品H和白菜基质色谱图,白菜加标样品,白菜样品基质,白菜样品重叠图,白菜加标样品,白菜样品基质,0.5mg/L的标品,峰5处有杂质干扰，白菜基质在此处的峰面积应主要由杂质及空白贡献,甘蓝加标样品和甘蓝基质色谱图,甘蓝加标样品,甘蓝样品基质,甘蓝样品重叠图,甘蓝加标样品,甘蓝样品基质,0.5mg/L的标品,峰5处有杂质干扰，甘蓝基质在此处的峰面积应主要由杂质及空白贡献,不同基质中7种农药的定量结果,峰5处有杂质干扰，甘蓝基质在此处的峰面积应主要由杂质及空白贡献,2. LCMSMS分析结果- 第一组,UHPLC HPLC :Agilent 1290 UHPLC series Column : Agilent Plus C18, 2.150mm, 1.8 m Injection Vol. : 5L Flow rate : 0.5 mL/min Mobile phase : A-5mM CH3COONH4 +0.1% FA H2O； B-ACN,QQQ Mass system :Agilent 6460 QQQ Ion source : ESI(+)+Agilent JST Nebulizer : 50 psi Drying gas flow rate : 5L/min Drying gas temperature : 300C Sheath gas : 12L/min Sheath gas temperature :350 C Vcap :3500V Nozzle Voltage : 0,实验条件：,MRM,1ppm标样TIC及MRM提取色谱图,TIC,Solvent Blank,韭菜对照,韭菜加标,豇豆对照,豇豆加标,甘蓝对照,甘蓝加标,芹菜对照,芹菜加标,普白对照,普白加标,标准曲线,采用基质加标单点定量,基质对照添加0.5ppm样品的TIC,LCMSMS单点加标法计算结果：,LC与LCMSMS数据比较,实 验 步 骤,1.将用户提供的 23种100ppm农药混合标样用丙酮逐级稀释成0.25、0.50和1.0ppm 三个浓度水平,分别使用Agilent 6460LCQQQ, Agilent 5975C GCMSD, Agilent 7000系列GCQQQ，依次进样分析。每个浓度水平重复进样两次，以其平均值建立23种农药的标样曲线 2.对五个不同蔬菜品种的添加样在同样分析条件下进行分析，使用步骤1当中建立的标准曲线分别计算23种农药的定量结果 3.根据步骤2计算出来的结果，用每种蔬菜的对照溶液将23种农药混标配置成相同浓度的溶液，再依次进样分析，并用单点法建立标准曲线，然后对已得到的步骤2当中的数据再次进行定量分析,Page 26,第二组农药分析实验,3. LCMSMS分析结果第二组,UHPLC HPLC :Agilent 1290 UHPLC series Column : Agilent Plus C18, 2.150mm, 1.8 m Injection Vol. : 0.2L Flow rate : 0.5 mL/min Mobile phase : A-5mM CH3COONH4 +0.1% FA H2O； B-ACN,QQQ Mass system :Agilent 6460 QQQ Ion source : ESI(+)+Agilent JST Nebulizer : 50 psi Drying gas flow rate : 5L/min Drying gas temperature : 300C Sheath gas : 12L/min Sheath gas temperature :350 C Vcap :3500V Nozzle Voltage : 0,实验条件：,MRM,TIC,Solvent Blank,韭菜对照,韭菜加标,豇豆对照,豇豆加标,甘蓝对照,甘蓝加标,芹菜对照,芹菜加标,普白对照,普白加标,标准曲线,采用基质加标单点定量,基质对照添加0.5ppm样品的TIC,定量结果,4. GCMS分析结果第二组,仪 器 参 数,目标化合物质谱采集信息,23种农药标准谱 SIM 谱图（500 g/L）,敌敌畏（r2=0.999798）,甲拌磷（r2=0.999362）,嘧霉胺（r2=0.999904）,三唑酮（r2=0.999596）,每个浓度水平分别进样三针取平均值,丙酮做溶剂建立标曲计算结果,普通白菜样品加标 SIM 图,芹菜样品加标 SIM 图,豇豆样品加标 SIM 图,甘蓝样品加标 SIM 图,韭菜样品加标 SIM 图,单位：g/L,单点定量结果偏差较大： 豇豆中甲胺磷，单点定量浓度为 941.2ppb。,自配豇豆基质加标,豇豆样品,注：自配豇豆基质加标：在送检的空白豇豆基质中自行加入500ppb标准溶液。,标准曲线定量结果偏差较大： 芹菜中的乐果，当定量离子选为m/z 93时，标曲的定量结果为4524.80ppb。 基质中的干扰离子恰好也有m/z 93，故定量浓度产生了很大误差。,m/z 93,补充说明：在确定芹菜中乐果的保留时间时，分别提取目标离子 m/z 93、125、143及TIC与标准进行比较，最终确定12.689min的峰为乐果。,RT=16.767min,RT=12.689min,m/z 93,m/z 125,m/z 143,TIC,4. GCMSMS分析结果第二组,仪 器 参 数,23种农药保留时间及MRM检测参数,所有23种农药标准曲线的相关系数都很好.这里只显示四种农药作为例子 每个水平都是两次进样的平均值。,乙酰甲胺磷,氧化乐果,乐果,甲基对硫磷,不同蔬菜样品在MRM模式下分析得到的总离子流图,甘蓝,芹菜,甘蓝,芹菜,普通白菜,豇豆,不同蔬菜样品在MRM模式下分析得到的总离子流图,韭菜,不同蔬菜样品在MRM模式下分析得到的总离子流图,由于GCQQQ 能够将大部分样品基质干扰“过滤”掉，所以即使基质干扰相对比较大的韭菜样品,其TIC图与其它品种蔬菜的结果相比也没有明显区别,甘蓝样品23种农药MRM分析结果,芹菜样品23种农药MRM分析结果,普通白菜样品23种农药MRM分析结果,Page 58,豇豆样品23种农药MRM分析结果(不知何故豇豆当中所有农药的响应值都很低）,Page 59,韭菜样品23种农药MRM分析结果,