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最新人教版选修一专题5DNA和蛋白质技术学案 学习导航DNA和蛋白质技术,包才DNA的提取、蛋白质的提取、 DNA片段的扩增等,是开展分 子生物学研究的基本技术。本专题将从基础入手 ,学习DNA的粗提取、PCR技术和血红蛋 白的提纯。学习这些技术,不仅能够帮助学生初步了解分子生物学的基本实验方法,而且能够巩固必修课中学习的有关 DNA和蛋白质的理论知识。本专题的3个课题相对独立,没有严格的先后顺序。课题 1的操作难度不高,学生比较 容易获得结果。课题 2的操作难度也不高,但PCR技术的原理是难点,学生要充分利用教材 的图文资料,并且在教师的引导下进行实验操作。课题 3的操作难度比较大,所以学生一定 要在教师的精心指导下完成操作。课题1 DNA的粗提取与鉴定导学诱思1 .提取DNA的方法提取生物大分子的基本思路是 。对于DNA的粗提取而言,就 是要利用、等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成 分。1) DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同,利用 这一特点,选择适当的盐浓度就能使 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目 的。书本图5-1是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线,请根据曲线图,思考:在什么浓度下,DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的?如何通过控制 NaCl溶液的浓度使 DNA在盐溶液中溶解或析出?此外,DNA不溶于 溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2) DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解 J且是对一没有影响。大多数蛋白质不能忍受 6080oC的高温,而DNA在以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ,但对DNA没有影响。3) DNA的鉴定 在 条件下,DNA遇会被染成 一色,因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。2 .实验设计1)实验材料的选取凡是含有 _的生物材料都可以考虑,但是使用 的生物组织,成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料:鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、冻猴桃、洋葱、豌 豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌思考:哺乳动物的红细胞的特点?2)破碎细胞,获取含DNA的滤液 动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细 胞液中加入一定量的 ,同时用 搅拌,过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物 细胞,需要先用 溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的 和,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。思考:为什么加入蒸储水能使鸡血细胞破裂?加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响 ?此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?3)去除滤液中的杂质阅读课本的三个方案,思考:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?方案二与方案三的原理有什么不同?4) DNA的析出与鉴定将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积 、冷却的 静置溶液中会出现 这就是粗提取的 DNA。用玻璃棒搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分。取两支20ml的试管,各加入物质的量浓度为 的NaCl溶液5ml,将丝状物放入其 中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入 4ml的。混 合均匀后,将试管置于 中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变。3 .操作提示以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g,防止。加入洗涤剂后,动作要、否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操 作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时 ,动作要,以免,导致DNA分子不能形成絮状沉 淀。二苯胺试剂要 ,否则会影响鉴定的效果。4 .结果分析与评价疑难点拨1 . DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系:当NaCl溶液浓度低于 0.14mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶解度降低;当 NaCl溶液 浓度高于0.14mol/L时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。2 .制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入柠檬酸钠的原因制备鸡血细胞液时,要在新鲜的鸡血中加入抗凝剂一一柠檬酸钠,防止血液凝固。其原理是柠檬酸钠能与血浆中Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的 Ca2+大大减少,血液便不会凝固,因为鸡血红细胞,白细胞都有细胞核,DNA主要存在于细胞核中,所以在 离心或静置沉淀后,要弃出上层清液一一血浆。3 .提取DNA的第一步是材料的选取,其目的是一定要选取 DNA含量较高的生物材料,否则 会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是DNA的释放和溶解,这一步是实验成功与否的关键,要尽可能使细胞内的 DNA全部溶解;第三步是 DNA的纯化,即 根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性 ,最大限度地将 DNA与杂质分 开;最后一步是对 DNA进行鉴定,这是对整个实验的结果的检测。4 .盛放鸡血细胞液的容器 ,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内 DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的 DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程的DNA的损失。 典例解析 本实验中有三次过滤:过滤用蒸储水稀释过的鸡血细胞液过滤含粘稠物的 0.14mol/LNaCl 溶液 过滤溶解有DNA 的 2mol/LNaCl 溶液以上三次过滤分别为了获得( )A 含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA 的滤液B 含核物质的滤液、滤液中DNA 粘稠物、含 DNA 的滤液C 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、纱布上的 DNAD 含较纯的DNA 滤液、纱布上的粘稠物、含DNA 的滤液 课堂演练 一、选择题( 10 个)1.在研究DNA 的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是( )A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D. 除去血细胞中的所有的蛋白质,使 DNA 释放 ,便于进一步提纯2 与析出DNA 粘稠物有关的叙述,不正确的是()A. 操作时缓缓滴加蒸馏水,降低 DNA 的溶解度B.在操作A时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整C. 加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度,两者均可析出D. 当丝状粘稠物不再增加时,此时 NaCl 的浓度相当于0.14mol/L3 洗涤剂能够瓦解() ,但对DNA 没有影响。A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞核 D.细胞质4 在沸水浴的条件下,DNA 遇()会被染成蓝色。A.斐林试剂B.苏丹出染液C.双缩月尿试剂D.二苯胺5 在DNA 提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()A.不易破碎B.减少提取过程中 DNA的损失 C.增加DNA的含量D.容易洗刷6 下列操作中,对 DNA 的提取量影响最小的是( )A. 使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA 等核物质B.搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C. 在“析出 DNA 粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加D. 在用酒精沉淀DNA 时 ,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却E 在 DNA 的溶解和再溶解时,要充分搅拌7 . DNA的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的(),静置23min,溶液中会出现白色丝状物。A.0 9% 的 NaClB.0.14mol/L 的 NaCl 溶液C. 质量分数 15% 的 HCl D. 体积分数为 95% 的酒精溶液8 .以血液为实验材料时,需要向血液中加入( ) ,防止血液凝固。A.醋酸钠 B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红9 .在向溶解DNA 的 NaCl 溶液中,不断加入蒸馏水的目的是()A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度,加快DNA析出D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出10 .去除滤液中的杂质时,直接在滤液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的()分解蛋白质。A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.肠肽酶二、非选择题(3 个)1 提取鸡血中DNA 时,要除去血液中的上清液,这是因为什么?2填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。提取鸡血细胞中核物质 溶解核内DNA:析出2mol/LNaCl溶液中的DNADNA粘稠物的再溶解提取杂质较少的 DNA白色乳状丝状物 DNA的鉴定3.关于DNA粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做 实验材料的原因是什么?请回答下列问题:鸡血细胞中红细胞 ,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中_细胞数目较多,可以提供丰富的 。实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后 结果是,这是因为这些动物和人一样,成熟的红细胞中,但若改用动物肝月做实验材料,实验能顺利进行。这是因为。若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加 程序,使组织细胞更易分离。课题2多聚酶链式反应扩增 DNA片段导学诱思1. PCR原理填写下列表格参与的组分在DNA复制中的作用解旋酶DNA母链合成子链的原料DNA聚合酶引物DNA的两条链是反向平行的,通常将DNA的羟基末端称为 ,而磷酸基团的末端 称为。 DNA聚合酶不能 开始合成DNA,而只能,因此,DNA复制需要 引物。DNA的合成方向总是。在DNA的复制过程中,复制的前提是 。在体外可通过控制 来实 现。在 的温度范围内,DNA的双螺旋结构将解体,双链分开,这个过程称为 。PCR利用了 DNA的 原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合。由于 PCR过程的温度高,导致DNA聚合酶失活,后来 的DNA聚合酶的发现和应用,大大增加了 PCR的效 率。PCR反应需要在一定的缓冲溶液中提供: ,,同时通过控制温度使 DNA复制在体外反复进行。2. PCR的反应过程PCR 一般要经历 循环,每次循环可以分为、和 三步。从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,并且由 延伸而成的 DNA单链会与结合,进彳T DNA的延伸,这样,DNA聚合酶只能 ,使这段固定长度的序列成 指数扩增。3. 实验操作在实验室中,做PCR通常使用 ,它是一种薄壁塑料管。具体操作时 ,用微量移液器, 按PCR反应体系的配方在 中依次加入各组分”再参照下表的设置设计好 PCR仪的循 环程序即可。 4.操作提示为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的 、_、以及蒸储水等在 使用前必须进行。 PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在储存。使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上缓慢融化。在微量离心管中添加反应 成分时,移液管上的枪头要疑难点拨1.PCR技术简介PCR是一种体外迅速扩增 DNA片段的技术,它能以极少量的 复制出上百万份的 DNA拷贝。这项技术有效地解决了因为样品中 样品进行分析研究的问题,被广泛的应用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、 隆和DNA序列测定等各方面。2.细胞内参与 DNA复制的各种组成成分及其作用解旋酶:打开 DNA双链 DNA母链:提供 DNA复制的模板DNA为模板,在几小时内 DNA含量太低而难以对 古生物学、基因克成子链的原料 DNA聚合酶:催化合成 的3,端开始连接脱氧核甘酸(引物是一小段 列互补配对。用于 PCR的引物长度通常为 3. DNA的合成方向DNA的两条链是反向平行的,通常将 为5,端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA子链引物:使DNA或RNA,它能与 20-30个核甘酸)4种脱氧核甘酸:合 DNA聚合酶能够从引物 DNA母链的一段碱基序DNA的羟基末端称为 3,端,而磷酸基团的末端称DNA,而只能从3湍延伸DNA链,因此,DNA复制需10 / 10PCR反应中的目的片段一般以 30次循环后反应物中大约有 典例解析一个由15N标记的DNADNA分子总数的(A 1/10 B 1/5 C课堂K练一.选择题(10个)1. DNA分子复制时)1/16D1/25,解旋的两条链中(A仅一条作为复制模板B两条链作为模板并复制出两个不同的 C两条链作为模板并复制出两个相同的 D两条链作为模板,各自合成一条子链DNA分子DNA分子,然后两条母链重新结合为原来的双螺旋分子要引物。当引物与 DNA母链通过碱基互补配对结合后 ,DNA聚合酶就能从引物的 3,端开始 延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的 5端向3端延伸。4. PCR技术与DNA的复制PCR反应是通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。PCR反应的实质就是 DNA复制,所以有关 PCR反应的题目与 DNA复制的原理相同,计算方法也大体相同。例如:2n的方式积累,其中n为反应循环次数。一个 DNA片段在 10亿个这样的片段。(23)分子,放在没有标记的环境中培养 ,利用PCR循环5次后标记的A3.下列各项过程中DNA复制A酶游离的脱氧核甘酸ATP mRNA tRNA适宜的温度DNA分子适宜的酸碱度两条新链结合成一个全新的 DNA分子2 .下列关于DNA复制过程的正确顺序是( D )互补碱基对之间氢键断裂互补碱基对之间形成氢键DNA分子在解旋酶的作用下解旋以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对子链与母链盘旋成双螺旋状结构BC D,遵循“碱基互补配对原则”的有(A )RNA复制转录翻译逆转录BCD4 .实验室内模拟生物体 DNA的复制必需的一组条件是ABCD5 .利用PCR技术,把一个双链DNA分子当作第一代,经过3次循环,在第四代DNA分 子中,有几条第一代脱氧核甘酸的长链? ( A )A 2 B 4 C 8 D 16,6 .关于DNA分子的叙述中,正确的是(C )A .DNA的两条链是极性相同,同向平行 B.DNA的两条链是极性相同,反向平行C.DNA的两条链中极性不同,反向平行的 D.DNA的两条链是极性不同,同向平行7 .假设PCR反应中,只有一个DNA的片段作为模板,请计算在30次循环后,反应物中大约有 多少这样的DNA片段(BA 215 B 230C 260 D 2318 .DNA的合成方向总是(C )延伸。A从DNA分子的左端向右端B从DNA分子的右端向左端C从子链的5,端向3,端D从子链的3,端向5,端9 .要使PCR反应在体外的条件下顺利地进行 ,需要严格的控制(C )A氧气的浓度 B酸碱度 C温度 D大气的湿度10 .DNA分子经PCR反应循环一次后,新合成的那条子链的脱氧核甘酸的序列应与()A模板母链相同 B非模板母链相同 C两条模板母链相同 D两条模板母链都不相同二.非选择题(2个)1 . PCR技术是把某一 DNA片段在实验条件下,合成许许多多相同片段的一种方法,利用这 种技术能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或者DNA分子片段,“人类基因组计戈的研究中常用到这种技术。请结合有关知识,回答有关此技术的一些问题:PCR技术能把某一 DNA片段进行扩增,依据的原理是:在实验条件下,DNA分子进行扩增,除了所要扩增的 DNA片段处,还需要、 和、等条件。某DNA片段有160个碱基,其中有腺喋吟 35个,若让该DNA分子扩增三次(即复制三 次)至少需要腺喋吟脱氧核甘酸和鸟喋吟脱氧核甘酸的数目分别是_和 个。2 .将大肠杆菌置于含 15N的培养基上培养。这样,后代大肠杆菌细胞中的 DNA双链均被 15N标记。然后将被15N标记的大肠杆菌作为亲代转到普通培养基中,繁殖两代。亲代、第一代、第二代大肠杆菌DNA的状况如图所示。第一代大肠杆菌 DNA贮存的遗传信息与亲代大肠杆菌DNA贮存的遗传信息完全相同的原因是。如果将第二代大肠杆菌的DNA分子总量作为整体 1,其中,带有15N的第二代大肠杆菌DNA分子约占总量的%。如果将第二代大肠杆菌的DNA含量作为整体1,其中含15N标记的第二代大肠杆菌的DNA含量(脱氧核甘酸单链)约占总量的 %课题3血红蛋白的提取和分离导学诱思1,凝胶色谱法凝胶色谱法也称做 ,是根据 分离蛋白质的有效方法。凝胶实际上是一些由 构成的多孔球体,在小球体内部有许多贯穿的通道,相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同,相对分子质量较小的蛋白质 进入凝胶内部的通道,路程,移动速度;而相对分子质量 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在 移动,路程,移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。2缓冲溶液的作用是。缓冲溶液通常由 溶解于水中配制而成的。生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的,例如:血浆的pH是,要在实验条件下准确模生物体内的过程,必须保持体外的pH与体内的基本一致。3 .电泳电泳是指。许多重要的生物大分子 ,如多肽、核酸等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上。在电场的作用下,这些带电分子会向着 与其所带电荷 的电极移动。电泳利用了待分离样品中各分子 以及分子本身的_、的不同,使带电分子产生不同的 ,从而实现样品中各种分子的分离。一而种标山电泳方法是 禾口 ,在测定蛋白质分子量时通常使用。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于 以及等而紊4 .蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离一般分为四步: 、_和。5 .样品处理血液由 _和组成,其中红细胞最多。红细胞具有 的特点。红细胞中有一种非常重要而而而一,其作用是 ,血红蛋白有 _个肽链组成,包括, 其中每条肽链环绕一个,磁基团可携带 ”红蛋白因含有呈现红色。红细胞的洗涤 洗涤红细胞的目的是 ,采集的血样要及时采用 分离红细胞,然后用胶头吸管吸出上层透明的 ,将下层暗红色的 倒入烧杯,再加入,缓慢搅才,低速短时间离心,如此重复洗涤三次,直至,表明红细胞已洗 涤干净。血红蛋白的释放 在 和 作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白。分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后 ,试管中的溶液分为 4层。第一层为无色透明的 ,第2层为白色薄层固体,是,第3层是红色透明液体,这是,第4层 是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤,除去之溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透明液体。透析 取1mL的血红蛋白溶液装入 中,将透析袋放入盛有 300mL的物质的量的浓 度为20mmol/L的 中,透析12h。透析可以去除样品中 的杂质,或用于更换样品的。6 .凝胶色谱操作第一步要制作 ,第二步要 ,因为 所以装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。在装填凝胶柱时,不得有 存在。因为气泡会,降低分离效果。第三步是 疑难点拨1 .与其他真核细胞相比,红细胞的特点及这一特点对进行蛋白质的分离的意义哺乳动物及人的成熟的红细胞是双面凹圆饼状,没有细胞核和细胞器。其含有的血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集脱液。这使血红蛋白的分离过程非常直观 典例解析用凝胶色谱法分离蛋白质时 A路程较长,移动速度较慢 C路程较短,移动速度较慢 课堂K练一. 选择题,大大简化了实验操作。,分子量大的蛋白质()B路程较长,移动速度较快D路程较短,移动速度较快1.凝胶色谱法是根据()分离蛋白质的有效方法。A分子的大小B相对分子质量的大小 C带电荷的多少 D溶解度2 .缓冲液的作用是:在一定范围内,抵制外界的影响来维持()基本不变。A温度 B pH C渗透压 D氧气浓度3 .电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷()的电极移动。A相同 B相反 C相对 D相向4 .哺乳动物和人的成熟的红细胞中的()与氧气的运输有关。A血红蛋白 B肌红蛋白C肌动蛋白D肌球蛋白5 .血液由血浆和各种血细胞组成 ,其中()的含量最多。A白细胞 B血小板 C红细胞 D淋巴细胞6 .为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入抗凝血剂()。A. NaCl B.甲苯 C.蒸储水 D.柠檬酸钠7 .将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后,可以明显看到试管中的溶液分为4层,其中第3层是()A无色透明的甲苯层B脂溶性物质的沉淀层C血红蛋白的水溶液D其他杂质的暗红色沉淀物二. 非选择题1 .电泳利用了待分离样品中各种分子 以及、的不同,使带电分子产生 不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。2 .你能描述血红蛋白分离的完整过程吗?专题知识归纳实验设计 去 DNA的粗提取 与鉴定操作提,基础知识:提取DNA的方法 实验材料的选”破碎细胞/获取含DNA的滤液卜滤液中的N质DNA也析出与鉴定以血液为,料要防止血液凝固DNA和蛋白质技术加入洗你IJ后,动作要轻缓;加入酒精和用玻璃棒j 搅拌时,动作要轻缓二苯胺试剂要现配现用结果分析与评价课题延伸尸p PCR原理基础知识 PCR的反应过程多聚酶链式反产验操作 应扩增DNA K作提示课题延伸凝胶色谱法血红蛋白的提取和分离片段结果分析与评价心出知识如溶液电泳I样品处理厂实验操作y度胶色谱操作 SdS聚丙烯酰凝胶电泳红细胞的洗涤实验操作色谱主填料的处理凝胶。谱柱的装填 蛋白质的分离结果分析与评价 课题延伸专题知识检测一、选择题1 . DNA的溶解度最低时,NaCl的物质的量浓度为()A. 2mol/L B.0.1mol/L C. 0.14mol/LD.0.015mol/L2 . DNA不溶解于()A.NaCl溶液 B.KCl溶液C.酒精溶液D.MgCl 2溶液3 .鉴定DNA的试剂是()A.斐林试剂B苏丹出染液C.双缩月尿试剂D.二苯胺试剂4 .在向溶解DNA得NaCl溶液中,不断加入蒸储水的目的是()A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减小DNA的溶解度,加快DNA析出D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出5 .在DNA的粗提取过程中,初步析出DNA和提取较纯净的 DNA所用的药品的浓度及 其名称分别是()0.1g/ml柠檬酸钠溶液2mol/LNaCl溶液 0.14mol/LNaCl溶液体积分数为 95%的酒精溶液 0.015mol/LNaCl溶液 0.04mol/LNaCl溶液A. B.C.D.6 .关于DNA的粗提取与鉴定实验的表达哪项是错误的()A.离心沉淀的血细胞中加水是为了提取DNAB.NaCl溶液的物质的量浓度为 2mol/L时,DNA溶解C.向溶解的DNA烧杯中加蒸储水是漂洗DNAD.离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质7 .下列关于实验现象的正确描述是()A.向盛有果糖溶液的试管中加入斐林试剂,产生转红色沉淀B.纸层析法分离叶绿体中的色素时,滤纸条上最宽的色素带呈黄绿色C.DNA的粗提取中,第二次加入蒸储水并搅拌,能析出含DNA的黏稠物D.同一叶片受SO2危害的顺序是先叶柄后叶片8 .关于DNA在NaCl溶液中的溶解度,下面的叙述哪一个是正确的()A.随着NaCl溶液浓度增大,DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大B.随着NaCl溶液浓度的减小,DNA在NaCl溶液中的溶解度也减小C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与 NaCl溶液的浓度无关D.当NaCl溶液的浓度为 0.14M时,DNA的溶解度最低9 .某DNA分子共有a个碱基,其中含胞喀咤 m个,则该DNA分子利用PCR技术循环了 3次,需要游离的胸腺喀咤脱氧核甘酸数为()A.7 (a-m)B.8(a-m)C.7 (1/2a-m)D.8 (2a-m)10 .卵原细胞在进行 DNA复制时,细胞中不可能出现的是()A.解旋B.蛋白质合成C.基因突变D.基因重组11 .在一个密闭的容器中,利用PCR技术用含有同位素13C的脱氧核甘酸合成一个DNA分子,然后再加入普通的含12C的脱氧核甘酸,经n次循环后,所得DNA分子中含12C 的脱氧核甘酸链数与含13C的脱氧核甘酸链数之比是()A.2n: 1 B. (2n-2) : n C. (2n-2) : 2 D. (2n-2) : 112 .在PCR技术中,能打开DNA双链的酶是()A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶 C.解旋酶 D.DNA酶13 .某DNA分子有2000个脱氧核甘酸,已知它的一条单链上碱基 A: G: T: C=1 : 2:3: 4,若利用PCR技术使该分子循环了一次,则需要腺喋吟脱氧核甘酸的数量是()A.200 个 B.300 个14.某些药物可以抑制肿瘤细胞的细胞正处在细胞周期的(C.400 个 D.800 个A.间期B.前期C.中期 D.后期15.某DNA分子的一条单链中 基的(),A占20%,T占30%,则该DNA分子中的C占全部碱DNA的复制,从而达到控制癌症的目的。这些药物作用 )A.50%B.25%C.20%D.30%16 .用15N标记含有1000个碱基的DNA分子 淇中有胞喀咤 60个,该DNA分子在14N 的培养基中循环了 4次。其结果不可能的是()A.含有15N的DNA 分子占1/8B.含有14N的DNA分子占7/8C.复制过程中需腺喋吟脱氧核甘酸6600个 D.复制结果共产生16个DNA分子17 .具有x个碱基对的一个 DNA分子片段含有m个腺口K吟,该片段利用PCR技术完成了 第n个循环后需要多少个游离的胞喀咤脱氧核甘酸?()A.2 n-1(x-m )B.2 n(x-m)C.2 n-1(x/2-m)D.2 n(x/2-m)18 .在DNA复制过程中,保证复制准确无误进行的关键步骤是()A.破坏氢键并使DNA双链分开B.游离核甘酸与母链碱基互补配对C.配对的游离核甘酸连接成子链D.子链与模板母链盘绕成双螺旋结构19 .哺乳动物和人的成熟的红细胞中的()与氧气的运输有关。A血红蛋白B肌红蛋白C肌动蛋白D肌球蛋白20 .凝胶色谱法是根据()分离蛋白质的有效方法。A分子的大小B相对分子质量的大小C带电荷的多少 D溶解度二、非选择题1 .粗提取 DNA的原理是 ,纯化粗提取的 DNA的原理 是;在制备鸡血细胞液的过程中 ,加入的抗凝剂是 ,还可使用的抗凝剂是 一2 . PCR反应需要在一定的缓冲溶液中提供:、分别于两条模板链结合的 ,四种,耐热的 ,同时通过控制 使DNA复制载体外反复进行。3 .在蛋白质的提取和分离实验中 ,若用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液来分离血红蛋白,需对样品如何处理?
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