蛋白质的定量测定方法PPT学习教案

会计学1蛋白质的定量测定方法蛋白质的定量测定方法第1页/共24页第2页/共24页【实验材料】第3页/共24页用少量蒸馏水完全溶解后，转移至100毫升容量瓶中，准确稀释至刻度，使蛋白质浓度1mg/mL。 (4)样品溶液：配制约的酪蛋白溶液作为未知样品溶液。第4页/共24页【实验操作】1. 绘制标准曲线取7支试管，按下表分别加入各试剂 各管加入Fo1in酚试剂乙后，立即摇匀，放置30分钟后比色，在500nm处记下各管光密度，以0号管为对照，以光密度为纵坐标，标准蛋白质溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。2. 测定未知样品：取2支试管，分别准确吸取1毫升样品溶液，各加5毫升Fo1in酚试剂甲，摇匀，室温放置10分钟后，再各加1毫升Fo1in酚试剂乙，立即摇匀，放置30分钟，在500nm处测定光密度值。【实验结果】根据未知样品溶液的光密度值，在绘制好的标准曲线图中查出样品溶液中的蛋白质含量。第5页/共24页第6页/共24页第7页/共24页第8页/共24页第9页/共24页第10页/共24页第11页/共24页第12页/共24页第13页/共24页第14页/共24页 4.滴定：用L的标准盐酸溶液滴定各锥形瓶中收集的氨量，硼酸指示剂溶液由绿色变淡紫色为滴定终点。第15页/共24页第16页/共24页第17页/共24页第18页/共24页第19页/共24页第20页/共24页第21页/共24页管号管号标准蛋白溶液（m）00.20.40.60.81.0蒸馏水（m）1.00.80.60.40.20考马斯亮蓝（m）555555蛋白质含量（g）020406080100第22页/共24页 2.样品测定 准确吸取样品溶液于一支干燥洁净的试管中，加入考马斯亮蓝G250试剂5mL，摇匀，室温静置2min，以标准曲线1号管为对照，在595nm处比色，记录吸光值。第23页/共24页