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肝素钠效价检测方法试剂：羊血浆(冰冻保存)、0.9%生理盐水、0.25%CaCl2 (用生理盐水配置)、8%柠檬酸钠 溶液、8IU/mg肝素钠标准溶液。4.2.2.2 待检样品溶液的配置：精确称取肝素钠固体待检样品M mg，溶解并用0.9%生 理盐水定容至100ml,再取V ml定容至25ml即得待检样品溶液，冷藏保存。估计M及V的计算公式为：样品估计效价XMV/ 100=25X8估算时V只尽量小于10且取整数，从而计算出M值。4.2.2.3 检测方法：将恒温水域调制37C恒温，取出冰冻羊血浆，融化，并过滤，待 用。取2组10只试管，分别加入标样110ul、120ul200ul，然后每管加 入8%柠檬酸钠溶液20ul、0.25%CaCl2 0.8ml及过滤后的羊血浆1ml,另一组 加入待检样品溶液110ul、120ul200ul，同样每管加入8%柠檬酸钠溶液 20ul、0.25%CaCl2 0.8ml及过滤后的羊血浆1ml。并将每只试管盖好管盖， 倒转34次混匀，使内壁湿润，垂直放入37C水域1h1h后取出各管，检 查各管的凝固程度，并记录确定标样及待检样的1/2凝固点及体积。凝固程度标准： 完全凝固：溶液完全凝固，倒转试管并猛敲一下时，凝块不从管壁脱落。 3/4凝固：溶液完全凝固，但当猛敲一下时，凝块能从管壁脱落。 1/2凝固：大约一半体积的溶液凝固。 1/4凝固：少量溶液凝固。 0凝固：溶液悟凝固现象。若相邻两管跳过1/2凝固点则1/2凝固点的计算公式为 V=V2-(V2-V1)X(0.5-S1)/(S2-S1)(S1：小凝固度；S2：大凝固度；V1：相邻两管大凝固度加入的微升数；V2:相邻两管小凝 固度加入的微升数。)待检样品效价计算公式：4.2.2.4 F=待检样品估计效价X标品1 / 2凝固点微升数三样品1 / 2凝固点微升数4.2.2.5注意事项：4.2.2.6.1实验室操作环境必须控制在30C以下。4.2.2.6.2在使用新开启羊血浆前，需检测羊血浆是否能够正常使用。取试管一只，加入 0.8ml 0.25%CaCl2及过滤后的羊血浆1ml，盖好管盖，倒转34次混匀，使内壁湿润， 垂直放入37C水域5min, 5min后检查血浆是否凝固，如血浆凝固则可使用，未凝固则不 能使用。4.2.2.6.3如在检测过程中，标样的1 / 2凝固点高于200ul，则需重新调整羊血浆的1 /2凝固点。方法如下：取3组各10只试管组一：12345678910标样110120130140150160170180190200ul8%柠檬酸钠20202020202020202020ul0.25%CaCl20.80.80.80.80.80.80.80.80.80.8ml羊血浆1111111111ml组二：12345678910标样110120130140150160170180190200ul8%柠檬酸钠 30303030303030303030ul0.25%CaCl20.80.80.80.80.80.80.80.80.80.8 ml羊血浆1111111111ml组三：12345678910标样110120130140150160170180190200ul8%柠檬酸钠 40404040404040404040ul0.25%CaCl20.80.80.80.80.8 0.80.80.80.80.8 ml羊血浆1111111111ml将每只试管盖好管盖，倒转34次混匀，使内壁湿润，垂直放入37C水域lhlh后取出 各管,检查各管的凝固程度，并记录确定标样的1 / 2凝固点及体积。如1 / 2凝固点在llOul 200ul的，即可使用。选值最好在130ul170ul范围内。8%柠檬酸钠需用生理盐水配置。4.2.2效价(羊血浆法) 4.2.2.1、 试剂：羊血浆(冰冻保存)、0.9%生理盐水、0.25%CaCl2 (用生理盐水配置)、 8%柠檬酸钠溶液、8IU / mg肝素钠标准溶液。4.2.2.2 待检样品溶液的配置：精确称取肝素钠固体待检样品M mg，溶解并用0.9%生理盐水定容至100ml,再取V ml定容至25ml即得待检样品溶液，冷藏保存。估计M及V的计算公式为：样品估计效价XMV/ 100=25X8 估算时V只尽量小于10且取整数，从而计算出M值。4.2.2.3 检测方法：将恒温水域调制37C恒温，取出冰冻羊血浆，融化，并过滤，待 用。取2组10只试管，分别加入标样110ul、120ul200ul，然后每管加入8%柠檬酸钠 溶液20ul、0.25%CaCl2 0.8ml及过滤后的羊血浆1ml,另一组加入待检样品溶液110ul、 120ul200ul，同样每管加入8%柠檬酸钠溶液20ul、0.25%CaCl2 0.8ml及过滤后的羊 血浆1ml。并将每只试管盖好管盖，倒转34次混匀，使内壁湿润，垂直放入37C水域 1h1h后取出各管，检查各管的凝固程度，并记录确定标样及待检样的1/2凝固点及体 积。4.2.2.4 凝固程度标准： 完全凝固：溶液完全凝固，倒转试管并猛敲一下时，凝块不从管壁脱落。 3/4凝固：溶液完全凝固，但当猛敲一下时，凝块能从管壁脱落。 1/2凝固：大约一半体积的溶液凝固。 1/4凝固：少量溶液凝固。 0凝固：溶液悟凝固现象。 若相邻两管跳过1/2凝固点则1/2凝固点的计算公式为V=V2-(V2-V1)X(0.5-S1)/(S2-S1)（S1：小凝固度；S2：大凝固度；VI：相邻两管大凝固度加入的微升数；V2:相邻两管小凝 固度加入的微升数。） 4.2.2.5待检样品效价计算公式：F=待检样品估计效价X标品1 / 2凝固点微升数三样品1 / 2凝固点微升数 4.2.2.6注意事项：4.2.2.6.1实验室操作环境必须控制在30C以下。4. 2. 2. 6. 2在使用新开启羊血浆前，需检测羊血浆是否能够正常使用。取试管一只，加入0.8ml 0.25%CaCl2及过滤后的羊血浆1ml，盖好管盖，倒转34次混匀，使内壁湿润， 垂直放入37C水域5min, 5min后检查血浆是否凝固，如血浆凝固则可使用，未凝固则不 能使用。4.2.2.6.3如在检测过程中，标样的1 / 2凝固点高于200ul,则需重新调整羊血浆的1/ 2凝固点。方法如下：取3组各10只试管组一：12345678910标样110120130140150160170180190200ul8%柠檬酸钠20202020202020202020ul0.25%CaCl20.80.80.80.80.80.80.80.80.80.8ml羊血浆1111111111ml组二：12345678910标样110120130140150160170180190200ul8%柠檬酸钠 30303030303030303030ul0.25%CaCl20.80.80.80.80.80.80.80.80.80.8 ml羊血浆1111111111ml组三：12345678910标样110120130140150160170180190200ul8%柠檬酸钠 40404040404040404040ul0.25%CaCl20.80.80.80.80.8 0.80.80.80.80.8 ml羊血浆1111111111ml将每只试管盖好管盖，倒转34次混匀，使内壁湿润，垂直放入37C水域1h1h后取出 各管,检查各管的凝固程度，并记录确定标样的1 / 2凝固点及体积。如1 / 2凝固点在110ul 200ul的，即可使用。选值最好在130ul170ul范围内。8%柠檬酸钠需用生理盐水配置。
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