微生物消毒与灭菌课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临沂大学生命科学学院 王自然,13666399213 E-mail:wzrly,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临沂大学生命科学学院 王自然,13666399213 E-mail:wzrly,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,微生物消毒与灭菌,微生物消毒与灭菌,第一节 物理消毒灭菌法,第一节 物理消毒灭菌法,物理因素对微生物的影响,物理因素,温 度,辐 射,干 燥,超声波,微 波,滤过除菌,高温,低温,物理因素对微生物的影响物理因素温 度辐 射干 燥超声波,一、热力灭菌法,高温对微生物虽具有明显的致死作用，但不同种类的微生物对热的敏感性有明显的的差异，细菌繁殖体最为敏感，其次是真菌和病毒，细菌的芽孢对热有很强的抵抗力。,一、热力灭菌法高温对微生物虽具有明显的致死作用，但不同种类的,热力灭菌的原理,破坏菌体蛋白质、核酸和酶系统而致死微生物。,热力使蛋白质中的氢键破坏使之变性或凝固，,使双股,DNA,分开为单股，受热活化的核酸酶使单股的,DNA,断裂，导致细菌死亡,影响高温灭菌的因素：,细菌对高温的耐受性与细菌种类、发育时期、菌体浓度及细菌所处介质有关。,热力灭菌的原理破坏菌体蛋白质、核酸和酶系统而致死微生物。,热力灭菌法分类：干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。,二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。,原因：,（,1,）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固；,（,2,）湿热的穿透力比干热大；,（,3,）湿热的蒸汽有潜热存在。,热力灭菌法分类：干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。,热力灭菌法,高温杀灭细菌,焚烧,-,最彻底的灭菌方法,烧灼（火焰灭菌法）,-,直接用火焰灭菌方法,干烤,（热空气灭菌法、干热灭菌法）,-,加热,160-180 2,小时,干热灭菌法,红外线,热力灭菌法 高温杀灭细菌焚烧-最彻底的灭菌方法烧灼（,(2),火焰灭菌法,:,火焰直接烧灼，用于接种环,(,针,),和试管口或瓶口的灭菌。,(1),焚烧法：用火焚烧，是一种彻底的灭菌方法，仅适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。,(2)火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，用于接种环(针)和试管口或,(3),干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）,灭菌对象：为玻璃器皿、金属器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。,方法,160,（,160,170,），,1,2h,（,180,纸、棉塞就可烧焦）,(3)干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）灭菌对象：为玻璃器皿、,缺点,穿透力差，故需高温、长时间（繁殖体,100,，,1.5h,杀灭；芽孢,140,，,2h,可杀灭）,160,170,，,1,2h,可杀死繁殖体和芽孢。,降到室温（,60,）后再取物品,注意事项 温度不能超过,170,物品不宜包、放过紧过厚、帖壁,缺点穿透力差，故需高温、长时间（繁殖体100，1.5h,电热干燥箱,电热干燥箱,湿热灭菌法,高压蒸汽灭菌法,最有效的灭菌方法,121 2030,分钟,煮沸消毒法,水煮,100 5,分钟,(,繁殖体,)2,小时,(,芽胞,),流通蒸汽消毒法,巴氏消毒法,间歇蒸汽灭菌法,水蒸汽,100 1530,分钟,(,繁殖体,),反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌,较低的温度（,61 30,分钟）杀灭致病菌,湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法 121 20,方法：温度在,100,左右，煮沸,10,20 min,可杀死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸,1,2 h,才被杀死 。 若在水中加入,2-5%,酚，则,10-15min,可杀灭芽胞；若在水中加入,1-2%Na,2,CO,3,，可提高沸点既可促进芽胞的摧毁，亦可防止金属器械生锈。,应用：灭菌对象,:,饮水、玻璃器皿、外科器械,(1),煮沸灭菌,:,方法：温度在100左右，煮沸1020 min可杀死所有细,煮沸消毒器,煮沸消毒器,(2),巴氏消毒法 ：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法 。,低温维持巴氏消毒法,63,65 30min,高温瞬时巴氏消毒法,71,72 15s,；迅速冷却,10,以下（冷击法）,超高温巴氏消毒法,132,管道 12s,；迅速冷却,常温保存半年。,(2)巴氏消毒法 ：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定,(3),流通蒸汽消毒法 ：又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸笼或阿诺氏（,Arnold,）流通蒸汽灭菌器，在,1,个大气压下，用,100,左右的水蒸汽，,30min,，可杀灭繁殖体。不杀芽孢和霉菌的孢子。,用于食品、食具及不耐用高温的物品消毒。如敷料、糖培养基、半乳糖培养基,(3)流通蒸汽消毒法 ：又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸笼或,(4),间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽）,利用连续,3,次的流通蒸汽消毒法，达到彻底灭菌的目的。即将待灭菌物品放入蒸笼（灭菌器）内，加热（约,100,）,15-30min,，取出置室温,(,或,37)24h,，次日重复灭菌。连续,3,次。,用于一些不宜,100,以上温度灭菌物质，以达到杀灭芽胞的目的。常用于含糖、半乳糖、牛乳、血清等培养基的灭菌。,(4) 间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽）,（,5,）高压蒸汽灭菌法,高压蒸汽灭菌器：,15,磅（,0.105MPa,），,/,平方英寸，,121.3,温度下维持,15,20min,。,应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。,（5）高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌器：15磅（0.105MPa,高压蒸汽灭菌器,手提式,立式,高压蒸汽灭菌器手提式立式,微生物消毒与灭菌课件,二、辐 射灭菌法,辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。能量可借波动或粒子高速运行而传播。用于灭菌的辐射可分为两种。,电离辐射,、,、,、,x,射线及高能中子、质子等。,非电离辐射可见光、日光、紫外线等。,辐射的杀菌作用随波长的降低而增强。,紫外、,x,、,杀菌增强,可见光、红外线作用弱,紫,宇宙线,x,可见,红外,无线电波,二、辐 射灭菌法辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。,（二）理想消毒剂的条件,主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。,光感作用原生动物、细菌、病毒、噬菌体等均有灭活作用。,化学治疗剂对于宿主和病原微生物的作用具有选择性，它们使其生命活动受到抑制或使其死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。,2%5%的碘酊用于手术部位、注射部位,干燥缺水生化反应受阻新陈代谢障碍死亡。,05%溶液用于食品厂、奶牛场的设备、用具消毒。, 射线：电离辐射强 ， 穿透力强,(4) 间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽）,（一）影响消毒剂作用的因素,可见光线是指在红外线和紫外线之间肉眼可见的光线，其波长400800nm。,到目前为止，已发现的抗生素达2500多种，但其大多数对人和动物有毒性，临床上最常用的抗生素只有几十种。,(,一）非电离辐射,1.,可见光线,可见光线是指在红外线和紫外线之间肉眼可见的光线，其波长,400,800nm,。可见光线对微生物一般无多大影响，但长时间作用也能妨碍微生物的新陈代谢与繁殖，故培养细菌和保存菌种，均应置于阴暗之处。,光感作用,（,photosensitization,）,某些染料（结晶紫、美蓝、伊红、汞溴红、沙黄等）加入培养基中，能增强可见光的杀菌作用。,光感作用原生动物、细菌、病毒、噬菌体等均有灭活作用。,G,菌对光感作用比,G,菌敏感，美蓝、伊红、汞溴红因作用于,G,菌，而沙黄作用于,G,菌。,（二）理想消毒剂的条件(一）非电离辐射1.可见光线可见光线,2.,阳光,直射日光有强烈的杀菌作用，,日光是天然杀菌因素,细菌日光直射,30min,数小时死亡。,碳疽芽孢直射,20h,死亡,影响日光杀菌的因素（烟尘、玻璃、有机物、空气中的水分、温度），日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异 。,2. 阳光直射日光有强烈的杀菌作用，,3.,紫外线,杀菌原理波长为,100,400nm,，以,254nm,杀菌力最强，短波紫外线灯为,253.7nm,。,杀菌作用细菌,DNA,对紫外线的吸收高峰在,265,266nm,之间，,O,2,O,3,O ,氧化能力强的氧原子,-,杀菌,诱发变异使,DNA,分子结构改变而诱发变异（影响核酸同链上的胸腺嘧啶共价键结合形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰了,DNA,的复制和转录）,方法紫外线灯照射杀菌,应用手术室、病房、无菌室、实验室消毒（,G,-,、,G,+,）,3.紫外线杀菌原理波长为100400nm，以254nm,光复活现象：微生物经致死量的紫外线照射后，若在,3h,内在遇到可见光照射，部分微生物可以恢复其活力，这种现象称之。,影响因素时间、强度、距离（一般要求距地面,2m,，时间,1,2h,，,1W,m,2,）,紫外线作用的特点：,穿透力弱，只能用于房间空气、物体表面消毒；,对眼睛角膜和皮肤有损伤作用,，工作人员切勿在紫外线灯照射下进行操作。,杀菌效果与照射时间，距离和强度有关；,光复活现象：微生物经致死量的紫外线照射后，若在3h内在遇到可,(,二）电离辐射,具有较高的能量和穿透能力产生极强的致死效应。,射线：电离辐射强 ，穿透力差（ 缺乏穿透力，不实用）,射线：电离辐射强 ， 穿透力强,射线：电离辐射弱， 穿透力强，仅有抑菌作用和微弱的杀菌作用。,X,射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强,(二）电离辐射具有较高的能量和穿透能力产生极强的致死效应。,用途：忌热,塑料制品,物品,（注射器、试管、吸管等）,的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面,杀菌机制：射线使水电离为,H,和,OH,，这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身 。,用途：忌热塑料制品物品（注射器、试管、吸管等）的灭菌消毒、食,（三）红外线,利用红外线烤箱灭菌，红外线是波长为,0.77-1000m,的电磁波，尤以,1-10m,波长的热效应最高。多用于医疗器械的灭菌,（三）红外线利用红外线烤箱灭菌，红外线是波长为0.77-10,（四）微波,从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。,微波灭菌，主要是利用微波的加热作用完成。灭菌物品放在微波照射的交变电场中时，物品内部的分子随着电场的变化而相应的旋转振动起来，电场变化快，分子振动也就跟着快；由于分子间的相互作用力即产生摩擦力，因此分子克服其摩擦力而产生热量，使整个物品则热起来，起到了摩擦加热灭菌的作用。这种灭菌法，所需时间短、加热均匀是其显著的优点。,主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。,（四）微波从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。,三、超声波杀菌法,频率在,20000,200000Hz,声波称为超声波。,超声波虽可使菌体裂解死亡，但往往有残存者，又因超声波费用颇大，故未应用于消毒灭菌。,目前主要用于裂解细胞，提取细胞组分，研究其抗原、酶类、细胞壁的化学性质以及从组织内提取病毒等。,三、超声波杀菌法频率在20000200000Hz声波称为超,超声波主要通过四方面的作用达到杀菌目的：,震荡：使微生物细胞内含物强烈震荡而被破坏,氧化杀菌：因在水溶液中超声波能产生过氧化氢,产生热效应：破坏细胞的酶系统；,空（腔）化作用：即在液体中形成许多真空状态的小空腔，空腔崩破产生的巨大压力使细胞裂解。,超声波主要通过四方面的作用达到杀菌目的：,四、过滤除菌法,滤过除菌,:,通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌,L,型等小颗粒。,应用：,细菌滤器不耐热物品的灭菌（如不耐高温的营养液、血清、毒素、抗生素、,V,、酶、维生素等）,空气除菌超净工作台；,SPF,动物的饲养；,GMP,厂房的洁净度（四级）,四、过滤除菌法滤过除菌 :通过机械阻留作用将液体或空气中的细,微生物消毒与灭菌课件,滤菌过程,滤菌过程,微生物消毒与灭菌课件,五、干燥及低温抑菌法,1.,干燥,干燥可致微生物死亡,干燥缺水生化反应受阻新陈代谢障碍死亡。甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。,各种微生物对干燥的耐受性差异很大,巴氏杆菌、淋球菌、鼻疽杆菌几天,破伤风、碳疽芽孢几年、几十年,霉菌孢子抵抗力很强,应用：主要用于菌种和食品的保藏。,五、干燥及低温抑菌法1.干燥,2.,低温对微生物的影响,细菌对寒冷的抵抗力较强。因此，低温不能用于灭菌。,(1),微生物对低温有较强的抵抗力：,微生物,低温,代谢活动降低，生长繁殖停止，可长期维持生命,T,升高到适宜,苏醒,生长繁殖,2.低温对微生物的影响 细菌对寒冷的抵抗力较强。因此，,低温常用于保存菌种。 但是，反复冻融对微生物不宜。 各种细菌对低温的抵抗力亦不同。,（细菌、酵母菌、霉菌,0,4,；病毒、某些细菌,20,70,，最好在液氮中（,196,）可长期保存；但是巴氏杆菌、脑膜炎双球菌等低温敏感，低温比在室温中死亡更快。）,冷冻保存食品,细菌生长繁殖停止,应 用,低温常用于保存菌种。 但是，反复冻融对微生物不宜。 各种细,（,2,）冷冻真空干燥法,方法,低温（,-40,）,迅速冻结，抽出空气，真空状态下迅速脱水干燥,可维持生命达数年,加保护剂,脱脂奶粉或不含相应抗体的血浆或血清（,10,50,）,注意事项,细菌、真菌不宜长期冰冻保存,尤其是反复冻融对任何微生物都有很大的破坏力。,（2）冷冻真空干燥法 方法低温（-40）迅速冻,在低温状态下真空抽去水分,用途：保存菌种,冷冻真空干燥法：,在低温状态下真空抽去水分用途：保存菌种冷冻真空干燥法：,冷冻干燥机,冷冻干燥机,第二节 化学消毒法,防腐消毒剂：,许多化学药物能够抑制或杀死微生物，已广泛用于消毒、防腐，统称为防腐消毒剂。消毒剂它在杀灭病原微生物的同时，对动物体的组织细胞也有损害作用。,消毒剂,（,disinfectant,）,：用于杀灭物体上病原体的化学药品,防腐剂,（,antiseptic,）,：用于抑制微生物生长繁殖的化学药品或称抑菌剂。,消毒剂和防腐剂区别：无严格的界限,第二节 化学消毒法防腐消毒剂：许多化学药物能够抑制或杀死微生,化学治疗剂：,用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫的化学药物称为化学治疗剂。化学治疗剂对于宿主和病原微生物的作用具有选择性，它们使其生命活动受到抑制或使其死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。,消毒剂与治疗剂的区别：对宿主组织细胞的作用。,消毒剂特点：在杀灭病原微生物的同时，对肌体的组织细胞也有损害作用。因此，只用于局部（少数不被吸收可由于消化道）、器械、环境。,治疗剂特点：,对宿主和病原微生物作用有选择性，对宿主细胞副作用很小。可全身用药,化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫的化学药物,一、消毒剂的种类及应用,一、消毒剂的种类及应用,(,一,),常用消毒剂种类,种类繁多消毒目的、对象、特点进行选择,酸类消毒剂,碱类消毒剂,其它消毒剂,H,+,OH,-,-SH,醇脱水,Hg,(一)常用消毒剂种类种类繁多消毒目的、对象、特点进行选,1,、酸类消毒剂,无机酸（三大强酸）：具有腐蚀性。但硼酸腐蚀性较小（杀菌力亦弱），常用,1-2%,硼酸用粘膜消毒。,有机酸：如甲酸，醋酸，乳酸等均有杀菌作用，常用乳酸水蒸气或溶液杀灭细菌或病毒。,1、酸类消毒剂无机酸（三大强酸）：具有腐蚀性。但硼酸腐蚀性较,2,、碱类消毒剂,碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和病毒都有杀灭作用。尤其常用于病毒的消毒：,10-20%,石灰乳,20-30%,草木灰水,1-3% NaOH,2、碱类消毒剂,3,、其它常用消毒剂,0.1%,升汞用于非金属器械消毒,0.1%KMnO,4,和,3%H,2,O,2,用于粘膜和创伤消毒,70,75%,乙醇用于体表和体温表的消毒,1,3%,碘液用于皮肤、粘膜消毒,5,10%,碘液可杀灭放线菌,3、其它常用消毒剂0.1%升汞用于非金属器械消毒,0.2,0.5%,过氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纤维消毒及皮肤消毒。,3,5%,酚、,3-5%,来苏儿用于环境消毒或空气消毒。,甲醛杀菌力较强，常用于器械消毒。,40%,甲醛溶液用于烈性传染病的消毒，,4,10%,甲醛溶液浸泡,30min,可杀灭繁殖体及真菌。,20%,甲醛溶液浸泡,6h,以上，可杀灭芽胞体。消毒房间：,15,25ml,福尔马林,/m,加等量水薰蒸或加入,KMnO,4,。要求湿度,60,80,；,KMnO,4,21g,（,15,）甲醛,42ml,（,30,），,24h,。,0.20.5%过氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纤维消毒及皮肤消,（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度,类别,作用原理,消毒剂名称,方法与浓度,酸,与,碱,以,H,+,、,OH,-,的解离,作用妨碍菌体代,谢，杀菌力与浓度,成正比,醋酸,乳酸,烧碱,生石灰,草木灰,5,10ml/ m,3,加等量水蒸发，空间消毒。,蒸汽熏蒸或,2%,溶液喷雾，用于空气消毒,2%,5%,的苛性钠溶液（,60,70,）消毒,厩舍、饲槽、用具、车辆等。,用,10%,乳剂消毒厩舍、运动场等。,用,10%,草木灰水煮沸,2h,，过滤，再加,2,4,倍水，消毒厩舍、运动场等。,卤,族,元,素,以氯化作用、氧化,作用破坏,-SH,基，,使酶活性受到抑制,产生杀菌效果,漂白粉,碘酊,用,5%,20%,的混悬液消毒畜禽舍、饲槽、车辆等；以,0.3,0.4g/kg,的剂量消毒,饮水。,2%,5%,的碘酊用于手术部位、注射部位,酚类,使菌体蛋白变性或凝固,石炭酸,3%,5%,用于器械、排泄物消毒。,（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度类别作用原理消毒剂名称方,（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度,续,醇类,使菌体蛋白变性沉淀,乙醇,用,70%,75%,的乙醇作皮肤消毒，也用于体温计、器械等消毒。,醛类,能与菌体蛋白的氨基酸结合，起到还原作用,福尔马林,1%,5%,甲醛溶液或福尔马林气体熏蒸法消毒畜舍、禽舍、孵化器等用具和皮毛等。,重金属盐类,能与菌体蛋白质（酶）的,-SH,基结合，使其失去活性；重金属离子易使菌体蛋白变性,升汞,硫柳汞,0.01%,水溶液用于消毒手和皮肤；,0.05%,0.1%,用于非金属器皿消毒。,0.1%,溶液可作皮肤消毒；,0.01%,适于作生物制品的防腐剂。,氧化剂,使菌体酶类发生氧化而失去活性,过氧乙酸,用,3%,10%,溶液熏蒸或喷雾，一般按每平方米空间,0.25,0.5ml,用量，适于畜禽舍空气消毒。,烷化剂,能与菌体蛋白发生烷化,环氧乙烷,在密闭条件下，每平方米用,700,900mg ,消毒,24h,，适于皮毛、裘皮、电动和光学仪器及医用胶手套等消毒。,（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度 续醇类使菌体蛋白变,（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度,续,表,面,活,性,剂,阳离子表面,活性剂能改,变细菌胞浆,膜的通透,性，甚至使,其崩解，使,菌体内的物,质外渗而产,生杀菌作,用；或以薄,层包围胞浆,膜，干扰其,吸收作用,新洁尔灭,(,溴苄烷铵,),0.5%,的水溶液用于皮肤和手的消毒；,0.1%,用于玻璃器皿、手术器械、橡用,品的消毒；,0.15%,2%,用于禽舍空喷,雾消毒；,0.1%,可用于种蛋消毒,(40,43,3min),。,度米芬,(,消毒宁,),对污染的表面用,0.1%,0.5%,喷洒，作,用,10,60min,；浸泡金属器械可在其中加入,0.5%,亚硝酸钠防锈；,0.05%,溶液用于食品厂、奶牛场的设备、用具消毒。,洗必泰,（双氯苯双胍乙烷）,0.02%,水溶液可消毒手；,0.05%,溶液,冲洗创面，也可消毒禽舍、手术室、用具等；,0.1%,用于手术器械的消毒、食品厂器具、设备的消毒。,消毒净,0.05%,0.1%,水溶液用于皮肤和手的消毒，也可用于玻璃器皿、手术器械、橡胶用品等的消毒，一般浸泡,10min,即可,（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度 续阳离子表面新洁尔,（二）理想消毒剂的条件,种类很多，其杀菌作用亦不相同，一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。,最理想的消毒剂应是杀菌力强、价格低、无腐蚀性、能长期保存、对动物无毒性或毒性较小、无残留或对环境无污染的化学药物。,（二）理想消毒剂的条件 种类很多，其杀菌作用亦不相同，一般可,（三）消毒剂的杀菌机制,复杂而多样，根据对菌体的作用大致可分为,:,使菌体蛋白变性、凝固及水解。,药物与菌体蛋白质结合变性（金属离子,、蛋白质,）变性或沉淀,-,（金属盐、醇类）,与蛋白质的氨基酸结合蛋白质脱水凝固变形（醛类）,使菌体蛋白质水解中和蛋白质电荷,-,破坏其胶体稳定性而沉淀（碱或酸类）,改变,DNA,分子结构染料类（结晶紫）,（三）消毒剂的杀菌机制复杂而多样，根据对菌体的作用大致可分为,损伤胞浆膜,降低菌细胞的表面张力，使胞浆膜通透性增加，菌体破裂溶解。,表面活性剂和酚（石炭酸、来苏儿、醇类等脂溶剂）,干扰细菌的酶系统和代谢,（与菌体内的酶类结合，影响细胞代谢或酶丧失活性）。,使酶蛋白中的,SH,改变二硫键，使酶失去活性氧化剂（,高锰酸钾、过氧化氢、碘酊、漂白粉,）、金属盐类（汞、银）,损伤胞浆膜,改变核酸的功能,如：染料龙胆紫可嵌入菌细胞双股,DNA,邻近碱基对中，改变,DNA,分子结构，使细菌生长繁殖受到抑制或死亡。,改变核酸的功能,二、影响消毒剂作用的因素,消毒剂,种类,浓度,作用时间,细菌,菌龄,种类,环境,有机物,温度,酸碱度,二、影响消毒剂作用的因素消毒剂种类浓度作用时间细菌菌龄种类,（一）影响消毒剂作用的因素,1.,消毒剂的性质、浓度与作用时间,2.,环境中的有机物的存在（对细菌有保护作用、与消毒剂发生反应）,意义：,3.,微生物的种类和特性广谱、交替,（,G+,、繁殖体、幼龄菌）,清创、清扫最好的预防药物,（一）影响消毒剂作用的因素1.消毒剂的性质、浓度与作用时间清,4.,温度与酸碱度的影响,温度：升高,18,20,；石炭酸升高,10,，杀菌效果提高,5,8,倍,PH,值：一般为电离的分子较易通过,C,膜，杀菌效果好。碱性溶液中，阳离子去污剂杀菌力强；酸性溶液中，阴离子去污剂杀菌力强。,例如戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，当加入碳酸氢钠后才发挥杀菌作用。新洁尔灭的杀菌作用是,pH,愈低所需杀菌浓度愈高，如在,pH3,时，其所需杀菌浓度较,pH9,时要高,10,倍左右。,4.温度与酸碱度的影响,5.,消毒剂的相互颉颃,：,阴离子清洁剂肥皂与阳离子清洁剂苯扎溴铵共用,6.,影响消毒效果的其他因素,还有湿度、穿透力、表面张力及颉抗物质等。,5.消毒剂的相互颉颃：,第三节抗生素和细菌素的杀菌作用,自然界中各种微生物之间，或是在微生物与高等动植物之间，经常呈现相互影响的作用，如寄生、共生和颉抗现象等。导致颉抗的物质基础是抗生素、细菌素等细菌的代谢产物。此外植物中也存在杀菌物质如黄连素,(,小蘖碱,),，噬菌体则是可杀灭细菌的活的微生物。,第三节抗生素和细菌素的杀菌作用 自然界中,1,、抗生素,(antibiotics),某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质称为抗生素。,主要来源,:,放线菌,(,如链霉菌,),，少数来源于某些霉菌,(,如青霉菌等,),和细菌,(,如多黏菌素,),，有些亦能用化学方法合成或半合成。到目前为止，已发现的抗生素达,2500,多种，但其大多数对人和动物有毒性，临床上最常用的抗生素只有几十种。,1、抗生素 (antibiotics) 某些微生物在代谢过程,抗生素的作用原理,抑制细菌细胞壁的合成。如青霉素、头孢类,影响细菌细胞膜的通透性。多粘菌素、杆菌肽,抑制菌体蛋白质的合成。如氯、四、糖苷类,抑制细菌核酸合成。如灰黄霉素、利福平。,抗生素的作用原理 抑制细菌细胞壁的合成。如青霉素、头孢类,微生物消毒与灭菌课件,药敏试验结果及观察,药敏试验结果及观察,2.,细菌素,（,bacteriocin,）,细菌素是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质。只能对同种细菌不同菌株产生作用。,作用：杀菌范围较窄，有一定的特异性只作用于同种菌株的细菌以及与它相近的细菌。,特点：作用类似抗生素。但不裂解菌体，也不能在菌体内繁殖（不同噬菌体）。,种类：大肠杆菌素（某些大肠杆菌；志贺氏杆菌）；弧菌素；绿脓杆菌素；葡萄球菌素,2.细菌素（bacteriocin）细菌素是某种细菌产生的一,3.,植物杀菌素,(phytocidin),植物杀菌素：某些植物中存在有杀菌物质，这种杀菌物质一般称植物杀菌素。,中草药：如黄连、黄柏、黄芩、大蒜、金银花、连翘、鱼腥草、穿心莲、马齿苋、板蓝根等都含有杀菌物质，其中有的已制成注射液或其他制剂的药品。,3.植物杀菌素(phytocidin)植物杀菌素：某些植物中,第四节 兽医微生物实验室的生物安全,第四节 兽医微生物实验室的生物安全,一、生物安全的概念和一般要求,实验室的生物安全有三层含义：,其一主要是指防止病原微生物等及其他有害生物或物质传入实验室，此种生物安全英文称,“,biosecurity ”,其二主要是指防止病原微生物等传出实验室，此种生物安全英文为,“,biosafety”,。,其三是指实验室人员的自身安全防护，,biosecurity,及,biosafety,都包括此义。,一、生物安全的概念和一般要求实验室的生物安全有三层含义：,兽医微生物实验室主要从事病原微生物的检验及相关研究，我国政府对必病原微生物实验室的生物安全颁布了管理条例,(,中华人民共和国国务院令第,424,号，,2004),。参验照国外同行的经验，结合我国的有关规定，兽医微生物实验室的安全要点主要包括以下几方面,:,兽医微生物实验室主要从事病原微生物的检验及相关,生物安全的潜在危险在于处理临床样本，样本的气溶胶往往最易污染实验室并造成人员舍感染。所有送检样本都应视为有传染性并做相应处理。不允许用嘴吸取液体，应采用相应器械。,涉及有害物质的实验室的人员应具备防范生物危害的知识，人员的数量及流动应予控制。实验室人员必须穿戴全套防护服，甚至面罩、防护眼镜等。这些用品用后应做灭菌处理。要有良好的卫生习惯，尤其要注意洗手。实验室内不允许吃、喝、涂抹化妆品及装隐形眼镜。实验室工作人员必须接种有关疫苗。,生物安全的潜在危险在于处理临床样本，样本的气溶胶往往最易污染,对所有污染材料及水，包括样本、试验器材、动物等必须规定明确的消毒程序，并予实施。推荐使用含氯,5.25%,的消毒剂或其他消毒剂。,最主要的防护并非设施，而是工作人员本身，造成事故的最常见原因主要是由于工作人员缺乏有关知识、训练和粗心大意。,只有经培训的人员才能处理动物，操作时动物应予麻醉或镇静，避免伤害人及动物。,实验室中处理的微生物提取物，特别是,DNA,，亦可造成污染，必须注意。,对所有污染材料及水，包括样本、试验器材、动物等必须规定明确的,二、兽医微生物实验室的生物安全分类,凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求，对实验室的设计、设施也有所不同。目前国际公认的微生物实验室分为生物安全,(biosafetylevel,，,BSL),1,至,4,级。其中,BSL-1,最低，,BSL-4,最高。,二、兽医微生物实验室的生物安全分类 凡涉,BSL-1,实验室 可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物的实验工作。实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在实验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。,BSL-1实验室 可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实,BSL-2,实验室与,BSL-1,相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。,不同点,:,工作人员要经过操作病原因子的专门培训，,由专业人员进行指导和管理,;,工作时限制外人进入实验室,;,某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行,;,对污染的锐器采取高度防护措施。凡从事微生物基因的操作，均需在,BSL-2,实验室进行。,BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度,微生物消毒与灭菌课件,BSL-3,实验室 供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸人途径引起严重的或致死性疾病的病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室。,BSL-3,实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服和装备。,BSL-3,实验室要经过专业的设计和建造。,BSL-3实验室 供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸人途,BSL-4,实验室 有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到,BSL-4,的安全水平。,BSL-4,实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。,每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊的和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。实验室主任要严格控制进入实验室的人员。实验室应是独立的建筑物或是建筑物内的隔离区。要实施特殊的实验室安全工作细则。,在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在,E,级生物安全柜内或者是安全柜与一套由生命维持系统供气的正压个人工作服联合使用。,BSL-4实验室 有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如,三、动物病原微生物的分类,根据病原微生物的传染性、感染人和,(,或,),动物的危害程度，世界动物卫生组织,(OIE),将动物病原分为,1,至,4,类。其中,1,类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控制计划的病原微生物。,2,类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的致病微生物。,3,类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划的、实验室释放有中等危险的病原微生物。,4,类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制的、实验室释放存在高危险性的病原微生物。,三、动物病原微生物的分类 根据病原微生物的传染,我国农业部于,2005,年颁布了动物病原微生物分类名录，其中一类病原微生物危害最大，依此类推，四类最小。有少数寄生虫也列在名单之中。,我国农业部于2005年颁布了动物病原微生物分类,一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水瘤病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反鱼兽瘟病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。,一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水瘤,二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘,/,山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔出血症病毒、炭疽芽胞杆菌、布氏杆菌。,二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵,三类动物病原微生物,多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒、伪狂犬病病毒、破伤风梭菌、气肿疽梭菌、结核分枝杆菌、副结核分枝杆菌、致病性大肠杆菌、沙门菌、巴氏杆菌、致病性链球菌、李氏杆菌、产气英膜梭菌、嗜水气单胞菌、肉毒梭状芽胞杆菌、腐败梭菌和其他致病性梭菌、鹦鹉热衣原体、放线菌、钩端螺旋体。,三类动物病原微生物多种动物共患病病原微生物：低致病性流感病毒,牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒腹泻,/,黏膜病病毒、胎儿弯曲菌性病亚种,(,牛生殖器弯曲菌,),、日本血吸虫。,绵羊和山羊病病原微生物：山羊关节炎,/,脑脊髓炎病毒、维士纳,/,梅迪病毒、传染性服瘤皮炎,(,羊口疮,),病毒。,猪病病原微生物：日本脑炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪丹毒杆菌、猪支气管败血波氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体、猪短螺旋体,(,猪密螺旋体,),。,牛病病原微生物：牛恶性卡他热病毒、牛白血病病毒、牛流行热病毒,马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产病毒、马鼻炎病毒、鼻疽杆菌、类鼻疽杆菌、假皮疽组织胞浆菌、溃殇性淋巴管炎假结核棒状杆菌。,禽病病原微生物：鸭瘟病毒、鸭病毒性肝炎病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性囊病病毒、鸡马立克病病毒、禽白血病,/,肉瘤病毒、禽网状内皮组织增殖病病毒、鸡传染性贫血病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡减蛋综合征病毒、禽痘病毒、鸡病毒性关节炎病毒、禽传染性脑脊髓炎病毒、副鸡嗜血杆菌、鸡毒支原体、鸡球虫。,兔病病原微生物：兔黏液瘤病病毒、野兔热土拉杆菌、兔支气管败血波氏杆菌、兔球虫。,马病病原微生物：马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、马病毒性流产,生生动物病病原微生物：,蜜蜂病病原微生物：,其他动物病病原微生物：犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒、猫泛白细胞减少症病毒、水貂阿留申病病毒、水貂病毒性肠炎病病毒。,四类动物病原微生物 是指危害小、低致病力、实验室感染机会小的兽用生物制品、疫苗生产用的各种弱毒病原微生物以及不属于一、二、三类的各种低毒力的病原微生物。,生生动物病病原微生物：,复习重点,1.,灭菌、消毒、防腐、无菌的概念。,2.,物理消毒灭菌方法主要有哪些？如何合理选用这,些消毒方法？,复习重点1. 灭菌、消毒、防腐、无菌的概念。,身体健康，学习进步！,身体健康，学习进步！,