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淮北师范大学 2012届学士学位论文 青钱柳的生物学特征及其开发利用学院、专业 生命科学学院生物科学专业 研 究 方 向 植物生态学 学 生 姓 名 学 号 指导教师姓名 指导教师职称 讲师 2012年 5 月 25 日11青钱柳的生物学特性及其开发利用生命科学学院2012届毕业生 指导教师: 摘 要:青钱柳是我国特有的单种属乔木植物,是国家重点保护的濒危植物之一。本文简述了青钱柳的地理分布、形态特征和生长特性,并对其叶进行了化学成分的分析,从根本上解释了青钱柳的绿色纯天然药用保健价值。对于资源培育方面,本文介绍了有性繁殖的播种苗培育技术和无性繁殖的扦插繁殖和组织培养技术,同时对青钱柳的人工林培育作了简要的介绍,包括青钱柳苗优良品种的筛选、青钱柳种子休眠的解除、青钱柳苗木的快繁技术和无性系化、青钱柳人工林的定向培育模式、青钱柳次生代谢产物的离体细胞培养技术。最后介绍了利用青钱柳的资源来开发研究的新型甜味剂和新型保健品、药物,并对青钱柳的未来研究做了展望。本文旨在为青钱柳的研究以及未来的开发利用和产业化经营提供参考。关键词:青钱柳;资源培育;生物活性The Biological Characteristics and Its Development and Use of Cyclocarya PaliurusZhang BoSchool of Life Science 2012 Graduatesof Huaibei Normal UniversitySupervised by Zhang Xing-wang, InstructorAbstract:Cyclocarya paliurus is Chinese unique single species trees plant, is one of the national key protective endangered plants. This article simply introduces the geographical distribution of Cyclocarya paliurus, the orphological characteristics , growth characteristics and analyses its chemical composition ,which fundamentally explained the green pure natural and health care medicinal value of Cyclocarya palsiurus . For the aspect of resource cultivation, this paper briefly introduces the sexual reproductive seeding plant cultivation technology,asexual reproduction cutting propagation technology and tissue culture technique ,at the same time on paliurus forest plantation cultivation are briefly introduced, including the screening of good varieties of Cyclocarya paliurus、dormant removal of seed of Cyclocarya paliurus fast propagation technology and cloning of Cyclocarya paliurus artificial forest oriented cultivation mode of Cyclocarya paliurusin vitro cell culture technique of secondary metabolite of Cyclocarya paliurus . At last, the paper introduces that using the Cyclocarya paliurus resources to develop new sweetener and new health care products , medicines,and do prospect for future resarch of Cyclocarya paliurus.This paper aims to be the Cyclocarya paliurus research ,future development and the industrial management to provide the reference.Keywords:Cyclocarya paliurus;Resources silviculture;Bioactivities目 录引言11、青钱柳的生物学特性11.1生态学特性11.2形态学特性12、青钱柳的繁殖特性22.1有性繁殖22.2无性繁殖32.2.1扦插繁殖32.2.2组织培养33.青钱柳叶的化学组成33.1无机成分33.2有机成分43.2.1黄酮类43.2.2多糖43.2.3三萜类43.2.4有机酸类53.2.5氨基酸53.2.6其他成分54.青钱柳的药用保健价值54.1药用功能54.1.1降血压作用54.1.2降血糖作用54.1.3降血脂作用64.2 保健作用64.2.1增强机体免疫力的作用64.2.2抗氧化、防衰老作用74.2.3抗疲劳作用75.青钱柳的人工林资源培育及开发利用75.1青钱柳的人工林资源培育75.1.1青钱柳优良品种的筛选75.1.2青钱柳种子休眠的解除75.1.3青钱柳苗木的快繁技术和无性系化85.1.4青钱柳人工林的定向培育模式85.1.5青钱柳次生代谢产物的离体细胞培养技术85.2青钱柳的新产品开发85.2.1开发新型的甜味剂85.2.2研究和开发新型的保健品和药物8结语9主要参考文献9致谢11引言青钱柳(Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinskaja)又名青钱李、山沟树(浙江)、摇钱树等,系胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属植物,是我国特有的单种属植物,国家重点保护濒危植物之一,属三类保护植物。青钱柳是一种高达速生乔木,奇数羽状复叶。广泛分布于我国的亚热带地区如江西、浙江、安徽、台湾等地的海拔4202500m的山区、溪谷或石灰岩山地1。根据中国中药志要的记载2:其树皮、树叶具有清热解毒、止痛功能,可用于治疗顽癣,长期以来民间用其叶做茶。对青钱柳的研究最早始于20世纪70年代末,江西省农牧厅等单位在开展农业资源调查时,发现在江西某山区生活的农民中有许多长寿老人,而他们都以当地特有的植物叶子泡茶饮用,该植物经庐山植物园专家鉴定为青钱柳。该茶甘甜滋润、生津止渴,具清热解暑、防病治病等功效。80年代初,一些以青钱柳叶为主要原料的初级保健品陆续上市,经国内一些大专院校科研机构及医院初步的动物及临床实验,表明由青钱柳为原料制成的产品确实具有多种对人体有利的生理和药理功能。另外,青钱柳树姿优美,果似铜钱,可以作为优良观赏绿化树种及造林树种。目前,关于青钱柳的生物学特性、化学成分、资源培育、药用保健功能等方面的研究先后取得了一些重要的进展。1、青钱柳的生物学特性1.1生态学特性青钱柳产于长江以南,分布范围很广,南至华南,东达台湾,西至西南,多生于海拔4202500m的山区、溪谷或石灰岩山地。树大喜光,幼苗稍耐阴,喜生于温暖、湿润、肥沃、排水良好的酸性红壤或红黄壤之上,适生于适度较大的环境中,在土壤干旱瘠薄的地方生长不良。青钱柳根系发达,主侧根多分布于4080cm土层中。每年有大量的凋谢物,分解速率高,是良好的肥料树种,与常绿针叶树种混合造林后,可改善土壤结构,提高土壤肥力,并能充分发挥涵养水源的功能。青钱柳常与银鹊属、大叶楠、青冈、紫楠、香槐等混生,组成常绿与落叶阔叶混交林群落3。青钱柳树干通直,常处于林分林冠上层,自然整枝良好。高1030m,胸径30cm左右,花期45月,果期79月。1.2形态学特性青钱柳为落叶大乔木,裸芽被褐色腺鳞,奇数羽状复叶,小叶79枚,革质椭圆形,先端钝或突尖,侧生小叶基部偏歪,边缘有细锯齿,上面中脉密被淡褐色毛及腺鳞,下面有腺鳞,沿叶脉有毛。叶表皮有许多小乳突,腺毛,盾状鳞片和非腺毛表皮毛;气孔器不规则型,仅分布于下表面;靠近表皮的叶肉组织中有规律地分布含簇晶的细胞;主脉中维管组织环状,封闭,具有一个副维管束;二级脉在叶缘内分支,相互连接形成脉环,三级脉及顶型,脉间区充满分支的自由结束的小细脉4。花单性,雌雄同株,雄柔荑花序24条成一束集生在短总梗上,雌柔荑花序单独顶生。果序轴长2530cm,果实为坚果,扁球形,径约7mm,中部围有水平方向的革质圆盘状翅,似铜钱,径2.56cm,顶端有4枚宿存花被片及花柱,10余枚果实串在一起,层层叠叠,颜色碧绿。2、青钱柳的繁殖特性目前,现有的青钱柳资源主要是天然林,不仅数量少,而且多零星分布于深山老林和一些自然保护区中,国内尚无大量人工繁殖和栽培青钱柳的成功经验,也很少有关这方面的研究报道,影响了青钱柳的开发利用和产业化进程。因此,为了加速青钱柳的开发利用进程,探索与解决其人工林资源的培育问题十分重要,对青钱柳繁殖技术研究的探索主要包括有性繁殖和无性繁殖。2.1有性繁殖青钱柳的繁殖以有性繁殖为主。青钱柳果实为坚果,通称种子,呈扁球形,形如铜钱。青钱柳种子的种壳坚硬,种子具有深的休眠特性,一般播种后需隔年甚至两年后萌发,自然发芽率低,仅为0.1%0.2%。有学者推测,青钱柳种子休眠的主要原因是果壳骨质,妨碍水分和氧气的吸收。史晓华等 5 研究指出:青钱柳种子坚硬外壳是导致其强迫休眠的主要原因,它既束缚了种胚,又影响力了透气性,但仍具有透水性;其次,种子还存在生理休眠。杨万霞 6 研究指出:青钱柳种子属于综合性深休眠类型,种皮表面角质化,中种皮木栓质,内种皮木质而坚硬,在一定程度上阻碍了胚与外界的水气交换;同时,种皮内积累了大量的抑制物质,使幼胚进入深度休眠状态。人工处理可以大大提高种子的发芽率,史晓华等5在研究了青钱柳种子的休眠和萌发机理的基础上,认为酸蚀、赤霉素、低温层积对打破种子休眠,提高发芽率。史晓华用浓硫酸处理9h后,经500mg/L GA3溶液浸种,并用拌有500mg/L GA3溶液的湿沙层积一冬,当温度达到25时,则其发芽率可达87.5%。王家源用浓硫酸处理10h,清水浸种48h,用层积基质为400mg/kg赤霉素浸拌的湿沙层积120d后,发芽率可达95%以上。通过研究,目前已经研制出了解除青钱柳种子休眠的技术,实现了头年采种,翌年出苗的目标,但在实际生产中应根据实际情况来选择一个最佳处理措施。 2.2无性繁殖无性繁殖技术长期以来一直被采用,尤其是现代备受关注,主要是由于它能够保持繁殖母体的遗传性,可以克服某些树种因种子休眠问题而带来的一系列困难。青钱柳种子发育差,自然更新能力弱。在筛选的基础上,如何使这些稀缺的优良种资源快速繁殖和无性系化,也是急需研究和解决的技术关键。当前,青钱柳进行的无性繁殖方法主要有扦插和组织培养,但相关的研究报道极少。2.2.1扦插繁殖 青钱柳属于极难生根树种,人工扦插技术报道很少。宋祖祥7自1993年开始对青钱柳的扦插繁育进行了大量的试验,但未取得突破,扦插成活率近于零;夏小华等用ABT生根粉处理扦插成活率仅为2%,用QI生根粉处理,扦插成活率为16%,用QInc生根粉处理的扦插成活率最高,也只达到了41%。可见在扦插研究中应加强生根调节剂的使用、母树的年龄、枝条发育的程度以及扦插环境条件等因子对其生根影响的研究,优化出提高扦插成活率的配套措施。2.2.2组织培养 青钱柳的组织培养工作已受到众多科研工作者的重视,建立优良种质稳定的组织培养体系意义重大,但就目前的具体情况来看,大部分处于初步探索阶段。胡冬南等8以青钱柳一年生嫩枝茎段为外植体诱导出了愈伤组织,且诱导过程中无褐化现象,BA对愈伤组织的形成起了至关重要的作用,但进一步诱导形成不定芽,效果不理想。尚旭岚等9以青钱柳离体胚为材料,采用正交实验设计对影响其萌发、快速成苗的各种因素进行研究,并进行了诱导增值实验。结果表明:基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和成苗最关键的因素,同时GA3对解除青钱柳离体胚的休眠、促进萌发有显著效果。通过诱导和增值培养,获得了一定数量的丛生芽,但未获得再生植株。以后的组织培养工作,需要解决的问题很多,如:器官发生途径的探索、愈伤组织的进一步诱导、防止外植体褐化等等,应继续深入研究,为青钱柳的产业开发利用做好技术储备。3.青钱柳叶的化学组成近年来对青钱柳进行了大量的化学成分分析研究,研究发现,青钱柳所含成分主要分为两种:一种是无机营养成分,一种是有机营养成分如黄酮类化合物、多糖、三萜、酚酸、氨基酸等。其中芽叶活性成分含量是其它部位的815倍。3.1无机成分青钱柳中不仅含有人体所必需的钾、钙、磷等常量元素,而且还含有对人体有保健作用的微量元素如锰、铁、铜、铬、锌、硒、钒、锗等,与糖代谢和胰岛素作用密切相关的元素Ni、Cr、V、Se的含量较高,其中Ni、Cr、V的含量大约为传统茶叶的10倍。同时李磊等10人还发现了稀土元素,并通过采用微波辅助技术-电感耦合等离子体质谱法研究了青钱柳中稀土元素(REEs)的组成、含量。结果为:青钱柳中含有所研究的15中稀土元素。La、Ce、Y、Pr、Nd、Gd、Sm、Dy等8中元素含量相对较高,占稀土元素总量的96.7%。3.2有机成分3.2.1黄酮类 目前从青钱柳叶中分离得到的黄酮类化合物主要为黄酮醇及其黄酮醇苷类。易醒等11从青钱柳叶中分离得到山奈酚、槲皮素和异槲皮苷3个黄酮单体化合物。通过反相高效液相色谱法梯度洗脱同时测定水提液和醇提液中这三种黄酮类成分的含量并进行比较,结果其各自的含量没有明显的区别。李俊等12从青钱柳叶中得到山奈酚-7-O-L-鼠李糖,山奈酚-4-甲醚-7-O-D-甘露糖。张晓瑢等13从青钱柳叶的乙醇提取物中分离得到3-O-D-吡喃葡萄醛酸苷。舒任庚等14从青钱柳正丁醇部位得到黄酮类化合物,分别为槲皮素-3-O-L-鼠李糖苷、3-O-咖啡酰基奎宁酸丁酯。谢明勇等15对青钱柳叶中的黄酮苷含量进行测定后,与茶叶中的黄酮苷化合物含量相比较,发现青钱柳中的含量高于茶叶。陈金华等16通过对不同产地的青钱柳叶中化学成分的测定,发现湖南省绥宁县的青钱柳叶中的总黄酮含量比江西省修水县的高,其利用价值更高。3.2.2多糖 青钱柳多糖类化学成分近年来成为科学家研究的热点。李磊等17通过采用超声波萃取,从青钱柳中提取到一种多糖复合物,经动物实验证明该多糖复合物为降血糖的主要成分。谢建华18通过优化实验方案,首次从青钱柳叶中分离得到青钱柳多糖CP-、CP-和CP-,之后又从中性多糖中分离得到青钱柳多糖CPC-和CPC-。通过对CPC-进行化学组分和摩尔分析,结果显示它的组成成分有:L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖。同时经过药理实验表明:CP-、CP-、CP-和CPC-均具有较强的清除自由基作用。对不同时期采样的青钱柳叶中多糖质量分数进行测定,结果显示在58月的多糖质量分数为2.19%。陈金华等16人研究发现湖南省绥宁县和江西省修水县的青钱柳叶中多糖含量接近。3.2.3三萜类 1992年首次从青钱柳中分离得到甜茶树甙A。1995年,舒任庚等14从青钱柳叶提取物亲脂性部分分离出青钱柳甙、青钱柳甙、青钱柳甙。这些化合物均为达玛烷型三萜皂甙,这都是首次从自然界得到的,为胡桃科独有。谢明勇等19人从青钱柳叶中分出了4个五环三萜成分,分别为:2-羟基熊果酸、青钱柳酸B、Arjunolic acid和青钱柳酸A。其中Arjunolic acid、青钱柳酸A、青钱柳酸B为齐墩果烷型五环三萜类化合物,2-羟基熊果酸为乌斯烷型五环三萜类化合物。05年从青钱柳的低极性部位分离得到齐墩果酸、乌苏酸和Epikatonic Acid 3个三萜类成分。从青钱柳叶中分的两种青钱柳酸甙B和青钱柳酸甙C。陈金华等16人的研究表明,不同地区的青钱柳叶中皂苷的含量接近,采用甲醇回流提取可以较大程度地将样品中的皂苷提取出来,比乙醚脱脂加乙醇回流提取效果好。3.2.4有机酸类 李俊等20在对青钱柳叶的75%乙醇提取物的氯仿萃取部分进行分离,利用柱层析、硅胶薄层层析和Ssphadex LH-20柱层析发,分离得到-乳香酸、-乳香酸和4-羟基-3-甲氧基苯甲酸3种有机酸,并为首次从该植物中分离得到。舒任庚等14利用柱色谱等方法从青钱柳嫩叶中提取物中分离到6个酚类化合物,分别是:原儿茶酸、香草酸、反式对羟基桂皮酸、岩白菜内酯、3-O-(E-4-coumaroyl)-quinic acid 和5-O-(E-4-coumaroyl)-quinic acid。此外,从青钱柳中分离得到的酚类还有没食子酸、儿茶素苯甲酸等。3.2.5氨基酸 谢明勇等19对青钱柳干叶中的蛋白质质量分数进行研究,采用柱前衍生法测定了青钱柳叶中水解蛋白质的氨基酸组成与质量分数,结果显示青钱柳干叶的蛋白质含量为17.7%,氨基酸种类达到17种,人体所必须的八种氨基酸中,除色氨酸未检测出和蛋氨酸含量较低,其余六种氨基酸含量均较丰富。但不同地区样本中,六种氨基酸含量多少不同,存在一定的差异。3.2.6其他成分 此外,青钱柳中还含有维生素A、维生素E、香豆素、蒽醌、内酯、胡萝卜素及胡萝卜苷、-谷甾醇、-香树脂醇、-香树脂酮、棕榈酸、硬脂酸、山俞酸、肌醇等化合物21。4.青钱柳的药用保健价值4.1药用功能青钱柳茶是中国名贵滋补保健药材,现代科学实验发现青钱柳叶含多糖,三萜,皂苷,黄酮等多种重要药效成分,同时还检出氨基酸,维生素,锗,硒,铬,钒,锌,铁,钙等多种珍贵的微量元素。能增强人体免疫力,抗氧化,抗衰老,适宜现代“三高”类慢性疾病人群饮用,能有效降低甘油三脂和胆固醇,具有神奇的天然降血压、降血糖、降血脂的功能,亚健康人群饮用能增强人体免疫力、抗氧化、抗衰老。4.1.1降血压作用 黄敬耀等22青钱柳嫩叶的水提物和醇提物对家兔血压又显著地降压作用,同时使家兔呼吸加快加深,也能明显促进小鼠胃肠道蠕动和显著延长小鼠常压缺氧的存活时间,其中水提物的药理作用更为显著。以青钱柳为主要原料制成的降压神茶,对高血压病人症状改善率为81%,降低血压有效率为90%。4.1.2降血糖作用 青钱柳具有明显的降血糖作用,其作用机理可能是通过恢复病变胰岛细胞的结构和功能或增加外围组织的胰岛素受体而起作用。青钱柳中所含的甾萜类化合物及内酯等成分可能有抑制血糖升高的作用,青钱柳多糖能够有效提高高血糖患者糖耐受量,青钱柳苷能够满足高血糖患者对甜味的需求,又不加重病情。钾为胰岛素分泌所必须,同时所含的微量元素锌对降血糖也起重要作用,微量元素铬是葡萄糖耐量因子的有机成分之一,能够协助胰岛素发挥降血糖作用,又有报道硒具有胰岛素样作用,其它元素如镍、钒、镁及一些稀土元素也与降血糖显著相关。易醒等23用江西梅山降压神茶对患有四氧嘧啶糖尿病大鼠的降糖作用进行了实验,结果表明,给患有四氧嘧啶糖尿病大鼠连续4周服用梅山降压神茶3.6g后,大鼠空腹血糖明显降低,糖耐量增高,但对正常大、小鼠血糖物明显影响。病理切片显示,大鼠病变的胰岛结构功能逐渐恢复。4.1.3降血脂作用 青钱柳中所含的三萜类化合物具有降血脂的作用,微量元素硒能有效的改善脂质代谢。谢明勇等24对具有高胆固醇血症模型的大鼠进行实验,观察青钱柳对动物血清胆固醇的调节作用,结果表明,青钱柳内含物可抑制大鼠血清胆固醇的升高。Hiroshi对青钱柳能否抑制消化脂肪酶、降低血浆甘油三脂水平进行了研究,结果表明:青钱柳提取物对口服猪油和橄榄油溶液的小鼠血浆TG水平的抑制率分别为28.6%和24.1%,体外对胰脂肪酶显示出抑制活性,表明青钱柳可能通过抑制消化脂肪酶活性来降低血脂水平。青钱柳复方茶减低血脂、胆固醇的有效率为66%,冠心病患者症状改善率为75%,心电图改善率为78%。青钱柳黄酮能有效清除体内的氧自由基,改善血液循环,降低胆固醇,扩张冠状血管、预防心脑血管疾病。 中国中药资源志要记载,青钱柳叶具清热消渴解毒之效。中国中药资源志要记载:青钱柳树皮、树叶具有杀虫止痒、消炎消肿、止痛祛风之功效.并可用于治疗顽癣。同时青钱柳提取物对于金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等革兰氏阳性菌具有较强的抗菌作用25。青钱柳中的很多成分如三萜、多糖、甾体、黄酮等都有抑制癌细胞的作用。4.2 保健作用4.2.1增强机体免疫力的作用 北京神农医药开发研究所将青钱柳配制的梅山神茶煮沸浓缩,取低剂量对小鼠体液免疫和细胞免疫功能进行试验。结果表明:浓缩液能增加抗体积数,具有增强动物体液免疫功能的作用,还有促进单核巨噬细胞的功能,增强细胞免疫的作用,而且对人体无毒副作用26。另有实验表明青钱柳叶煎剂对大鼠无致畸胎作用。对于体弱、神经衰弱、更年期综合症病人的效果,主要表现在免疫功能提高和临床症状的改善,如饮食增加、体重增加、神经功能好转、睡眠转佳等方面。4.2.2抗氧化、防衰老作用董彩军等27人的研究结果表明,青钱柳醇提物具有较强的清除自由基和抗油脂氧化活性。青钱柳的抗氧化性比较高,具有天然抗氧化剂的应用价值。可能与其含有黄酮类化合物有关,黄酮类化合物具有多酚结构,能够提供活泼的质子,与氧自由基结合成较稳定的产物。此外,抗氧化防衰老的作用还可能与青钱柳中所含的微量元素有关,如硒是人体血红细胞中谷胱甘肽过氧化酶的重要成分,具有抗氧化、保护细胞膜和心血管的作用,维生素E是一种有效的抗氧化剂,与硒结合是一种重要的体内自由基清除剂,有机锗具有抗脂质氧化的作用。研究表明,青钱柳具有多种保健功能可能与其含有较多的微量元素硒、胡萝卜素和维生素E有关。常饮以青钱柳为原料制成的茶,还可起到醒神健脑,滋补体质,益智强身,延年益寿之功效。4.2.3抗疲劳作用 陈家群28通过建立动物一次性力竭运动模型,探讨了青钱柳对训练小鼠抗疲劳能力的影响,发现青钱柳具有较强的抗疲劳作用,可以有效抑制运动过程中小鼠Hb含量的下降,提高有氧代谢能力,延缓运动性疲劳的发生,延长小鼠至力竭的运动时间。其原因可能是青钱柳中含有咖啡因,咖啡因具有增强大脑皮层兴奋过程、振奋精神、祛除疲劳等功效。5.青钱柳的人工林资源培育及开发利用5.1青钱柳的人工林资源培育5.1.1青钱柳优良品种的筛选 青钱柳广泛分布于我国亚热带地区,由于突变、隔离剂自然选择等原因,分化并产生了种内有差别的地理生态种源和家系。这种差异表现在形态解剖、生长发育、木材性状、适应性与抗性、生理生化特性等方面。通过种源收集和种源实验,可以不同培育目标(药用、材用、观赏等)的人工林筛选出优良的地理种源(家系)。如通过选育生长快、叶中目的成分含量高的青钱柳优良品种,并使其得到快速繁殖,形成优良青钱柳苗木的产业化生产,满足市场对优良青钱柳种苗和青钱柳原材料的需求,为以青钱柳叶为原材料的产业发展提供原料保障29。5.1.2青钱柳种子休眠的解除 史晓华等5人认为青钱柳种子坚硬骨质的种壳是导致强迫休眠的主要原因,同时存在着生理休眠,其种皮结构可能对胚的萌发特别是胚根的生长和延伸起到严重的机械阻力,且种皮浸提液中可能含有抑制萌发的物质。研究结果显示:离体胚的萌发率达到百分之906.5且生长正常,而完整种子、酸蚀4h种子不萌发,破损果皮的种子随着破碎程度的加深,萌发率增高,但均不能正常生长。表明果皮和种皮中含有一些活性较强的抑制萌发和生长的内源性物质是导致青钱柳种子休眠的主要原因之一,同时果皮提取物对白菜生根有明显抑制作用。因此可以通过种胚离体培养技术来解除种子的休眠。5.1.3青钱柳苗木的快繁技术和无性系化 在筛选出青钱柳优良地理资源的基础上,对其生理生化特性,特别是种子休眠和萌发机理等进行进一步研究。突破青钱柳无性繁殖技术难关,建立快速、高效的无性繁殖技术体系,是满足青钱柳规模化、产业化开发利用对种苗需求的最有效途径,也是今后急需研究和解决的技术关键。目前,关于青钱柳无性系化的报道极少,因此,有必要深入研究青钱柳的扦插繁殖和原生质体组织培养技术,为青钱柳的产业化开发利用做好技术储备。5.1.4青钱柳人工林的定向培育模式 青钱柳为多用途树种,具药用、材用和观赏价值,因此,在人工林资源培育时必须实行定向培育。如作为药用资源开发,收获的主要是叶子,则需系统研究立地条件、造林密度、轮伐期长短、施肥技术等对单位面积上青钱柳叶产量和质量的影响;作为材用资源开发,收获的主要是木材,则需系统研究立地条件、造林密度、混交林营造技术、修枝技术、施肥技术等对单位面积上青钱柳木材产量和质量的影响,从而为不同的培育目标筛选出优化的定向培育模式29。5.1.5青钱柳次生代谢产物的离体细胞培养技术 由于青钱柳是一种人工繁育比较困难的植物资源,而它又含有多种对人体有明显药用及保健功能的此生代谢产物。因此,研究利用生物反应器离体细胞培养技术得到目标产物也是今后探索的一个重要方向。5.2青钱柳的新产品开发青钱柳是我国独有的珍惜药用植物,含有无机成分、三萜类化合物、黄酮类化合物、稀土元素等多种有效药用成分,具有降血压、降血糖、降血脂、调节胆固醇、增强免疫能力等多种药用价值。5.2.1开发新型的甜味剂 目前大规模开发无毒、使用安全、低热量、甜味素质优良又具有保健作用的天然甜味剂,以代替蔗糖和人工合成甜味剂是国内外科学家迫切需要解决的大课题,青钱柳甙的发现为目前尚少的天然甜味化合物家族增加了新的成员。因此,开发青钱柳中的青钱柳甙类天然甜味剂,充分利用大自然赐予我国的青钱柳这一特有植物资源,造福人类,是未来科学家研究开发的重点课题之一。5.2.2研究和开发新型的保健品和药物 青钱柳具有很高的药用价值,并且对人体无毒副作用。因此可以开发一些以青钱柳为原料的新型营养保健品和药物制剂。目前,关于青钱柳的产品研发正在如火如荼的进行,已有一些初级保健品正式面市,如江西省修水神茶(集团)公司开发的以青钱柳叶为主要原料的降血糖、降血压和减肥神茶系列产品,以其独特的香甜味和一定的祛病强身效果,深受广大消费者的青睐30。对于其功效已经为临床研究所证实,但它的作用机理还有待深入研究,对于青钱柳内含物降血糖、降血压、降血脂和抗氧化、抗疲劳的物质基础尚不十分明确,影响了人们对其进一步的开发利用。当前科研人员正在努力突破针对型和型糖尿病的特殊因子,希望研制开发3种青钱柳保健食品(青钱柳胶囊、青钱柳片剂、青钱柳冲剂)31。加强这方面的科学研究,探明其发挥保健和药理作用的功能因子,为研制功能食品和药品奠定科学理论基础。青钱柳树皮含鞣质及纤维,鞣质可以用来制作橡胶,以代替传统的橡胶制品:纤维可以用来作纤维原料,制作新型纤维布料。结语近年来,国内外学者对青钱柳进行了一定的研究,但许多方面的研究还有待于进一步深入,青钱柳在基因资源保护、繁殖、定向培育、遗传性状改良等方面还存在着许多需要攻克的难题。一方面,由于青钱柳资源匮乏,严重影响了青钱柳的开发利用和产业化进程,培育人工资源以解决青钱柳原料的不足,是解决青钱柳产业化进程的必由之路和保护资源的重要措施。了解青钱柳种子休眠原因,解决青钱柳育苗出芽率低、出芽率不齐等关键技术问题,提高青钱柳质量是人工培育青钱柳的重点工作。另一方面,对青钱柳化学成分的提取分离鉴定和药理作用研究虽有一定的基础,但其化学成分和结构与药理活性之间的关系还有待于进一步确定。总之,继续开展青钱柳资源培育、生物活性成分的系统研究,对于青钱柳这种药用价值较高的植物进行深入的研究和开发,具有重要的理论意义和广阔的应用前景。主要参考文献1方升佐,杨万霞.青钱柳的开发利用与资源培育J.林业科技开发,2003,17(1):49-51.2中国药材公司.中国中药资源志要M.北京:科学出版社,1994.3连雷龙.青钱柳的栽培技术J.林业科技开发,2003,17(3):51-52.4孙同兴,徐丽丽.青钱柳叶的结构鉴定J.中草药,2006,37(2):271-273.5史晓华,徐本美,黎念林.青钱柳种子的休眠与萌发的研究J.种子,2002,(5):5-8.6杨万霞.青钱柳种子休眠原因及萌发生理的初步研究D.南京:南京林业大学,2004.7宋祖祥,邱先华.青钱柳播种育苗技术试验J.江西林业科技,2004,(5):10-11.8胡冬南,蒋艳,吴少福.青钱柳组织培养的初步研究J.江西农业大学学报,2005,2(1):39-41.9尚旭兰,徐锡增,方升佐.青钱柳离体胚的培养及快速繁殖J.南京林业大学学报/自然科学版,2007,31(1):101-105.10李磊,谢明勇,吴熙鸿.胡桃科植物青钱柳多种微量元素的化学形态研究J.江西农业大学学报,1999,21(4):546-551.11易醒,石建功,周光雄.青钱柳化学成分研究J.中国中药杂志,2002,27(1):43-45.12李俊,陆圆圆,许子竞.青钱柳中黄酮成分的研究J.中药材,2005,28(12):1058-1059.13张晓瑢,廖循,丁立生.青钱柳的化学成分J.应用与环境生物学报,2001,7(1):90-91.14舒任庚,宋子荣,舒积成.青钱柳正丁醇部位化学成分J.中药材,2006,29(12):1304-1307.15谢明勇,王远兴,温辉梁.青钱柳中黄酮甙和维生素含量的测定J.食品科学,2001,22(1):66-68.16 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ID=663.致谢经过两个多月的查阅文献和论文整理,值此论文完成之际,谨以最衷心的谢意致于张兴旺老师和帮助过的我同学们!从开始的开题报告到最后的论文写作张老师都给予我细心的指导与帮助,张老师严肃认真的治学态度、高度的敬业精神、孜孜以求的工作作风对我产生很深的影响,他渊博的知识、开阔的视野和敏锐的思维给了我深深的启迪,使我具备了很高的科研素养。感谢在整个毕业设计期间帮助过我的指导老师和我密切合作的同学,和曾经在各个方面给予过我帮助的伙伴们,在此我再一次真诚地向帮助过我的老师和同学表示感谢!
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