菌种的提纯与复壮知识.ppt

菌种的提纯与复壮,尤昌建,长期使用某一品种栽培，或对品种保存、管理不当，会造成该品种的退化和老化，因此对菌种必须进行经常的提纯复壮工作。菌种的退化和老化有两种不同的含意。退化是指某一良种遗传性状发生改变，造成产量下降的现象。一个优良品种在长期栽培过程中，由于环境条件的逆境，病虫害的侵袭，化学药物的杀伤，管理不当，多次的转管造成人为的创伤的增多，影响菌种遗传性状的变异或突变，从而改变了菌种原有的遗传特性，造成退化现象；其次，在实践中往往是几个品种在同一环境下培养，它们之间的自然杂交率也是很高的，品种的自然杂交也会引起菌种的不纯。老化是指菌种菌龄过长，使菌丝体衰老，生活能力下降，抗病能力减弱，吃料慢，长势弱，出菇少，畸形多等种种现象。,菌种提纯复壮途径,1、分离筛选：采用组织分离法及基质菌丝分离法获得母种，经转管纯化后做栽培试验，进行产量、质量比较，选优去劣。2、育种：通过杂交育种、诱变育种、原生质体融合技术培育新品种。3、加强管理：加强菌种保存工作，创造条件使其处于休眠状态，严格控制转管次数，防止菌种退化、老化。,4、注意菌种的选用：选用菌龄适中的菌丝体扩繁，取试管菌种时应避开试管边缘和接种点附近的菌丝，应挑取它们中间部分菌丝，最好是挑基质菌丝接种；取原种时去掉瓶口表面菌膜、老菌丝、子实体原基和菌蕾，尽量挑取瓶中间部分的菌丝接种，达到选优复壮的目的。5、采用液体菌种：液体菌种培养条件容易控制，生长速度快，培养时间短，生命力强，菌龄一致，杂菌污染少，操作方便又起到了防止退化的作用。6、改善营养成份：首先改换培养基主料成份，使菌种吸收不同的营养成份，促进复壮。食用菌的复壮可以用豆芽、棉籽皮、甘薯、玉米粉等等代替马铃薯或者采用马铃薯培养基和上述培养基交替使用，复壮效果更好。其次是在培养基中添加各种辅料，使菌丝生长健壮。如在培养基内加入适量的麦芽糖、谷氨酸、柠檬酸、酵母膏等有机营养，或加磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、硫酸锌、铜、钴、锰等无机营养，对防止菌丝老化是有益的。,菌种复壮,由于环境条件和营养条件的暂时改变，常引起菌种退化(大多是非遗传变异)。菌种复壮是针对菌种退化而采取的一种防止措施。从广义上讲，菌种复壮并不单纯只限于采取一些防止退化的措施，也含有不断提高菌种纯度，提高优良种性(高产、优质、抗逆性强)的含义。,1防止菌种退化的措施,控制菌种传代次数。菌种退化性的变异，是在繁殖过程中发生的，因此，减少传代次数可以防止退化。母种的传代扩接应控制在3次以内，扩接次数愈多，后代的生活力就愈衰退。原种个栽培种也应尽量减少传代次数。优化菌种培养和保藏的环境条件。菌种退化这有是基因突变引起的，基因突变与环境条件、代谢产物有关。一般突变比率随温度降低而减少，因此，应采用低温(04)条件保藏菌种。另外，用木屑或枝条培养基保藏菌种，扩接后，成活率高，菌丝生长健壮，也是防止菌种退化的有效措施之一。,对已开始退化菌种的复壮措施,改善营养条件大多菌种退化是由于营养条件的改变或缺乏而引起的，一但营养条件得到改善，就可以恢复原来优良的性状。实践中常用的是采用加富营养的办法，即除一般培养基成分外，需在加蛋白胨25克，酵母膏0.52克，牛肉膏2.5克，维生素B10.010.05克，必要时可加入适量的复合B族维生素和微量蜂王浆。待菌种恢复良好性状后，再移植到普通培养基上。经常分离纯化菌种如果菌种退化原因是屑纯种不纯，即已退化的菌株占了优势，应进行纯种重新分离。生产上使用的菌种，每年要重新分离一次，选具有典型优良性状的子实体进行组织分离、培养。也可每年进行一次孢子分离，通过有性繁殖来发现好的菌株，再用组织分离来巩固这些优良菌株的遗传性。,菌球形态,菌种长好后会看到菌瓶内充满大小均匀，活力旺盛，毛刺明显的大量菌球，静置X分钟后菌球占菌液浓度的X以上或不分层，若菌球很少或大小不一值可能是质量有部题。,判断菌种的质量,菌液澄清度,菌液中除菌球以外，无其它固形物，菌液由前期的微浑浊变的澄清透明，多数是浅黄色或橙黄色,如变的浑浊不清则很可能是染菌,判断菌种的质量,菌液气味,到培养后期菌液的糖香味会逐渐消失，取而代之的是或有或无的菌种特有的清香味，若有臭味、酸味、霉味则可能是染菌。,判断菌种的质量,若依以上指标还不能判断菌种的质量，还可以将菌种放在XXC的条件下静置X小时左右，若表层菌种萌发明显且无其它顏色的孢子则多为正常。,