高三生物二轮专题复习题型增分练四加试非选择题题加试特训生物技术实践B新人教

加试特训2生物技术实践(B)1某研究小组利用酵母菌发酵葡萄生产葡萄酒。回答下列问题：(1)欲从土壤中分离野生型酵母菌，最好采用_法进行接种，经过培养后，观察培养基上微生物的_，从中选出酵母菌。(2)为提高生产效率，做了对比实验。甲发酵罐中保留一定量的氧气，乙发酵罐中没有氧气，其余条件相同且适宜，定期测得的数据如图所示。甲发酵罐提供氧气的目的是_，12 h后，甲、乙两发酵罐消耗的葡萄糖量之比为_(A.34B43C53D35)。实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、操作正确、发酵温度和pH适宜，但乙醇含量比预期低，可能的原因是_。(3)在酿制葡萄酒时，加入果胶酶将果胶分解成可溶性的_，瓦解植物的胞间层，可以提高果汁的出汁率，并使果汁澄清，提高葡萄酒的品质。答案(1)划线分离(或涂布分离)菌落(2)使酵母菌进行需氧呼吸，快速繁殖B乙醇增多会抑制酵母菌的酒精发酵过程(3)半乳糖醛酸解析(1)欲从土壤中分离野生型酵母菌，最好采用划线分离法或涂布分离法进行接种，经过培养后，观察培养基上微生物的菌落，从中选出酵母菌。(2)甲发酵罐提供氧气的目的是使酵母菌进行需氧呼吸，快速繁殖。由于甲发酵罐中含有一定量的氧气，因此甲发酵罐中进行需氧呼吸和酒精发酵，由题图可知，甲发酵罐中的氧气是6 mol，则需氧呼吸消耗的葡萄糖是1 mol，产生的乙醇是18 mol，则酒精发酵消耗的葡萄糖是9 mol，故消耗的葡萄糖共10 mol；乙发酵罐不含有氧气，只进行酒精发酵，产生的酒精是15 mol，则酒精发酵消耗的葡萄糖是7.5 mol。因此，甲、乙两发酵罐消耗的葡萄糖之比为107.543。实验后检测发现，尽管酵母菌菌种合适、原料充足、操作正确、发酵温度和pH适宜，但乙醇含量比预期低，可能的原因是乙醇增多会抑制酵母菌的酒精发酵过程。(3)果胶酶将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。2下列问题是有关大肠杆菌的培养实验，请回答：(1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和_作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的_。(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在_中进行扩大培养，培养液经_后，在LB固体培养基上进行_，并将培养皿_放在恒温培养箱中培养，可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及_，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。(3)通常对获得的纯菌种可以依据_的形状、大小等特征进行初步的鉴定。(4)关于“大肠杆菌培养和分离”的操作中，下列叙述正确的是_。A高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C为了防止污染，接种工具经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上(5)科学家利用转基因技术，利用大肠杆菌生产人胰岛素，其过程如图。由甲和载体乙拼接形成的丙通常称为_，构建得到丙时必需的工具酶有_。在此过程中，用来处理丁以增加细菌细胞壁通透性的化学试剂是_。A氯化钠B氯化钙C次氯酸钠D纤维素酶答案(1)酵母提取物NaCl(2)LB液体培养基稀释分离倒置无菌操作是否规范(3)菌落(4)D(5)重组质粒(重组DNA分子)限制性核酸内切酶和DNA连接酶B解析(1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和酵母提取物作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的NaCl。(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在LB液体培养基中进行扩大培养，培养液经稀释后，在LB固体培养基上进行分离，并将培养皿倒置放在恒温培养箱中培养；为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及无菌操作是否规范，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱中培养。(3)通常对获得的纯菌种可以依据菌落的形状、大小等特征进行初步鉴定。(4)高压灭菌加热结束，等待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能直接打开放气阀使压力表指针回到零；倒平板过程中只能打开皿盖的一边，不能将皿盖放在一边，以防止杂菌污染；接种环在火焰上灼烧，待冷却后才可以快速挑取菌落；用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上。(5)由目的基因甲和载体乙拼接形成的丙通常称为重组质粒；构建重组DNA分子时，需先用限制性核酸内切酶切割外源DNA分子和载体，再用DNA连接酶将目的基因与载体连接形成重组DNA分子；将重组质粒导入微生物细胞时，常用氯化钙来处理微生物细胞，以增加细胞壁通透性，使之成为感受态细胞，有利于重组质粒向内部转移。3请回答微生物筛选和培养实验的有关问题：(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从_环境采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。(3)为获得一种能高效降解农药的细菌(目的菌)，向培养基中加入某种化合物，将初步筛选得到的目的菌转到固体培养基中，常采用的接种方法是_；实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做是为了_。(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。答案(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)划线分离法防止造成环境污染(4)pH调整高压蒸汽灭菌4果胶酶能分解果胶等物质，澄清果蔬饮料，在食品加工业中有着广泛的应用。某兴趣小组的同学对三种不同品牌的果胶酶制剂(制剂中果胶酶浓度相同)进行了探究，其实验设计及实验结果如表所示。分组蒸馏水(mL)缓冲液(mL)果汁(mL)果胶酶制剂(mL)果汁浑浊程度甲乙丙1225200222502032250024X25000Y注：“”越多表示果汁越浑浊。(1)表中X所代表的数值应为_，Y的果汁浑浊程度应表示为_(用若干个“”表示)。(2)除了观察果汁浑浊程度外，还可以通过检测_的变化量来判断不同品牌果胶酶制剂的效果。若使用该方法，相关物质变化量最大的是_组。(3)微生物是生产果胶酶的优良生物资源。分离和筛选能产生果胶酶的微生物，使用的培养基应以_为唯一碳源；如需进一步纯化果胶酶，可根据果胶酶分子的_(至少写出两点)等特性进行分离提纯。由于果胶酶的活性容易受到外界环境因素的干扰，所以应利用_技术减少影响从而保护酶的活性。答案(1)4(或多于)(2)反应物(或“果胶”“半乳糖醛酸”“生成物”“产物”)1(3)果胶形状和大小(或“所带电荷性质和多少”“溶解度”“吸附性质和对其他分子的亲和力”等)固定化酶解析(1)对照实验应遵循单一变量原则，要严格控制无关变量适宜且相同。由题中实验分组处理可知，第4组实验中没有添加果胶酶制剂，为保证各组实验溶液体积相同，X应为4；果胶酶能分解果胶等物质以澄清果蔬饮料，故没有添加果胶酶制剂的第4组的果汁浑浊程度应当最高。(2)果胶酶可水解果胶，可通过反应中反应物的减少量或生成物的生成量来表示果胶酶的作用效果。(3)果胶可作为微生物培养的碳源，并且果胶的水解需要果胶酶，故在分离和筛选能产生果胶酶的微生物时，要使用果胶作为唯一碳源的培养基。分离提纯物质一般根据其物质的相关特性设置分离提纯方法，如：“形状和大小”“所带电荷性质和多少”“溶解度”“吸附性质和对其他分子的亲和力”等。固定化酶技术能有效地减少外界环境对酶的影响。5如图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答：(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是_。(2)制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为41，盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是_。(3)泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因(只要求写一个原因)：_。(4)测定亚硝酸盐含量的方法是_，其原理是：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_反应后，与_偶联，形成紫红色产物。答案(1)亚硝酸盐的含量低(2)加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响(3)泡菜坛子密封不严或取食工具不卫生或盐的比例过小或温度过高都会引起杂菌滋生、泡菜变质(4)光电比色法重氮化N1萘基乙二胺6请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题：(1)LB固体培养基：取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸馏水溶解，再加_，灭菌备用。(2)尿素固体培养基：先将适宜浓度的尿素溶液用_灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤，因为G6玻璃砂漏斗_，故用于过滤除菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。(3)取适量含产脲酶细菌的104、105两种土壤稀释液，分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上，培养48 h，推测固体培养基上生长的菌落最少的是_(A.105稀释液尿素固体培养基B105稀释液LB固体培养基C104稀释液尿素固体培养基D104稀释液LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现_，其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生_所致。(4)制备固定化脲酶时，用石英砂吸附脲酶，装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱，其作用是_。答案(1)琼脂糖(2)高压蒸汽孔径小，细菌不能滤过(3)A红色环带氨(或NH3)(4)除去游离的脲酶解析(1)固体培养基中需添加琼脂糖起到凝固的作用。(2)因为G6玻璃砂漏斗中存在杂菌，所以在其过滤除菌之前需进行高压蒸汽灭菌；G6玻璃砂漏斗能过滤除菌的原理是其孔径较小，细菌不能通过。(3)土壤中的微生物在LB全营养培养基中都能生长，在尿素固体培养基中只有能利用尿素的微生物能生长，104土壤稀释液中微生物数量较多，所以推测固体培养基上生长的菌落数最少的是105稀释液尿素固体培养基；在尿素固体培养基上产脲酶的细菌周围会出现红色环带，因为细菌产生的脲酶催化尿素分解产生了氨(NH3)，导致培养基呈碱性，培养基中的酚红物质在碱性条件下会变红。(4)并不是所有的脲酶都能吸附在石英砂上，所以装柱后需用蒸馏水洗涤固定化酶柱，以洗去多余的未吸附的脲酶。7大肠杆菌是生存在人体肠道中的正常菌群，每克粪便中含有109个，且能够与致病菌混杂生长。如果食品和饮用水中出现大肠杆菌，就意味着食物可能被粪便污染而带上致病菌，因而常将大肠杆菌的数量作为食品卫生的检测指标之一。请据此回答下列问题：(1)大肠杆菌异化作用的类型是_，大肠杆菌在肠道中一般对人无害，但如果进入人的_，会对人体产生危害。(2)测定街边出售的奶茶中大肠杆菌的数目，常用涂布分离法进行测定。在操作过程中错误的是_。A将玻璃刮刀从70%酒精中取出后需放在酒精灯火焰上灼烧B涂布时需转动培养皿以使涂布均匀C每一浓度需设多个培养皿进行涂布D也可以利用划线分离法进行测定(3)根据菌落测出的大肠杆菌数比实际数值要_(高、低)，原因是_。实验完成后需要对培养基进行_处理，然后才能倒掉。答案(1)兼性厌氧型泌尿系统(2)D(3)低培养基中可能有两个或多个细菌紧挨在一起，共同形成一个菌落灭菌8以下是有关泡菜发酵过程中的相关问题，请回答下列问题：(1)蔬菜刚入坛时，其表面带有不抗酸的大肠杆菌和酵母菌等微生物。其中的酵母菌最初的呼吸作用方式是_，请写出相关反应式：_。(2)到发酵中期，无氧环境形成，乳酸菌开始活跃，并产生大量乳酸，使乳酸积累量达到0.6%0.8%，pH为3.53.8，试分析此时坛内其他微生物的活动情况及原因。_。(3)发酵后期，乳酸含量继续增加，当达到1.2%以上时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是_。(4)请在下列坐标图中画出该过程中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐含量的变化趋势。答案(1)需氧呼吸C6H12O66O2酶,6CO26H2O能量(2)其他微生物活动减慢甚至停止，因为pH不适宜(3)pH过低抑制了乳酸菌的生长(4)如图所示解析(1)蔬菜入坛的初期，坛内氧气充足，酵母菌主要进行需氧呼吸产生CO2和H2O。(3)发酵后期发酵速度变缓甚至停止的主要原因是过多的乳酸使pH过低，抑制了乳酸菌的生长。7