各种类型中药制剂的分析专家讲座

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第七章,各种类型中药制剂分析,1,各种类型中药制剂的分析,第1页,第五节 中药注射剂,注射剂系指药材经,提取、纯化后,制成供注入体内溶液、乳状液及供临用前配制成溶液粉末或浓溶液,无菌,制剂。,注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液,定义中将药材,“,提取有效物质,”,改为,“,经提取、纯化后,”,;“,灭菌,制剂”,改为,“,无菌,制剂”,。,2,各种类型中药制剂的分析,第2页,例,止喘灵注射液,（麻黃、洋金花、苦杏仁、连翘）,【制法】,以上四味，加水煎煮两次，第一次,1小时，第二次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液,浓缩至约150ml，用乙醇沉淀处理两次，第一次,溶液中含醇量为70%，第二次为85%，每次于4,冷藏放置24小时后滤过，滤液浓缩至约100ml，,加注射用水稀释至800ml，预测含量，调整pH值，,滤过，加注射用水至1000ml，灌封，灭菌，即得。,【使用方法与用量】,肌注。,3,各种类型中药制剂的分析,第3页,例,注射用双黄连,（冻干）,（连翘、金银花、黄芩）,【性状】,本品为黄棕色无定形粉末或疏松,固体状物；味苦、涩；有引湿性。,【使用方法与用量】,静脉滴注。临用前，,先以适量灭菌注射用水充分溶解，再用氯化,钠注射液或5%葡萄糖注射液500ml稀释。,4,各种类型中药制剂的分析,第4页,照中国药典“制剂通则”注射,剂（附录U）项下要求检验。,一、中药注射剂普通质量要求,中药注射剂直接注入人体，显效快，,毒副反应也快，质量要求严格。,5,各种类型中药制剂的分析,第5页,（一）配制注射剂前半成品,1. 重金属,10ppm,（附录 E 第二法）,2. 砷盐,2ppm,（附录 F 第一法）,6,各种类型中药制剂的分析,第6页,1. 装量,注射液、注射用浓溶液照下述方法检验,（二）注射剂普通检验项目,7,各种类型中药制剂的分析,第7页,检验法,注射液标示装量为2.0ml或2.0ml以,下者取供试品5支，2.0ml以上至10.0ml者取3支，10.0ml以上者取供试品2支；开启时注意防止损,失，将内容物分别用对应体积干燥注射器抽,尽，然后注入标化量具内在室温下检视；测,定油溶液装量时，应先加温摇匀，再用干燥,注射器抽尽后，同前法操作，放冷至室温检视。每支注射液装量均不得少于其标示量。,注射液规格为50500ml按最低装量检验,法（附录 C）检验,8,各种类型中药制剂的分析,第8页,2. 装量差异,除另有要求外，注射用无菌粉末照下述方法检验。,凡要求检验含量均匀度注射用无菌粉末，普通不再进行装量差异检验。,9,各种类型中药制剂的分析,第9页,平 均 装 量 装量差异程度,0.05,g,15,%,0.05,0.15,g,10,%,0.15,0.5,g,7,%,0.5,g,5,%,10,各种类型中药制剂的分析,第10页,除另有要求外，照可见异物检验法（附录XJ C）检验，应符合要求。,澄明度,3. 可见异物,11,各种类型中药制剂的分析,第11页,4. 不溶性微粒,除另有要求外，,溶液型,静脉用注射液（水溶液）、,溶液型,静脉用注射用无菌粉末，及注射用浓溶液照不溶性微粒检验法（附录 R）检验，应符合要求。,12,各种类型中药制剂的分析,第12页,方法,光阻法,显微计数法,要求,增,注射用,浓,溶液,修订注射用无菌粉末检验法(3个容器或25ml,测3次,取后二次均值,10m6000,含25m600；“注射剂中不溶性微粒检验法”（附录9R）,13,各种类型中药制剂的分析,第13页,5. 相关物质,按各品种项下要求，照注射液相关物质检验法（附录 S）检验，应符合要求,注射剂,相关物质,系指中药材经提取、纯化制成注射剂后，残留在注射剂中可能含有并需要控制物质。,14,各种类型中药制剂的分析,第14页,蛋白质、鞣质、树脂、,草酸盐、钾离子、pH值,15,各种类型中药制剂的分析,第15页,（1） 蛋白质,生产过程中如未能将蛋白质除,尽，可能影响注射剂稳定性、,澄,明度,，还可能在注入人体后引发过,敏反应。,16,各种类型中药制剂的分析,第16页,蛋白质检验方法,取注射液1,ml，加新配制30%磺基,水杨酸试液1ml，混合，放置5分钟，不,得出现浑浊。注射液中如含有遇酸能产,生沉淀成份可改加鞣酸试液13滴，不,得出现混浊。,（,如黄芩素、蒽醌等）,（比浊法）,17,各种类型中药制剂的分析,第17页,（2） 鞣质,*,易产生沉淀而影响,澄明度,，,*,注射后引发疼痛，甚至肌肉组,织坏死,18,各种类型中药制剂的分析,第18页,鞣质检验法,取注射液1,ml，加新配制含1%鸡蛋清,生理盐水5ml,必要时用微孔滤膜(0.45m)滤过,，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。或取供试液1ml，加稀醋酸1滴，再加氯化钠明胶试液45滴，不得出现浑浊和沉淀。,（比浊法）,19,各种类型中药制剂的分析,第19页,（3） 树脂,取注射液5,ml，加盐酸1滴，放置30分钟，应无絮状物析出。注射液中如含有遇酸能产,生沉淀成份，可改加氯仿10ml振摇提取，,分取氯仿液，置水浴上蒸干，残渣加冰醋酸,2ml使溶解，置具塞试管中，加水3ml，混匀，放置30分钟，应无絮状物析出。,（比浊法）,20,各种类型中药制剂的分析,第20页,（4）草酸盐,中药材中草酸普通以草酸钙形式存在，不会被水或有机溶剂提取。,如用酸水或酸性,乙醇提取，草酸钙可能混入药液中。,草酸进入血液可使血液脱钙，产,生抗凝血作用，甚至引发痉挛。并因为,生成不溶于水草酸钙，可引发血栓。,溶液型静脉注射液,21,各种类型中药制剂的分析,第21页,草酸盐检验法,取注射液2,ml，用稀盐酸调整pH,值至12，滤过，滤液调整pH值至,56，加3%氯化钙溶液23滴，放置,10分钟，不得出现浑浊或沉淀。,（比浊法）,溶液型静脉注射液,22,各种类型中药制剂的分析,第22页,（5） 钾离子,静脉注射用注射液,*,注射液中钾离子浓度过高，会引发显著局,部刺激，尤其对心脏损害很大。,*,静脉注射时，如钾离子含量过高，注射后会,引发体内血钾浓度偏高，使电解质平衡失调。,*,静注钾离子在1.0,mg/ml以下。,23,各种类型中药制剂的分析,第23页,取注射液2,ml，蒸干，先用小火炽灼至炭化，再在500600炽灼至完全灰化，加稀醋酸使溶解，至25ml量瓶中，加水稀释至刻度，混,匀，作为供试品溶液。取10ml纳氏比色管两支，,甲管中精密加入标准钾离子溶液0.8ml，加碱性,甲醛溶液（）12滴、3%乙二胺四乙酸二钠溶液2滴、3%四苯硼钠溶液0.5ml，加水稀释成10ml，乙管中精密加入供试品溶液1ml，与甲管同时依法操作，摇匀，,24,各种类型中药制剂的分析,第24页,甲、乙两管同置黑纸上，自上向下透视，乙管,中显出浊度与甲管比较，不得更深。,标准钾离子溶液,每ml相当于100,gK。,25,各种类型中药制剂的分析,第25页,6. 无菌,照无菌检验法（附录 B）检验，应符合要求。,无菌检验法由培养7天修订为培养14天,26,各种类型中药制剂的分析,第26页,7. 热原或细菌内毒素,除另有要求外，静脉用注射剂按各品种项下要求，照热原检验法（附录 A）或细菌内毒素检验法（附录 D,）检验，应符合要求。,27,各种类型中药制剂的分析,第27页,注射剂普通检验项目,装量,装量差异,可见异物,（澄明度）,不溶性微粒,相关物质,无菌,热原或细菌内毒素,28,各种类型中药制剂的分析,第28页,（三）注射剂安全性检验,热原检验,、刺激性检验、,过敏试验、溶血与凝聚试验、,异常毒性,、,降压物质,家兔、家兔、豚鼠、兔或羊、小鼠,、猫,中药注射剂安全性检验法应用指导标准,29,各种类型中药制剂的分析,第29页,例,止喘灵注射液,【检验】异常毒性,取本品，加灭菌生理,盐水制成每1ml含0.1ml溶液，依法检验（二,部附录 C），按腹腔注射法给药，应符合规,定。,30,各种类型中药制剂的分析,第30页,处方组成,单味药材,复方,化学组成,有效成份明确且较单一,有效成份还未明确或完全不明确,大多较复杂,新型中药制剂，生产历史不长，七十年代以后有,较大发展，中药注射剂大多成份复杂，且为了改,善溶解度、增加稳定性等需要加入附加剂，需要,按照中药制剂特点，检验普通项目和特殊项目,二、中药注射剂质量分析特点,31,各种类型中药制剂的分析,第31页,注意一些附加剂对分析干扰,（一）判别,吐温80,+,生物碱,32,各种类型中药制剂的分析,第32页,（二）含量测定,以有效成份或有效部位为组分,均以,标示量上下限范围,表示,以药材为组分注射剂含量以,限量,表示,33,各种类型中药制剂的分析,第33页,例,止喘灵注射液,（麻黄，洋金花，苦杏仁，连翘）,【含量测定】总生物碱,剩下碱滴定法。,本品每1ml含总生物碱以麻黄碱（C,10,H,15,NO）,计，应为0.500.80mg。,东莨菪碱,TLC-酸性染料比色法。本品每1ml含东莨菪碱（C,17,H,21,NO,4,）应为40100,m,g。,34,各种类型中药制剂的分析,第34页,例,注射用双黄连,（连翘，金银花，黄芩）,【含量测定】,HPLC法,绿原酸,本品每支含金银花以绿原酸（C,18,H,18,O,8,）计，应为8.511.5mg。,黄芩苷,本品每支含黄芩以黄芩苷（C,22,H,18,O,11,）计，应为128173mg。,35,各种类型中药制剂的分析,第35页,（三）中药注射剂指纹图谱,在固定,中药材品种,、,产地,和,采收期,前提下，需制订中,药材、有效部位或中间体、注,射制剂指纹图谱。,现已用于中药注射剂质量控制,36,各种类型中药制剂的分析,第36页,中药指纹图谱,中药材、中药注射剂经适当处理后，采取一定分析伎俩、得到能够标示该中药材、注射剂特征色谱或光谱图。,中药注射剂指纹图谱研究技术要求（暂行）,1999.4,中药化学指纹图谱,37,各种类型中药制剂的分析,第37页,*,中药指纹图谱是一个综合、可量化判定伎俩。,*,以中药成份系统研究为基础,*,应用：判别真伪，评价原药材,半成品及制剂质量均匀性和稳定性,*,整体性，含糊性,38,各种类型中药制剂的分析,第38页,1. 中药指纹图谱分类,TLC、HPLC、GC、HPCE、,UV、IR、NMR、MS、X-射线衍射、DNA指纹图谱,39,各种类型中药制剂的分析,第39页,1. 建立中药指纹图谱标准,*,系统性,*,特征性,*,稳定性,广泛代表性样品搜集,40,各种类型中药制剂的分析,第40页,2. 指纹图谱及技术参数,*,指纹图谱统计时间与范围,*,共有指纹峰标定,*,共有指纹峰面积比值,*,非共有峰面积,*,中药材、有效部位、中间体和注射液指,纹图谱相关性,41,各种类型中药制剂的分析,第41页,中药注射液中若含有遇酸能产生沉淀成份如黄芩苷、蒽醌类等成份，做蛋白质检验时，可用,A 30%磺基水杨酸试液,B 硫代乙酰胺溶液,C 四苯硼钠溶液,D 鞣酸,E 氯化鈣试液,D,42,各种类型中药制剂的分析,第42页,以下注射剂检验项目中属于安全性检验项目有,A 重金属检验,B 热原检验,C 刺激性检验,D 鞣质检验,E 溶血试验,BCE,43,各种类型中药制剂的分析,第43页,陈皮与枳壳薄层色谱,44,各种类型中药制剂的分析,第44页,DNA指纹图谱,中药DNA分子判定是利用DNA分子标识技术对含原生药中药制剂及其基原进行真伪优劣判定。,特异性强,稳定性好,微量,便捷,准确,45,各种类型中药制剂的分析,第45页,尤其适合近缘品种,易混同品种,宝贵品种,动物药材,破碎药材,陈旧药材,腐烂药材,样品量极为有限植物,模式标本、中药出土标本、古化石标本,等宝贵样品判定。,46,各种类型中药制剂的分析,第46页,DNA指纹图谱技术,RFLP,(Restriction Fragment Length Polymorphism ),（限制性内切酶酶切片段长度多态性）,AFLP,（Amplified Fragment Length Polymorphism）,(扩增片断长度多态性),RAPD,（random amplified polymorphic DNA）,（随机扩增多态性DNA）,47,各种类型中药制剂的分析,第47页,RFLP,限制性内切酶,酶切片段长度多态性,48,各种类型中药制剂的分析,第48页,49,各种类型中药制剂的分析,第49页,50,各种类型中药制剂的分析,第50页,51,各种类型中药制剂的分析,第51页,52,各种类型中药制剂的分析,第52页,53,各种类型中药制剂的分析,第53页,54,各种类型中药制剂的分析,第54页,Xsp,I,55,各种类型中药制剂的分析,第55页,