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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,动物细胞工程专题复习,动物细胞培养,动物,胚胎,或,幼龄,动物的组织、器官,胰蛋白酶,剪碎,单个细胞,加培养液,制成,细胞悬浮液,10,代,细胞,部分细胞“,癌变,”，遗传物质改变，无限传代,动物细胞培养不能,最终培养成动物体,50,代细胞,原代培养,传代培养,细胞贴壁,剥离、分瓶,细胞株,细胞,细胞系,1,、过程：,细胞悬浮液,10,代细胞,50,代细胞,无限传代,原代培养,传代培养,细胞株,细胞系,如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？,多数组织细胞固定在表面生长和分裂。,随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖,遗传物质改变,几个有关概念：,原代培养：,从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的,第,1,代,细胞与,传,10,代以内,的细胞称为原代细胞培养。,传代培养：,将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养,。,细胞株：,原代细胞一般传至,10,代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到,4050,代，这种传代细胞为细胞株。,细胞系：,细胞株传代至,50,代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。,细胞株和细胞系的区别：,细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。,1,、无菌、无毒：,2,、全部的营养物质：,3,、适宜的温度和,PH,值：,4,、必要的气体条件：,（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）,（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。,）,保证细胞顺利的生长增殖,36.5+,（,-,）,0.5,度,7.2-7.4,O,2,和,CO,2,（,95%,空气和,5%CO,2,）,2,、条件：,维持培养液的,PH,3,、应用：,大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）,作为基因工程中的受体细胞,培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性,用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据,细胞的全能性,细胞株、细胞系,植株,培养结果,获得细胞,或细胞产物,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物组织培养和动物细胞培养的比较,1.,动物细胞工程技术的基础是（）,A,、动物细胞融合,B,、胚胎移植,C,、动物细胞培养,D,、核移植,2.,下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是（）,A,、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白,B,、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散,C,、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中,D,、培养至,50,代后的传代细胞称为细胞株,C,B,3.,下列关于动物细胞培养的叙述中，错误的是（）,A,、用于培养的细胞大多取自胚胎或幼龄动物的器官或组,织,B,、将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单,个细胞,C,、在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，,制成悬浮液,D,、动物细胞培养只能传,50,代左右，所培养的细胞会衰,老死亡,D,4.,下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：,（,1,）容器,A,中放置的是动物器官或组织。它一般取自,_,。,（,2,）容器,A,中的动物器官或组织首先要进行的处理是,，然后用,酶处理，这是为了使细胞,分散开来，这样做的目的是,（,3,）培养首先在,B,瓶中进行，瓶中的培养基成分有,_,等。,幼龄动物或胚胎的组织或器官,剪碎组织,胰蛋白,使细胞与培养液充分接触,葡萄糖、氨基酸、水、无机盐、促生长因子,与微量元素和动物血清,在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这是培,养到第,代，到这时的培养称为,_,。,为了把,B,瓶中的细胞分装到,C,瓶中，用,处理,然后配置成,，再分装。,在,C,瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，,原因是,10,原代培养,胰蛋白酶,细胞悬液,细胞没有发生癌变,核移植技术和克隆动物,1.,概念：,将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的,卵母细胞,中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。,核移植,（难度高）,受体细胞：,M,期的卵母细胞,胚胎细胞核移植：,体细胞核移植：,细胞分化程度低，恢复全能性容易,用核移植的方法得到的动物,称为克隆动物,原理：动物体细胞核的全能性。,取供体细胞,取卵母细胞,供体细胞培养,培养到,M,中期,卵母细胞去核,供体细胞,注入去核的卵母细胞,供体核进入受体卵母细胞,重组胚胎,代孕母牛,生出与供体遗传物质基本相同的个体,2.,过程：,3.,克隆动物的研究意义：,1.,克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白,2.,改良动物品种,3.,治疗人类疾病，作为供体,4.,保护濒危动物,4,体细胞核移植技术存在的问题：,1.,许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型,过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等。,2.,成功率非常低及克隆动物食品的安全性问题。,1.,下列哪,项属于克隆（）,A,将鸡的某个,DNA,片段整合到小鼠的,DNA,分子中,B,将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内,C,将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤,细胞,D,将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系,D,2.,（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用,成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应,器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管，这种血管的,外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织,培养领域的重大进展。下列关于以上技术的叙述中，正,确的是（）,A,属于,“,克隆,”,B,可能要利用去核卵细胞,C,关键是激发血管细胞的全能性,D,关键是激发血管细胞发育成血管的潜能,ABD,3.,从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉,核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植,入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状,（）,A,、难以预测,B,、像甲,C,、像乙,D,、像丙,4.,生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的,“,复生,”,将不再,是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功,“,复生,”,野驴的方法是（）,A,将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分,化、再分化，培育成新个体,B,将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个,体,C,取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，,经孕育培养成新个体,D,将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体,B,C,5.,下图所示为用两栖动物卵所做的实验图解，据图回答,下列问题：,蝌蚪肠上皮细胞核中含有青蛙发育所需的,_,，重新组合的细胞相当于蛙的,_,细胞，经过,_,和,_,形成组织和器官。,全部基因,受精卵,细胞分裂,细胞分化,本实验结果说明,_,具有全能性，图中,A,过程采用的技术手段称做,_,。,动物体细胞核,核移植技术,动物细胞融合,1.,过程：,动物细胞,A,动物细胞,B,诱导，融合,2,个完整的杂交细胞,AB,有丝分裂,（膜融合、质融合）,（核融合）,注意：,动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞,2.,意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能,。,3.,应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体,植物体细胞杂交和动物细胞融合比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,原理,融合前处理,诱导方法,用途,细胞膜的流动性、,植物细胞的全能性,细胞膜的流动性,用纤维素酶、,果胶酶去壁,用胰蛋白酶,使细胞分散,物理、化学方法,物理、化学、生物方法,获得部分或完整植株,主要用于制备,单克隆抗体,1,、基因型为,Aa,与基因型为,Bb,的动物体细胞混合，用灭活,的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞,A,AAaa B,AaBb C,Aabb D,BBbb,2,、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是,诱导融合的方法完全相同 所用的技术手段不相同,所采用的原理完全相同 都能形成杂种细胞,A.B.C.D.,3,、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是,A,、融合的原理,B,、融合的优点,C,、融合的诱导手段,D,、融合的过程,C,C,C,4.,科学工作者用绿色和红色荧光材料，分别标记人和鼠的,细胞膜上的蛋白质。当两个标记细胞融合成一个细胞后，,起初一半膜发出绿色荧光，另一半膜发出红色荧光，一段,时间后，两种颜色的荧光点均匀分布，如图所示。请分析,回答：,该实验结果说明了细胞膜,，这是因为,若在两个细胞融合成一个细胞后，将融合细胞置于,0,条件下再保持,40min,，则融合细胞仍然是一半膜发绿色荧,光，另一半膜发红色荧光，这说明,具有一定的流动性,构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质大都是可以运动的,膜的流动性受温度影响，在低温下分子的运动受抑制,单克隆抗体,1.,单克隆抗体制备过程,诱导其融合的方法有哪些？,融合后培养液中有几种细胞,怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点,注射抗原的目的是什么,为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，多次筛选,大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法,过程：,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,诱导融合,B-B,细胞,B-,瘤细胞,瘤,-,瘤细胞,选择培养,杂交瘤细胞,（,B-,瘤细胞）,克隆化培养,抗体检测,产生所需抗,体的杂交瘤,细胞,体外培养,小鼠腹腔内增殖,单克隆抗体,2.,单克隆抗体的应用：,.,作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合,2.,用于,运载药物：制成,“,生物导弹,”,治疗疾病：主要用于癌症治疗,优点：准确、高效、简易、快速,单克隆抗体的,优点：特异性强、灵敏度高,优点,:,疗效高、毒副作用小,1,、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中,1,过程注射的物质和,A,细胞的名称为,(),A,、抗体、,T,淋巴细胞,B,、抗原、,T,淋巴细胞,C,、抗体、,B,淋巴细胞,D,、抗原、浆细胞,D,2,、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是,A,、可以制成诊断盒用于疾病的珍断,B,、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗,C,、可以利用基因工程技术生产,D,、可以在生物体内生产，不能体外生产,3,、,“,生物导弹,”,是指,A,、单克隆抗体,B,、带有特定药物的单克隆抗体,C,、杂交细胞,D,、,B,淋巴细胞,D,B,4.,单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究,中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误,的是,A,特异性强、灵敏度高,B,与抗癌药物结合可制成,“,生物导弹,”,C,体外培养,B,淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体,D,由效应,B,细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌,C,5.,下图为细胞融合的简略过程（只考虑两个细胞的融合）,请据图回答：,I,若,A,、,B,是基因型分别为,rrHH,、,RRhh,两个烟草品种细胞,的花粉，且这两对基因位于非同源染色体上，由于一对,隐性纯合基因,
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