(精品)课题2　月季的花药培养

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,月季的花药培养,（一）被子植物的花粉发育,花粉囊,花粉,花粉是由,经过,而形成的，因此，花粉是,单倍体,的,生殖,细胞,。,花粉母细胞（小孢子母细胞）,减数分裂,1.,来源：,2.,形成过程,花粉母细胞,（小孢子母细胞）,减数分裂,4,个小孢子,（小孢子四分体时期）,（单核期）,单核靠边期,单核居中期,彼此分离,有丝分裂,2,个精子,有丝分裂,花粉管细胞核,生殖细胞核,生殖细胞,营养细胞,（双核期）,有丝分裂,在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生,个精子 。,8,4,个小孢子,减分,有分,4,个花粉管细胞核,4,个生殖细胞核,有分,8,个精子,1,花粉母细胞,4,个营养细胞,4,个生殖细胞,两个精子和一个营养核的基因型,。,相同,二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）,三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。,一个成熟的花粉粒，有,两种,情况：,小孢子母细胞,4,个小孢子,四分体时期,1,个小孢子,单核居中期,1,个小孢子,单核靠边期,花粉粒,双核期,花粉粒,移栽,花药中的花粉,胚状体,脱分化,愈伤组织,花药中的花粉,脱分化,分化,丛芽,再分化,丛芽,诱导,生根,（二）产生花粉植株的两种途径,这两种途径的区别主要取决于培养基中,的种类及其,的配比。,浓度,激素,在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的,胚,非常相似的结构（胚芽、胚根、胚轴等结构完整），发育过程亦与合子胚类似，被称为,胚状体,。,花粉植株：,即,单倍体,植株,胚状体：,（体细胞胚）,（花粉胚）,三 影响花药培养的因素,花期早期；单核居中期与靠边期之间,培养基的组成,材料的选择,亲本生长条件、材料低温处理、接种密度等,适宜的培养条件等,从花药来看，应当选择（初花期、盛花期、晚花期）的花药；,从花粉来看，应当选择（四分体期、单核期、双核期、萌发期）的花粉；,从花蕾来看，应当选择（完全未开放、略微开放、完全盛开）的花蕾。,思考,为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？,亲本植株的生理状况,答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。,（一）材料的选取,实 验 操 作,1,、选择花药时，一般通过,镜检,来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。,2,、确定花粉发育时期最常用方法：,醋酸洋红法；,焙花青铬矾法,（蓝黑色）,二、材料的消毒：,花蕾,（,70,酒精,）,大约,30s,（无菌水）,清洗,（无菌吸水纸）,吸干水分,（,1,氯化汞溶液,）,2,4min,（无菌水）,冲洗,月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？,在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗,实 验 操 作,（三）接种和培养,在无菌条件下,除去萼片和花瓣,用镊子取出花药,要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,1,、剥离花药,勿损伤花药，,否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织,注意：,2,、接种,3,、培养,培养条件：,愈伤组织 转移,到分化培养基上,温度 光照,培养：,4,、鉴定和筛选,染色体倍性的变化,胚状体,在花药开裂后尽快将幼小植株,分开，分别转移到新的培养基上,每瓶接种花药,7-10,个,为何花粉植株常出现染色体数目的变化？,花粉细胞的融合,接种花粉过程中混有小孢子母细胞,在材料的低温处理时抑制了纺锤体的形成,双核期时，生殖细胞核和花粉管细胞核并没有形成两个细胞，而是两个核发生了融合,课题成果评价,选材是否恰当,选材是否成功是花药培养成功的关键。应学会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。,无菌技术是否过关,如果出现了污染现象，说明某些操作步骤，如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。,接种是否成功,如果接种的花药长出愈伤组织或释放出胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一步分化成再生植株。,）花药培养的选材非常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾，,）花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基，对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。,植物组织培养技术与花药培养技术的,异同,相同之处是：,培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同,两者不同之处在于：,问题探究,被子植物的花粉发育过程中的四分体时期与减数分裂过程中的四分体时期是同一阶段吗？,不是同一阶段。前者的四分体时期是指,4,个单倍体细胞连在一起的时期；后者的四分体时期是指同源染色体配对后，一对同源染色体含有四条染色单体的阶段。,