HPV分子生物学与宫颈病变病理诊断学习教案

会计学1HPV分子生物学与宫颈病变病理诊断分子生物学与宫颈病变病理诊断第一页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第1页/共57页第二页，编辑于星期六：十三点 四十八分。基对。分为早期区，晚期区和长控区。Human papillomavirus（HPV）第2页/共57页第三页，编辑于星期六：十三点 四十八分。早期转录区：参与病毒DNA的复制，转录，翻译，调控和细胞转化。晚期转录区：编码病毒的衣壳蛋白。上游调控区：又称长控区，通过与转录因子的相互作用调节早期区基因的转录，参与病毒复制，转录的调控。第3页/共57页第四页，编辑于星期六：十三点 四十八分。HPVHPV基因组基因组早期转录区E1涉及病毒DNA复制，在病毒起始复制中起关键作用E2抑制病毒转录复制，E2失活直接导致E6，E7过度表达E4与病毒成熟胞浆蛋白有关，破坏胞浆中间细丝（纤维）， 促进病毒颗粒释放E5位于E2下游，通过细胞生长因子受体激活上调控E6促进P53过早降解而抑制P53功能，并能阻止和干扰细胞凋亡，引起细胞无限增生并向恶性转化E7通过抑制pRB而消除细胞周期阻滞，导致细胞周期失控而发生永生化晚期转录区L1主要衣壳蛋白，LI:L2大约30:1L2次要衣壳蛋白长控区URR或LCR调节基因转录第4页/共57页第五页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第5页/共57页第六页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第6页/共57页第七页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第7页/共57页第八页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第8页/共57页第九页，编辑于星期六：十三点 四十八分。HPV自然生活史（游离状态）第9页/共57页第十页，编辑于星期六：十三点 四十八分。起细胞无限增生并向恶性转化。n E7与pRB结合，使E2F得以释放，从而使细胞周期由G1期向S期转化，细胞周期失控而发生永生化。n E6，E7编码的原癌蛋白表达，导致人类染色体端粒体酶逆转录酶基因（hTERC）扩增，维持端粒长度，细胞永生，免于凋亡，发生癌变。HPV致癌机制（整合状态）第10页/共57页第十一页，编辑于星期六：十三点 四十八分。一过性一过性HPV感染感染持续性持续性HPV感染感染HPV病毒病毒正常宫颈初次感染清除HPV感染的宫颈进展逆转癌前病变宫颈癌浸润中度细胞学异常第11页/共57页第十二页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第12页/共57页第十三页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第13页/共57页第十四页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第14页/共57页第十五页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第15页/共57页第十六页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第16页/共57页第十七页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第17页/共57页第十八页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第18页/共57页第十九页，编辑于星期六：十三点 四十八分。LSIL ASC-US第19页/共57页第二十页，编辑于星期六：十三点 四十八分。ASC-US第20页/共57页第二十一页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第21页/共57页第二十二页，编辑于星期六：十三点 四十八分。HSIL第22页/共57页第二十三页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第23页/共57页第二十四页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第24页/共57页第二十五页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第25页/共57页第二十六页，编辑于星期六：十三点 四十八分。n3.全层细胞密度增加，极性紊乱，丧失正常的组织结构。n4.表层细胞不出现典型的挖空细胞形态。第26页/共57页第二十七页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第27页/共57页第二十八页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第28页/共57页第二十九页，编辑于星期六：十三点 四十八分。HPV-DNA检测第29页/共57页第三十页，编辑于星期六：十三点 四十八分。HC2（不分型）第30页/共57页第三十一页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第31页/共57页第三十二页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第32页/共57页第三十三页，编辑于星期六：十三点 四十八分。DA8000全自动核酸分子杂交仪第33页/共57页第三十四页，编辑于星期六：十三点 四十八分。性者，一年后复查HPV-DNn和细胞学。第34页/共57页第三十五页，编辑于星期六：十三点 四十八分。HPV 的E6、E7是病毒癌基因，它们的翻译产物介导抑癌基因p53和Rb的降解，从而干扰细胞周期调节。如若癌基因没有表达，则细胞本身不会发生癌变。 E6蛋白能与细胞内 E6相关蛋白 ( E6 AP)形成复合物 ,特异性地结合 p53,并通过依赖蛋白酶系统将其水解 ,使其对细胞生长负调节功能丧失 ,从而引起细胞无限增生并向恶性转化。 E7蛋白是 HPV的主要转化蛋白 ,与控制细胞周期有关的肿瘤抑制蛋白视网膜母细胞瘤蛋白 (Rb)亲和力极高 . E7与 Rb结合使 Rb E2F复合物解离 , E2F被游离 ,从而发挥其转录因子的作用 ,导致细胞周期失控而发生永生化。 HPV E6/E7mRNA 在宫颈组织中表达，说明HPV 病毒表达出癌基因活性。 第35页/共57页第三十六页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第36页/共57页第三十七页，编辑于星期六：十三点 四十八分。人体的细胞周期包括G1，S,G2，M四个时相，且存在多个检查点调节各时相点的转换及细胞周期进程。其中以G1S期最为重要，因为细胞一旦从G1期进入S期，则不再依赖外界信息刺激而很快自动完成分裂过程，因此G1卡点可以决定细胞继续增值或进入G0期或离开细胞周期进入终末分化或死亡。细胞周期卡点的转换受控于“细胞周期蛋白（cyclins）-细胞周期依赖性激酶（cdks）-细胞周期依赖性激酶抑制因子（clks）”这组分子网络。研究最为广泛的一组是：Cyclin D1/cdk4/P16。P16在细胞周期G1卡点中与CyclinD1竞争结合cdk4并特异性抑制其活性，组织细胞尤其是带有损伤DNA的细胞进入S期，从而控制细胞分裂。第37页/共57页第三十八页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第38页/共57页第三十九页，编辑于星期六：十三点 四十八分。P16第39页/共57页第四十页，编辑于星期六：十三点 四十八分。P16第40页/共57页第四十一页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第41页/共57页第四十二页，编辑于星期六：十三点 四十八分。n3.Ki-67用于CIN的鉴别诊断，主要用于萎缩性病例，而对反应性改变，化生性改变，修复性改变意义不大（细胞增殖指数也很高）。第42页/共57页第四十三页，编辑于星期六：十三点 四十八分。Ki-67第43页/共57页第四十四页，编辑于星期六：十三点 四十八分。hTERC:宫颈细胞由非典型性发育异常向宫颈癌转变的过程中几乎都伴有3号染色体长臂扩增。其中，涉及到的最重要的基因可能是人类染色体末端酶（hTERC）基因。该基因的扩增可阻止细胞凋亡，因而可导致肿瘤产生。现已得知，3号染色体长臂扩增能准确区分宫颈细胞高度癌前病变与低度癌前发育异常，鉴别诊断的敏感性及特异性均在90%以上 第44页/共57页第四十五页，编辑于星期六：十三点 四十八分。端粒酶活性端粒影响影响影响影响与细胞凋亡密切相关与细胞凋亡密切相关hTERC基因状态第45页/共57页第四十六页，编辑于星期六：十三点 四十八分。TBSTBS分级分级正常正常/ /炎症炎症ASCUSASCUSASC-HASC-HLSILLSILHSILHSILTERCTERC基因扩增发生率（基因扩增发生率（% %）4.64.613.513.528.628.625.225.287.787.7病理分级病理分级正常正常/ /炎症炎症CIN 1CIN 1CIN 2CIN 2CIN 3CIN 3原位癌原位癌TERCTERC基因扩增发生率（基因扩增发生率（% %）4.24.27.37.369.269.285.185.195.795.7hTERC检测的意义第46页/共57页第四十七页，编辑于星期六：十三点 四十八分。48ASCUSCIN1CIN2/3TERC 基因基因ASCCIN1LSIL与HSIL的辅助判断指标第47页/共57页第四十八页，编辑于星期六：十三点 四十八分。CSP3TERChTERChTERC基因定位于基因定位于3q26.33q26.3 3 3号染色体着丝粒信号号染色体着丝粒信号第48页/共57页第四十九页，编辑于星期六：十三点 四十八分。扩增hTERC基因检测（fish）第49页/共57页第五十页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第50页/共57页第五十一页，编辑于星期六：十三点 四十八分。HPV流行病学第51页/共57页第五十二页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第52页/共57页第五十三页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第53页/共57页第五十四页，编辑于星期六：十三点 四十八分。的病毒感染或相关病变。n治疗性疫苗需要进一步研制。第54页/共57页第五十五页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第55页/共57页第五十六页，编辑于星期六：十三点 四十八分。第56页/共57页第五十七页，编辑于星期六：十三点 四十八分。